HUTU-80人十(shi)二脂腸腺(xian)癌(ai)

公(gong)司(si)產(chan)品僅供科研(yan)研(yan)究使用(yong)、不得用(yong)於臨(lin)床(chuang)診(zhen)斷(duan)！

二(er)、細胞培(pei)養(yang)操作

1) 復蘇(su)細胞：以下細胞培(pei)養(yang)凍存處理(li)僅供參考(kao)，具體(ti)操作(zuo)步(bu)驟(zhou)以隨(sui)貨產品說明書(shu)為主。將(jiang)含有(you)1 mL細胞懸(xuan)液(ye)的(de)凍(dong)存管(guan)在(zai) 37℃水(shui)浴中(zhong)迅(xun)速(su)搖晃(huang)解(jie)凍(dong)，加4 mL培(pei)養(yang)基(ji)混合(he)均(jun)勻(yun)。在(zai)1000 rpm條(tiao)件(jian)下離(li)心(xin)3 min，棄(qi)去(qu)上清(qing)液(ye)，加1-2 mL培(pei)養(yang)基(ji)後吹勻(yun)。然(ran)後將(jiang)所有(you)細胞懸(xuan)液(ye)加入(ru)含適(shi)量培(pei)養(yang)基(ji)的(de)培(pei)養(yang)瓶中培(pei)養(yang)過夜（或(huo)將(jiang)細胞懸(xuan)液(ye)加入(ru)10 cm皿(min)中，加入(ru)約8 mL培(pei)養(yang)基(ji)，培(pei)養(yang)過夜）。第(di)二天(tian)換(huan)液(ye)並(bing)檢查細胞密(mi)度。

2) 細胞傳代(dai)：如(ru)果細胞密(mi)度達(da) 80%-90%，即可進(jin)行(xing)傳代(dai)培(pei)養(yang)。

    a、棄(qi)去(qu)培(pei)養(yang)上清(qing)，用(yong)不含鈣、鎂(mei)離(li)子的(de)PBS潤洗細胞1-2次。        

    b、加1 mL消(xiao)化(hua)液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培(pei)養(yang)瓶中，使消(xiao)化(hua)液(ye)浸潤所有(you)細胞，將(jiang)培(pei)養(yang)瓶置(zhi)於37℃培(pei)養(yang)箱(xiang)中消(xiao)化(hua)1-2 min（視(shi)細胞情(qing)況(kuang)而(er)定(ding)），然(ran)後在(zai)顯(xian)微鏡(jing)下觀察細胞消(xiao)化(hua)情(qing)況(kuang)，若細胞大(da)部分(fen)變(bian)圓並(bing)脫(tuo)落，迅(xun)速(su)拿(na)回(hui)操(cao)作(zuo)臺，輕(qing)敲(qiao)幾下培(pei)養(yang)瓶後加2-3ml培(pei)養(yang)基(ji)終止消(xiao)化(hua)。輕(qing)輕(qing)打勻(yun)後裝入(ru)無菌(jun)離(li)心(xin)管(guan)中(zhong)，1000 rpm離(li)心(xin)5 min，棄(qi)去(qu)上清(qing)液(ye)，補加1-2 mL培(pei)養(yang)液後吹勻(yun)。        

     c、將(jiang)細胞懸(xuan)液(ye)按1:2比(bi)例(li)分(fen)到(dao)新(xin)的(de)含8 mL培(pei)養(yang)基(ji)的(de)新(xin)皿(min)中或者瓶中，置(zhi)於培(pei)養(yang)箱(xiang)中培(pei)養(yang)。 3) 細胞凍(dong)存(cun)：待(dai)細胞生(sheng)長狀態(tai)良(liang)好時，可進(jin)行(xing)細胞凍(dong)存(cun)。下面 T25 瓶為例(li)；a、收集細胞及(ji)細胞培(pei)養(yang)液，裝入(ru)無菌(jun)離(li)心(xin)管(guan)中(zhong)，1000 rpm條(tiao)件(jian)下離(li)心(xin)4 min，棄(qi)去(qu)上清(qing)液(ye)，用(yong)PBS清(qing)洗(xi)壹(yi)遍(bian)，棄(qi)盡PBS，進(jin)行(xing)細胞計數。

     b、根據細胞數(shu)量加入(ru)無血(xue)清(qing)細胞凍(dong)存(cun)液，使細胞密(mi)度5×106~1×107/mL，輕(qing)輕(qing)混勻(yun)，每支(zhi)凍存(cun)管(guan)凍(dong)存(cun)1mL細胞懸(xuan)液(ye)，註意凍(dong)存管(guan)做好(hao)標(biao)識(shi)。將(jiang)凍存(cun)管(guan)放(fang)入(ru)-80℃冰箱(xiang)，24 h後轉入(ru)液氮(dan)灌儲(chu)存。記(ji)錄凍存管(guan)位(wei)置(zhi)以便下次拿(na)取。  

三(san)、培(pei)養(yang)註意事(shi)項 

1. 收到細胞後首先觀察細胞瓶是(shi)否完好(hao)，培(pei)養(yang)液是(shi)否有(you)漏液、渾濁等現象，若(ruo)有(you)上述(shu)現象(xiang) 發(fa)生(sheng)請及時和我們(men)聯系。

2. 仔(zai)細閱(yue)讀(du)細胞說明書(shu)，了(le)解(jie)細胞相關信息，如(ru)細胞形(xing)態(tai)、所用(yong)培(pei)養(yang)基(ji)、血(xue)清(qing)比(bi)例(li)、所需(xu) 細胞因(yin)子(zi)等，確保細胞培(pei)養(yang)條(tiao)件(jian)壹致(zhi)，若由於培(pei)養(yang)條(tiao)件(jian)不壹致(zhi)而(er)導致(zhi)細胞出(chu)現(xian)問(wen)題，責(ze)任(ren)由 客(ke)戶自(zi)行(xing)承擔(dan)。

3. 用(yong) 75%酒(jiu)精擦拭細胞瓶表面，顯微(wei)鏡下觀察細胞狀態(tai)。因(yin)運輸問(wen)題，部分(fen)細胞由(you)於(yu)溫度 變(bian)化及劇(ju)烈(lie)碰(peng)亡破碎形成碎片(pian)，是(shi)正常現(xian)象(xiang)。觀察好細胞狀態(tai)後，75%酒(jiu)精消(xiao)毒(du)瓶壁將(jiang) T25 瓶置(zhi)於 37℃培(pei)養(yang)箱(xiang)放置(zhi) 2-4h。

4. 貼(tie)壁細胞可(ke)以消(xiao)化(hua)，懸(xuan)浮細胞直(zhi)接(jie)混勻(yun)收集細胞，900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，棄(qi)上 清(qing)。加 5 mL PBS 重(zhong)懸細胞，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，用(yong)新(xin)鮮的(de)培(pei)養(yang)基(ji)重(zhong)懸 細胞，並(bing)接種到新(xin)的(de)培(pei)養(yang)瓶或培(pei)養(yang)皿(min)中，置(zhi)於培(pei)養(yang)箱(xiang)中進(jin)行(xing)培(pei)養(yang)。

5. 請客戶(hu)用(yong)相同條(tiao)件(jian)的(de)培(pei)養(yang)基(ji)用(yong)於細胞培(pei)養(yang)。

6. 建(jian)議客戶(hu)收到細胞後前 3 天(tian)各(ge)拍(pai)幾張細胞照(zhao)片(pian)，記(ji)錄細胞狀態(tai)，便於(yu)和我司(si)技(ji)術(shu)部溝通(tong) 交流。由(you)於(yu)運輸的(de)原(yuan)因(yin)，個(ge)別(bie)敏(min)感細胞會(hui)出(chu)現(xian)不穩定(ding)的(de)情(qing)況(kuang)，請及時和我們(men)聯系，告(gao)知(zhi)細胞 的(de)具(ju)體(ti)情(qing)況(kuang)，以便我們(men)的(de)技(ji)術(shu)人員(yuan)跟蹤(zong)回(hui)訪(fang)直(zhi)至(zhi)問(wen)題解(jie)決(jue)。

7. 該(gai)細胞僅供科研(yan)使用(yong)。

8. 備註(zhu)：運(yun)輸用(yong)的(de)培(pei)養(yang)基(ji) (灌液培(pei)養(yang)基(ji)) 不能(neng)再(zai)用(yong)來(lai)培(pei)養(yang)細胞，請換用(yong)按照(zhao)說明書(shu)細胞培(pei) 養(yang)條(tiao)件(jian)新(xin)配(pei)制的(de)培(pei)養(yang)基(ji)來(lai)培(pei)養(yang)細胞。     收到細胞後次傳代(dai)建(jian)議 1：2 傳代(dai) 。

9. 註(zhu)意(yi)：  1:2 傳代(dai)就(jiu)是(shi) 1 個(ge) T25 瓶傳 2 個(ge) T25 瓶或者 2 個 6cm 皿(min)。不是(shi) 1 個(ge) T25 瓶傳 2 個(ge)10cm 皿(min)。

公(gong)司(si)正在(zai)出(chu)售(shou)的(de)產(chan)品：

(C1F3)： 單(dan)克隆抗體(ti) 大鼠(shu)肝癌(ai)細胞;RH-35

IL36G Protein Human 重(zhong)組人 IL36G / IL1F9 蛋(dan)白(bai) 大鼠(shu)細胞周(zhou)期(qi)1(Cyclin-D1)ELISA 試劑盒 AIF  大(da)鼠(shu)雕(diao)亡誘導因(yin)子(zi) 96T

(2F11)： 單(dan)克隆抗體(ti) KYNU Others Mouse 小鼠(shu) KYNU / Kynureninase 桿狀病(bing)毒(du)-昆蟲細胞裂(lie)解(jie)液(ye) (陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao))

小鼠(shu)肺成纖維(wei)細胞培(pei)養(yang)基(ji) 100mL 大鼠(shu)細胞周(zhou)期(qi)1(CCND1)ELISA試劑盒 IL-23(Human Interleukin 23)  人(ren)白(bai)介素23 96T

MAS1： GTP結(jie)合(he)蛋(dan)白(bai)MAS1抗體(ti) SPC-A-1細胞，肺(fei)腺(xian)癌(ai)細胞 人(ren)口(kou)腔(qiang)癌(ai)細胞,HB細胞 tTA基(ji)因修飾(shi)的(de)小鼠(shu)畸胎瘤細胞(B類(lei));P19-CAG-tTA-1D3

大(da)鼠(shu)腎(shen)上腺(xian)嗜鉻(ge)細胞瘤(liu)細胞;PC-12 [PC12] 人(ren)蛋(dan)酸(suan)酶(PP)ELISA 試劑盒 URGCP/URG4(Up-regulator of cell proliferation) 乙(yi)型肝炎(yan)病(bing)毒(du)X蛋白(bai)(HBxAg)抗原(yuan) 0.5mg

HSP10： 熱(re)休克(ke)蛋(dan)白(bai)10抗體(ti) EB病毒(du)轉化的(de)人(ren)B淋巴細胞;KMY0905

MLTC-1(小鼠(shu)間質細胞瘤(liu)細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠(shu) FGFR2 / CD332 人細胞裂(lie)解(jie)液(ye) (陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao)) 人蛋(dan)白(bai)酪酸(suan)0酸(suan)酶抗(kang)體(ti)/胰島細胞抗(kang)原(yuan)2抗(kang)體(ti)(IA-2)ELISA 試劑盒 URGCP/URG4(Up-regulator of cell proliferation)C terminal 肝炎(yan)病(bing)毒(du)X蛋白(bai)(HBxAg)C端(duan)抗原(yuan) 0.5mg

HMPH： 同(tong)源盒蛋(dan)白(bai)PRH抗體(ti) 周(zhou)邊細胞培(pei)養(yang)基(ji)PM-prf

CCL23 Protein Human 重(zhong)組人 CCL23 / MIP 3 蛋(dan)白(bai) (His 標(biao)簽(qian)) 人(ren)蛋(dan)白(bai)酪酸(suan)0酸(suan)酶(PTP/PTPase/CD148)ELISA 試劑盒 Alpha-HCG(Human chorionic gonadotropin Alpha ) 人(ren)α亞(ya)基(ji)人絨毛(mao)膜多(duo)肽(tai)抗(kang)原(yuan) 0.5mg

HUTU-80人(ren)十(shi)二脂腸腺(xian)癌(ai)PIST： PDZ結(jie)構域(yu)蛋(dan)白(bai)GOPC抗體(ti) 水牛皮(pi)膚成纖維(wei)樣(yang)細胞;WB-S5

人(ren)浸潤性導管(guan)癌(ai)旁皮(pi)膚細胞;CCD-1095Sk 人(ren)成纖維(wei)細胞培(pei)養(yang)基(ji) 100mL 大鼠(shu)雕(diao)亡相關因子(FAS/CD95)ELISA 試劑盒 HFABP  rat (Heartfattyacid -bindingprotein) 大(da)鼠(shu)心(xin)臟脂肪酸(suan)結(jie)合(he)蛋(dan)白(bai) 96T

PAX6： 轉錄因子(zi)Pax6抗(kang)體(ti) 小腸平(ping)滑(hua)肌細胞Many types of cells包(bao)裝(zhuang)：5 × 105次方(1ml)

DKK1 Protein Human 重(zhong)組人 DKK1 / Dkk-1 蛋(dan)白(bai) (His 標(biao)簽(qian)) 大(da)鼠(shu)雕(diao)亡相關因子(FAS)ELISA試劑盒 CCK-8(Rat cholecystokinin octapeptide)  大(da)鼠(shu)膽囊收縮素/縮膽囊素八肽 96T

PLAGL1： 多(duo)型性腺(xian)瘤(liu)基(ji)因樣蛋(dan)白(bai)1抗體(ti) AFM Others Human 人 AFM / Afamin 人(ren)細胞裂(lie)解(jie)液(ye) (陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao))