HGC-27人胃癌細胞

公(gong)司產(chan)品僅(jin)供(gong)科研研(yan)究使用(yong)、不得用(yong)於臨床診斷！

二(er)、細胞培養(yang)操(cao)作(zuo)

1) 復(fu)蘇(su)細胞：以下(xia)細胞培養(yang)凍(dong)存(cun)處(chu)理僅(jin)供(gong)參考(kao)，具(ju)體(ti)操(cao)作步驟以隨(sui)貨(huo)產品(pin)說(shuo)明(ming)書為(wei)主。將(jiang)含(han)有(you)1 mL細胞懸液(ye)的凍(dong)存管在(zai) 37℃水(shui)浴中(zhong)迅(xun)速(su)搖(yao)晃(huang)解(jie)凍(dong)，加4 mL培養(yang)基混合均(jun)勻。在(zai)1000 rpm條件(jian)下(xia)離心3 min，棄(qi)去上清(qing)液(ye)，加1-2 mL培養(yang)基後吹(chui)勻。然後將(jiang)所有細胞懸液(ye)加入(ru)含適(shi)量培養(yang)基的培養(yang)瓶(ping)中(zhong)培養(yang)過(guo)夜(ye)（或(huo)將(jiang)細胞懸液(ye)加入(ru)10 cm皿(min)中(zhong)，加(jia)入(ru)約(yue)8 mL培養(yang)基，培養(yang)過(guo)夜(ye)）。第(di)二(er)天換液(ye)並檢(jian)查細胞密(mi)度(du)。

2) 細胞傳代：如果(guo)細胞密(mi)度(du)達 80%-90%，即(ji)可(ke)進(jin)行傳代培養(yang)。

    a、棄(qi)去培養(yang)上清(qing)，用(yong)不含鈣(gai)、鎂(mei)離(li)子的PBS潤(run)洗(xi)細胞1-2次。        

    b、加1 mL消化液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培養(yang)瓶(ping)中(zhong)，使(shi)消(xiao)化液(ye)浸潤(run)所有細胞，將(jiang)培養(yang)瓶(ping)置(zhi)於37℃培養(yang)箱(xiang)中(zhong)消(xiao)化1-2 min（視細胞情況(kuang)而定），然後在(zai)顯微(wei)鏡下(xia)觀察(cha)細胞消化情況(kuang)，若細胞大部分變(bian)圓並脫(tuo)落，迅(xun)速拿(na)回操作(zuo)臺，輕(qing)敲(qiao)幾下(xia)培養(yang)瓶(ping)後(hou)加(jia)2-3ml培養(yang)基終止(zhi)消化。輕輕(qing)打勻後(hou)裝入(ru)無(wu)菌離心管中(zhong)，1000 rpm離(li)心5 min，棄(qi)去上清(qing)液(ye)，補加(jia)1-2 mL培養(yang)液(ye)後吹(chui)勻。        

     c、將(jiang)細胞懸液(ye)按1:2比(bi)例(li)分到新(xin)的(de)含(han)8 mL培養(yang)基的新(xin)皿(min)中(zhong)或(huo)者(zhe)瓶中(zhong)，置(zhi)於培養(yang)箱(xiang)中(zhong)培養(yang)。 3) 細胞凍存：待細胞生(sheng)長狀(zhuang)態(tai)良(liang)好(hao)時(shi)，可(ke)進(jin)行細胞凍存。下面(mian) T25 瓶(ping)為(wei)例(li)；a、收(shou)集(ji)細胞及細胞培養(yang)液(ye)，裝入(ru)無(wu)菌離心管中(zhong)，1000 rpm條(tiao)件(jian)下(xia)離心4 min，棄(qi)去上清(qing)液(ye)，用(yong)PBS清(qing)洗壹(yi)遍(bian)，棄(qi)盡PBS，進(jin)行細胞計數。

     b、根據(ju)細胞數量加入(ru)無(wu)血清細胞凍存液(ye)，使細胞密(mi)度(du)5×106~1×107/mL，輕(qing)輕混勻，每(mei)支凍(dong)存(cun)管凍(dong)存(cun)1mL細胞懸液(ye)，註意(yi)凍存(cun)管做(zuo)好(hao)標識。將(jiang)凍(dong)存(cun)管放(fang)入(ru)-80℃冰箱(xiang)，24 h後轉(zhuan)入(ru)液(ye)氮灌(guan)儲存。記錄(lu)凍(dong)存(cun)管位(wei)置(zhi)以便下次(ci)拿(na)取(qu)。  

三、培養(yang)註(zhu)意(yi)事(shi)項 

1. 收到細胞後首(shou)先觀察(cha)細胞瓶是(shi)否(fou)完(wan)好(hao)，培養(yang)液(ye)是(shi)否(fou)有漏(lou)液(ye)、渾(hun)濁等(deng)現象，若(ruo)有(you)上述(shu)現象 發(fa)生(sheng)請(qing)及時(shi)和(he)我們(men)聯系(xi)。

2. 仔(zai)細閱(yue)讀(du)細胞說(shuo)明(ming)書，了解(jie)細胞相關信(xin)息，如細胞形態(tai)、所用(yong)培養(yang)基、血清(qing)比例(li)、所需(xu) 細胞因(yin)子等(deng)，確(que)保(bao)細胞培養(yang)條(tiao)件(jian)壹(yi)致(zhi)，若由(you)於培養(yang)條(tiao)件(jian)不壹(yi)致(zhi)而導(dao)致(zhi)細胞出(chu)現問題(ti)，責(ze)任由 客戶自行承擔(dan)。

3. 用(yong) 75%酒(jiu)精(jing)擦(ca)拭細胞瓶表面，顯微(wei)鏡下(xia)觀察(cha)細胞狀(zhuang)態(tai)。因(yin)運輸問題(ti)，部(bu)分細胞由於溫度 變(bian)化及劇烈碰(peng)亡破(po)碎(sui)形(xing)成(cheng)碎(sui)片(pian)，是(shi)正常(chang)現象。觀察(cha)好(hao)細胞狀(zhuang)態(tai)後，75%酒精(jing)消(xiao)毒(du)瓶(ping)壁(bi)將(jiang) T25 瓶(ping)置(zhi)於 37℃培養(yang)箱(xiang)放(fang)置(zhi) 2-4h。

4. 貼壁細胞可(ke)以消(xiao)化，懸浮(fu)細胞直接(jie)混勻收(shou)集細胞，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄(qi)上 清(qing)。加 5 mL PBS 重懸細胞，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，用(yong)新(xin)鮮(xian)的(de)培養(yang)基重懸 細胞，並接(jie)種到(dao)新(xin)的(de)培養(yang)瓶(ping)或(huo)培養(yang)皿(min)中(zhong)，置(zhi)於培養(yang)箱(xiang)中(zhong)進(jin)行培養(yang)。

5. 請(qing)客戶用(yong)相同(tong)條件(jian)的(de)培養(yang)基用(yong)於細胞培養(yang)。

6. 建(jian)議(yi)客戶收到細胞後前 3 天各(ge)拍(pai)幾(ji)張(zhang)細胞照(zhao)片(pian)，記錄(lu)細胞狀(zhuang)態(tai)，便於和(he)我司(si)技術(shu)部溝(gou)通 交流。由於運(yun)輸的原因(yin)，個(ge)別敏感細胞會出(chu)現不穩定的情況(kuang)，請(qing)及時(shi)和(he)我們(men)聯系(xi)，告(gao)知(zhi)細胞 的具體(ti)情況(kuang)，以便我們(men)的(de)技術(shu)人員(yuan)跟(gen)蹤回訪直至(zhi)問題(ti)解(jie)決(jue)。

7. 該(gai)細胞僅(jin)供(gong)科研使(shi)用(yong)。

8. 備(bei)註：運輸用(yong)的(de)培養(yang)基 (灌液(ye)培養(yang)基) 不能再(zai)用(yong)來培養(yang)細胞，請(qing)換用(yong)按(an)照(zhao)說(shuo)明(ming)書細胞培 養(yang)條(tiao)件(jian)新(xin)配制的(de)培養(yang)基來培養(yang)細胞。     收到細胞後第(di)壹(yi)次(ci)傳代建(jian)議(yi) 1：2 傳代 。

9. 註(zhu)意(yi)：  1:2 傳代就(jiu)是(shi) 1 個(ge) T25 瓶傳 2 個(ge) T25 瓶或(huo)者(zhe) 2 個(ge) 6cm 皿(min)。不是(shi) 1 個(ge) T25 瓶傳 2 個(ge)10cm 皿(min)。

公(gong)司正(zheng)在(zai)出(chu)售(shou)的(de)產品：

白(bai)細胞介(jie)素-1超(chao)家族 大鼠(shu)胸腺活化調(tiao)節(jie)趨化因(yin)子(TARC/CCL17)ELISA試劑(ji)盒(he) eNOS (Rabbit Endothelial nitric oxide synthase)  兔內皮(pi)型合成(cheng)酶 96T

MYOM2： 肌(ji)間蛋(dan)白(bai)2抗(kang)體(ti) ACO1 Others Human 人(ren) ACO1 / irp1 桿(gan)狀(zhuang)病(bing)毒(du)-昆(kun)蟲(chong)細胞裂解(jie)液(ye) (陽性(xing)對照(zhao))

大(da)鼠小(xiao)梁網細胞培養(yang)基 100mL 大鼠(shu)胸腺(xian)表達趨化因(yin)子25(TECK/CCL25)ELISA試劑(ji)盒(he) NCAM-L1/CD171(Human Neural cell adhesion molecule ligand 1)  人神(shen)經細胞粘附(fu)分子配體(ti)1 96T

MYLK3： 肌(ji)球蛋(dan)白(bai)輕鏈(lian)激(ji)酶3抗(kang)體(ti) BxPC-3細胞，原位胰腺(xian)腺癌(ai)細胞 鼠骨髓(sui)瘤(liu)細胞,P3X63-Ag8.653細胞 人食管癌(ai)細胞;EC109

LTBR Others Rat 大(da)鼠 LTBR / TNFRSF3 人(ren)細胞裂解(jie)液(ye) (陽性(xing)對照(zhao)) 大(da)鼠胸腎(shen)表達趨化因(yin)子(BRAK)ELISA試劑(ji)盒(he) Plant Vitamin D2,VD2  植(zhi)物維生(sheng)2 96T

Lncap clone FGC(人(ren)前列腺(xian)癌(ai)細胞) 5×106cells/瓶×2 人 AMTN / Amelotin 人細胞裂解(jie)液(ye) (陽性(xing)對照(zhao)) 人(ren)鈣聯蛋(dan)白(bai)(calnexin)ELISA 試劑(ji)盒(he) phospho-eIF4E(pSer209)(phospho-Eukaryotic translation initiation factor 4E) 0酸化eIF-4E(Ser209)抗(kang)原 0.5mg

HCC1： RNA結合蛋(dan)白(bai)39抗(kang)體(ti) TUNEL色標法細胞雕(diao)亡檢(jian)測(ce)試劑(ji)盒(he)TUNEL

CCL3 Protein Human 重(zhong)組人(ren) CCL3 / Mip1a 蛋(dan)白(bai) (His 標簽(qian)) 人鈣離子通道(dao)抗(kang)體(ti)(VGCC)ELISA 試劑(ji)盒(he) ELK1 細胞轉(zhuan)錄(lu)因(yin)子ELK1抗(kang)原 0.5mg

HCCS： 全(quan)合成(cheng)酶抗(kang)體(ti) FCGR2A Others Human 人(ren) CD32a / FCGR2A CHO細胞裂解(jie)液(ye) (陽性(xing)對照(zhao))

人(ren)呼吸(xi)道上皮(pi)細胞培養(yang)基 100mL 人鈣(gai)結合蛋(dan)白(bai)(CR)ELISA 試劑(ji)盒(he) Elastin 彈性(xing)蛋(dan)白(bai)抗(kang)原 0.5mg

HGC-27人(ren)胃癌(ai)細胞人(ren)髓(sui)母(mu)細胞瘤(liu)細胞;D341Med 大鼠封閉(bi)蛋(dan)白(bai)4(CLDN4)ELISA試劑(ji)盒(he) HDV IgM(Human Hepatitis D virus IgM)  人丁(ding)型肝(gan)炎(yan)IgM 96T

Plexin A4： 神(shen)經叢(cong)蛋(dan)白(bai)A4抗(kang)體(ti) 大(da)額牛皮(pi)膚細胞;BFR-S3

293來源(yuan)病(bing)毒(du)包裝(zhuang)細胞;ΦA 人上皮(pi)細胞培養(yang)基 100mL 大鼠(shu)封閉(bi)蛋(dan)白(bai)3(CLDN3)ELISA試劑(ji)盒(he) T4  大鼠(shu)甲狀(zhuang)腺素 96T

PLAGL2： 多(duo)形性腺瘤(liu)基因(yin)樣蛋(dan)白(bai)2抗(kang)體(ti) 人(ren)真(zhen)皮(pi)淋巴內皮(pi)細胞HDLEC

SERPINA12 Protein Human 重(zhong)組人(ren) Vaspin / SerpinA12 蛋(dan)白(bai) (His 標簽(qian)) 大鼠酚(PYD)ELISA試劑(ji)盒(he) FT4  大鼠(shu)遊(you)離甲(jia)狀(zhuang)腺素 96T