防(fang)風(feng)染(ran)料法(fa)PCR鑒(jian)定試(shi)劑(ji)盒(he)直(zhi)銷(xiao)

實驗流程(cheng)：
1. 整個(ge)檢測過(guo)程應嚴格按照(zhao)本說(shuo)明(ming)書(shu)要(yao)求(qiu)分(fen)別(bie)在(zai)試(shi)劑(ji)準(zhun)備區、樣本處(chu)理區和PCR擴(kuo)增區進行(xing)操(cao)作(zuo)，各區實驗服、儀(yi)器 、耗(hao)材應獨(du)立(li)使(shi)用，不能混(hun)用；實驗用吸頭(tou)采(cai)用帶濾(lv)芯吸頭(tou)；樣本處(chu)理區應配(pei)有(you)生(sheng)物安(an)全(quan)櫃(gui)，樣本處(chu)理在(zai)生(sheng)物安(an)全(quan)櫃(gui)中進(jin)行(xing)操(cao)作(zuo)；三(san)個(ge)區應該(gai)配(pei)有(you)紫(zi)外線殺(sha)菌裝置(zhi)。
2. 為避免(mian)RNA降解(jie)，樣本處(chu)理過(guo)程應在(zai)0-4℃條件(jian)下(xia)操(cao)作(zuo)，且(qie)完成實驗後(hou)立(li)即(ji)上(shang)機檢測；樣本處(chu)理過(guo)程中(zhong)使(shi)用的器具(ju)耗(hao)材應經過(guo)無核酶(mei)處(chu)理。
3. 每次實驗應該(gai)設(she)置(zhi)陰(yin)、陽性對照(zhao)。
4. 試劑(ji)盒(he)所有(you)試(shi)劑(ji)在(zai)使(shi)用前應該(gai)在(zai)常溫(wen)下充分(fen)融化混(hun)勻(yun)，並(bing)應瞬時離心。
5. 試劑(ji)盒(he)內所(suo)配(pei)陰(yin)性和陽性對照(zhao)在(zai)壹(yi)次使(shi)用前應全(quan)部(bu)轉移至(zhi)標本(ben)準(zhun)備區，並單(dan)獨存放(fang)。
6. 為防(fang)止(zhi)熒(ying)光幹擾，應避(bi)免裸手(shou)直(zhi)接(jie)接(jie)觸PCR反應管(guan)，並(bing)應避(bi)免在(zai)PCR反應管(guan)上(shang)進行(xing)任(ren)何(he)標記(ji)。
7. 儀(yi)器 擴(kuo)增相(xiang)關參數應按(an)照本說(shuo)明(ming)書(shu)相(xiang)關(guan)要求(qiu)進行(xing)設(she)置(zhi)；不同批號試劑(ji)不能混(hun)用。
8. ABI系列熒(ying)光定量(liang)PCR儀(yi)參數設(she)置(zhi)中(zhong)不選(xuan)ROX校正(zheng)，淬滅基(ji)因(yin)選(xuan)擇None。
9. 實驗過(guo)程中(zhong)產品的廢棄(qi)物應該(gai)進行(xing)無(wu)害化(hua)處(chu)理後方(fang)可(ke)丟棄(qi)。

特點：
1. 即開(kai)即(ji)用，用戶只(zhi)需(xu)要(yao)提(ti)供(gong)病毒(du)樣品。
2. 根(gen)據(ju)地(di)黃(huang)保(bao)守序列設(she)計的專壹(yi)性引物，與相關(guan)病毒(du)無(wu)交叉反(fan)應。
3. 靈敏(min)度可以達到(dao)幾百(bai)拷(kao)貝/反應。
4. 壹管(guan)式(shi)熒(ying)光定量(liang) PCR 檢測，避免(mian)後(hou)續(xu)汙染(ran)。
5. 本試(shi)劑(ji)盒(he)足夠 50 次 20μL 反應體系的熒(ying)光定量(liang) PCR。
6. 本產(chan)品只(zhi)適(shi)用於科研(yan)，不能用於臨床診(zhen)斷(duan)。
使(shi)用方法(fa)：
壹、樣品采(cai)集：
1、食品樣品：樣品的采(cai)集與預培養按照(zhao)樣品的采(cai)集與預培養按照(zhao)《食品衛(wei)生(sheng)微生物學檢驗阪(ban)崎腸(chang)桿(gan)菌檢驗要(yao)求(qiu)進(jin)行(xing)。
2、血(xue)液(ye)樣品：用無菌註(zhu)射(she)器(qi)抽(chou)取受檢者靜(jing)脈(mai)血(xue)2mL，註(zhu)入(ru)無菌EDTA2Na(或檸檬(meng)酸(suan)鈉(na))抗凝管(guan)，立(li)即(ji)混(hun)勻(yun)。
3、糞便(bian)樣品：取糞便(bian)置(zhi)於滅(mie)菌的收集(ji)管(guan)中(zhong)送檢。
4、病竈部(bu)位樣品：取發病部(bu)位新鮮滲(shen)出(chu)物、粘(zhan)液膿(nong)血(xue)送檢。
壹、稀釋(shi) PCR 陽性對照(zhao)（以(yi) 10E2-10E7 拷(kao)貝/μL 這 6 個(ge) 10 倍稀釋(shi)度為例(li)）
1. 註(zhu)意(yi)：由於標準(zhun)品濃(nong)度非(fei)常高(gao)，因(yin)此(ci)下列(lie)稀釋(shi)操(cao)作(zuo)壹(yi)定要(yao)在(zai)獨(du)立(li)的區域進行(xing)，千(qian)萬(wan)不能汙(wu)染樣品或(huo)本(ben)試(shi)劑(ji)盒(he)的其(qi)他成分(fen)）。為增加(jia)產品穩(wen)定性和避(bi)免擴(kuo)散(san)傳染(ran)性病原(yuan)，本(ben)產(chan)品不提供(gong)活(huo)體樣品做陽性對照(zhao)，只(zhi)提(ti)供(gong)可(ke)以(yi)直(zhi)接(jie)使(shi)用的 DNA段作(zuo)為陽性對照(zhao)。
2. 標記(ji) 6 個(ge)離心管(guan)，分(fen)別(bie)為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍(qiang)頭(tou)分(fen)別(bie)加入(ru) 45 μL 熒(ying)光 PCR 模(mo)板(ban)稀釋(shi)液(ye)（用帶芯槍(qiang)頭(tou)，下同）。
4. 在(zai) 7 號管(guan)中(zhong)加(jia)入(ru) 5 μL 1×10E8 拷(kao)貝/μL 的陽性對照(zhao)，充分(fen)震(zhen)蕩 1 分(fen)鐘(zhong)，得(de)1×10E7 拷(kao)貝/μL 的陽性對照(zhao)。放(fang)冰上(shang)待用。
5. 換槍(qiang)頭(tou)，在(zai) 6 號管(guan)中(zhong)加(jia)入(ru) 5 μL 1×10E7 拷(kao)貝/μL 的陽性對照(zhao)(上(shang)步稀釋(shi)所(suo)得(de))，充分(fen)震(zhen)蕩 1 分(fen)鐘(zhong)，得(de) 1×10E6 拷(kao)貝/μL 的陽性對照(zhao)。放(fang)冰上(shang)待用。
6. 換槍(qiang)頭(tou)，在(zai) 5 號管(guan)中(zhong)加(jia)入(ru) 5 μL 1×10E6 拷(kao)貝/μL 的陽性對照(zhao)到(dao) 5 號管(guan)中(zhong)，充分(fen)震(zhen)蕩 1 分(fen)鐘(zhong)，得(de) 1×10E5 拷(kao)貝/μL 的陽性對照(zhao)。放(fang)冰上(shang)待用。
7. 重(zhong)復上(shang)面的操(cao)作(zuo)直(zhi)到(dao)得(de)到(dao) 6 個(ge)稀釋(shi)度的陽性對照(zhao)。放(fang)冰上(shang)待用。
註(zhu)：上(shang)述樣品建(jian)議(yi)經過(guo)增菌後，收集培(pei)養(yang)物用於檢測。 
二、DNA提取：
可采(cai)用PCR試劑(ji)盒(he)配(pei)備的DNA抽(chou)提液(ye)，按(an)以(yi)下(xia)說(shuo)明(ming)進(jin)行(xing)DNA核酸(suan)的粗提(ti)。也可采(cai)購上(shang)海澤(ze)葉生(sheng)物科技(ji)有(you)限(xian)公司(si)生(sheng)產的DNA提取試劑(ji)盒(he)(過(guo)柱(zhu)法(fa)-熒(ying)光配(pei)套(tao))或其(qi)他合(he)適(shi)的商業化(hua)產(chan)品，並(bing)按(an)照(zhao)相應試(shi)劑(ji)盒(he)說(shuo)明(ming)進(jin)行(xing)操(cao)作(zuo)。
1、液體培養(yang)物：取液體培養(yang)物100μL加到(dao)1.5mL無菌離心管(guan)中(zhong)，8000rpm離心3min，盡量(liang)吸棄(qi)上(shang)清(qing)，加入(ru)50μL DNA抽(chou)提液(ye)充分(fen)混(hun)勻(yun)，100℃恒溫10min，13000rpm離心3min，取上(shang)清(qing)5μL進行(xing)PCR反應。
2、固體培養(yang)物：挑(tiao)取單(dan)克(ke)隆(long)菌落與50μL DNA抽(chou)提液(ye)充分(fen)混(hun)勻(yun)，100℃恒溫10min，13000rpm離心3min，取上(shang)清(qing)5μL進行(xing)PCR反應。
3、糞便(bian)樣品：挑(tiao)取米(mi)粒大小(xiao)糞(fen)便於滅(mie)菌離心管(guan)中(zhong)，加(jia)入(ru)0.5mL生理鹽水，振(zhen)蕩(dang)混(hun)勻(yun)，13000rpm離心3分(fen)鐘(zhong)，棄(qi)上(shang)清(qing)，沈澱(dian)中加(jia)入(ru)50μL DNA抽(chou)提液(ye)充分(fen)混(hun)勻(yun)，100℃恒溫10min，13000rpm離心3min取上(shang)清(qing)5μL進行(xing)PCR反應。
4、其(qi)他液(ye)體標本(ben)：取標本(ben)2-3mL，13000rpm離心3min，棄(qi)上(shang)清(qing)，沈澱(dian)中加(jia)入(ru)50μL DNA抽(chou)提液(ye)充分(fen)混(hun)勻(yun)，100℃恒溫10min，13000rpm離心3min取上(shang)清(qing)5μL進行(xing)PCR反應。
註(zhu)：陽性對照(zhao)和陰(yin)性對照(zhao)為已經抽(chou)提好(hao)的核酸(suan)(無需(xu)提(ti)取)，直(zhi)接(jie)取5μL加入(ru)到(dao)反應體系中即(ji)可。由於陽性對照(zhao)濃(nong)度較高，建議(yi)在(zai)樣品制備區域加入(ru)陽性對照(zhao)。 
QSG-7701細(xi)胞(bao)，肝細(xi)胞(bao) 人結(jie)直(zhi)腸(chang)腺(xian)癌(ai)上(shang)皮細(xi)胞(bao),DLD-1細(xi)胞(bao) CM-R053大鼠卵巢上(shang)皮細(xi)胞(bao)*培養基100mL鄰苯(ben)二(er)(>99.0%(GC))o-Phthalaldehyde 質量(liang)規(gui)格：>99.0%(GC)

大鼠腦膠(jiao)質瘤細(xi)胞(bao);C6丹(dan)磺(>95.0%(HPLC)(T))Dansyl Hydrazine質量(liang)規(gui)格：>95.0%(HPLC)(T)

CSF2RA Others Human 人 GM-CSFR 人細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye) (陽性對照(zhao)) DBD-H [=4-(N,N-二甲(jia)氨(an)基(ji)磺酰)-7-肼基(ji)-2,1,3-苯並(bing)惡二(er)唑(>98.0%(HPLC))DBD-H [=4-(N,N-Dimethylamisulfonyl)-7-hydrazi-2,1,3-benzoxadiazole] 質量(liang)規(gui)格：>98.0%(HPLC)

人視網膜色(se)素上(shang)皮細(xi)胞(bao)cDNAHRPEpiC cDNANBD-H (=4-肼基(ji)-7-硝基(ji)-2,1,3-苯並(bing)惡二(er)唑肼)(>98.0%(HPLC))NBD-H (=4-Hydrazi-7-nitro-2,1,3-benzoxadiazole Hydrazine) 質量(liang)規(gui)格：>98.0%(HPLC)

TNFRSF1A Others Rat 大鼠 TNFR1 / CD120a / TNFRSF1A 人細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye) (陽性對照(zhao)) 1,3-環(huan)己(ji)二酮(tong)(>98.0%(GC)(T))1,3-Cyclohexanedione質量(liang)規(gui)格：>98.0%(GC)(T)
SF9細(xi)胞(bao)，昆(kun)蟲卵巢細(xi)胞(bao) 人卵巢癌(ai)細(xi)胞(bao),Sw626細(xi)胞(bao) 人生(sheng)發(fa)基(ji)質細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)物HHGMCL麥(mai)芽糖醇(chun)質量(liang)規(gui)格：>98%Maltitol

非(fei)洲綠猴腎(shen)細(xi)胞(bao);VERO-76L-甲酯(zhi)鹽(yan)酸(suan)鹽(yan)質量(liang)規(gui)格：0.98L-Threonine methyl ester

IGFBP4 Others Human 人 IGFBP4 人細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye) (陽性對照(zhao)) 鹽酸(suan)阿(e)莫(mo)羅(luo)芬(fen)/鹽酸(suan)阿(e)莫(mo)洛芬 （標準(zhun)品）質量(liang)規(gui)格：HPLC>98%,標準(zhun)品Amorolfine

大耳(er)山(shan)羊(yang)肺細(xi)胞(bao);LDG-1鈉(na)/氨芐鈉(na)質量(liang)規(gui)格：>900μg/mg, USP,BRAmpicillin

IL7R Others Rat 大鼠 IL7R / IL7RA 人細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye) (陽性對照(zhao)) 鈉(na)(標準(zhun)品)質量(liang)規(gui)格：標準(zhun)品用於含(han)量(liang)測定Ampicillin
H1299人非(fei)小(xiao)細(xi)胞(bao)肺癌(ai)細(xi)胞(bao) H1299 cells in human n small cell lung cancer 1640+10%FBS鹽酸(suan)左(zuo)(標準(zhun)品)質量(liang)規(gui)格：>98%,標準(zhun)品Levofloxacin HCl

IL20 Protein Rat 重(zhong)組大(da)鼠 IL20 / Ierleukin-20 蛋白俾(bi)士(shi)麥(mai)棕,俾士(shi)麥(mai)棕R質量(liang)規(gui)格：BSBismarck Brown R

SK-N-MC(人神經上(shang)皮瘤細(xi)胞(bao)) 5×106cells/瓶×2 HEL(紅(hong)白血(xue)病細(xi)胞(bao))1酸(suan)泰(tai)樂(le)菌素,1酸(suan)泰(tai)洛星質量(liang)規(gui)格：BRTylosin Tartrate

CL-0012A172(人腦膠(jiao)質瘤細(xi)胞(bao))5×106cells/瓶×21酸(suan)泰(tai)樂(le)菌素(標準(zhun)品)質量(liang)規(gui)格：含量(liang)測定Tylosin Tartrate

ART3 Others Human 人 ART3 人細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye) (陽性對照(zhao)) 質量(liang)規(gui)格：>99%,BRLevoceitrizine HCl
防(fang)風(feng)染(ran)料法(fa)PCR鑒(jian)定試(shi)劑(ji)盒(he)直(zhi)銷(xiao)HEC-1-B(人內膜(mo)腺(xian)癌(ai)細(xi)胞(bao)) 5×106cells/瓶×2Bismuthsubcaonate堿式1公斤(jin)FCP，100-200目

ALPL Others Human 人 ALPL / TNAP 人細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye) (陽性對照(zhao)) 莧菜(cai)紅(hong) Murexide 915-67-3 25G 通(tong)用試劑(ji)

人臍(qi)帶間(jian)充質幹細(xi)胞(bao)cDNAHUMSC cDNAD-炳(bing)安(an)醋(cu)芐酯(zhi)隊(dui)本(ben)磺醋鹽(yan) H-D-cLc-OBZL P-TOSYLcTq 41036-3-

TH Others Human 人 TH / Tyrosine Hydroxyl
儲(chu)存條件(jian)：
14℃或－20℃樣品收(shou)集(ji)、處(chu)理及保存方(fang)法(fa)
1. 血(xue)清(qing)：使(shi)用不含熱(re)原(yuan)和內毒(du)素的試管(guan)，操(cao)作(zuo)過(guo)程中(zhong)避免任(ren)何(he)細(xi)胞(bao)刺(ci)激，收(shou)集血(xue)液(ye)後(hou)，3000 轉離心10 分(fen)鐘(zhong)將(jiang)血(xue)清(qing)和紅(hong)細(xi)胞(bao)迅速小心地(di)分(fen)離。
2. 血(xue)漿(jiang)：EDTA、檸檬(meng)酸(suan)鹽(yan)或肝素抗凝。3000 轉離心30 分(fen)鐘(zhong)取上(shang)清(qing)。
3. 細(xi)胞(bao)上(shang)清(qing)液：3000 轉離心10 分(fen)鐘(zhong)去除顆粒和聚合物。
4. 組織(zhi)勻(yun)漿(jiang)：將(jiang)組織(zhi)加入(ru)適(shi)量(liang)生理鹽水搗碎。3000 轉離心10 分(fen)鐘(zhong)取上(shang)清(qing)。
5. 保存：如果樣本收(shou)集後不及時檢測，請按壹次用量(liang)分(fen)裝(zhuang)，凍(dong)存於-20℃，避免(mian)反(fan)復凍(dong)融，在(zai)室(shi)溫(wen)下(xia)解(jie)凍(dong)並確保(bao)樣品均勻(yun)地(di)充分(fen)解(jie)凍(dong)。