HK-2人(ren)腎皮質(zhi)近曲小管上皮細胞

公(gong)司(si)產(chan)品僅供科研研究使(shi)用、不得用於臨(lin)床診斷(duan)！

二、細胞培養(yang)操作

1) 復蘇(su)細胞：以(yi)下(xia)細胞培養(yang)凍存處理(li)僅供參考，具(ju)體(ti)操作步(bu)驟以(yi)隨貨產(chan)品說明(ming)書(shu)為主。將含有1 mL細胞懸(xuan)液(ye)的(de)凍存管在(zai) 37℃水浴中(zhong)迅(xun)速搖(yao)晃解凍，加4 mL培養(yang)基(ji)混(hun)合(he)均勻。在(zai)1000 rpm條件下(xia)離心3 min，棄(qi)去(qu)上清液，加1-2 mL培養(yang)基(ji)後吹勻。然(ran)後將所有細胞懸(xuan)液(ye)加入(ru)含(han)適量培養(yang)基(ji)的培養(yang)瓶(ping)中培養(yang)過(guo)夜（或(huo)將細胞懸(xuan)液(ye)加入(ru)10 cm皿中(zhong)，加入(ru)約(yue)8 mL培養(yang)基(ji)，培養(yang)過(guo)夜）。第(di)二(er)天(tian)換(huan)液並(bing)檢(jian)查細胞密(mi)度(du)。

2) 細(xi)胞傳(chuan)代(dai)：如果(guo)細(xi)胞密(mi)度(du)達(da) 80%-90%，即(ji)可(ke)進行傳(chuan)代(dai)培養(yang)。

    a、棄(qi)去(qu)培養(yang)上清，用不含鈣、鎂(mei)離子的PBS潤(run)洗細(xi)胞1-2次(ci)。        

    b、加1 mL消(xiao)化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培養(yang)瓶(ping)中，使(shi)消(xiao)化液浸(jin)潤所(suo)有細胞，將培養(yang)瓶(ping)置於37℃培養(yang)箱中(zhong)消化1-2 min（視細胞情況(kuang)而(er)定(ding)），然(ran)後在顯微鏡下(xia)觀察(cha)細胞消(xiao)化情況(kuang)，若(ruo)細(xi)胞大(da)部分(fen)變圓(yuan)並脫(tuo)落，迅(xun)速拿(na)回(hui)操作臺(tai)，輕(qing)敲(qiao)幾(ji)下(xia)培養(yang)瓶(ping)後加2-3ml培養(yang)基(ji)終(zhong)止消(xiao)化。輕輕(qing)打勻後裝入(ru)無菌(jun)離心管中(zhong)，1000 rpm離心5 min，棄(qi)去(qu)上清液，補加1-2 mL培養(yang)液(ye)後吹勻。        

     c、將細胞懸(xuan)液(ye)按(an)1:2比(bi)例分(fen)到(dao)新(xin)的(de)含(han)8 mL培養(yang)基(ji)的新(xin)皿中(zhong)或(huo)者瓶(ping)中(zhong)，置於培養(yang)箱中(zhong)培養(yang)。 3) 細(xi)胞凍存：待細胞生(sheng)長(chang)狀(zhuang)態(tai)良好(hao)時，可(ke)進行細(xi)胞凍存。下(xia)面 T25 瓶(ping)為例；a、收集(ji)細(xi)胞及(ji)細胞培養(yang)液(ye)，裝入(ru)無(wu)菌離心管中(zhong)，1000 rpm條(tiao)件下(xia)離心4 min，棄(qi)去(qu)上清液，用PBS清洗壹遍，棄(qi)盡PBS，進行細(xi)胞計數。

     b、根(gen)據(ju)細胞數量加入(ru)無(wu)血清細(xi)胞凍存液，使(shi)細(xi)胞密(mi)度(du)5×106~1×107/mL，輕(qing)輕(qing)混(hun)勻，每(mei)支(zhi)凍存管凍存1mL細胞懸(xuan)液(ye)，註(zhu)意凍存管做(zuo)好標(biao)識(shi)。將凍存管放(fang)入-80℃冰(bing)箱，24 h後轉入(ru)液氮(dan)灌(guan)儲(chu)存。記(ji)錄凍存管位置以(yi)便(bian)下(xia)次(ci)拿(na)取。  

三(san)、培養(yang)註(zhu)意事項 

1. 收到(dao)細(xi)胞後首先觀(guan)察(cha)細胞瓶(ping)是否(fou)完(wan)好，培養(yang)液(ye)是否(fou)有漏(lou)液、渾(hun)濁等(deng)現象(xiang)，若(ruo)有上述現象(xiang) 發生(sheng)請(qing)及(ji)時和(he)我們聯(lian)系(xi)。

2. 仔(zai)細(xi)閱讀(du)細(xi)胞說明(ming)書(shu)，了解細胞相關(guan)信(xin)息，如(ru)細胞形(xing)態(tai)、所用培養(yang)基(ji)、血清比(bi)例、所(suo)需(xu) 細胞因(yin)子等(deng)，確保(bao)細(xi)胞培養(yang)條(tiao)件壹致，若由(you)於培養(yang)條(tiao)件不壹致而(er)導致細胞出(chu)現(xian)問(wen)題(ti)，責(ze)任(ren)由(you) 客戶(hu)自行承擔。

3. 用 75%酒(jiu)精擦拭細胞瓶(ping)表(biao)面(mian)，顯微鏡下(xia)觀察(cha)細胞狀(zhuang)態(tai)。因運輸問題，部分(fen)細(xi)胞由(you)於溫度(du) 變化及(ji)劇烈(lie)碰(peng)亡(wang)破(po)碎形成碎片，是正(zheng)常現(xian)象(xiang)。觀(guan)察好(hao)細胞狀(zhuang)態(tai)後，75%酒(jiu)精消毒(du)瓶(ping)壁(bi)將 T25 瓶置於 37℃培養(yang)箱放(fang)置 2-4h。

4. 貼壁(bi)細(xi)胞可(ke)以(yi)消(xiao)化，懸浮細胞直接混(hun)勻收集(ji)細(xi)胞，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄(qi)上 清。加 5 mL PBS 重懸細胞，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，用新鮮的(de)培養(yang)基(ji)重懸 細胞，並(bing)接種到(dao)新(xin)的(de)培養(yang)瓶(ping)或培養(yang)皿中(zhong)，置(zhi)於培養(yang)箱中(zhong)進行培養(yang)。

5. 請(qing)客戶(hu)用相同條件的培養(yang)基(ji)用於細胞培養(yang)。

6. 建(jian)議(yi)客戶(hu)收到(dao)細(xi)胞後前(qian) 3 天(tian)各(ge)拍(pai)幾(ji)張細(xi)胞照(zhao)片(pian)，記(ji)錄細胞狀(zhuang)態(tai)，便於和(he)我司(si)技(ji)術部溝(gou)通 交流(liu)。由(you)於運輸的原因，個別敏感細(xi)胞會(hui)出現(xian)不穩定(ding)的(de)情況(kuang)，請(qing)及(ji)時和(he)我們聯(lian)系(xi)，告(gao)知(zhi)細胞 的(de)具(ju)體(ti)情況(kuang)，以(yi)便(bian)我們的(de)技(ji)術人員跟蹤回(hui)訪(fang)直至(zhi)問題(ti)解決。

7. 該(gai)細胞僅供科研使(shi)用。

8. 備註(zhu)：運輸用的培養(yang)基(ji) (灌(guan)液培養(yang)基(ji)) 不能再(zai)用來培養(yang)細(xi)胞，請(qing)換(huan)用按照說明(ming)書(shu)細胞培 養(yang)條(tiao)件新配(pei)制的(de)培養(yang)基(ji)來培養(yang)細(xi)胞。     收到(dao)細(xi)胞後第壹(yi)次(ci)傳(chuan)代(dai)建議(yi) 1：2 傳(chuan)代(dai) 。

9. 註(zhu)意：  1:2 傳(chuan)代(dai)就是 1 個 T25 瓶傳(chuan) 2 個 T25 瓶或(huo)者 2 個 6cm 皿。不是 1 個 T25 瓶傳(chuan) 2 個10cm 皿。

公(gong)司(si)正(zheng)在(zai)出售的產(chan)品：

NCI-H23(人非小細(xi)胞肺(fei)癌細(xi)胞) 5×106cells/瓶(ping)×2 Pt K1 (NBL-3)(長(chang)鼻袋(dai)鼠(shu)腎細胞) 大(da)鼠性(xing)別(bie)決(jue)定(ding)區(qu)Y框(kuang)蛋(dan)白(bai)2(SOX2)ELISA試劑盒(he) PLAUR/uPAR (Rabbit Urokinase-type Plasminogen Activator Receptor)  兔型(xing)纖(xian)溶(rong)酶原(yuan)激(ji)活(huo)物(wu)受體 96T

Myosin VIIa： 肌球蛋(dan)白(bai)7a/常(chang)染色(se)體隱(yin)性耳(er)聾蛋(dan)白(bai)2抗(kang)體(ti) 兔源(yuan)細(xi)胞

IL11RA Protein Canine 重組狗(gou) IL11RA / IL-11RA / IL11Rα 蛋(dan)白(bai) (His 標(biao)簽(qian)) 大(da)鼠型(xing)乙(yi)酰受體(N-AChR)ELISA試劑盒(he) ACE I  大(da)鼠血管緊(jin)張(zhang)素(su)Ⅰ轉化酶 96T

MBC1： 膀胱癌(ai)突變蛋(dan)白(bai)1抗(kang)體(ti) ACOX1 Others Human 人 ACOX1 / aox 桿狀(zhuang)病(bing)毒(du)-昆(kun)蟲細(xi)胞裂解液 (陽性(xing)對照)

大(da)鼠視網膜色(se)素(su)上皮細胞培養(yang)基(ji) 100mL 大(da)鼠型(xing)乙(yi)酰受體(N-AChR)ELISA 試劑盒(he) uPA (Rabbit urokinase plasminogen activator)  兔型(xing)纖(xian)溶(rong)酶原(yuan)激(ji)活(huo)物(wu) 96T

大(da)耳(er)山羊(yang)肺(fei)細胞;LDG-1 人(ren)富含半(ban)胱酸(suan)蛋(dan)白(bai)61(Cyr61)ELISA試劑盒(he) sFRP-4(Secreted frizzled-related protein 4; Frizzled protein, human endometrium) 抗(kang)子宮內膜抗(kang)原(yuan) 0.5mg

HDHD1A： 鹵酸(suan)脫(tuo)鹵(lu)酶樣(yang)水解酶域(yu)內(nei)含蛋(dan)白(bai)1A抗(kang)體(ti) EB病(bing)毒(du)轉(zhuan)化的人(ren)B淋巴細(xi)胞(彜(yi)族(zu));HYL

LoVo(人大(da)腸癌(ai)細(xi)胞) 5×106cells/瓶(ping)×2 人(ren) EDNRB / Endothelin B Receptor 人(ren)細(xi)胞裂解液 (陽性(xing)對照) 人(ren)副腫瘤(liu)性(xing)天(tian)皰(pao)瘡抗體(ti)(PNP)ELISA 試劑盒(he) Endostatin 內(nei)皮抑素(su)/內皮他(ta)丁(ding)抗原 0.5mg

HECTD1： E3連接酶抑(yi)制素(su)受體抗(kang)體(ti) 纖維粘連蛋(dan)白(bai)-牛(niu)源BPF

CCL4 Protein Human 重組人(ren) CCL4 / MIP1B 蛋(dan)白(bai) (His 標(biao)簽(qian)) 人副甲(jia)狀(zhuang)旁腺(xian)激(ji)素(su)相關(guan)肽(PTHrp)ELISA 試劑盒(he) E.coli O6 (Escherichia coli O6) E.coli O6大(da)腸桿(gan)菌(jun)菌(jun)體蛋(dan)白(bai) 0.5mg

HK-2人腎皮質(zhi)近曲小管上皮細胞95-D人高(gao)轉(zhuan)移(yi)肺(fei)癌細(xi)胞 Human high metastatic lung cancer cell line 95-D RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS 大(da)鼠分(fen)泌型免疫(yi)球蛋(dan)白(bai)A(sIgA)ELISA 試劑盒(he) Free-T3  大(da)鼠遊離狀(zhuang)腺原(yuan)酸(suan) 96T

PTPRN： 蛋(dan)白(bai)酪酸(suan)0酸(suan)酶樣(yang)N前(qian)體蛋(dan)白(bai)抗(kang)體(ti) KLK13 Others Human 人 KLK13 / Kallikrein-13 人細胞裂解液 (陽性(xing)對照)

人癌(ai)細(xi)胞;SK-BR-3 大(da)鼠分(fen)泌型0脂(zhi)酶A2(sPLA2)ELISA試劑盒(he) HCV-IgG(Human Hepatitis C virus IgG)  人(ren)丙(bing)型肝炎IgG 96T

PSMD12： 26S蛋(dan)白(bai)酶調(tiao)節亞(ya)型(xing)p55抗體(ti) 黃(huang)牛(niu)皮膚細(xi)胞;BTA-S2

293來源(yuan)病(bing)毒(du)包(bao)裝(zhuang)細(xi)胞;ΦA-GP 人(ren)成纖(xian)維細胞培養(yang)基(ji) 100mL 大(da)鼠分(fen)泌型卷曲相關(guan)蛋(dan)白(bai)5(SFRP5)ELISA試劑盒(he) NN-T4  大(da)鼠新(xin)生(sheng)甲(jia)狀(zhuang)腺素(su) 96T