HT-1080人纖(xian)維(wei)肉(rou)瘤(liu)細胞(bao)

公(gong)司產品(pin)僅供(gong)科研研究使用(yong)、不(bu)得用(yong)於(yu)臨床診斷(duan)！

二、細胞(bao)培(pei)養(yang)操(cao)作(zuo)

1) 復蘇細胞(bao)：以下(xia)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)凍存(cun)處理僅供(gong)參(can)考，具體操作(zuo)步(bu)驟(zhou)以隨貨產品(pin)說(shuo)明(ming)書(shu)為主。將含(han)有(you)1 mL細胞(bao)懸(xuan)液(ye)的(de)凍存(cun)管在(zai) 37℃水(shui)浴中(zhong)迅(xun)速搖晃(huang)解(jie)凍，加(jia)4 mL培(pei)養(yang)基(ji)混合(he)均勻(yun)。在(zai)1000 rpm條件下離(li)心3 min，棄(qi)去(qu)上清液(ye)，加(jia)1-2 mL培(pei)養(yang)基(ji)後(hou)吹勻(yun)。然(ran)後(hou)將所有細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)加(jia)入(ru)含(han)適量(liang)培(pei)養(yang)基(ji)的(de)培(pei)養(yang)瓶中(zhong)培(pei)養(yang)過(guo)夜（或(huo)將細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)加(jia)入(ru)10 cm皿(min)中(zhong)，加(jia)入(ru)約(yue)8 mL培(pei)養(yang)基(ji)，培(pei)養(yang)過(guo)夜）。第二(er)天(tian)換液並(bing)檢查細胞(bao)密度(du)。

2) 細(xi)胞(bao)傳代(dai)：如果(guo)細胞(bao)密度(du)達(da) 80%-90%，即可進行(xing)傳(chuan)代(dai)培(pei)養(yang)。

    a、棄(qi)去(qu)培(pei)養(yang)上(shang)清(qing)，用(yong)不(bu)含(han)鈣(gai)、鎂離(li)子的(de)PBS潤洗(xi)細胞(bao)1-2次。        

    b、加(jia)1 mL消(xiao)化(hua)液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培(pei)養(yang)瓶中(zhong)，使消(xiao)化(hua)液浸潤所有細(xi)胞(bao)，將培(pei)養(yang)瓶置於(yu)37℃培(pei)養(yang)箱中(zhong)消(xiao)化(hua)1-2 min（視(shi)細(xi)胞(bao)情況而定），然(ran)後(hou)在顯微鏡下(xia)觀察(cha)細胞(bao)消化(hua)情況，若(ruo)細(xi)胞(bao)大部分變(bian)圓(yuan)並(bing)脫(tuo)落，迅(xun)速拿回操(cao)作(zuo)臺，輕(qing)敲(qiao)幾下(xia)培(pei)養(yang)瓶後(hou)加(jia)2-3ml培(pei)養(yang)基(ji)終(zhong)止(zhi)消(xiao)化(hua)。輕(qing)輕(qing)打(da)勻(yun)後(hou)裝入(ru)無菌(jun)離(li)心管中(zhong)，1000 rpm離(li)心5 min，棄(qi)去(qu)上清液(ye)，補加(jia)1-2 mL培(pei)養(yang)液(ye)後(hou)吹勻(yun)。        

     c、將細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)按(an)1:2比例分(fen)到(dao)新(xin)的(de)含(han)8 mL培(pei)養(yang)基(ji)的(de)新皿(min)中(zhong)或(huo)者(zhe)瓶中(zhong)，置(zhi)於(yu)培(pei)養(yang)箱中(zhong)培(pei)養(yang)。 3) 細(xi)胞(bao)凍存(cun)：待(dai)細(xi)胞(bao)生長(chang)狀態(tai)良(liang)好時(shi)，可進行(xing)細(xi)胞(bao)凍存(cun)。下面 T25 瓶為例；a、收(shou)集(ji)細胞(bao)及(ji)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)液(ye)，裝入(ru)無菌(jun)離(li)心管中(zhong)，1000 rpm條(tiao)件(jian)下(xia)離(li)心4 min，棄(qi)去(qu)上清液(ye)，用(yong)PBS清洗(xi)壹遍，棄(qi)盡(jin)PBS，進行(xing)細(xi)胞(bao)計(ji)數(shu)。

     b、根據(ju)細(xi)胞(bao)數(shu)量(liang)加(jia)入(ru)無血(xue)清細(xi)胞(bao)凍存(cun)液，使細(xi)胞(bao)密度(du)5×106~1×107/mL，輕(qing)輕(qing)混勻(yun)，每(mei)支(zhi)凍存(cun)管凍存(cun)1mL細胞(bao)懸(xuan)液(ye)，註(zhu)意凍存(cun)管做(zuo)好標(biao)識。將凍存(cun)管放(fang)入(ru)-80℃冰(bing)箱，24 h後(hou)轉入(ru)液氮灌儲(chu)存(cun)。記錄(lu)凍存(cun)管位(wei)置(zhi)以便(bian)下(xia)次拿取(qu)。  

三、培(pei)養(yang)註(zhu)意事項(xiang) 

1. 收到(dao)細胞(bao)後(hou)首先(xian)觀察(cha)細胞(bao)瓶是(shi)否完好(hao)，培(pei)養(yang)液(ye)是(shi)否有漏液、渾(hun)濁(zhuo)等現象(xiang)，若(ruo)有(you)上(shang)述現象(xiang) 發生(sheng)請(qing)及(ji)時(shi)和(he)我(wo)們(men)聯系(xi)。

2. 仔(zai)細(xi)閱(yue)讀(du)細胞(bao)說(shuo)明(ming)書(shu)，了(le)解(jie)細胞(bao)相關信息(xi)，如(ru)細胞(bao)形(xing)態(tai)、所用培(pei)養(yang)基(ji)、血(xue)清比(bi)例、所需 細胞(bao)因(yin)子等，確保(bao)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)條(tiao)件(jian)壹致，若(ruo)由(you)於(yu)培(pei)養(yang)條(tiao)件(jian)不(bu)壹致而(er)導(dao)致細(xi)胞(bao)出現問(wen)題，責(ze)任(ren)由(you) 客戶自(zi)行(xing)承(cheng)擔。

3. 用(yong) 75%酒(jiu)精擦拭(shi)細胞(bao)瓶表面，顯微鏡下(xia)觀察(cha)細胞(bao)狀態(tai)。因(yin)運(yun)輸(shu)問(wen)題，部(bu)分(fen)細胞(bao)由於(yu)溫度(du) 變(bian)化(hua)及(ji)劇(ju)烈(lie)碰亡破碎(sui)形(xing)成(cheng)碎(sui)片(pian)，是(shi)正(zheng)常現象(xiang)。觀察(cha)好細(xi)胞(bao)狀態(tai)後(hou)，75%酒(jiu)精消毒(du)瓶壁將 T25 瓶置於(yu) 37℃培(pei)養(yang)箱放(fang)置(zhi) 2-4h。

4. 貼(tie)壁細胞(bao)可以消(xiao)化(hua)，懸(xuan)浮(fu)細(xi)胞(bao)直接混勻(yun)收(shou)集(ji)細胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，棄(qi)上(shang) 清。加(jia) 5 mL PBS 重(zhong)懸(xuan)細(xi)胞(bao)，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，用新鮮(xian)的(de)培(pei)養(yang)基(ji)重(zhong)懸(xuan) 細(xi)胞(bao)，並(bing)接種到(dao)新(xin)的(de)培(pei)養(yang)瓶或培(pei)養(yang)皿(min)中(zhong)，置(zhi)於(yu)培(pei)養(yang)箱中(zhong)進(jin)行(xing)培(pei)養(yang)。

5. 請(qing)客戶用(yong)相同(tong)條件(jian)的(de)培(pei)養(yang)基(ji)用(yong)於(yu)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)。

6. 建(jian)議(yi)客戶收(shou)到細(xi)胞(bao)後(hou)前 3 天(tian)各拍(pai)幾(ji)張(zhang)細(xi)胞(bao)照片(pian)，記錄(lu)細胞(bao)狀態(tai)，便(bian)於(yu)和(he)我(wo)司(si)技(ji)術部(bu)溝(gou)通 交流。由於(yu)運(yun)輸(shu)的(de)原(yuan)因(yin)，個(ge)別(bie)敏(min)感(gan)細胞(bao)會(hui)出現不(bu)穩定(ding)的(de)情況，請(qing)及(ji)時(shi)和(he)我(wo)們(men)聯系(xi)，告(gao)知細(xi)胞(bao) 的(de)具體(ti)情況，以便(bian)我(wo)們(men)的(de)技(ji)術人員(yuan)跟蹤(zong)回(hui)訪直至問(wen)題解(jie)決。

7. 該(gai)細胞(bao)僅供(gong)科研使用(yong)。

8. 備(bei)註(zhu)：運(yun)輸(shu)用(yong)的(de)培(pei)養(yang)基(ji) (灌液(ye)培(pei)養(yang)基(ji)) 不(bu)能再(zai)用(yong)來(lai)培(pei)養(yang)細(xi)胞(bao)，請(qing)換用按(an)照說(shuo)明(ming)書(shu)細(xi)胞(bao)培(pei) 養(yang)條(tiao)件(jian)新(xin)配(pei)制的(de)培(pei)養(yang)基(ji)來(lai)培(pei)養(yang)細(xi)胞(bao)。     收到(dao)細(xi)胞(bao)後(hou)第壹次傳(chuan)代(dai)建(jian)議(yi) 1：2 傳代(dai) 。

9. 註(zhu)意：  1:2 傳代(dai)就是(shi) 1 個(ge) T25 瓶傳 2 個(ge) T25 瓶或者(zhe) 2 個 6cm 皿。不是(shi) 1 個(ge) T25 瓶傳 2 個(ge)10cm 皿(min)。

公(gong)司正(zheng)在出售的(de)產品(pin)：

Megsin： 絲(si)酸(suan)蛋白酶抑(yi)制劑(ji)B7抗(kang)體(ti) 中(zhong)國(guo)倉鼠(shu)卵(luan)巢細胞(bao)(亞(ya)系(xi)克隆(long));CHO-HCV-E1

IL36G Protein Human 重組(zu)人 IL36G / IL1F9 蛋白 (aa 18-169, His 標簽(qian)) 大鼠(shu)纖(xian)維(wei)蛋白原(yuan)降解(jie)產物(wu)(FDP)ELISA試劑(ji)盒 P-cad(Human Placenta Cadherin)  人P鈣黏(nian)蛋白/胎(tai)盤鈣黏(nian)蛋白 96T

Mfn1： 線粒體融合蛋白1抗(kang)體(ti) ELK1 Others Human 人 ELK1 桿狀病(bing)毒(du)-昆蟲(chong)細(xi)胞(bao)裂解(jie)液 (陽(yang)性對(dui)照)

大鼠(shu)牙(ya)細胞(bao)培(pei)養(yang)基(ji) 100mL 大鼠(shu)纖(xian)維(wei)蛋白原(yuan)γ鏈(Fgg)ELISA試(shi)劑(ji)盒 MUC5AC(Mouse Mucin-5 subtype AC)  小(xiao)鼠(shu)粘蛋白/粘液(ye)素5AC 96T

MGMT： O6甲基DNA甲(jia)基轉移(yi)酶抗(kang)體(ti) QGY-7701細(xi)胞(bao)，肝癌(ai)細(xi)胞(bao) 人宮頸(jing)上(shang)皮(pi)細(xi)胞(bao)癌,Ski細(xi)胞(bao) KM小(xiao)鼠(shu)子瘤(liu)株;U27

MDBK(牛腎(shen)細(xi)胞(bao)) 5×106cells/瓶×2 小(xiao)鼠(shu) EphB2 / Hek5 人細胞(bao)裂解(jie)液 (陽(yang)性對(dui)照) 人對(dui)基苯(PABA)ELISA 試(shi)劑(ji)盒 GFP 綠(lv)色(se)熒光(guang)蛋白 0.5mg

Hepatitis E Virus ORF3： 戊(wu)型肝(gan)炎病(bing)毒(du)抗(kang)體(ti) 腦(nao)膜(mo)細胞(bao)生長(chang)添加(jia)物(wu)MenCGS

CCL20 Protein Human 重組(zu)人 CCL20 / MIP-3 alpha 蛋白 (His 標簽(qian)) 人對(dui)環0酰(xian)胺(CTX)ELISA 試(shi)劑(ji)盒 GITR (glucocorticoidinduced tumor necrosis factor receptor) 糖皮質激(ji)素誘(you)導壞死因(yin)子受體抗(kang)原(yuan) 0.5mg

HRG1： 神經(jing)調節蛋白1抗(kang)體(ti) IL6ST Others Mouse 小(xiao)鼠(shu) IL6ST / CD130 CHO細(xi)胞(bao)裂解(jie)液 (陽(yang)性對(dui)照)

人淋巴內皮(pi)細胞(bao)培(pei)養(yang)基(ji) 100mL 人端粒酶(TE)ELISA 試劑(ji)盒 GLI1(GLI-Kruppel family member 1) 下遊轉(zhuan)錄(lu)因(yin)子Gli1蛋白抗(kang)原(yuan) 0.5mg

HT-1080人纖(xian)維(wei)肉(rou)瘤(liu)細胞(bao)Phospho-PLK1 (Ser137)： 0酸化(hua)絲(si)/蘇酸蛋白激(ji)酶Plk1抗(kang)體(ti) 原(yuan)代(dai)骨細(xi)胞(bao)特制基礎(chu)培(pei)養(yang)基(ji)Many types of cells包(bao)裝：500/250/100

DKK1 Protein Rhesus 重組(zu)恒河猴(hou) DKK-1 / Dkk1 蛋白 (256 Asn/Gln, His 標簽(qian)) 大鼠(shu)多配(pei)體蛋白聚糖(tang)4(SDC4)ELISA試劑(ji)盒 ADM(Human adrenomedullin)  人腎(shen)上(shang)腺髓質素 96T

Phospho-PNK1 (Ser114 + Thr118)： 0酸化(hua)多聚(ju)合苷(gan)酸(suan)激(ji)酶30酸(suan)化(hua)酶抗(kang)體(ti) SCG2 Others Human 人 SCG2 / Secretogranin II 人細胞(bao)裂解(jie)液 (陽(yang)性對(dui)照)

MX-1 人癌細(xi)胞(bao) 大鼠(shu)多配(pei)體蛋白聚糖(tang)1(SDC1)ELISA試劑(ji)盒 IL-4  大鼠(shu)白介(jie)素4 96T

PSD93： 突觸後(hou)密度(du)蛋白93抗(kang)體(ti) G-401細(xi)胞(bao)，人腎(shen)癌(ai)Wilms 人癌細(xi)胞(bao),MX-1細胞(bao) 周細(xi)胞(bao)生長(chang)添加(jia)物(wu)PGS