Calu-3人肺(fei)腺(xian)癌(ai)細胞

公(gong)司產(chan)品僅供科(ke)研(yan)研究(jiu)使(shi)用、不(bu)得(de)用(yong)於(yu)臨(lin)床(chuang)診(zhen)斷！

壹、商品介(jie)紹：

二(er)、細(xi)胞培養(yang)操(cao)作(zuo)

1) 復(fu)蘇(su)細(xi)胞：以(yi)下(xia)細胞培養(yang)凍(dong)存(cun)處(chu)理(li)僅(jin)供參(can)考(kao)，具(ju)體操作(zuo)步(bu)驟以(yi)隨(sui)貨產(chan)品說明(ming)書(shu)為主(zhu)。將(jiang)含有1 mL細(xi)胞懸液(ye)的(de)凍(dong)存(cun)管(guan)在(zai) 37℃水浴中迅(xun)速搖晃解凍(dong)，加4 mL培養(yang)基混(hun)合均(jun)勻。在(zai)1000 rpm條件下(xia)離心(xin)3 min，棄去(qu)上(shang)清液(ye)，加1-2 mL培養(yang)基後吹(chui)勻。然(ran)後將所(suo)有(you)細胞懸液(ye)加(jia)入(ru)含適(shi)量培養(yang)基的培養(yang)瓶(ping)中培養(yang)過(guo)夜(ye)（或將(jiang)細胞懸液(ye)加(jia)入(ru)10 cm皿中，加(jia)入約(yue)8 mL培養(yang)基，培養(yang)過(guo)夜(ye)）。第二(er)天(tian)換(huan)液(ye)並(bing)檢查細(xi)胞密(mi)度(du)。

2) 細胞傳代(dai)：如果(guo)細胞密(mi)度(du)達 80%-90%，即(ji)可進(jin)行傳代(dai)培養(yang)。

    a、棄去(qu)培養(yang)上(shang)清(qing)，用(yong)不含鈣、鎂(mei)離子(zi)的(de)PBS潤(run)洗(xi)細(xi)胞1-2次。        

    b、加(jia)1 mL消化液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培養(yang)瓶(ping)中，使(shi)消化液(ye)浸潤所(suo)有(you)細(xi)胞，將培養(yang)瓶(ping)置(zhi)於(yu)37℃培養(yang)箱中消化1-2 min（視(shi)細(xi)胞情(qing)況(kuang)而(er)定(ding)），然(ran)後在顯微(wei)鏡(jing)下(xia)觀察(cha)細胞消化情(qing)況(kuang)，若(ruo)細胞大(da)部(bu)分變(bian)圓並(bing)脫落(luo)，迅(xun)速拿(na)回操(cao)作(zuo)臺，輕(qing)敲幾下(xia)培養(yang)瓶(ping)後加2-3ml培養(yang)基終止消化。輕(qing)輕(qing)打(da)勻後裝(zhuang)入(ru)無(wu)菌離心(xin)管(guan)中，1000 rpm離心(xin)5 min，棄去(qu)上(shang)清液(ye)，補加1-2 mL培養(yang)液(ye)後吹(chui)勻。        

     c、將(jiang)細胞懸液(ye)按(an)1:2比(bi)例分到(dao)新的(de)含8 mL培養(yang)基的新皿中或(huo)者瓶中，置(zhi)於(yu)培養(yang)箱中培養(yang)。 3) 細(xi)胞凍存(cun)：待(dai)細胞生長(chang)狀(zhuang)態(tai)良(liang)好(hao)時，可(ke)進行細胞凍存(cun)。下(xia)面 T25 瓶(ping)為例；a、收(shou)集細(xi)胞及細胞培養(yang)液(ye)，裝(zhuang)入(ru)無(wu)菌離心(xin)管(guan)中，1000 rpm條(tiao)件下(xia)離心(xin)4 min，棄去(qu)上(shang)清液(ye)，用PBS清洗(xi)壹遍，棄盡(jin)PBS，進(jin)行細胞計數。

     b、根(gen)據(ju)細(xi)胞數量加入無(wu)血(xue)清(qing)細(xi)胞凍存(cun)液(ye)，使(shi)細胞密(mi)度(du)5×106~1×107/mL，輕(qing)輕(qing)混(hun)勻，每(mei)支凍(dong)存(cun)管(guan)凍(dong)存1mL細(xi)胞懸液(ye)，註(zhu)意(yi)凍(dong)存(cun)管(guan)做好標識。將(jiang)凍(dong)存管(guan)放入-80℃冰(bing)箱，24 h後轉入(ru)液(ye)氮(dan)灌(guan)儲存(cun)。記(ji)錄凍(dong)存(cun)管(guan)位(wei)置(zhi)以(yi)便下(xia)次拿(na)取(qu)。  

三(san)、培養(yang)註(zhu)意(yi)事項 

1. 收(shou)到(dao)細胞後首先觀察(cha)細胞瓶是(shi)否(fou)完(wan)好(hao)，培養(yang)液(ye)是(shi)否(fou)有(you)漏(lou)液(ye)、渾濁(zhuo)等現象，若(ruo)有上述現象 發(fa)生請及時和我們(men)聯(lian)系。

2. 仔(zai)細(xi)閱讀(du)細(xi)胞說明(ming)書(shu)，了解細(xi)胞相(xiang)關(guan)信息，如細胞形態(tai)、所用(yong)培養(yang)基、血(xue)清(qing)比(bi)例、所需(xu) 細胞因子(zi)等，確(que)保細胞培養(yang)條(tiao)件壹致，若(ruo)由(you)於(yu)培養(yang)條(tiao)件不壹致而(er)導(dao)致細胞出現問題(ti)，責(ze)任由(you) 客戶(hu)自(zi)行承擔(dan)。

3. 用 75%酒精擦(ca)拭(shi)細胞瓶表面，顯微(wei)鏡(jing)下(xia)觀察(cha)細胞狀態(tai)。因運(yun)輸問(wen)題(ti)，部(bu)分細(xi)胞由(you)於(yu)溫(wen)度(du) 變化及劇烈(lie)碰亡破(po)碎形成(cheng)碎片，是(shi)正(zheng)常現象。觀(guan)察(cha)好細胞狀態(tai)後，75%酒精消毒(du)瓶壁(bi)將 T25 瓶置(zhi)於(yu) 37℃培養(yang)箱放置(zhi) 2-4h。

4. 貼壁(bi)細胞可以(yi)消化，懸(xuan)浮(fu)細(xi)胞直接混(hun)勻收(shou)集細(xi)胞，900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，棄上(shang) 清(qing)。加 5 mL PBS 重(zhong)懸細胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，用新(xin)鮮的培養(yang)基重懸 細胞，並(bing)接種(zhong)到(dao)新的(de)培養(yang)瓶(ping)或(huo)培養(yang)皿中，置(zhi)於(yu)培養(yang)箱中進(jin)行培養(yang)。

5. 請客戶(hu)用相(xiang)同(tong)條件的培養(yang)基用於(yu)細(xi)胞培養(yang)。

6. 建(jian)議(yi)客戶(hu)收(shou)到(dao)細胞後前 3 天(tian)各(ge)拍幾張細胞照片(pian)，記(ji)錄細(xi)胞狀態(tai)，便於(yu)和(he)我司技術(shu)部(bu)溝通 交流(liu)。由(you)於(yu)運(yun)輸的(de)原(yuan)因，個別敏感細(xi)胞會出(chu)現不穩(wen)定(ding)的情(qing)況(kuang)，請及時和我們(men)聯(lian)系，告(gao)知(zhi)細胞 的具(ju)體情(qing)況(kuang)，以(yi)便我們(men)的(de)技(ji)術(shu)人員跟蹤回訪(fang)直至問(wen)題(ti)解決(jue)。

7. 該(gai)細(xi)胞僅供科(ke)研(yan)使(shi)用。

8. 備註(zhu)：運(yun)輸用(yong)的(de)培養(yang)基 (灌(guan)液(ye)培養(yang)基) 不能(neng)再(zai)用(yong)來(lai)培養(yang)細(xi)胞，請換(huan)用(yong)按(an)照說(shuo)明書(shu)細胞培 養(yang)條(tiao)件新配(pei)制(zhi)的培養(yang)基來(lai)培養(yang)細(xi)胞。     收(shou)到(dao)細胞後第壹次傳代(dai)建(jian)議(yi) 1：2 傳代(dai) 。

9. 註(zhu)意(yi)：  1:2 傳代(dai)就是(shi) 1 個 T25 瓶(ping)傳 2 個 T25 瓶或者(zhe) 2 個(ge) 6cm 皿。不(bu)是(shi) 1 個 T25 瓶傳 2 個10cm 皿。

公(gong)司正(zheng)在出(chu)售的產(chan)品：

IGFBP6 Protein Mouse 重(zhong)組小鼠 IGFBP6 / IBP-6 蛋(dan)白(bai) (His 標簽) 大(da)鼠(shu)硬脂(zhi)酰(xian)去(qu)飽(bao)和(he)酶(mei)1(SCD-1)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) HBeAb 乙(yi)型肝炎(yan)e抗(kang)體 PAH Others Human 人 PAH / PH (415 Asn/Asp) 桿狀病(bing)毒(du)-昆(kun)蟲(chong)細胞裂解液(ye) (陽(yang)性(xing)對(dui)照)

大(da)鼠(shu)膀胱(guang)成(cheng)纖維(wei)細胞培養(yang)基 100mL 大(da)鼠(shu)硬脂(zhi)酰(xian)去(qu)飽(bao)和(he)酶(mei)(SCD)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) HBcAb 乙(yi)型肝炎(yan)核(he)心(xin)抗體 HEC-1A, 人子(zi)宮內(nei)膜癌(ai)細胞系 肝細(xi)胞,BRL細胞 TE 115.T(人軟(ruan)組織(zhi)纖維(wei)瘤(liu)細胞)

ENPP5 Others Human 人(ren) ENPP5 人細胞裂解液(ye) (陽(yang)性(xing)對(dui)照) 大(da)鼠(shu)硬骨(gu)素(SOST)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) HBsAg(立可讀(du)) 乙(yi)型肝炎(yan)表面抗(kang)原 96T

MPP9： 有(you)絲分裂(lie)細胞周(zhou)期蛋白(bai)MPP9抗體 小鼠小膠質(zhi)細胞;BV2

BRL 3A大(da)鼠(shu)肝細(xi)胞 Rat hepatic cells BRL 3A DMEM培養(yang)基+10%FBS 大(da)鼠(shu)印度(du)刺(ci)猬(wei)因(yin)子(zi)(IHH)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) HBsAb(立可讀(du)) 乙(yi)型肝炎(yan)表面抗(kang)體 EPOR Others Mouse 小鼠 EPOR 人細(xi)胞裂解液(ye) (陽(yang)性(xing)對(dui)照)

急性(xing)T淋(lin)巴細胞白(bai)血(xue)病(bing)細(xi)胞;TALL-104 人抗(kang)鈣(gai)蛋(dan)白(bai)酶(mei)抑素抗(kang)體(ACAST-DⅣ)ELISA 試(shi)劑(ji)盒(he) NOS-2 (iNOS) Nitric Oxide Synthase,Inducible 合成酶(mei)-2(抗(kang)原(yuan)) 0.5mg

HOXD8： 同(tong)源盒(he)轉錄因(yin)子(zi)8抗(kang)體 人類(lei)成纖維細胞系;CNLMG-B5537SKIN

HCT 116(人(ren)結腸癌(ai)細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0401NCI-H446(人(ren)小(xiao)細(xi)胞肺癌(ai)細胞)5×106cells/瓶×2 非(fei)洲綠(lv)猴(hou)腎細(xi)胞系/IgRCD4-;VERO/IgRCD4- 人(ren)抗(kang)副(fu)流(liu)感(gan)病毒IgM抗(kang)體(ai-PIV IgM)ELISA 試(shi)劑(ji)盒(he) Batroxobin 蛇毒巴曲(qu)酶(mei)抗(kang)原(yuan) 0.5mg

HCG Beta(4H7)： 人(ren)絨毛膜β亞(ya)基單(dan)抗(kang) 0.1ml

Rhesus antibody Rh C10orf63/Enkurin 10號(hao)染色體開(kai)放閱讀(du)框(kuang)63抗(kang)體 人生發基質細胞RNAHHGMC miRNA5 μg

Calu-3人(ren)肺腺(xian)癌(ai)細胞PRKAR1： 蛋(dan)白(bai)激酶(mei)A調(tiao)節亞(ya)基a1抗體 CL-0120HuH-7(人肝癌(ai)細胞)5×106cells/瓶×2

769-P人(ren)腎細(xi)胞腺(xian)癌(ai)細胞 769-P human renal cell carcinoma cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS 大(da)鼠(shu)肌(ji)鈣(gai)蛋白(bai)Ⅰ(Tn-Ⅰ)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) Beta-TG  大(da)鼠(shu)β血(xue)小(xiao)板(ban)球蛋白(bai)/β血(xue)栓(shuan)環(huan)蛋(dan)白(bai) 96T

phospho-PTPRA (Ser180)： 0酸化酪酸0酸酶(mei)α抗(kang)體 MSR1 Others Human 人 MSR1 / SCARA1 / CD204 人細胞裂解液(ye) (陽(yang)性(xing)對(dui)照)

猴(hou)腎細(xi)胞;Vero IgCD4 大(da)鼠(shu)肌(ji)鈣(gai)蛋白(bai)Ⅰ(Tn-Ⅰ)ELISA 試(shi)劑(ji)盒(he) Gelsolin(Mouse Gelsolin )  小鼠凝(ning)溶膠蛋(dan)白(bai) 96T

PDZD5A： PDZ結(jie)構域PDZK5A蛋白(bai)抗體 兔間變表皮(pi)鱗癌(ai)瘤株;VX2