Li-7人肝(gan)癌細胞(bao)

公(gong)司產品(pin)僅(jin)供科(ke)研(yan)研(yan)究使用、不得(de)用於(yu)臨床診斷！

二、細胞(bao)培養(yang)操作(zuo)

1) 復(fu)蘇(su)細胞(bao)：以(yi)下(xia)細胞(bao)培養(yang)凍(dong)存處理僅(jin)供(gong)參(can)考(kao)，具體(ti)操作(zuo)步(bu)驟以(yi)隨(sui)貨產(chan)品說明(ming)書(shu)為(wei)主(zhu)。將(jiang)含有1 mL細胞(bao)懸(xuan)液的(de)凍(dong)存管(guan)在 37℃水(shui)浴中迅(xun)速(su)搖(yao)晃(huang)解凍(dong)，加(jia)4 mL培養(yang)基(ji)混(hun)合均勻(yun)。在1000 rpm條件(jian)下(xia)離(li)心3 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清液，加(jia)1-2 mL培養(yang)基(ji)後(hou)吹勻。然(ran)後(hou)將(jiang)所(suo)有細胞(bao)懸(xuan)液加(jia)入含適(shi)量培養(yang)基(ji)的(de)培養(yang)瓶中培養(yang)過(guo)夜(ye)（或將(jiang)細胞(bao)懸(xuan)液加(jia)入10 cm皿中，加(jia)入約(yue)8 mL培養(yang)基(ji)，培養(yang)過(guo)夜(ye)）。第(di)二天換液(ye)並檢查(zha)細胞(bao)密度。

2) 細胞(bao)傳代：如果細胞(bao)密度達 80%-90%，即(ji)可(ke)進行傳代培養(yang)。

    a、棄(qi)去(qu)培養(yang)上(shang)清，用不含鈣、鎂離(li)子的(de)PBS潤(run)洗細胞(bao)1-2次。        

    b、加1 mL消(xiao)化(hua)液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培養(yang)瓶中，使消(xiao)化(hua)液浸(jin)潤(run)所(suo)有(you)細胞(bao)，將培養(yang)瓶置於(yu)37℃培養(yang)箱(xiang)中消(xiao)化1-2 min（視(shi)細胞(bao)情況(kuang)而(er)定(ding)），然(ran)後(hou)在(zai)顯(xian)微鏡下(xia)觀察(cha)細胞(bao)消化(hua)情況，若(ruo)細胞(bao)大(da)部(bu)分(fen)變圓(yuan)並脫落(luo)，迅(xun)速(su)拿(na)回(hui)操作(zuo)臺(tai)，輕(qing)敲幾(ji)下(xia)培養(yang)瓶後加(jia)2-3ml培養(yang)基(ji)終(zhong)止消化(hua)。輕(qing)輕(qing)打勻(yun)後(hou)裝入(ru)無菌(jun)離(li)心管中，1000 rpm離(li)心5 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清液，補(bu)加1-2 mL培養(yang)液(ye)後吹勻。        

     c、將細胞(bao)懸(xuan)液按(an)1:2比(bi)例分(fen)到(dao)新(xin)的(de)含8 mL培養(yang)基(ji)的(de)新(xin)皿中或(huo)者(zhe)瓶中，置於(yu)培養(yang)箱(xiang)中培養(yang)。 3) 細胞(bao)凍存(cun)：待細胞(bao)生長(chang)狀態(tai)良(liang)好(hao)時，可(ke)進行細胞(bao)凍存(cun)。下(xia)面 T25 瓶為(wei)例；a、收(shou)集細胞(bao)及細胞(bao)培養(yang)液(ye)，裝入無菌(jun)離(li)心管中，1000 rpm條(tiao)件(jian)下(xia)離(li)心4 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清液，用PBS清洗壹(yi)遍，棄(qi)盡PBS，進行細胞(bao)計數(shu)。

     b、根(gen)據細胞(bao)數量加入(ru)無血清細胞(bao)凍存(cun)液，使細胞(bao)密度5×106~1×107/mL，輕(qing)輕(qing)混(hun)勻(yun)，每(mei)支凍存(cun)管凍(dong)存(cun)1mL細胞(bao)懸(xuan)液，註(zhu)意凍(dong)存(cun)管(guan)做(zuo)好(hao)標(biao)識。將凍存(cun)管(guan)放(fang)入-80℃冰箱(xiang)，24 h後(hou)轉入(ru)液(ye)氮(dan)灌儲(chu)存(cun)。記(ji)錄凍存管位(wei)置以(yi)便下(xia)次拿(na)取(qu)。  

三、培養(yang)註(zhu)意事項(xiang) 

1. 收(shou)到(dao)細胞(bao)後首(shou)先(xian)觀察(cha)細胞(bao)瓶是(shi)否完(wan)好(hao)，培養(yang)液(ye)是(shi)否有漏(lou)液、渾(hun)濁等現(xian)象，若(ruo)有(you)上(shang)述(shu)現(xian)象 發生(sheng)請及時和(he)我們聯系。

2. 仔細閱(yue)讀細胞(bao)說明(ming)書(shu)，了解細胞(bao)相關(guan)信(xin)息，如細胞(bao)形態(tai)、所(suo)用培養(yang)基(ji)、血清比(bi)例、所(suo)需 細胞(bao)因子等，確(que)保(bao)細胞(bao)培養(yang)條(tiao)件(jian)壹(yi)致，若(ruo)由於(yu)培養(yang)條(tiao)件(jian)不壹(yi)致而(er)導(dao)致細胞(bao)出現(xian)問題(ti)，責(ze)任(ren)由 客戶(hu)自(zi)行承(cheng)擔。

3. 用 75%酒精(jing)擦拭細胞(bao)瓶表(biao)面，顯(xian)微鏡下(xia)觀察(cha)細胞(bao)狀態(tai)。因(yin)運輸問題(ti)，部(bu)分(fen)細胞(bao)由於(yu)溫度 變化(hua)及劇烈碰(peng)亡(wang)破(po)碎形成(cheng)碎片(pian)，是(shi)正常(chang)現(xian)象。觀察(cha)好(hao)細胞(bao)狀態(tai)後(hou)，75%酒精(jing)消毒瓶壁將 T25 瓶置於(yu) 37℃培養(yang)箱(xiang)放(fang)置 2-4h。

4. 貼(tie)壁細胞(bao)可以(yi)消化(hua)，懸(xuan)浮細胞(bao)直接(jie)混(hun)勻(yun)收(shou)集細胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，棄(qi)上(shang) 清。加 5 mL PBS 重(zhong)懸(xuan)細胞(bao)，再 900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，用新(xin)鮮(xian)的(de)培養(yang)基(ji)重(zhong)懸(xuan) 細胞(bao)，並接(jie)種到(dao)新(xin)的(de)培養(yang)瓶或培養(yang)皿(min)中，置於(yu)培養(yang)箱(xiang)中進行培養(yang)。

5. 請客戶(hu)用相同(tong)條件(jian)的(de)培養(yang)基(ji)用於(yu)細胞(bao)培養(yang)。

6. 建(jian)議(yi)客戶(hu)收(shou)到(dao)細胞(bao)後前 3 天各拍(pai)幾(ji)張(zhang)細胞(bao)照片(pian)，記錄細胞(bao)狀態(tai)，便於(yu)和(he)我司技術部(bu)溝(gou)通(tong) 交(jiao)流(liu)。由於(yu)運輸的(de)原因(yin)，個(ge)別(bie)敏感(gan)細胞(bao)會出現(xian)不穩(wen)定(ding)的(de)情(qing)況，請及時和(he)我們聯系，告知細胞(bao) 的(de)具體(ti)情況，以(yi)便我們的(de)技術人員(yuan)跟(gen)蹤回(hui)訪直(zhi)至問題(ti)解(jie)決。

7. 該細胞(bao)僅供(gong)科(ke)研(yan)使用。

8. 備(bei)註：運輸用的(de)培養(yang)基(ji) (灌液(ye)培養(yang)基(ji)) 不能再用來(lai)培養(yang)細胞(bao)，請換用按(an)照說明(ming)書(shu)細胞(bao)培 養(yang)條(tiao)件(jian)新(xin)配(pei)制(zhi)的(de)培養(yang)基(ji)來(lai)培養(yang)細胞(bao)。     收(shou)到(dao)細胞(bao)後第(di)壹(yi)次傳代建(jian)議(yi) 1：2 傳代 。

9. 註意：  1:2 傳代就是(shi) 1 個 T25 瓶傳 2 個(ge) T25 瓶或者(zhe) 2 個 6cm 皿(min)。不是(shi) 1 個 T25 瓶傳 2 個(ge)10cm 皿(min)。

公(gong)司正在(zai)出售(shou)的(de)產(chan)品：

Mafa： v-maf 肌腱(jian)膜纖(xian)維肉瘤(liu)癌基(ji)因(yin)同(tong)源物(wu)A抗體(ti) 小(xiao)鼠(shu)胰(yi)腺(xian)癌細胞(bao)(B類);Pan02

RAG(小(xiao)鼠(shu)腎腺(xian)癌細胞(bao)) 5×106cells/瓶×2 H08910(卵巢癌(ai)細胞(bao)) 大(da)鼠(shu)頭(tou)蛋白(bai)(NOG)ELISA試(shi)劑盒 vaspin ELASA Kit 大(da)鼠(shu)內(nei)臟(zang)脂肪特(te)異性絲(si)酸(suan)抑制劑 96T

MMP-10： 基(ji)質(zhi)金(jin)屬-10抗體(ti) 人胃(wei)癌細胞(bao);MGC-803

CF Protein Mouse 重(zhong)組(zu)小(xiao)鼠(shu) CF / Ciliary Neuroophic Factor 蛋白 (His 標簽) 大(da)鼠(shu)銅(tong)藍(lan)蛋(dan)白(CP)ELISA試(shi)劑盒 NGF- Beta(Human Nerve growth factor- Beta)  人的(de)神(shen)經生長(chang)因子-β 96T

Mtp53(N235K N239Y)： 突變(bian)型(xing)P53抗體(ti) HK3 Others Human 人 Hexokinase-3 / HK3 桿狀病(bing)毒-昆(kun)蟲(chong)細胞(bao)裂解(jie)液 (陽性對照(zhao))

ITGA11： 整合素α11抗體(ti) 人軟(ruan)骨細胞(bao)HC-a

CCL22 Protein Human 重(zhong)組(zu)人 CCL22 / MDC 蛋(dan)白 (His 標簽) 人保(bao)護素(CD59)ELISA試(shi)劑盒 CD122/IL-2RB(Imterleukm-2 Receptor beta) CD122/白介素2受(shou)體(ti)β鏈(lian)抗原 0.5mg

IGFL2： 胰(yi)島(dao)素(su)生(sheng)長(chang)因子樣家族(zu)成員(yuan)2抗體(ti) DPYS Others Human 人 DPYS / Dihydropyrimidinase 桿狀病(bing)毒-昆(kun)蟲(chong)細胞(bao)裂解(jie)液 (陽性對照(zhao))

人結(jie)腸粘膜上(shang)皮(pi)細胞(bao)培養(yang)基(ji) 100mL 人胞(bao)漿(jiang)型(xing)0脂酶(mei)A2(cPLA2)ELISA 試(shi)劑盒 MIP2 (myocardial ischemic preconditioning upregulated protein 2) 巨噬(shi)細胞(bao)炎癥蛋白(bai)2抗原 0.5mg

IDI2： 異戊(wu)烯基(ji)焦(jiao)0酸(suan)異構(gou)酶(mei)2抗體(ti) 羅(luo)猴(hou)胎(tai)腎(shen)細胞(bao);MA104 腦膠質(zhi)瘤(liu)細胞(bao)，C6細胞(bao) NCI-H446 [H446](小(xiao)細胞(bao)肺癌(ai)細胞(bao))

Li-7人肝(gan)癌細胞(bao)Phospho-P105 RB (Ser788)： 0酸化(hua)視網膜母細胞(bao)瘤(liu)相關(guan)蛋(dan)白1抗體(ti) TNFRSF14 Others Human 人 TNFRSF14 / HVEA / HVEM 人細胞(bao)裂解(jie)液 (陽性對照(zhao))

人少突膠(jiao)質(zhi)前體(ti)細胞(bao)RNAHOPC miRNA5 μg 大(da)鼠(shu)雌(ci)激(ji)素受(shou)體(ti)(ER)ELISA 試(shi)劑盒 PLP(Human proteolipid protein)  人蛋(dan)白脂質(zhi)蛋白抗體(ti) 非洲(zhou)綠(lv)猴(hou)腎(shen)細胞(bao);VERO C1008 (E6)

人胚(pei)肺細胞(bao)系;KuMA 人肝(gan)內(nei)膽管(guan)上(shang)皮(pi)細胞(bao)培養(yang)基(ji) 100mL 大(da)鼠(shu)雌(ci)激(ji)素(E)ELISA試(shi)劑盒 VMA(Human vanillylmandelic acid)  人垂(chui)草(cao)扁桃(tao)酸 96T

phospho-RPS6KB1(Ser427)： 0酸化(hua)核糖體(ti)S6蛋白激(ji)酶(mei)抗體(ti) 骨骼肌細胞(bao)Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)

MN-h, 小(xiao)鼠(shu)海馬(ma)神經元(yuan) 大(da)鼠(shu)雌(ci)激(ji)素(E)ELISA 試(shi)劑盒 GKRP(Human glucokinase regulatory protein)  人葡(pu)萄糖激酶(mei)調(tiao)節蛋(dan)白(bai) 96T