K562人(ren)慢(man)性骨(gu)髓性白血(xue)病細(xi)胞系(xi)

公(gong)司(si)產品僅供科研研究使(shi)用、不(bu)得(de)用於(yu)臨床診(zhen)斷(duan)！

二、細胞培(pei)養(yang)操(cao)作(zuo)

1) 復(fu)蘇細胞：以(yi)下(xia)細胞培(pei)養(yang)凍存(cun)處(chu)理(li)僅(jin)供參(can)考，具(ju)體操(cao)作(zuo)步(bu)驟(zhou)以(yi)隨貨產(chan)品說(shuo)明(ming)書為(wei)主(zhu)。將(jiang)含有1 mL細(xi)胞懸液(ye)的(de)凍存(cun)管(guan)在 37℃水浴(yu)中(zhong)迅(xun)速(su)搖晃解(jie)凍，加(jia)4 mL培(pei)養基(ji)混(hun)合(he)均勻(yun)。在1000 rpm條(tiao)件下(xia)離心(xin)3 min，棄(qi)去(qu)上清液(ye)，加(jia)1-2 mL培(pei)養基(ji)後(hou)吹勻(yun)。然後將(jiang)所(suo)有(you)細(xi)胞懸液(ye)加(jia)入(ru)含適量(liang)培養(yang)基(ji)的(de)培養(yang)瓶(ping)中(zhong)培(pei)養(yang)過(guo)夜(ye)（或將(jiang)細(xi)胞懸液(ye)加(jia)入(ru)10 cm皿中(zhong)，加(jia)入(ru)約(yue)8 mL培養基(ji)，培(pei)養過(guo)夜(ye)）。第二天(tian)換液並(bing)檢(jian)查細(xi)胞密度。

2) 細(xi)胞傳代(dai)：如果(guo)細胞密度達(da) 80%-90%，即(ji)可(ke)進(jin)行傳代(dai)培(pei)養(yang)。

    a、棄(qi)去培養上清，用不(bu)含鈣、鎂離(li)子的PBS潤洗細胞1-2次(ci)。        

    b、加(jia)1 mL消化(hua)液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培養(yang)瓶(ping)中(zhong)，使消化(hua)液浸潤所(suo)有(you)細(xi)胞，將(jiang)培(pei)養(yang)瓶置於(yu)37℃培養(yang)箱(xiang)中(zhong)消化(hua)1-2 min（視(shi)細(xi)胞情況而(er)定(ding)），然後在(zai)顯(xian)微鏡下(xia)觀(guan)察細(xi)胞消化(hua)情況，若(ruo)細(xi)胞大部分變圓並(bing)脫落(luo)，迅(xun)速(su)拿回(hui)操(cao)作(zuo)臺(tai)，輕敲(qiao)幾下(xia)培養(yang)瓶後(hou)加(jia)2-3ml培(pei)養基(ji)終(zhong)止(zhi)消化(hua)。輕輕打勻(yun)後裝(zhuang)入(ru)無(wu)菌離(li)心(xin)管(guan)中，1000 rpm離(li)心(xin)5 min，棄(qi)去(qu)上清液(ye)，補(bu)加(jia)1-2 mL培(pei)養液(ye)後吹(chui)勻(yun)。        

     c、將(jiang)細(xi)胞懸液(ye)按(an)1:2比例(li)分(fen)到新的含8 mL培養(yang)基(ji)的(de)新皿中(zhong)或者瓶中，置於(yu)培養(yang)箱(xiang)中(zhong)培養。 3) 細(xi)胞凍存(cun)：待(dai)細(xi)胞生(sheng)長狀(zhuang)態(tai)良(liang)好時，可(ke)進(jin)行細(xi)胞凍存(cun)。下(xia)面 T25 瓶(ping)為(wei)例(li)；a、收(shou)集細胞及(ji)細(xi)胞培(pei)養(yang)液，裝(zhuang)入(ru)無(wu)菌離(li)心(xin)管(guan)中，1000 rpm條(tiao)件下(xia)離心(xin)4 min，棄(qi)去(qu)上清液(ye)，用PBS清洗壹遍(bian)，棄盡(jin)PBS，進(jin)行細(xi)胞計數。

     b、根(gen)據(ju)細(xi)胞數(shu)量(liang)加(jia)入(ru)無(wu)血(xue)清細(xi)胞凍存(cun)液(ye)，使(shi)細(xi)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混(hun)勻(yun)，每支凍存(cun)管(guan)凍存(cun)1mL細(xi)胞懸液(ye)，註(zhu)意(yi)凍存(cun)管(guan)做(zuo)好(hao)標(biao)識。將(jiang)凍存(cun)管(guan)放(fang)入(ru)-80℃冰(bing)箱，24 h後轉入(ru)液(ye)氮(dan)灌(guan)儲存(cun)。記(ji)錄(lu)凍存(cun)管(guan)位置以便(bian)下(xia)次拿(na)取。  

三(san)、培(pei)養註(zhu)意(yi)事項 

1. 收(shou)到(dao)細胞後(hou)首先(xian)觀(guan)察細(xi)胞瓶(ping)是否(fou)完(wan)好(hao)，培(pei)養(yang)液是否(fou)有(you)漏液、渾(hun)濁等(deng)現(xian)象(xiang)，若(ruo)有(you)上述(shu)現(xian)象(xiang) 發生(sheng)請及(ji)時和(he)我(wo)們(men)聯(lian)系(xi)。

2. 仔細閱(yue)讀(du)細胞說(shuo)明(ming)書，了解細胞相關(guan)信息，如細胞形(xing)態(tai)、所(suo)用培(pei)養(yang)基(ji)、血(xue)清比例(li)、所(suo)需(xu) 細(xi)胞因(yin)子等(deng)，確(que)保(bao)細胞培(pei)養(yang)條件壹(yi)致(zhi)，若(ruo)由(you)於(yu)培養(yang)條(tiao)件不(bu)壹(yi)致(zhi)而導(dao)致(zhi)細胞出(chu)現(xian)問題(ti)，責任由 客(ke)戶(hu)自(zi)行承(cheng)擔(dan)。

3. 用 75%酒精擦拭細胞瓶(ping)表(biao)面(mian)，顯(xian)微鏡下(xia)觀(guan)察細(xi)胞狀(zhuang)態(tai)。因(yin)運(yun)輸(shu)問題(ti)，部分細胞由(you)於(yu)溫度(du) 變(bian)化(hua)及劇(ju)烈(lie)碰(peng)亡(wang)破(po)碎形(xing)成碎(sui)片(pian)，是正常(chang)現(xian)象(xiang)。觀(guan)察好(hao)細(xi)胞狀(zhuang)態(tai)後(hou)，75%酒精消毒(du)瓶(ping)壁將(jiang) T25 瓶(ping)置於(yu) 37℃培養(yang)箱(xiang)放(fang)置 2-4h。

4. 貼壁(bi)細(xi)胞可(ke)以消化(hua)，懸浮(fu)細(xi)胞直(zhi)接(jie)混勻(yun)收集細胞，900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，棄(qi)上 清。加(jia) 5 mL PBS 重(zhong)懸細(xi)胞，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，用新(xin)鮮的培(pei)養基(ji)重(zhong)懸 細(xi)胞，並(bing)接(jie)種到(dao)新(xin)的(de)培養瓶(ping)或培養皿中(zhong)，置於(yu)培養(yang)箱(xiang)中(zhong)進(jin)行培(pei)養(yang)。

5. 請客(ke)戶用相同條(tiao)件的(de)培(pei)養基(ji)用於(yu)細胞培(pei)養(yang)。

6. 建議(yi)客戶收到細(xi)胞後(hou)前 3 天(tian)各拍(pai)幾張細胞照(zhao)片(pian)，記(ji)錄(lu)細(xi)胞狀(zhuang)態(tai)，便(bian)於(yu)和(he)我(wo)司(si)技(ji)術(shu)部溝通 交流(liu)。由(you)於(yu)運輸(shu)的原因(yin)，個(ge)別(bie)敏(min)感細胞會(hui)出(chu)現(xian)不(bu)穩定(ding)的(de)情況，請及(ji)時和(he)我(wo)們(men)聯(lian)系(xi)，告知(zhi)細胞 的(de)具(ju)體情況，以(yi)便(bian)我(wo)們(men)的(de)技(ji)術(shu)人(ren)員(yuan)跟(gen)蹤(zong)回(hui)訪直(zhi)至問(wen)題(ti)解(jie)決。

7. 該(gai)細胞僅(jin)供科研使用。

8. 備(bei)註(zhu)：運(yun)輸(shu)用的(de)培(pei)養基(ji) (灌(guan)液培(pei)養(yang)基(ji)) 不(bu)能再(zai)用來(lai)培(pei)養細(xi)胞，請換用按(an)照(zhao)說(shuo)明(ming)書細胞培(pei) 養(yang)條件新(xin)配(pei)制(zhi)的培養基(ji)來(lai)培(pei)養細(xi)胞。     收(shou)到(dao)細胞後(hou)第壹(yi)次(ci)傳代(dai)建(jian)議(yi) 1：2 傳代(dai) 。

9. 註(zhu)意(yi)：  1:2 傳代(dai)就(jiu)是 1 個 T25 瓶(ping)傳 2 個(ge) T25 瓶(ping)或者 2 個 6cm 皿。不(bu)是 1 個 T25 瓶(ping)傳 2 個(ge)10cm 皿。

公(gong)司(si)正在出(chu)售的(de)產(chan)品：

l-Myc： Myc基(ji)因(yin)肺癌(ai)相關(guan)蛋白抗(kang)體 SK-BR-3細胞，腺(xian)癌(ai)細胞 人(ren)食(shi)管(guan)癌(ai)細胞,TE-1細(xi)胞 中(zhong)國(guo)倉鼠卵(luan)巢(chao)細胞K1(亞系(xi)克隆);CHO-K1

VNN1 Others Mouse 小(xiao)鼠(shu) VNN1 / Vanin-1 人(ren)細(xi)胞裂(lie)解(jie)液(ye) (陽性對(dui)照) 大鼠無(wu)翅(chi)型MMTV整合(he)位(wei)點(dian)家族(zu)成員(yuan)3A(W3A)ELISA試(shi)劑盒(he) HSF1(Mouse Heat Shock Factor 1)  小(xiao)鼠(shu)熱(re)休(xiu)克因(yin)子1 96T

Megalin： 糖蛋(dan)白gp330抗(kang)體 人(ren)口(kou)腔(qiang)角質(zhi)細(xi)胞cDNAHOK cDNA

PC9人(ren)肺癌(ai)細胞 PC9 human lung cancer cells DMEM+10% FBS 大鼠無(wu)翅(chi)型MMTV整合(he)位(wei)點(dian)家族(zu)成員(yuan)3(W3)ELISA試(shi)劑盒(he) VEGFR-3/Flt-4(Human Vascuoar endothelial cell growth factor receptor 2)  人(ren)血(xue)管(guan)內皮細(xi)胞生(sheng)長因(yin)子受體3 96T

phospho-MyoD1(Ser200)： 0酸化(hua)肌原調節(jie)蛋(dan)白抗(kang)體 CPE Others Human 人(ren) CPE 人(ren)細(xi)胞裂(lie)解(jie)液(ye) (陽性對(dui)照)

Neuro-2a/N2a(小(xiao)鼠(shu)腦神經(jing)瘤(liu)細(xi)胞) 5×106cells/瓶(ping)×2 中(zhong)東呼吸(xi)綜(zong)合(he)征(zheng) MERS-CoV (HCoV-EMC/2012) Spike Protein fragme (aa 367-606) 桿狀(zhuang)病(bing)毒(du)-昆(kun)蟲(chong)細胞裂(lie)解(jie)液(ye) (陽性對(dui)照) 人(ren)促(cu)紅(hong)細(xi)胞生(sheng)成素抗(kang)體(EPO-Ab)ELISA試(shi)劑盒(he) IL-16(Interleukin-16) 白介素16抗(kang)原 0.5mg

HPV16 E7： 人(ren)瘤(liu)病(bing)毒(du)16型(xing)E7抗(kang)體 小(xiao)鼠(shu)小(xiao)膠(jiao)質(zhi)細(xi)胞MM

CXCL11 Protein Human 重組(zu)人(ren) I-TAC / CXCL11 蛋(dan)白 人(ren)雌酮E(ESONE)ELISA 試(shi)劑盒(he) IL-16/LCF(interleukin-16)(Lymphocyte Chemotactic Factor) 白細胞介(jie)素-16抗(kang)原 0.5mg

HPV58 E6： 人(ren)類狀(zhuang)瘤(liu)病(bing)毒(du)58 E6蛋(dan)白抗(kang)體 CHST11 Others Human 人(ren) CHST11 / C4ST-1 桿狀(zhuang)病(bing)毒(du)-昆(kun)蟲(chong)細胞裂(lie)解(jie)液(ye) (陽性對(dui)照)

人(ren)淋(lin)巴(ba)內皮細(xi)胞培(pei)養(yang)基(ji) 100mL 人(ren)雌三(san)醇(chun)(E3)ELISA 試(shi)劑盒(he) IL-18/IGIF(Interleukin-18) 白細胞介(jie)素-18/幹(gan)擾素γ誘導(dao)因(yin)子 0.5mg

K562人(ren)慢(man)性骨(gu)髓性白血(xue)病細(xi)胞系(xi)RNF131： 環指蛋白131抗(kang)體 TGFB1 Others Rat 大鼠 TGF-beta 1 / TGFB1 人(ren)細(xi)胞裂(lie)解(jie)液(ye) (陽性對(dui)照)

NCI-H661 人(ren)大細胞肺癌(ai)細胞 大鼠蛋(dan)白激酶B(PKB)ELISA 試(shi)劑盒(he) Human Cortisol  人(ren)唾(tuo)液(ye)96T

Phospholipase A2 activator protein： 0脂酶A2激活(huo)蛋白抗(kang)體 CHOdhfr細胞，二氫缺(que)陷(xian)型中(zhong)國(guo)倉鼠卵(luan)巢(chao)細胞 人(ren)癌(ai)細胞系(xi),1590細胞 人(ren)星(xing)形(xing)膠(jiao)質(zhi)細(xi)胞裂(lie)解(jie)物HAL

ACE2 Others Rat 大鼠 ACE2 / ACEH 人(ren)細(xi)胞裂(lie)解(jie)液(ye) (陽性對(dui)照) 大鼠蛋(dan)白激酶A(PKA)ELISA 試(shi)劑盒(he) E2(Human Estradiol)  人(ren)雌二醇(chun) 96T

thymidine phosphorylase： 胸苷0酸化(hua)酶抗(kang)體 豬腎(shen)細(xi)胞;PK(15)