huh-7人肝(gan)癌細(xi)胞(bao)

公司產品(pin)僅(jin)供(gong)科(ke)研(yan)研(yan)究使用(yong)、不得(de)用(yong)於(yu)臨床診(zhen)斷！

二(er)、細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)操(cao)作(zuo)

1) 復蘇(su)細(xi)胞(bao)：以(yi)下(xia)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)凍存(cun)處理僅(jin)供(gong)參(can)考(kao)，具(ju)體操(cao)作(zuo)步驟以隨(sui)貨產(chan)品(pin)說(shuo)明(ming)書(shu)為主(zhu)。將含(han)有(you)1 mL細(xi)胞(bao)懸(xuan)液的(de)凍(dong)存(cun)管(guan)在 37℃水浴(yu)中(zhong)迅(xun)速搖(yao)晃(huang)解(jie)凍，加(jia)4 mL培(pei)養(yang)基(ji)混(hun)合均勻(yun)。在(zai)1000 rpm條(tiao)件(jian)下(xia)離(li)心(xin)3 min，棄去(qu)上清(qing)液，加(jia)1-2 mL培(pei)養(yang)基(ji)後(hou)吹(chui)勻(yun)。然(ran)後(hou)將所有(you)細(xi)胞(bao)懸(xuan)液加(jia)入含(han)適(shi)量培(pei)養(yang)基(ji)的(de)培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)培(pei)養(yang)過夜(ye)（或(huo)將細(xi)胞(bao)懸(xuan)液加(jia)入10 cm皿中(zhong)，加(jia)入約(yue)8 mL培(pei)養(yang)基(ji)，培(pei)養(yang)過夜(ye)）。第(di)二(er)天換液並檢查細(xi)胞(bao)密(mi)度(du)。

2) 細(xi)胞(bao)傳(chuan)代：如(ru)果細(xi)胞(bao)密(mi)度(du)達(da) 80%-90%，即(ji)可進行(xing)傳代培(pei)養(yang)。

    a、棄去(qu)培(pei)養(yang)上清(qing)，用(yong)不含(han)鈣、鎂(mei)離(li)子的(de)PBS潤(run)洗細(xi)胞(bao)1-2次。        

    b、加(jia)1 mL消化(hua)液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)，使消化(hua)液浸(jin)潤(run)所有(you)細(xi)胞(bao)，將培(pei)養(yang)瓶(ping)置於(yu)37℃培(pei)養(yang)箱中(zhong)消化(hua)1-2 min（視(shi)細(xi)胞(bao)情況(kuang)而(er)定(ding)），然後(hou)在顯(xian)微鏡下觀(guan)察細(xi)胞(bao)消化(hua)情況(kuang)，若細(xi)胞(bao)大部分變圓並脫(tuo)落(luo)，迅速拿回(hui)操(cao)作(zuo)臺(tai)，輕(qing)敲(qiao)幾(ji)下培(pei)養(yang)瓶(ping)後加(jia)2-3ml培(pei)養(yang)基(ji)終(zhong)止消化(hua)。輕(qing)輕(qing)打勻(yun)後(hou)裝入無(wu)菌離(li)心(xin)管(guan)中(zhong)，1000 rpm離(li)心(xin)5 min，棄去(qu)上清(qing)液，補(bu)加(jia)1-2 mL培(pei)養(yang)液後(hou)吹(chui)勻(yun)。        

     c、將細(xi)胞(bao)懸(xuan)液按(an)1:2比例(li)分(fen)到新的(de)含(han)8 mL培(pei)養(yang)基(ji)的(de)新皿中(zhong)或(huo)者(zhe)瓶(ping)中(zhong)，置(zhi)於培(pei)養(yang)箱中(zhong)培(pei)養(yang)。 3) 細(xi)胞(bao)凍(dong)存(cun)：待(dai)細(xi)胞(bao)生長狀(zhuang)態(tai)良(liang)好(hao)時，可(ke)進行(xing)細(xi)胞(bao)凍(dong)存(cun)。下(xia)面(mian) T25 瓶(ping)為例(li)；a、收(shou)集細(xi)胞(bao)及(ji)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)液，裝入無(wu)菌離(li)心(xin)管(guan)中(zhong)，1000 rpm條(tiao)件(jian)下(xia)離(li)心(xin)4 min，棄去(qu)上清(qing)液，用(yong)PBS清(qing)洗壹遍(bian)，棄盡PBS，進行(xing)細(xi)胞(bao)計(ji)數。

     b、根據(ju)細(xi)胞(bao)數量加(jia)入無(wu)血清(qing)細(xi)胞(bao)凍(dong)存(cun)液，使細(xi)胞(bao)密(mi)度(du)5×106~1×107/mL，輕(qing)輕(qing)混(hun)勻(yun)，每(mei)支凍存(cun)管(guan)凍存1mL細(xi)胞(bao)懸(xuan)液，註(zhu)意凍(dong)存管(guan)做好(hao)標(biao)識(shi)。將凍存管(guan)放入-80℃冰箱，24 h後(hou)轉(zhuan)入液氮(dan)灌儲存(cun)。記錄(lu)凍(dong)存(cun)管(guan)位置以(yi)便下次拿取(qu)。  

三、培(pei)養(yang)註意(yi)事項 

1. 收(shou)到細(xi)胞(bao)後(hou)首(shou)先(xian)觀(guan)察細(xi)胞(bao)瓶(ping)是否(fou)完(wan)好(hao)，培(pei)養(yang)液是(shi)否有(you)漏(lou)液、渾(hun)濁等(deng)現象，若有(you)上述現象 發(fa)生請(qing)及(ji)時和我們聯系。

2. 仔(zai)細(xi)閱(yue)讀(du)細(xi)胞(bao)說(shuo)明(ming)書(shu)，了解(jie)細(xi)胞(bao)相(xiang)關(guan)信(xin)息(xi)，如(ru)細(xi)胞(bao)形(xing)態(tai)、所用(yong)培(pei)養(yang)基(ji)、血(xue)清(qing)比例(li)、所需(xu) 細(xi)胞(bao)因(yin)子等(deng)，確保(bao)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)條件(jian)壹(yi)致，若由於培(pei)養(yang)條件(jian)不壹(yi)致而導致細(xi)胞(bao)出現問(wen)題，責(ze)任由 客(ke)戶自行(xing)承(cheng)擔。

3. 用(yong) 75%酒(jiu)精擦(ca)拭細(xi)胞(bao)瓶(ping)表(biao)面，顯(xian)微鏡下觀(guan)察細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態(tai)。因(yin)運(yun)輸問(wen)題，部分細(xi)胞(bao)由於溫(wen)度(du) 變(bian)化(hua)及劇烈碰(peng)亡(wang)破碎(sui)形成碎片(pian)，是正(zheng)常現象。觀(guan)察好(hao)細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態(tai)後(hou)，75%酒(jiu)精消毒瓶(ping)壁將 T25 瓶(ping)置於(yu) 37℃培(pei)養(yang)箱放(fang)置(zhi) 2-4h。

4. 貼(tie)壁細(xi)胞(bao)可(ke)以(yi)消化(hua)，懸(xuan)浮(fu)細(xi)胞(bao)直接(jie)混(hun)勻(yun)收(shou)集細(xi)胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，棄上 清(qing)。加(jia) 5 mL PBS 重(zhong)懸(xuan)細(xi)胞(bao)，再 900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，用(yong)新鮮的(de)培(pei)養(yang)基(ji)重(zhong)懸(xuan) 細(xi)胞(bao)，並接(jie)種(zhong)到新的(de)培(pei)養(yang)瓶(ping)或(huo)培(pei)養(yang)皿中(zhong)，置(zhi)於培(pei)養(yang)箱中(zhong)進行(xing)培(pei)養(yang)。

5. 請客(ke)戶用(yong)相(xiang)同(tong)條(tiao)件(jian)的(de)培(pei)養(yang)基(ji)用(yong)於(yu)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)。

6. 建議(yi)客(ke)戶收(shou)到細(xi)胞(bao)後(hou)前 3 天各拍(pai)幾(ji)張(zhang)細(xi)胞(bao)照片(pian)，記錄(lu)細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態(tai)，便於和我司技(ji)術(shu)部溝(gou)通 交流(liu)。由於運(yun)輸的(de)原(yuan)因(yin)，個別敏感(gan)細(xi)胞(bao)會(hui)出現不穩(wen)定(ding)的(de)情況(kuang)，請(qing)及(ji)時和我們聯系，告(gao)知(zhi)細(xi)胞(bao) 的(de)具(ju)體情況(kuang)，以(yi)便我們的(de)技(ji)術(shu)人員跟蹤回(hui)訪直至(zhi)問(wen)題解(jie)決(jue)。

7. 該(gai)細(xi)胞(bao)僅(jin)供(gong)科(ke)研(yan)使用(yong)。

8. 備註：運(yun)輸用(yong)的(de)培(pei)養(yang)基(ji) (灌液培(pei)養(yang)基(ji)) 不能(neng)再用(yong)來培(pei)養(yang)細(xi)胞(bao)，請(qing)換用(yong)按(an)照說(shuo)明(ming)書(shu)細(xi)胞(bao)培(pei) 養(yang)條件(jian)新配制(zhi)的(de)培(pei)養(yang)基(ji)來培(pei)養(yang)細(xi)胞(bao)。     收(shou)到細(xi)胞(bao)後(hou)次傳(chuan)代建(jian)議(yi) 1：2 傳代 。

9. 註(zhu)意(yi)：  1:2 傳代就是(shi) 1 個 T25 瓶(ping)傳 2 個 T25 瓶(ping)或(huo)者(zhe) 2 個 6cm 皿。不是(shi) 1 個 T25 瓶(ping)傳 2 個10cm 皿。

公司正(zheng)在出售的(de)產(chan)品(pin)：

小鼠(shu)氣管(guan)上皮細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)基(ji) 100mL 大鼠(shu)纖(xian)溶(rong)酶抗(kang)纖(xian)溶(rong)酶復合(he)物(wu)(PAP)ELISA 試(shi)劑(ji)盒 BMPR- II (Mouse Bone morphogenetic protein receptor II )  小鼠(shu)骨(gu)成型(xing)蛋(dan)白(bai)受體Ⅱ 96T

MSH2： 錯(cuo)配修(xiu)復蛋(dan)白(bai)2抗(kang)體 BEL-7402細(xi)胞(bao)，肝(gan)癌細(xi)胞(bao) 人口(kou)腔(qiang)表(biao)皮樣癌細(xi)胞(bao),KB細(xi)胞(bao) 小鼠(shu)誘(you)導性(xing)多(duo)潛(qian)能幹細(xi)胞(bao);PUMC-mips-A2

EFNB2 Others Rat 大鼠(shu) Ephrin-B2 / EFNB2 人細(xi)胞(bao)裂解(jie)液 (陽(yang)性(xing)對(dui)照) 大鼠(shu)纖(xian)溶(rong)酶/纖(xian)維(wei)蛋(dan)白(bai)溶酶(PL/Fbn)ELISA 試(shi)劑(ji)盒 CaN  大鼠(shu)鈣調0酸(suan)酶(mei) 96T

5 MethylCytosine： 5甲基(ji)胞(bao)嘧啶(ding)抗(kang)體 人脊(ji)髓(sui)星形(xing)膠質細(xi)胞(bao)總(zong)RNAHA-sp NA

NIH/3T3小鼠(shu)胚胎(tai)細(xi)胞(bao) NIH/3T3 mouse embryo cells DMEM+10%NBCS(小牛(niu)血(xue)清(qing)) 大鼠(shu)纖(xian)連(lian)蛋(dan)白(bai)(FN)ELISA試(shi)劑(ji)盒 IFN- Alpha(Human Interferon Alpha)  人α幹擾(rao)素 96T

CXCL16 Protein Canine 重(zhong)組(zu)狗(gou) CXCL16 / SR-PSOX 蛋(dan)白(bai) (Fc 標(biao)簽(qian)) 人登革熱(re)抗(kang)體(DF-Ab)ELISA 試(shi)劑(ji)盒 H1N1(Influenza A virus ,hemagglutinin) 流(liu)感病毒A抗(kang)原(yuan) 0.5mg

HIP1： 亨(heng)廷(ting)頓(舞(wu)蹈癥(zheng))相(xiang)互(hu)作用(yong)蛋(dan)白(bai)1抗(kang)體 PDK4 Others Mouse 小鼠(shu) PDK4 桿狀病(bing)毒-昆蟲細(xi)胞(bao)裂解(jie)液 (陽(yang)性(xing)對(dui)照)

人外(wai)周血(xue)白(bai)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)基(ji) 100mL 人的(de)幽(you)門(men)螺(luo)桿菌IgG(HP IgG)ELISA試(shi)劑(ji)盒 H2AX peptide 組(zu)蛋(dan)白(bai)H2AX多(duo)肽(tai)抗(kang)原(yuan) 0.5mg

HAO1： 葡萄糖氧(yang)化(hua)酶1抗(kang)體 大額(e)牛(niu)與(yu)婆羅門牛(niu)雜(za)交F1代皮膚(fu)成纖(xian)維(wei)樣細(xi)胞(bao);BOS-6 羊膜(mo)細(xi)胞(bao)，WISH細(xi)胞(bao) 786-O [786-0](腎(shen)透明(ming)細(xi)胞(bao)腺(xian)癌細(xi)胞(bao))

CD83 Others Rat 大鼠(shu) CD83 人細(xi)胞(bao)裂解(jie)液 (陽(yang)性(xing)對(dui)照) 人的(de)神經生長因(yin)子(NGF)ELISA 試(shi)劑(ji)盒 H1N1(Influenza A virus ,hemagglutinin) 流(liu)感病毒A抗(kang)原(yuan) 0.5mg

huh-7人肝(gan)癌細(xi)胞(bao)PROSAAS： 枯(ku)草(cao)溶菌(jun)素轉(zhuan)化(hua)酶1抑(yi)制(zhi)劑(ji)抗(kang)體 CGREF1 Others Human 人 CGREF1 人細(xi)胞(bao)裂解(jie)液 (陽(yang)性(xing)對(dui)照)

NCI-H157 人非小細(xi)胞(bao)肺腺癌細(xi)胞(bao) 大鼠(shu)頂體蛋(dan)白(bai)(ACR)ELISA試(shi)劑(ji)盒 16- Alpha OHE-1(Human 16- AlphaHydroxyestrogen 1)  人16α羥基(ji)雌(ci)酮1 96T

PROSAAS： 枯(ku)草(cao)溶菌(jun)素轉(zhuan)化(hua)酶1抑(yi)制(zhi)劑(ji)抗(kang)體 MCF7細(xi)胞(bao)，人癌細(xi)胞(bao) 人導管(guan)癌細(xi)胞(bao),HCC38細(xi)胞(bao) 髓(sui)核細(xi)胞(bao)生長添加(jia)物(wu)NPCGS

KIR2DL3 Others Human 人 KIR2DL3 / CD158B2 / NKAT-2 人細(xi)胞(bao)裂解(jie)液 (陽(yang)性(xing)對(dui)照) 大鼠(shu)丁酰(xian)酯(zhi)酶(BCHE)ELISA試(shi)劑(ji)盒 CNTF  大鼠(shu)睫狀神經營養(yang)因(yin)子 96T

PPP2R5C： 蛋(dan)白(bai)質0酸(suan)酶(mei)2調節亞(ya)基(ji)5C/PP2A-B56-γ抗(kang)體 非洲綠猴(hou)腎細(xi)胞(bao)系(xi)/HCV-E2;Vero-HCV-E2