HELA 人子(zi)宮(gong)頸癌細胞

公(gong)司(si)產品僅(jin)供科研研究(jiu)使用(yong)、不得(de)用(yong)於臨床診斷！

二、細胞培養(yang)操作(zuo)

1) 復蘇細胞：以下(xia)細胞培養(yang)凍(dong)存(cun)處理(li)僅供(gong)參考，具體操作(zuo)步驟(zhou)以隨(sui)貨(huo)產品說明書(shu)為(wei)主(zhu)。將含有1 mL細胞懸液(ye)的(de)凍(dong)存(cun)管在 37℃水(shui)浴(yu)中(zhong)迅速(su)搖晃解凍(dong)，加(jia)4 mL培(pei)養(yang)基(ji)混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上(shang)清液(ye)，加(jia)1-2 mL培(pei)養(yang)基(ji)後(hou)吹(chui)勻。然後(hou)將所(suo)有細胞懸液(ye)加(jia)入(ru)含適(shi)量(liang)培養(yang)基的(de)培(pei)養瓶(ping)中培(pei)養(yang)過夜（或(huo)將細胞懸液(ye)加(jia)入(ru)10 cm皿中(zhong)，加(jia)入(ru)約(yue)8 mL培養(yang)基(ji)，培(pei)養過夜(ye)）。第二天(tian)換(huan)液(ye)並檢(jian)查細胞密度。

2) 細胞傳代：如果細胞密度達(da) 80%-90%，即(ji)可(ke)進行傳代培養。

    a、棄去培(pei)養(yang)上清，用(yong)不含(han)鈣(gai)、鎂(mei)離子的(de)PBS潤洗(xi)細胞1-2次。        

    b、加(jia)1 mL消化液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培(pei)養(yang)瓶(ping)中，使(shi)消化液(ye)浸潤所(suo)有細胞，將培養(yang)瓶(ping)置(zhi)於37℃培(pei)養(yang)箱中消化1-2 min（視(shi)細胞情況(kuang)而(er)定(ding)），然(ran)後(hou)在顯(xian)微(wei)鏡下(xia)觀(guan)察(cha)細胞消化情況(kuang)，若(ruo)細胞大部分(fen)變(bian)圓並脫落(luo)，迅速(su)拿回操作(zuo)臺，輕(qing)敲幾下培(pei)養瓶(ping)後(hou)加(jia)2-3ml培(pei)養(yang)基(ji)終止消化。輕輕(qing)打勻後(hou)裝入(ru)無菌(jun)離心管中，1000 rpm離心5 min，棄去上(shang)清液(ye)，補加(jia)1-2 mL培(pei)養(yang)液(ye)後(hou)吹(chui)勻。        

     c、將細胞懸液(ye)按1:2比例分到(dao)新(xin)的(de)含(han)8 mL培養(yang)基(ji)的(de)新(xin)皿中(zhong)或(huo)者(zhe)瓶(ping)中，置(zhi)於培(pei)養(yang)箱中培(pei)養(yang)。 3) 細胞凍(dong)存(cun)：待細胞生長狀態(tai)良(liang)好(hao)時，可(ke)進行細胞凍(dong)存(cun)。下面 T25 瓶(ping)為例(li)；a、收集細胞及(ji)細胞培養(yang)液(ye)，裝入(ru)無菌(jun)離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上(shang)清液(ye)，用(yong)PBS清洗(xi)壹(yi)遍(bian)，棄(qi)盡PBS，進行(xing)細胞計數(shu)。

     b、根據(ju)細胞數(shu)量加(jia)入(ru)無血清細胞凍(dong)存(cun)液(ye)，使細胞密度5×106~1×107/mL，輕(qing)輕(qing)混勻，每支(zhi)凍(dong)存(cun)管凍(dong)存(cun)1mL細胞懸液(ye)，註意(yi)凍(dong)存(cun)管做好(hao)標識。將凍(dong)存(cun)管放入(ru)-80℃冰(bing)箱，24 h後(hou)轉入(ru)液(ye)氮(dan)灌儲存。記(ji)錄(lu)凍(dong)存(cun)管位置(zhi)以便下(xia)次拿(na)取(qu)。  

三(san)、培養註意(yi)事項(xiang) 

1. 收到(dao)細胞後(hou)首先(xian)觀察(cha)細胞瓶(ping)是否(fou)完好(hao)，培養(yang)液(ye)是否(fou)有漏液(ye)、渾濁等現(xian)象，若有上(shang)述(shu)現象 發(fa)生請及(ji)時和我(wo)們(men)聯系。

2. 仔(zai)細閱(yue)讀(du)細胞說明書(shu)，了(le)解細胞相關(guan)信息，如(ru)細胞形態、所(suo)用(yong)培養(yang)基(ji)、血清比例、所(suo)需 細胞因子(zi)等，確(que)保(bao)細胞培養(yang)條件壹(yi)致(zhi)，若由於培(pei)養(yang)條件不壹(yi)致(zhi)而(er)導(dao)致(zhi)細胞出現問(wen)題，責(ze)任(ren)由 客戶自(zi)行承(cheng)擔(dan)。

3. 用(yong) 75%酒精擦拭(shi)細胞瓶(ping)表(biao)面，顯(xian)微(wei)鏡下(xia)觀(guan)察(cha)細胞狀態(tai)。因運(yun)輸(shu)問(wen)題，部分(fen)細胞由於溫度(du) 變(bian)化及(ji)劇(ju)烈(lie)碰(peng)亡破碎(sui)形成碎(sui)片(pian)，是正(zheng)常現象。觀察(cha)好(hao)細胞狀態(tai)後(hou)，75%酒精消毒瓶(ping)壁將 T25 瓶(ping)置(zhi)於 37℃培(pei)養(yang)箱放置(zhi) 2-4h。

4. 貼(tie)壁細胞可(ke)以消化，懸浮(fu)細胞直接(jie)混勻收集細胞，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄上(shang) 清。加(jia) 5 mL PBS 重(zhong)懸(xuan)細胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，用(yong)新鮮的(de)培(pei)養基(ji)重(zhong)懸 細胞，並接(jie)種到(dao)新(xin)的(de)培(pei)養瓶(ping)或(huo)培養(yang)皿中，置(zhi)於培(pei)養(yang)箱中進(jin)行(xing)培養。

5. 請客戶用(yong)相同(tong)條件的(de)培(pei)養基(ji)用(yong)於細胞培養(yang)。

6. 建議客戶收到(dao)細胞後(hou)前 3 天(tian)各拍幾張細胞照片(pian)，記(ji)錄(lu)細胞狀態(tai)，便於和我(wo)司(si)技術部溝(gou)通(tong) 交(jiao)流(liu)。由於運(yun)輸(shu)的(de)原(yuan)因，個(ge)別(bie)敏感(gan)細胞會出現不(bu)穩(wen)定(ding)的(de)情況(kuang)，請及(ji)時和我(wo)們(men)聯系，告(gao)知(zhi)細胞 的(de)具(ju)體情況(kuang)，以(yi)便我(wo)們(men)的(de)技術人員跟(gen)蹤(zong)回訪直至(zhi)問(wen)題解決。

7. 該細胞僅供(gong)科研使用(yong)。

8. 備註：運(yun)輸(shu)用(yong)的(de)培(pei)養基(ji) (灌液(ye)培養(yang)基) 不能再(zai)用(yong)來培養細胞，請換(huan)用(yong)按照(zhao)說明書(shu)細胞培 養(yang)條件新配(pei)制(zhi)的(de)培(pei)養基(ji)來培養細胞。     收到(dao)細胞後(hou)第壹(yi)次傳(chuan)代建議 1：2 傳代 。

9. 註意(yi)：  1:2 傳(chuan)代就(jiu)是(shi) 1 個 T25 瓶(ping)傳 2 個(ge) T25 瓶(ping)或(huo)者(zhe) 2 個(ge) 6cm 皿(min)。不(bu)是 1 個 T25 瓶(ping)傳 2 個(ge)10cm 皿(min)。

公司正(zheng)在(zai)出售的(de)產品：

NCI-H2087(人非(fei)小(xiao)細胞肺(fei)腺癌細胞) 5×106cells/瓶(ping)×2 Mo-MuLv/3T3(Mo-MuLv感染(ran)的(de)3T3細胞) 大鼠(shu)血管緊(jin)張素(su)Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA 試劑盒(he) CH  大(da)鼠(shu) 96T

MOT8： 甲狀(zhuang)腺激素(su)轉運(yun)蛋(dan)白(bai)/單(dan)羧(suo)酸轉運(yun)蛋(dan)白(bai)7/8抗體 小(xiao)耳(er)豬(zhu)腎細胞;SEPfk

IFNW1 Protein Human 重組(zu)人 Ierferon omega-1 / IFNω / IFNW1 蛋(dan)白(bai) (Fc 標簽(qian)) 大(da)鼠(shu)血管緊(jin)張素(su)Ⅰ轉化(hua)酶(mei)(ACEⅠ)ELISA試劑盒(he) PTN(Human pleiotrophin)  人多(duo)效生長因子(zi) 96T

MARK2： 絲酸/蘇酸蛋(dan)白(bai)激(ji)酶(mei)MARK2抗體 CAMK1G Others Human 人 CAMK1G / CLICK III / CaMKIgamma 桿(gan)狀(zhuang)病毒-昆蟲細胞裂解液(ye) (陽性(xing)對(dui)照(zhao))

大鼠(shu)雪(xue)旺氏細胞培養(yang)基 100mL 大(da)鼠(shu)血管緊(jin)張素(su)Ⅰ轉化(hua)酶(mei)(ACEⅠ)ELISA 試劑盒(he) Apo-E (Rabbit Apolipoprotein E)  兔(tu)載(zai)脂蛋(dan)白(bai)E 96T

hHR23A： 紫外(wai)切(qie)除修復蛋(dan)白(bai)RAD23A抗體 TIMP1 Others Mouse 小(xiao)鼠(shu) TIMP1 / TIMP / CLGI 人細胞裂解液(ye) (陽性(xing)對(dui)照(zhao))

牛(niu)腎細胞;MDBK(BVDV-free) 人幹(gan)細胞因子(zi)受體(ti)(SCFR)ELISA 試劑盒(he) DHAV(duck hepatitis A virus) 鴨(ya)甲型(xing)肝(gan)炎(yan)A病(bing)毒(du)抗原 0.5mg

hHR23b： 紫外(wai)切(qie)除修復蛋(dan)白(bai)RAD23B抗體 EB病(bing)毒轉化(hua)的(de)人B淋(lin)巴細胞;KM932

Li-7(人肝(gan)癌細胞) 5×106cells/瓶(ping)×2 SARS Spike S1 Subunit 桿狀(zhuang)病(bing)毒-昆蟲細胞裂解液(ye) (陽性(xing)對(dui)照(zhao)) 人幹(gan)細胞因子(zi)/肥(fei)大細胞生長因子(zi)(SCF/MGF)ELISA 試劑盒(he) Des(Desmin) 結蛋(dan)白(bai)抗原 0.5mg

HIBADH： 3-羥(qiang)基異(yi)脫氫酶(mei)抗體 人神(shen)經(jing)細胞裂解物HNL

HELA 人子(zi)宮(gong)頸癌細胞MDA-MB-468 人癌細胞 大鼠(shu)鈣(gai)網蛋(dan)白(bai)(C)ELISA試劑盒(he) VLA  大(da)鼠(shu)遲現抗原 96T

PDZK3： 前列腺癌激(ji)活(huo)蛋(dan)白(bai)抗體 Beta-TC-6細胞，小鼠(shu)胰(yi)腺癌beta細胞 人癌細胞,SKBr-2HL細胞 小鼠(shu)海馬(ma)星(xing)形膠質(zhi)細胞MA-h

GPR56 Others Human 人 GPR56 / TM7LN4 人細胞裂解液(ye) (陽性(xing)對(dui)照(zhao)) 大(da)鼠(shu)鈣(gai)調(tiao)素(su)依賴性(xing)蛋(dan)白(bai)激(ji)酶(mei)2(CAMK2)ELISA試劑盒(he) CT  大(da)鼠(shu)降(jiang)鈣素(su) 96T

PDZK4： PDZ結構(gou)域(yu)PDZK4蛋(dan)白(bai)抗體 CM-H101新(xin)生兒表(biao)皮(pi)角化(hua)細胞培養(yang)基100mL

HCC827人非(fei)小(xiao)細胞肺(fei)癌細胞 HCC827 cells in human non small cell lung cancer RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS 大鼠(shu)鈣(gai)調(tiao)素(su)(CAM)ELISA試劑盒(he) ECHO IgM(Human EchoVirus IgM)  人艾柯(ke)病毒(du)IgM 96T