KYSE-410人食道(dao)鱗狀(zhuang)細胞癌

公司產品(pin)僅(jin)供科(ke)研研究使(shi)用、不(bu)得(de)用於(yu)臨(lin)床(chuang)診斷！

二(er)、細胞培養(yang)操作(zuo)

1) 復蘇(su)細胞：以下(xia)細胞培養(yang)凍(dong)存處理僅供(gong)參(can)考，具(ju)體(ti)操(cao)作步驟以(yi)隨(sui)貨(huo)產品(pin)說(shuo)明書(shu)為(wei)主。將(jiang)含有1 mL細胞懸液的(de)凍(dong)存管在 37℃水(shui)浴(yu)中(zhong)迅速(su)搖晃解凍(dong)，加4 mL培(pei)養(yang)基(ji)混(hun)合均(jun)勻(yun)。在1000 rpm條(tiao)件(jian)下(xia)離心(xin)3 min，棄去上清(qing)液(ye)，加1-2 mL培(pei)養(yang)基(ji)後吹(chui)勻(yun)。然後將(jiang)所(suo)有細胞懸液加入(ru)含適(shi)量(liang)培養(yang)基(ji)的(de)培養(yang)瓶中(zhong)培養(yang)過夜（或將(jiang)細胞懸液加入(ru)10 cm皿(min)中(zhong)，加入(ru)約(yue)8 mL培(pei)養(yang)基(ji)，培養(yang)過夜）。第二(er)天(tian)換液並檢查細胞密(mi)度。

2) 細胞傳代(dai)：如(ru)果細胞密(mi)度達(da) 80%-90%，即(ji)可進行傳代(dai)培(pei)養(yang)。

    a、棄去培養(yang)上清(qing)，用(yong)不(bu)含鈣(gai)、鎂離子(zi)的(de)PBS潤洗(xi)細胞1-2次。        

    b、加1 mL消(xiao)化液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培(pei)養(yang)瓶中(zhong)，使消(xiao)化液(ye)浸(jin)潤所(suo)有細胞，將(jiang)培養(yang)瓶置於(yu)37℃培(pei)養(yang)箱中(zhong)消化1-2 min（視(shi)細胞情(qing)況而(er)定），然後(hou)在顯(xian)微(wei)鏡下(xia)觀察(cha)細胞消化情(qing)況，若細胞大(da)部(bu)分(fen)變(bian)圓(yuan)並脫(tuo)落(luo)，迅速(su)拿(na)回操(cao)作臺，輕敲幾(ji)下(xia)培養(yang)瓶後(hou)加2-3ml培(pei)養(yang)基(ji)終止(zhi)消(xiao)化。輕輕打勻(yun)後裝入無菌離心(xin)管中(zhong)，1000 rpm離心(xin)5 min，棄去上清(qing)液(ye)，補加1-2 mL培(pei)養(yang)液後(hou)吹勻(yun)。        

     c、將(jiang)細胞懸液按(an)1:2比例(li)分(fen)到(dao)新(xin)的(de)含8 mL培養(yang)基(ji)的(de)新皿(min)中(zhong)或者(zhe)瓶(ping)中(zhong)，置於(yu)培(pei)養(yang)箱中(zhong)培養(yang)。 3) 細胞凍(dong)存：待細胞生長狀(zhuang)態良(liang)好時，可進行細胞凍(dong)存。下(xia)面 T25 瓶為(wei)例；a、收(shou)集細胞及細胞培養(yang)液，裝(zhuang)入無菌離心(xin)管中(zhong)，1000 rpm條(tiao)件(jian)下(xia)離心(xin)4 min，棄去上清(qing)液(ye)，用PBS清(qing)洗(xi)壹(yi)遍(bian)，棄盡(jin)PBS，進行細胞計數。

     b、根(gen)據(ju)細胞數量(liang)加入(ru)無血清(qing)細胞凍(dong)存液，使細胞密(mi)度5×106~1×107/mL，輕輕混(hun)勻(yun)，每支(zhi)凍(dong)存管凍(dong)存1mL細胞懸液，註(zhu)意凍(dong)存管做(zuo)好標(biao)識。將(jiang)凍(dong)存管放(fang)入(ru)-80℃冰箱(xiang)，24 h後轉入液氮灌(guan)儲(chu)存。記錄凍(dong)存管位置以便(bian)下(xia)次拿(na)取。  

三、培養(yang)註(zhu)意事項 

1. 收(shou)到(dao)細胞後首先(xian)觀(guan)察(cha)細胞瓶是否完好，培養(yang)液是否有漏液(ye)、渾(hun)濁(zhuo)等(deng)現(xian)象(xiang)，若(ruo)有上述(shu)現(xian)象(xiang) 發生請(qing)及時(shi)和(he)我們(men)聯(lian)系(xi)。

2. 仔細閱讀(du)細胞說明書(shu)，了解細胞相關信息，如細胞形態、所(suo)用培養(yang)基(ji)、血清(qing)比例(li)、所(suo)需 細胞因子(zi)等(deng)，確保(bao)細胞培養(yang)條(tiao)件(jian)壹(yi)致，若由於(yu)培(pei)養(yang)條(tiao)件(jian)不(bu)壹(yi)致(zhi)而(er)導(dao)致細胞出現(xian)問(wen)題(ti)，責任(ren)由 客戶自行(xing)承擔。

3. 用 75%酒(jiu)精擦拭(shi)細胞瓶表面，顯微(wei)鏡(jing)下(xia)觀察(cha)細胞狀態。因運(yun)輸問(wen)題(ti)，部(bu)分(fen)細胞由於(yu)溫度 變(bian)化及劇烈碰(peng)亡破碎形成(cheng)碎片，是正常(chang)現(xian)象(xiang)。觀(guan)察(cha)好細胞狀態後，75%酒(jiu)精消毒(du)瓶(ping)壁(bi)將(jiang) T25 瓶置於(yu) 37℃培(pei)養(yang)箱放(fang)置 2-4h。

4. 貼(tie)壁(bi)細胞可以消化，懸(xuan)浮細胞直接混(hun)勻(yun)收(shou)集細胞，900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，棄上(shang) 清(qing)。加 5 mL PBS 重(zhong)懸細胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，用新(xin)鮮的(de)培養(yang)基(ji)重懸(xuan) 細胞，並接種(zhong)到(dao)新(xin)的(de)培養(yang)瓶或(huo)培養(yang)皿(min)中(zhong)，置於(yu)培(pei)養(yang)箱中(zhong)進行培養(yang)。

5. 請(qing)客(ke)戶用相(xiang)同(tong)條(tiao)件(jian)的(de)培養(yang)基(ji)用於(yu)細胞培養(yang)。

6. 建議(yi)客戶收(shou)到(dao)細胞後前 3 天(tian)各(ge)拍(pai)幾(ji)張細胞照片，記(ji)錄細胞狀態，便於(yu)和(he)我司技術部溝通 交流(liu)。由於(yu)運(yun)輸(shu)的(de)原因(yin)，個別(bie)敏(min)感細胞會出現(xian)不(bu)穩(wen)定的(de)情(qing)況，請(qing)及時(shi)和(he)我們(men)聯(lian)系(xi)，告(gao)知(zhi)細胞 的(de)具體(ti)情(qing)況，以便(bian)我們(men)的(de)技術(shu)人員跟蹤回訪直至問(wen)題(ti)解(jie)決。

7. 該細胞僅供科(ke)研使用。

8. 備註(zhu)：運輸(shu)用(yong)的(de)培養(yang)基(ji) (灌(guan)液(ye)培養(yang)基(ji)) 不(bu)能(neng)再(zai)用(yong)來(lai)培養(yang)細胞，請(qing)換(huan)用(yong)按(an)照說明書(shu)細胞培 養(yang)條(tiao)件(jian)新(xin)配制(zhi)的(de)培養(yang)基(ji)來培(pei)養(yang)細胞。     收(shou)到(dao)細胞後第壹(yi)次傳(chuan)代(dai)建(jian)議(yi) 1：2 傳代(dai) 。

9. 註(zhu)意：  1:2 傳(chuan)代(dai)就(jiu)是 1 個 T25 瓶(ping)傳 2 個 T25 瓶(ping)或者(zhe) 2 個 6cm 皿(min)。不(bu)是 1 個 T25 瓶(ping)傳 2 個10cm 皿(min)。

公(gong)司正在出(chu)售(shou)的(de)產品(pin)：

Phospho-MEF2A (Thr312)： 0酸化肌細胞增強因(yin)子(zi)2抗體(ti) HA Others H5N1 甲型流(liu)感 H5N1 (A/turkey/Turkey/1/2005) 血凝(ning)素(su) (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液(ye) (陽(yang)性(xing)對照)

CL-0223SW480(人結腸癌細胞)5×106cells/瓶×2 大(da)鼠(shu)唾液酸(suan)酶2(SIAL2)ELISA試(shi)劑盒 sCD40L(Human Soluble Cluster of differentiation 40 ligand)  人可溶性(xing)CD40配體(ti) 96T

Phospho-MEF2A (Ser408)： 0酸化肌細胞增強因(yin)子(zi)2抗體(ti) tTA基(ji)因修(xiu)飾(shi)的(de)小(xiao)鼠(shu)畸(ji)胎瘤(liu)細胞(B類(lei));P19-CAG-tTA-1D3

QG-56(人肺扁(bian)平上皮(pi)癌細胞) 5×106cells/瓶×2 L-02(正常(chang)肝細胞) 大(da)鼠(shu)唾液α1(AMY1)ELISA試(shi)劑盒 a-Glu  大(da)鼠(shu)α葡(pu)萄(tao)糖苷酶 96T

phospho-MEK1 (Thr286)： 0酸化原(yuan)活(huo)化蛋(dan)白激酶激酶1抗體(ti) 小(xiao)鼠(shu)畸(ji)胎瘤(liu)細胞;P19

小(xiao)鼠(shu)胚(pei)胎(tai)成(cheng)纖(xian)維細胞;3T6-Swiss albino 人型肝(gan)炎(yan)IgG(HCV-IgG)ELISA 試(shi)劑盒 lamin A 核(he)纖(xian)層蛋白A抗(kang)原 0.5mg

phospho-ITGB4(Tyr1530)： 0酸化整(zheng)合素β4抗(kang)體(ti) EB病(bing)毒(du)轉(zhuan)化的(de)人B淋(lin)巴細胞;KMY1022

OVCAR-3(人卵巢(chao)癌細胞) 5×106cells/瓶×2 甲型流(liu)感 H1N1 (A/California/07/2009) 核蛋(dan)白 (Nucleoprotein / NP) 桿(gan)狀病(bing)毒(du)-昆(kun)蟲細胞裂解液(ye) (陽(yang)性(xing)對照) 人轉酶/谷轉(zhuan)酶(ALT/GPT)ELISA 試(shi)劑盒 LOX-1/OLR1 凝(ning)集(ji)素樣(yang)氧(yang)化型(xing)低(di)密(mi)度脂(zhi)蛋白受(shou)體(ti) 0.5mg

IGFBP1： 結合蛋白1抗(kang)體(ti) 人羊膜(mo)上皮(pi)細胞HAmEpiC

CCL21 Protein Cynomolgus 重組(zu)食蟹(xie)猴 CCL21 / 6Ckine 蛋(dan)白 人基(ji)轉移(yi)酶(ALT)ELISA試(shi)劑盒 LPLUNC1 人鼻(bi)咽(yan)癌癌基(ji)因多肽(tai)抗(kang)原 0.5mg

KYSE-410人食道(dao)鱗狀(zhuang)細胞癌CL-0434SC-1(小(xiao)鼠(shu)胚(pei)胎(tai)細胞)5×106cells/瓶×2 大(da)鼠(shu)促(cu)腎上(shang)腺皮(pi)質(zhi)激素(su)受(shou)體(ti)(ACTHR)ELISA試(shi)劑盒 Hyl(Human hydroxylysine)  人羥賴酸(suan) 96T

RNF126： 環指蛋白126抗(kang)體(ti) IDS Others Human 人 Iduronate 2-Sulfatase / IDS 人細胞裂解液(ye) (陽(yang)性(xing)對照)

人結腸平滑肌細胞RNAHCSMC miRNA5 μg 大(da)鼠(shu)促(cu)腎上(shang)腺皮(pi)質(zhi)激素(su)釋放(fang)因(yin)子(zi)(CRF)ELISA試(shi)劑盒 GAP(Human GTPase activating protein)  人GTP酶活化蛋(dan)白 96T

RBC(G2H4)： 小(xiao)鼠(shu)抗(kang)人紅(hong)細胞單克隆(long)抗(kang)體(ti) 恒河猴腎(shen)細胞;LLC-MK2

人胚(pei)肺(fei)細胞VA13細胞;WI-38 VA13亞系2RA 人直結腸平滑肌細胞培養(yang)基(ji) 100mL 大(da)鼠(shu)促(cu)腎上(shang)腺皮(pi)質(zhi)激素(su)(ACTH)ELISA試(shi)劑盒 Apo-H(Human Apolipoprotein H)  人載脂(zhi)蛋白H 96T