HEK-293（293）人(ren)胚腎(shen)細胞

公司產品(pin)僅(jin)供科研研究使(shi)用(yong)、不得(de)用(yong)於臨床診(zhen)斷！

二(er)、細胞培(pei)養操作

1) 復(fu)蘇細胞：以(yi)下細胞培(pei)養凍存處理僅(jin)供參(can)考，具(ju)體(ti)操作步(bu)驟以(yi)隨(sui)貨(huo)產品(pin)說(shuo)明(ming)書(shu)為主(zhu)。將含有1 mL細胞懸液的(de)凍存管在(zai) 37℃水(shui)浴(yu)中(zhong)迅速(su)搖晃(huang)解凍，加4 mL培(pei)養(yang)基(ji)混合均(jun)勻。在1000 rpm條(tiao)件下離心3 min，棄(qi)去上(shang)清液，加1-2 mL培(pei)養(yang)基(ji)後(hou)吹(chui)勻。然(ran)後(hou)將所(suo)有細胞懸液加入含適(shi)量培養基(ji)的(de)培(pei)養(yang)瓶中(zhong)培養(yang)過(guo)夜（或(huo)將細胞懸液加入10 cm皿(min)中(zhong)，加入約(yue)8 mL培養基(ji)，培養(yang)過(guo)夜）。第(di)二(er)天(tian)換液並(bing)檢查細胞密(mi)度(du)。

2) 細胞傳(chuan)代：如(ru)果(guo)細胞密(mi)度(du)達 80%-90%，即(ji)可進(jin)行(xing)傳代(dai)培養(yang)。

    a、棄去培養(yang)上(shang)清，用(yong)不含鈣、鎂(mei)離(li)子(zi)的(de)PBS潤洗細胞1-2次(ci)。        

    b、加1 mL消(xiao)化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培(pei)養瓶中(zhong)，使消(xiao)化液浸潤所(suo)有細胞，將(jiang)培養(yang)瓶置於37℃培(pei)養箱中(zhong)消(xiao)化1-2 min（視細胞情(qing)況而(er)定(ding)），然(ran)後(hou)在顯(xian)微鏡(jing)下(xia)觀(guan)察(cha)細胞消(xiao)化情況(kuang)，若(ruo)細胞大(da)部分變(bian)圓並(bing)脫落(luo)，迅速(su)拿(na)回(hui)操作臺(tai)，輕(qing)敲幾下(xia)培養瓶後(hou)加2-3ml培(pei)養(yang)基(ji)終(zhong)止(zhi)消(xiao)化。輕(qing)輕(qing)打勻後(hou)裝(zhuang)入無(wu)菌離心管中(zhong)，1000 rpm離心5 min，棄(qi)去上(shang)清液，補(bu)加1-2 mL培(pei)養(yang)液後(hou)吹(chui)勻。        

     c、將細胞懸液按(an)1:2比(bi)例(li)分到新的(de)含8 mL培養(yang)基(ji)的(de)新皿(min)中(zhong)或者(zhe)瓶中(zhong)，置於(yu)培(pei)養箱中(zhong)培養(yang)。 3) 細胞凍存：待細胞生長狀(zhuang)態(tai)良好時，可(ke)進(jin)行(xing)細胞凍存。下面(mian) T25 瓶為例(li)；a、收(shou)集(ji)細胞及細胞培(pei)養液，裝(zhuang)入無(wu)菌離心管中(zhong)，1000 rpm條(tiao)件下離心4 min，棄(qi)去上(shang)清液，用(yong)PBS清洗壹遍(bian)，棄盡(jin)PBS，進行(xing)細胞計數。

     b、根據細胞數量加入無(wu)血清細胞凍存液，使(shi)細胞密(mi)度(du)5×106~1×107/mL，輕(qing)輕(qing)混勻，每支凍存管凍存1mL細胞懸液，註(zhu)意凍存管做(zuo)好標(biao)識。將(jiang)凍存管放入-80℃冰(bing)箱，24 h後(hou)轉入液氮(dan)灌儲存(cun)。記(ji)錄(lu)凍存管位置(zhi)以(yi)便下次(ci)拿(na)取(qu)。  

三(san)、培養註意事(shi)項 

1. 收(shou)到(dao)細胞後(hou)首先觀(guan)察(cha)細胞瓶是否(fou)完好(hao)，培養(yang)液是否(fou)有漏(lou)液、渾(hun)濁(zhuo)等現象，若有(you)上(shang)述(shu)現象 發生請(qing)及時和我(wo)們聯系(xi)。

2. 仔細閱讀細胞說(shuo)明(ming)書(shu)，了解細胞相關(guan)信(xin)息(xi)，如(ru)細胞形(xing)態(tai)、所(suo)用培(pei)養基(ji)、血清比(bi)例(li)、所(suo)需(xu) 細胞因子等，確保細胞培(pei)養條(tiao)件壹致，若(ruo)由(you)於(yu)培(pei)養(yang)條(tiao)件不壹致(zhi)而(er)導(dao)致(zhi)細胞出(chu)現問(wen)題(ti)，責(ze)任由(you) 客戶(hu)自(zi)行(xing)承擔(dan)。

3. 用 75%酒精擦(ca)拭細胞瓶表面(mian)，顯(xian)微鏡(jing)下(xia)觀(guan)察(cha)細胞狀(zhuang)態(tai)。因運輸(shu)問(wen)題，部分細胞由(you)於(yu)溫(wen)度(du) 變(bian)化及劇(ju)烈(lie)碰亡破碎形(xing)成碎片(pian)，是正(zheng)常(chang)現象。觀(guan)察(cha)好(hao)細胞狀(zhuang)態(tai)後(hou)，75%酒精消(xiao)毒瓶壁(bi)將 T25 瓶置於 37℃培(pei)養箱放置 2-4h。

4. 貼(tie)壁(bi)細胞可(ke)以(yi)消(xiao)化，懸浮(fu)細胞直(zhi)接(jie)混(hun)勻收(shou)集(ji)細胞，900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，棄(qi)上(shang) 清。加 5 mL PBS 重懸細胞，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，用(yong)新鮮(xian)的(de)培(pei)養(yang)基(ji)重懸 細胞，並(bing)接(jie)種到(dao)新的(de)培(pei)養(yang)瓶或培養(yang)皿中(zhong)，置於(yu)培(pei)養箱中(zhong)進行(xing)培養(yang)。

5. 請(qing)客戶(hu)用(yong)相同(tong)條(tiao)件的(de)培(pei)養(yang)基(ji)用於(yu)細胞培(pei)養。

6. 建議客戶(hu)收(shou)到(dao)細胞後(hou)前 3 天(tian)各拍幾張細胞照片，記(ji)錄(lu)細胞狀(zhuang)態(tai)，便(bian)於和我(wo)司技(ji)術(shu)部溝通(tong) 交流(liu)。由(you)於(yu)運(yun)輸(shu)的(de)原(yuan)因，個(ge)別(bie)敏(min)感(gan)細胞會出現不穩(wen)定(ding)的(de)情(qing)況(kuang)，請(qing)及時和我(wo)們聯系(xi)，告知(zhi)細胞 的(de)具(ju)體(ti)情(qing)況，以(yi)便我(wo)們的(de)技(ji)術(shu)人(ren)員跟蹤回訪(fang)直(zhi)至(zhi)問題解決。

7. 該細胞僅(jin)供科研使用(yong)。

8. 備(bei)註：運輸(shu)用(yong)的(de)培(pei)養(yang)基(ji) (灌液培(pei)養(yang)基(ji)) 不能(neng)再用來(lai)培(pei)養(yang)細胞，請(qing)換用(yong)按(an)照說(shuo)明(ming)書(shu)細胞培(pei) 養條(tiao)件新配(pei)制的(de)培(pei)養(yang)基(ji)來(lai)培(pei)養(yang)細胞。     收(shou)到(dao)細胞後(hou)第壹(yi)次(ci)傳(chuan)代(dai)建議 1：2 傳(chuan)代(dai) 。

9. 註意：  1:2 傳代(dai)就(jiu)是 1 個(ge) T25 瓶傳 2 個(ge) T25 瓶或者 2 個(ge) 6cm 皿(min)。不是 1 個(ge) T25 瓶傳 2 個(ge)10cm 皿(min)。

公司正(zheng)在(zai)出售(shou)的(de)產品(pin)：

MEI-1： 減(jian)數分裂缺(que)陷蛋白1抗(kang)體(ti) A172細胞，膠(jiao)質母(mu)細胞瘤(liu)細胞 肝細胞癌(ai),HepG2細胞 人(ren)結(jie)直(zhi)腸(chang)腺癌(ai)細胞;COLO 205

CLEC3B Others Mouse 小鼠 CLEC3B / Teanectin 人(ren)細胞裂解液 (陽性(xing)對照) 大鼠血管緊(jin)張素(su)轉化酶(ACE)ELISA 試(shi)劑盒(he) TSLP(Human thymic stromal lymphopoietin)  人(ren)胸(xiong)腺基(ji)質淋(lin)巴(ba)細胞生成(cheng)素(su) 96T

MTCH1： 細胞增(zeng)殖誘(you)導(dao)蛋白60(早(zao)老(lao)素(su)相關(guan)蛋白) 0.2ml

Rhesus antibody Rh Ephrin A3/EFNA3 酪蛋白激(ji)酶A3受體抗(kang)體(ti) 人(ren)滑膜(mo)細胞RNAHS miRNA5 μg

Super Tube狗腎(shen)細胞 Super Tube canine kidney cells D-MEM/F-12培(pei)養基(ji)(GIBCO)+10%FBS 大鼠血管緊(jin)張素(su)原(yuan)(aGT)ELISA試劑盒(he) TARC/CCL17  大(da)鼠胸(xiong)腺活(huo)化調節(jie)趨(qu)化因子 96T

HERC2： HERC2 E3泛素(su)蛋白連接(jie)酶(mei)抗(kang)體(ti) 人(ren)表皮黑(hei)色(se)素細胞-淺(qian)色(se)素裂解物(wu)HELM-l L

ANGPT2 Protein Human 重組人(ren) ANG2 / Angiopoietin-2 蛋白 (His 標(biao)簽(qian)) 人(ren)高速(su)泳動蛋白17(HMG-17)ELISA 試(shi)劑盒(he) DRD5 receptor(dopamine D5 receptor) 多(duo)巴胺(an)受體-D5抗(kang)原(yuan) 0.5mg

HERC3： HERC3 E3泛素(su)蛋白連接(jie)酶(mei)抗(kang)體(ti) KIR2DL4 Others Human 人(ren) KIR2DL4 / CD158D CHO細胞裂解液 (陽性(xing)對照)

人(ren)小氣道(dao)上(shang)皮細胞培(pei)養基(ji) 100mL 人(ren)高遷移率(lv)族(zu)蛋白B1(HMGB-1) ELISA試(shi)劑盒(he) DBH (Dopamine- Beta-Hydroxylase) 多(duo)巴胺(an)β羥(qiang)化酶(抗(kang)原(yuan)) 0.5mg

HERC4： HERC4 E3泛素(su)蛋白連接(jie)酶(mei)抗(kang)體(ti) 新生牛眼(yan)晶體(ti)上(shang)皮細胞;NBLE 人(ren)甲狀(zhuang)腺癌(ai)細胞，SW579細胞 RIN-m5F細胞，小鼠β胰(yi)島(dao)素瘤細胞

HEK-293（293）人(ren)胚腎(shen)細胞Perilipin A： 脂滴包(bao)被蛋白Perilipin-A抗(kang)體(ti) hFOB 1.19細胞，人(ren)SV40轉染(ran)成骨細胞 人(ren)癌細胞(耐(nai)),MCF-7/ADR細胞 小鼠小腦(nao)星形膠質(zhi)細胞MA-c

HA Others H5N1 甲型(xing)流(liu)感(gan) H5N1 (A/Viet Nam/1203/2004) 血凝素HA2 (Hemagglutinin) 人(ren)細胞裂解液 (陽性(xing)對照) 大鼠甘露(lu)糖(tang)結(jie)合凝集(ji)素(MBL)ELISA試(shi)劑盒(he) Human Leishimaria antibody  人(ren)利什(shen)曼原(yuan)蟲(chong)抗(kang)體(ti) CM-H117人(ren)腦靜脈血(xue)管內(nei)皮細胞培(pei)養基(ji)100mL

NCI-H358人(ren)非小細胞肺癌(ai)細胞 NCI-H358 cells in human non small cell lung cancer RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS 大(da)鼠甘露(lu)糖(tang)結(jie)合蛋白/甘(gan)露(lu)糖(tang)結(jie)合凝集(ji)素(MBP/MBL)ELISA試(shi)劑盒(he) ACTH  大(da)鼠促(cu)腎(shen)上(shang)腺皮(pi)質激(ji)素 96T

PAS1C1： 核纖(xian)層(ceng)蛋白A相關(guan)結(jie)構蛋白1抗(kang)體(ti) LY86 Others Mouse 小鼠 LY86 / MD1 人(ren)細胞裂解液 (陽性(xing)對照)

人(ren)侵(qin)襲性脈絡(luo)膜(mo)黑色(se)素瘤(liu)細胞;MuM-2B 大(da)鼠甘露(lu)糖(tang)結(jie)合蛋白(MBL)ELISA試(shi)劑盒(he) FSH  大(da)鼠促(cu)卵(luan)泡(pao)素(su) 96T