Jeko-1人套細胞(bao)淋(lin)巴(ba)瘤(liu)細胞(bao)

公司(si)產(chan)品(pin)僅(jin)供科(ke)研(yan)研(yan)究(jiu)使用、不(bu)得用(yong)於臨(lin)床(chuang)診(zhen)斷！

二(er)、細胞(bao)培(pei)養(yang)操作

1) 復蘇細胞(bao)：以(yi)下細胞(bao)培(pei)養(yang)凍存(cun)處理(li)僅(jin)供參(can)考(kao)，具(ju)體(ti)操作步(bu)驟以(yi)隨貨(huo)產(chan)品(pin)說(shuo)明書(shu)為主(zhu)。將含有1 mL細胞(bao)懸(xuan)液(ye)的(de)凍存(cun)管在(zai) 37℃水浴中(zhong)迅(xun)速(su)搖(yao)晃解(jie)凍(dong)，加4 mL培(pei)養(yang)基混合(he)均(jun)勻(yun)。在(zai)1000 rpm條(tiao)件下離心3 min，棄去(qu)上(shang)清(qing)液(ye)，加1-2 mL培(pei)養(yang)基後(hou)吹勻(yun)。然後(hou)將所(suo)有細胞(bao)懸(xuan)液(ye)加(jia)入含適量培(pei)養(yang)基的(de)培(pei)養(yang)瓶中(zhong)培(pei)養(yang)過夜(ye)（或將(jiang)細胞(bao)懸(xuan)液(ye)加(jia)入10 cm皿(min)中(zhong)，加(jia)入約8 mL培(pei)養(yang)基，培(pei)養(yang)過夜(ye)）。第(di)二(er)天換(huan)液(ye)並檢查細胞(bao)密度。

2) 細胞(bao)傳(chuan)代：如果(guo)細胞(bao)密度達(da) 80%-90%，即(ji)可進(jin)行傳(chuan)代培(pei)養(yang)。

    a、棄去(qu)培(pei)養(yang)上(shang)清(qing)，用(yong)不(bu)含鈣(gai)、鎂離子的(de)PBS潤(run)洗細胞(bao)1-2次。        

    b、加1 mL消化液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培(pei)養(yang)瓶中(zhong)，使消化液(ye)浸(jin)潤(run)所有(you)細胞(bao)，將(jiang)培(pei)養(yang)瓶置(zhi)於(yu)37℃培(pei)養(yang)箱(xiang)中(zhong)消化1-2 min（視(shi)細胞(bao)情(qing)況而定），然後(hou)在顯微(wei)鏡下觀(guan)察細胞(bao)消化情(qing)況(kuang)，若細胞(bao)大部(bu)分變圓並(bing)脫(tuo)落，迅(xun)速(su)拿回(hui)操作臺(tai)，輕敲(qiao)幾下培(pei)養(yang)瓶後(hou)加2-3ml培(pei)養(yang)基終(zhong)止消化。輕輕打勻後(hou)裝入無菌離心管中(zhong)，1000 rpm離心5 min，棄去(qu)上(shang)清(qing)液(ye)，補(bu)加(jia)1-2 mL培(pei)養(yang)液後(hou)吹勻(yun)。        

     c、將細胞(bao)懸(xuan)液(ye)按1:2比(bi)例分到(dao)新(xin)的(de)含8 mL培(pei)養(yang)基的(de)新(xin)皿(min)中(zhong)或者瓶中(zhong)，置(zhi)於(yu)培(pei)養(yang)箱(xiang)中(zhong)培(pei)養(yang)。 3) 細胞(bao)凍(dong)存：待細胞(bao)生長(chang)狀態(tai)良好時，可進(jin)行細胞(bao)凍(dong)存。下面(mian) T25 瓶為(wei)例；a、收(shou)集細胞(bao)及(ji)細胞(bao)培(pei)養(yang)液，裝(zhuang)入無菌離心管中(zhong)，1000 rpm條(tiao)件下離心4 min，棄去(qu)上(shang)清(qing)液(ye)，用PBS清(qing)洗(xi)壹(yi)遍，棄盡(jin)PBS，進行細胞(bao)計(ji)數(shu)。

     b、根據(ju)細胞(bao)數(shu)量加入無血清(qing)細胞(bao)凍(dong)存液，使細胞(bao)密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍(dong)存(cun)管凍存1mL細胞(bao)懸(xuan)液(ye)，註意(yi)凍存(cun)管(guan)做(zuo)好標識(shi)。將凍(dong)存(cun)管放入-80℃冰(bing)箱(xiang)，24 h後(hou)轉入液氮(dan)灌儲存。記錄凍存(cun)管(guan)位置(zhi)以(yi)便(bian)下次拿取(qu)。  

三(san)、培(pei)養(yang)註意(yi)事項 

1. 收(shou)到(dao)細胞(bao)後(hou)首先(xian)觀察(cha)細胞(bao)瓶(ping)是否(fou)完(wan)好(hao)，培(pei)養(yang)液是(shi)否(fou)有(you)漏(lou)液、渾濁(zhuo)等現(xian)象(xiang)，若(ruo)有上(shang)述(shu)現(xian)象(xiang) 發生請及(ji)時和(he)我們(men)聯(lian)系(xi)。

2. 仔細閱(yue)讀細胞(bao)說(shuo)明書(shu)，了(le)解(jie)細胞(bao)相(xiang)關(guan)信(xin)息(xi)，如細胞(bao)形(xing)態(tai)、所用(yong)培(pei)養(yang)基、血(xue)清(qing)比(bi)例、所(suo)需 細胞(bao)因(yin)子等(deng)，確(que)保細胞(bao)培(pei)養(yang)條(tiao)件壹(yi)致(zhi)，若由(you)於培(pei)養(yang)條(tiao)件不(bu)壹(yi)致(zhi)而導致(zhi)細胞(bao)出(chu)現(xian)問(wen)題(ti)，責(ze)任(ren)由(you) 客戶(hu)自(zi)行(xing)承(cheng)擔。

3. 用(yong) 75%酒(jiu)精擦(ca)拭細胞(bao)瓶(ping)表面，顯微(wei)鏡下觀(guan)察細胞(bao)狀(zhuang)態(tai)。因(yin)運輸問題，部分細胞(bao)由(you)於溫(wen)度 變化及(ji)劇(ju)烈碰亡(wang)破(po)碎(sui)形成(cheng)碎(sui)片，是(shi)正常(chang)現(xian)象(xiang)。觀(guan)察好細胞(bao)狀(zhuang)態(tai)後(hou)，75%酒(jiu)精消毒瓶(ping)壁(bi)將 T25 瓶置(zhi)於(yu) 37℃培(pei)養(yang)箱(xiang)放置(zhi) 2-4h。

4. 貼(tie)壁(bi)細胞(bao)可(ke)以(yi)消化，懸(xuan)浮(fu)細胞(bao)直(zhi)接混勻收(shou)集細胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄上(shang) 清(qing)。加(jia) 5 mL PBS 重懸(xuan)細胞(bao)，再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，用新(xin)鮮(xian)的(de)培(pei)養(yang)基重(zhong)懸(xuan) 細胞(bao)，並(bing)接種到(dao)新(xin)的(de)培(pei)養(yang)瓶或培(pei)養(yang)皿(min)中(zhong)，置(zhi)於(yu)培(pei)養(yang)箱(xiang)中(zhong)進(jin)行培(pei)養(yang)。

5. 請客(ke)戶用(yong)相(xiang)同(tong)條(tiao)件的(de)培(pei)養(yang)基用(yong)於(yu)細胞(bao)培(pei)養(yang)。

6. 建(jian)議客(ke)戶(hu)收(shou)到(dao)細胞(bao)後(hou)前 3 天各(ge)拍(pai)幾張(zhang)細胞(bao)照(zhao)片，記錄細胞(bao)狀(zhuang)態(tai)，便(bian)於和(he)我司(si)技(ji)術(shu)部(bu)溝(gou)通 交(jiao)流(liu)。由(you)於運(yun)輸(shu)的(de)原因(yin)，個別敏感(gan)細胞(bao)會出(chu)現(xian)不(bu)穩定的(de)情況(kuang)，請及(ji)時和(he)我們(men)聯(lian)系(xi)，告知(zhi)細胞(bao) 的(de)具(ju)體(ti)情(qing)況(kuang)，以(yi)便(bian)我們(men)的(de)技術(shu)人員跟蹤回(hui)訪直(zhi)至(zhi)問(wen)題(ti)解(jie)決。

7. 該細胞(bao)僅(jin)供科(ke)研(yan)使用。

8. 備(bei)註：運輸(shu)用(yong)的(de)培(pei)養(yang)基 (灌液培(pei)養(yang)基) 不(bu)能(neng)再用來(lai)培(pei)養(yang)細胞(bao)，請換(huan)用按照說(shuo)明書(shu)細胞(bao)培(pei) 養(yang)條(tiao)件新(xin)配制的(de)培(pei)養(yang)基來(lai)培(pei)養(yang)細胞(bao)。     收(shou)到(dao)細胞(bao)後(hou)第壹(yi)次傳代建(jian)議 1：2 傳(chuan)代(dai) 。

9. 註意(yi)：  1:2 傳代(dai)就是 1 個(ge) T25 瓶傳(chuan) 2 個(ge) T25 瓶(ping)或者 2 個 6cm 皿(min)。不(bu)是 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個10cm 皿(min)。

公司(si)正在(zai)出(chu)售(shou)的(de)產(chan)品(pin)：

n-Myc： 致(zhi)癌(ai)基因(yin)n-Myc抗體(ti) CDH2 Others Human 人 Cadherin-2 / CD325 / CDH2 / NCAD 人細胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye) (陽性(xing)對照)

CL-0321BEL-7405(人肝(gan)癌(ai)細胞(bao))5×106cells/瓶(ping)×2 大鼠(shu)細胞(bao)毒(du)性T淋(lin)巴(ba)細胞(bao)相(xiang)關(guan)抗(kang)原4(CTLA-4/CD152)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) CTGF(Human connective tissue growth factor)  人結(jie)締組(zu)織生長(chang)因(yin)子 96T

MRP3： 多(duo)藥(yao)耐藥(yao)相(xiang)關(guan)蛋(dan)白(bai)3抗體(ti) 小(xiao)鼠(shu)誘導(dao)性(xing)多(duo)潛能(neng)幹細胞(bao);PUMC-mips-B2

NCI-H716(人結(jie)直(zhi)腸(chang)腺(xian)癌(ai)細胞(bao)) 5×106cells/瓶(ping)×2 3T3-L1(小(xiao)鼠(shu)脂(zhi)肪(fang)細胞(bao)) 大鼠(shu)細胞(bao)雕亡(wang)調(tiao)節(jie)因(yin)子BAX(BAX)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) IL-7(Mouse Interleukin-7)  小(xiao)鼠(shu)白(bai)介素(su)7 96T

MTERF1： 線(xian)粒(li)體(ti)轉錄終止因(yin)子1抗(kang)體(ti) 小(xiao)鼠(shu)誘導(dao)性(xing)多(duo)潛能(neng)幹細胞(bao);PUMC-mips-A4

HDAC5： 組(zu)蛋(dan)白(bai)去乙酰化(hua)酶(mei)5抗(kang)體(ti) 非(fei)洲(zhou)綠(lv)猴腎(shen)細胞(bao);CV-1 人二(er)倍(bei)體(ti)胚肺(fei)細胞(bao)，WI-38細胞(bao) SHG-44(膠質瘤(liu)細胞(bao))

LAIR1 Others Mouse 小(xiao)鼠(shu) LAIR1 人細胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye) (陽性(xing)對照) 人促(cu)生長(chang)激(ji)素(su)釋(shi)放激(ji)素(su)(GHRH)ELISA 試(shi)劑(ji)盒(he) IGF-IIBP3(Insulin like growth factor 2 mRNA binding protein 3) 2 mRNA 結合(he)蛋(dan)白(bai)3抗原(yuan) 0.5mg

H5N1 Hemagglutinin： A型(xing)流(liu)感病(bing)毒H5N1凝(ning)集素(su) 1ml

Rhesus antibody Rh CCL13/MCP-4 單(dan)核(he)細胞(bao)趨(qu)化蛋白(bai)4抗體(ti) CM-R119大鼠(shu)晶狀體(ti)上(shang)皮(pi)細胞(bao)培(pei)養(yang)基100mL

WISH細胞(bao)，人羊膜(mo)細胞(bao) 普(pu)通變形桿(gan)菌(jun) 中(zhong)國倉鼠(shu)卵(luan)巢細胞(bao)(亞(ya)系(xi)克隆);CHO DUX B11 Carrying pBSCRLc/pTCSgpt clone 35.6 人促(cu)腎上(shang)腺(xian)皮質激(ji)素(su)(ACTH)ELISA 試(shi)劑(ji)盒(he) IKB Beta (Inhibitor of KB) KB抑(yi)制(zhi)蛋白(bai)β(多肽(tai)) 0.5mg

Jeko-1人套細胞(bao)淋(lin)巴(ba)瘤(liu)細胞(bao)Classical swine fever virus, CSFV： 病(bing)毒抗(kang)體(ti) 鼬(you)肺(fei)上(shang)皮(pi)細胞(bao);MV-1-Lu

正常(chang)細胞(bao) 大鼠(shu)蛋白(bai)激(ji)酶(mei)Cγ(PKCγ)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) PGF(Human Prostaglandin F)  人前(qian)列(lie)腺(xian)素F 96T

EMC1： 腺(xian)樣(yang)癌(ai)特(te)異(yi)性相(xiang)關(guan)抗(kang)原EMC1抗體(ti) IL13 Others Human 人 IL-13 / Ierleukin-13 人細胞(bao)裂(lie)解(jie)液(ye) (陽性(xing)對照)

人臍靜脈(mai)內(nei)皮細胞(bao);HUV-EC 大鼠(shu)蛋白(bai)激(ji)酶(mei)Cβ1(PKCβ1)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) PGE1(Human Prostaglandin E1)  人前(qian)列(lie)腺(xian)素E 96T

PPM2C： 蛋(dan)酸酶(mei)2C抗(kang)體(ti) 猴(hou)腎(shen)細胞(bao);Vero IgCD4