NHS活(huo)化(hua)磁珠(zhu)

公司產(chan)品僅供(gong)科(ke)研研究(jiu)使用(yong)、不(bu)得用(yong)於臨(lin)床(chuang)診斷(duan)！

商(shang)品屬性(xing)

NHS-Activated Magnetic Beads 是均(jun)勻(yun)的，表(biao)面(mian)覆(fu)蓋有高(gao)密(mi)度(du)NHS（N-羥基琥(hu)珀 酰(xian)亞(ya)胺(an)） 官能(neng)團(tuan)的磁珠(zhu)。磁珠(zhu)通(tong)過(guo)形(xing)成(cheng)穩(wen)定的酰(xian)胺(an)鍵方式(shi)，快速(su)、高(gao)效的(de)共價(jia)結(jie)合任(ren)何含(han)有伯胺(an)的配(pei) 體(圖 1）。本(ben)款(kuan)磁珠(zhu)可(ke)以(yi)在(zai)偶(ou)聯(lian)條(tiao)件(jian)下快速(su)完成(cheng)反應（室溫(wen) pH 6.5-9 下 15-30 分(fen) 鐘(zhong)，4℃ 下(xia) 4 小(xiao)時），且不(bu)需要危(wei)險化(hua)學品。 NHS-activated Magnetic Beads 適(shi)於結(jie)合大(da)分(fen)子(zi)蛋(dan)白(bai)。 Long-arm NHS-activated Magnetic Beads 被(bei)推薦用(yong)於結(jie)合小(xiao)肽分(fen)子(zi)， 因為(wei)其長(chang)臂（21-原(yuan)子） 的(de)親水連(lian)接(jie)基團(tuan)可(ke)以(yi)減少位(wei)阻現(xian)象(xiang)。 NHS-activated Magnetic Beads 可(ke)以(yi)地作為(wei)親和樹(shu)脂進(jin)行親和純化(hua)，將(jiang)分(fen)子、 細(xi)胞和 部分(fen)細(xi)胞提取物進行(xing)提煉純化(hua)。在(zai)與配(pei)體結(jie)合後(hou)，將(jiang)磁珠(zhu)添加到含(han)有目標(biao)分(fen)子(zi)的(de)樣品中，然(ran) 後(hou)混(hun)合、孵(fu)育、洗滌和洗脫目標(biao)分(fen)子(zi)（圖2）。

產(chan)品特點及(ji)優勢：

·預(yu)活(huo)化(hua)即(ji)用(yong)型磁珠(zhu)
·便於使用(yong)
·在(zai)pH7.4，4℃-25℃條(tiao)件(jian)下可(ke)以(yi)快速(su)偶(ou)聯
·穩定的共(gong)價(jia)鍵，低水(shui)平(ping)的(de)配(pei)體泄(xie)漏(lou)
·可(ke)重復使用(yong)的免疫(yi)親和基質(zhi)
·極低的(de)非特異性結(jie)合率
·用(yong)途(tu)：用(yong)於純化(hua)抗體，蛋(dan)白(bai)質(zhi)/肽，DNA / RNA;細(xi)胞篩(shai)選(xuan)、免(mian)疫(yi)沈澱
操作步驟(zhou)

提示：
強烈建(jian)議(yi)在(zai)實(shi)驗(yan)過(guo)程(cheng)中進(jin)行(xing)滴定優化(hua)，以(yi)確(que)定每(mei)個實(shi)驗(yan)中(zhong)應用(yong)的磁珠(zhu)數(shu)量(liang)。該(gai)協(xie)議(yi)可(ke)以(yi)相(xiang)應地放大(da)和縮小(xiao)。避(bi)免使用(yong)含(han)有 tris 或(huo)其他含(han)有伯胺(an)類試劑(ji)的(de)緩沖(chong)液，因為(wei)它(ta)們與預(yu)期(qi)的偶(ou)聯反應競爭。
1.將(jiang)適(shi)量(liang)的(de)珠(zhu)子(zi)轉(zhuan)移(yi)到離心(xin)管中(zhong)。將(jiang)管(guan)放在(zai)磁力分(fen)離器(qi)上(shang) 1-3 分鐘。當磁珠(zhu)沈(chen)澱時， 去(qu)除上清(qing)液。 

2.取下試管(guan)，加入 5 倍(bei)磁珠(zhu)溶液體積的 PBS 緩(huan)沖(chong)液，通過震(zhen)蕩重新(xin)懸浮磁珠(zhu)，渦(wo)旋(xuan) 30 秒(miao)。將(jiang)試管(guan)至(zhi)於室溫(wen)環境(jing) 1-3 分(fen)鐘(zhong)，再將(jiang)管(guan)放在(zai)磁力分(fen)離器(qi)上(shang) 1-3 分鐘。當磁珠(zhu)沈(chen)澱 時，去(qu)除上清(qing)液。 

3.重復步驟(zhou) 2 兩次。 

4.向含(han)有目標(biao)蛋(dan)白(bai)質(zhi)的粗(cu)樣(yang)品中添加洗滌過的磁珠(zhu)，並(bing)在(zai)室溫(wen)或(huo)所(suo)需溫(wen)度下(xia)溫(wen)浴 1-2 小(xiao)時 （溫(wen)度越(yue)低，培養時間越(yue)長(chang)）。提示：強烈建(jian)議(yi)進(jin)行(xing)滴定實驗(yan)以(yi)優(you)化(hua)培養時間。因為(wei)孵(fu)化(hua) 的時間太(tai)長(chang)可(ke)能(neng)會(hui)導(dao)致很高(gao)的(de)背(bei)景(jing)。 

5.用(yong) 5 倍磁珠(zhu)體積的 PBS 緩(huan)沖(chong)液或(huo) 1M NaCl 清(qing)洗磁珠(zhu)，直到 280nm 處洗脫液的吸 光(guang)度接(jie)近(jin)背(bei)景(jing)水平(ping)（OD 280<0.05）。提示：添加更高(gao)濃度的鹽、非離子洗滌劑和還(hai)原(yuan)劑也 可(ke)能(neng)會(hui)降(jiang)低非特異性背(bei)景(jing)。例如(ru)，向洗滌緩沖(chong)液中添加 NaCl（濃度為(wei) 1-1.5 M）、0.1-0.5% 的(de)非離子洗滌劑，如 TritonX-100 或(huo) Tween-20，以(yi)及(ji)還(hai)原(yuan)劑，如(ru) DTT 或(huo) TCEP（我們通 常(chang)使用(yong) 3mM）。 6.通過適(shi)當(dang)的(de)方法(fa)，如(ru)低 pH（2-4）、高(gao) pH（10-12）、高(gao)鹽(yan)、高(gao)溫(wen)、親和洗脫或(huo) SDS-PAGE 上樣緩沖(chong)液中煮(zhu)沸(fei)，洗脫目標(biao)蛋(dan)白(bai)。

公司正(zheng)在(zai)出(chu)售的(de)產(chan)品：