ELISA試劑盒(he)單克(ke)隆抗(kang)體制(zhi)備(bei)時(shi)很多朋友(you)會(hui)遇(yu)到這樣(yang)的問(wen)題，即咱(zan)們(men)免(mian)疫用(yong)的蛋(dan)白為原(yuan)核(he)表(biao)達蛋(dan)白(bai)而意(yi)圖蛋(dan)白(bai)是真(zhen)核(he)蛋白(bai)或病(bing)毒等(deng)，由(you)於(yu)沒(mei)有規範品(pin)咱(zan)們(men)做出(chu)來的抗(kang)體沒(mei)有辦(ban)法用(yong)規(gui)範品(pin)來驗(yan)證(zheng)是否(fou)與(yu)其發作(zuo)反(fan)響，終(zhong)究(jiu)導致咱(zan)們(men)做出(chu)的是無(wu)用(yong)抗(kang)體。以(yi)下(xia)內容為試(shi)驗室(shi)技(ji)能總(zong)結(jie)的幾種(zhong)辦(ban)法，期望對(dui)大(da)家有所協(xie)助。

壹、若要檢測的抗(kang)原(yuan)為某種新的病(bing)毒

ELISA試(shi)劑(ji)盒辦(ban)法：1、很多做出(chu)該(gai)病(bing)毒某個蛋白(bai)的單(dan)克(ke)隆抗(kang)體；

2、很(hen)多收集(ji)該(gai)病(bing)毒疑(yi)似(si)感染動物或人(ren)血(xue)液，用(yong)PCR的辦(ban)法進壹(yi)步斷定(ding)每(mei)份血(xue)液是否(fou)真(zhen)的有該(gai)病(bing)毒存在；

3、將妳做出(chu)的很(hen)多抗(kang)體中的壹(yi)個做符(fu)號作(zuo)為(wei)符號抗(kang)體，其他(ta)壹切(qie)抗(kang)體作(zuo)為(wei)包被(bei)抗(kang)體，檢(jian)測第二步(bu)中斷定(ding)陽(yang)性(xing)的血(xue)清(qing)，成(cheng)果(guo)與(yu)陰(yin)性(xing)血清(qing)做比(bi)照，並(bing)畫(hua)出(chu)點(dian)狀(zhuang)分(fen)布圖。若陽性(xing)血清(qing)大(da)部分(fen)的點(dian)在(zai)陰性(xing)血清(qing)之上祝賀妳找到(dao)配(pei)對抗(kang)體了；若成(cheng)果(guo)相差(cha)不大(da)，請從(cong)頭符(fu)號壹株(zhu)抗(kang)體做相同試(shi)驗。

二、若要檢測抗(kang)原(yuan)為某壹細胞因子

ELISA試劑(ji)盒(he)辦(ban)法：1、通過(guo)超表(biao)達的辦(ban)法樹立(li)安穩表(biao)達的細(xi)胞系，留(liu)意要在(zai)意圖蛋(dan)白(bai)上加相應(ying)的標(biao)簽，以(yi)便(bian)純化(hua)。若僅(jin)僅(jin)是找(zhao)到配(pei)對抗(kang)體則不需求純化(hua)甚(shen)至不(bu)需求樹立(li)安穩表(biao)達的細(xi)胞系瞬時轉染就可(ke)完成(cheng)，若要進壹(yi)步作(zuo)出(chu)規範曲(qu)線請純化(hua)。

2、 將細(xi)胞系樹立(li)後(hou)，咱(zan)們(men)就可(ke)以(yi)拿(na)到規範品(pin)了，做配(pei)對作(zuo)業(ye)就相應(ying)簡(jian)略(lve)。

3、若該(gai)種細胞因子可(ke)有某種陽性(xing)影響物很多(duo)影(ying)響而來(lai)，也(ye)可(ke)不做細(xi)胞系。用(yong)陽(yang)性(xing)影響物影響(xiang)，咱(zan)們(men)細胞影響物的上(shang)清(qing)液(ye)來做規(gui)範品(pin)也可(ke)。