耐(nai)鹽(yan)芽孢(bao)桿菌(jun)說明書(shu)

耐(nai)鹽(yan)芽孢(bao)桿菌(jun)說明書(shu)培養溫度：  35-37℃　英(ying)文(wen)名(ming)稱(cheng)：Bacillus subtilis　培養保藏(zang)法(fa):培養後於(yu)4—6℃冰箱內(nei)保存。

實驗內(nei)容：
1. 耐(nai)鹽(yan)芽孢(bao)桿菌(jun)說明書(shu)稱量→溶(rong)化→調(tiao)pH→過(guo)濾→分(fen)裝→加(jia)塞→包(bao)紮→滅(mie)菌(jun)→無(wu)菌(jun)檢查 
2.幹熱(re)滅(mie)菌(jun)：裝(zhuang)入(ru)待滅(mie)菌(jun)物品(pin)→升(sheng)溫(wen)→恒(heng)溫(wen)→降(jiang)溫(wen)→開(kai)箱取物 
3.高(gao)壓(ya)蒸(zheng)汽(qi)滅(mie)菌(jun)：加(jia)水(shui)→裝(zhuang)物品(pin)→加(jia)蓋(gai)→加熱(re)→排(pai)冷空氣(qi)→加壓(ya)→恒(heng)壓(ya)→降(jiang)壓(ya)回(hui)零→排(pai)汽(qi)→取物→無(wu)菌(jun)檢查 
4.過(guo)濾除(chu)菌(jun)：組(zu)裝(zhuang)滅(mie)菌(jun)→連(lian)接(jie)→壓(ya)濾(lv)→無(wu)菌(jun)檢查→清洗(xi)滅(mie)菌(jun)

保存方(fang)法：
 耐(nai)鹽(yan)芽孢(bao)桿菌(jun)說明書(shu)低溫(wen)存法(fa)
①簡單保存法(fa)，將瓊脂(zhi)斜(xie)面(mian)孢子(zi)培養物、菌(jun)絲(si)懸浮液(ye)以及(ji)由(you)麩皮(pi)、大米(mi)、小(xiao)米等(deng)谷物原料(liao)制(zhi)成的(de)孢(bao)子(zi)培養物置(zhi)於(yu)4℃冰箱保存,保存時(shi)間(jian)不超(chao)過(guo)1～2個月(yue)，若(ruo)將谷物原料(liao)制(zhi)備的(de)孢(bao)子(zi)瓶抽(chou)真空並(bing)在棉(mian)塞上浸蠟,以(yi)隔絕(jue)外(wai)界(jie)空氣(qi)和水汽(qi),保持(chi)時間(jian)可達3～4個月(yue)；②液(ye)氮(dan)超(chao)低溫保存法(fa)，將生長(chang)穩(wen)定期的(de)細(xi)胞(bao)懸浮在10%甘(gan)油或其他低(di)冰點液(ye)體(ti)中，密(mi)封(feng)於(yu)安(an)瓿管(guan)內(nei)，然後(hou)控(kong)制(zhi)冷卻速(su)度，使安(an)瓿管(guan)溫度逐步(bu)下(xia)降至(zhi) -35℃時，即(ji)可置於(yu)-150～-196℃的(de)液(ye)氮(dan)罐中(zhong)保存。大多數(shu)微生(sheng)物如(ru)病毒、噬(shi)菌(jun)體(ti)、多種細(xi)菌(jun)、放(fang)線(xian)菌(jun)、酵(jiao)母(mu)和原蟲(chong)、特(te)別是(shi)壹(yi)些用(yong)冷凍幹燥(zao)法(fa)有困難(nan)的(de)微生(sheng)物，都(dou)可用此(ci)法保存。
脫(tuo)水存(cun)法(fa)
①沙(sha)土保存法(fa)，能產孢子(zi)的(de)細(xi)菌(jun)、放(fang)線(xian)菌(jun)及(ji)黴菌(jun)可采用此(ci)法保存,即(ji)將沙和土以3:2比(bi)例(li)混合，經稀(xi)酸(suan)處理(li)洗(xi)凈(jing)過(guo)篩(shai),裝(zhuang)入(ru)小試(shi)管(guan)內(nei),裝置(zhi)高(gao)度為(wei)1cm;滅(mie)菌(jun)2～3次(ci)，烘幹後即(ji)可將在斜(xie)面(mian)培養基上生(sheng)長(chang)良好(hao)的(de)孢(bao)子(zi)，用無(wu)菌(jun)蒸(zheng)餾(liu)水(shui)2～2.5ml制(zhi)成孢子(zi)懸液(ye)，吸取少(shao)許加入(ru)沙土管(guan)中，經真(zhen)空抽(chou)幹，外(wai)觀(guan)呈(cheng)松散(san)狀態(tai),於(yu)4℃冰箱保存，保存期(qi)可達5～7年。
② 冷凍幹燥(zao)法(fa),將孢子(zi)懸浮液(ye)與保護劑(ji)（壹(yi)般用脫(tuo)脂牛奶或血清）相(xiang)混合，放(fang)在安(an)瓿管(guan)內(nei)於(yu)-20～-30℃的(de)乙(yi)醇(chun)浴(yu)中速(su)凍。然(ran)後(hou)，在低(di)溫(wen)下用真(zhen)空泵抽幹，並用(yong)五氧化二(er)磷(lin)或幹冰使水(shui)汽(qi)結(jie)凍，熔(rong)封(feng)安(an)瓿管(guan)，於(yu)低溫(wen)下保存。保存期(qi)可達5～10年之久(jiu)。
③ 石(shi)蠟油(you)封(feng)存法(fa)，在斜(xie)面(mian)菌(jun)種培養物上,倒(dao)上滅(mie)菌(jun)後(hou)的(de)石(shi)蠟油(you)，高(gao)出(chu)斜(xie)面(mian)1cm，於(yu)4℃冰箱或低溫幹燥(zao)處保存，此(ci)法不適(shi)用於(yu)能利(li)用(yong)石(shi)蠟油(you)作碳(tan)源的(de)微生(sheng)物，保存期(qi)為(wei)壹(yi)年以(yi)上。
以(yi)下(xia)是(shi) 耐(nai)鹽(yan)芽孢(bao)桿菌(jun)說明書(shu)的(de)相(xiang)關產品：
玫(mei)瑰(gui)產色(se)鏈(lian)黴菌(jun)　Streptomycesroseochromogenes(Jensen)WaksmanetHenrici

珊(shan)瑚(hu)色(se)諾(nuo)卡氏(shi)菌(jun)　Nocardiacoralline(Bergeyetal.)WaksmanetHenrici

雲(yun)芝(zhi)　CoriolusVersicolor(L.:Fr.)Quel

雞(ji)腿(tui)蘑（毛(mao)頭鬼傘(san)）　Coprinuscomatus(Mull.exFr.)Gray

忍(ren)冬(dong)木層孔菌(jun)　Phellinuslonicerinus(Bond)BondetSing.

蜜(mi)粘(zhan)褶(zhe)菌(jun)=革(ge)襇菌(jun)　Gloeophyllumtrabeum(Pers.)Murr.=Lenzitestrabea(Pers.)Fr.

臥(wo)孔菌(jun)　Poriasp.

蛹(yong)蟲草(cao)（北(bei)冬(dong)蟲(chong)夏草、北蟲草(cao)）　Cordycepsmillitaris(L.exFr.)Link

杏(xing)鮑(bao)菇(gu)　Pleurotuseryugii(DC.:Fr.)Quel.

平蓋(gai)靈芝(zhi)（樹舌(she)）　Ganodermaapplanatum(Pers.exWullr)Pat.
500毫升(sheng)低糖，液(ye)體(ti)

M9肉湯250克M9 BrothBR

F2營養混(hun)合物10升(sheng)F2 Nutrient Mixture含(han)L-谷(gu)酰，不(bu)含(han)NaHCO3

500毫(hao)升(sheng)不(bu)含(han)谷(gu)酰

M199培養基10升M199 Medium細(xi)胞(bao)培養用

1640培養基10升RPMI 1640含(han)L-谷(gu)酰，不(bu)含(han)鈉

M9CA肉湯250克M9CA BrothBR

M63肉湯250克M63 BrothBR

500毫(hao)升(sheng)含(han)谷(gu)酰

DMEM/F12培養基10升F2（DMEM）BR

10升(sheng)無(wu)紅(hong)，含(han)L-谷(gu)酰

500毫(hao)升(sheng)無血清，含(han)雙(shuang)抗
 耐(nai)鹽(yan)芽孢(bao)桿菌(jun)說明書(shu)羅漢(han)果提(ti)取物#3 Luo han guo (Siraitia grosvenori) Fruit Extract #3 BXL(REQUEST QUOTE)　1mg

羅(luo)漢(han)果(guo)提取物#2 Luo han guo (Siraitia grosvenori) Fruit Extract #2 BXL(REQUEST QUOTE)　1mg

羅(luo)漢(han)果(guo)提取物#1 Luo han guo (Siraitia grosvenori) Fruit Extract #1 BXL(REQUEST QUOTE)　1mg

路(lu)路(lu)通酸 BETULONIC ACID(P)　100mg

路(lu)路(lu)通酸 BETULONIC ACID(P)　25mg

路(lu)路(lu)通酸 BETULONIC ACID(P)　10mg

蘆(lu)薈寧(ning) ALOENIN A(SH)　5mg
基本概(gai)念：
(1)  耐(nai)鹽(yan)芽孢(bao)桿菌(jun)說明書(shu)菌(jun)群：由(you)多種細(xi)菌(jun)混(hun)合組(zu)成(cheng)的(de)相(xiang)對(dui)穩(wen)定的(de)細(xi)菌(jun)群體(ti)，具有某些共同性狀。如(ru)大腸菌(jun)群包(bao)括大腸桿菌(jun)、產氣(qi)腸細菌(jun)及(ji)他(ta)們(men)之間(jian)的(de)過(guo)渡類(lei)型。
(2) 菌(jun)屬(shu)：菌(jun)種的(de)上壹(yi)級分(fen)類(lei)，通常性狀相(xiang)近(jin)、親緣關系(xi)密(mi)切(qie)的(de)若(ruo)幹菌(jun)種組(zu)成(cheng)壹個菌(jun)屬(shu)，如(ru)芽孢(bao)桿菌(jun)屬(shu)、葡(pu)萄(tao)球菌(jun)屬(shu)、乳(ru)桿(gan)菌(jun)屬(shu)等(deng)。
(3)是(shi)細(xi)菌(jun)基(ji)本的(de)分(fen)類(lei)單位(wei)，通常指表型特(te)征相(xiang)似(si)、親緣關系(xi)接(jie)近(jin)的(de)壹(yi)類(lei)細菌(jun)群體(ti)，與同屬(shu)內(nei)其他(ta)種有著明(ming)顯(xian)差異；當(dang)涉及到(dao)細菌(jun)保存時(shi)，菌(jun)種是(shi)指細菌(jun)的(de)種子(zi)（用來(lai)保存）資(zi)源。
(4) 菌(jun)型(xing)：同(tong)壹(yi)菌(jun)種的(de)不(bu)同(tong)細(xi)菌(jun)，在某些方(fang)面存(cun)在較(jiao)小差(cha)異的(de)為(wei)同(tong)壹(yi)菌(jun)型(xing)，通常壹個菌(jun)種內(nei)的(de)細(xi)菌(jun)可以分(fen)為(wei)多種不(bu)同的(de)菌(jun)型(xing)。
(5) 菌(jun)株(zhu)：由(you)壹個獨立(li)分(fen)離(li)的(de)單(dan)細(xi)胞(bao)系培養而(er)成(cheng)的(de)純遺(yi)傳型(xing)群體(ti)及其(qi)壹切(qie)後(hou)代(dai)，壹(yi)種微生(sheng)物的(de)每(mei)壹(yi)個不同(tong)來(lai)源的(de)純培養物均(jun)可稱為(wei)該(gai)菌(jun)種的(de)壹(yi)個菌(jun)株(zhu)。