MDA-MB-415人(ren)乳腺癌(ai)細(xi)胞(bao)

公(gong)司(si)產(chan)品僅(jin)供科(ke)研(yan)研(yan)究(jiu)使用、不(bu)得用於臨床(chuang)診斷！

二(er)、細胞(bao)培(pei)養操作

1) 復蘇細(xi)胞(bao)：以(yi)下(xia)細胞(bao)培(pei)養凍存(cun)處理(li)僅供(gong)參考，具體操作步驟(zhou)以(yi)隨貨(huo)產品說明書(shu)為主(zhu)。將(jiang)含有(you)1 mL細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)的(de)凍存(cun)管(guan)在(zai) 37℃水(shui)浴(yu)中(zhong)迅(xun)速(su)搖晃(huang)解凍，加(jia)4 mL培(pei)養基混(hun)合(he)均勻(yun)。在(zai)1000 rpm條(tiao)件下離(li)心3 min，棄(qi)去(qu)上清(qing)液，加(jia)1-2 mL培(pei)養基後(hou)吹(chui)勻(yun)。然(ran)後(hou)將(jiang)所(suo)有細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)加(jia)入含(han)適(shi)量培(pei)養基的(de)培(pei)養瓶中(zhong)培(pei)養過夜（或(huo)將(jiang)細胞(bao)懸(xuan)液(ye)加(jia)入10 cm皿中(zhong)，加(jia)入約(yue)8 mL培(pei)養基，培(pei)養過夜）。第(di)二天換(huan)液(ye)並(bing)檢查細胞(bao)密度(du)。

2) 細(xi)胞(bao)傳代(dai)：如(ru)果(guo)細胞(bao)密度(du)達(da) 80%-90%，即可進行(xing)傳代(dai)培(pei)養。

    a、棄去(qu)培(pei)養上清(qing)，用不(bu)含鈣(gai)、鎂離(li)子的(de)PBS潤洗細(xi)胞(bao)1-2次。        

    b、加(jia)1 mL消化(hua)液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培(pei)養瓶中(zhong)，使(shi)消(xiao)化(hua)液浸(jin)潤所(suo)有細(xi)胞(bao)，將(jiang)培(pei)養瓶置(zhi)於(yu)37℃培(pei)養箱中(zhong)消(xiao)化(hua)1-2 min（視(shi)細胞(bao)情(qing)況而(er)定），然(ran)後(hou)在(zai)顯(xian)微(wei)鏡下(xia)觀(guan)察細(xi)胞(bao)消(xiao)化(hua)情(qing)況，若細(xi)胞(bao)大(da)部分變圓(yuan)並(bing)脫落(luo)，迅速拿回操作臺(tai)，輕(qing)敲(qiao)幾(ji)下(xia)培(pei)養瓶後(hou)加(jia)2-3ml培(pei)養基終(zhong)止消(xiao)化。輕(qing)輕(qing)打(da)勻(yun)後(hou)裝(zhuang)入(ru)無(wu)菌離(li)心管(guan)中(zhong)，1000 rpm離(li)心5 min，棄(qi)去(qu)上清(qing)液，補(bu)加(jia)1-2 mL培(pei)養液後(hou)吹(chui)勻(yun)。        

     c、將(jiang)細胞(bao)懸(xuan)液(ye)按(an)1:2比例(li)分到(dao)新的含(han)8 mL培(pei)養基的(de)新皿中(zhong)或(huo)者瓶中(zhong)，置(zhi)於(yu)培(pei)養箱中(zhong)培(pei)養。 3) 細胞(bao)凍存(cun)：待細(xi)胞(bao)生(sheng)長狀(zhuang)態(tai)良(liang)好(hao)時(shi)，可進行(xing)細(xi)胞(bao)凍存(cun)。下面(mian) T25 瓶(ping)為(wei)例(li)；a、收集(ji)細(xi)胞(bao)及(ji)細(xi)胞(bao)培(pei)養液，裝(zhuang)入(ru)無(wu)菌離(li)心管(guan)中(zhong)，1000 rpm條(tiao)件下離(li)心4 min，棄(qi)去(qu)上清(qing)液，用PBS清(qing)洗壹遍(bian)，棄盡(jin)PBS，進(jin)行(xing)細(xi)胞(bao)計(ji)數。

     b、根(gen)據細(xi)胞(bao)數(shu)量加(jia)入無(wu)血(xue)清(qing)細胞(bao)凍存(cun)液，使(shi)細胞(bao)密度(du)5×106~1×107/mL，輕(qing)輕(qing)混(hun)勻(yun)，每(mei)支凍存(cun)管(guan)凍存(cun)1mL細胞(bao)懸(xuan)液(ye)，註(zhu)意(yi)凍存(cun)管(guan)做(zuo)好標識(shi)。將(jiang)凍存(cun)管(guan)放入(ru)-80℃冰(bing)箱，24 h後(hou)轉(zhuan)入液(ye)氮(dan)灌(guan)儲(chu)存(cun)。記(ji)錄(lu)凍存(cun)管(guan)位(wei)置(zhi)以(yi)便(bian)下(xia)次拿取。  

三、培(pei)養註(zhu)意(yi)事項 

1. 收到(dao)細胞(bao)後(hou)首先觀(guan)察細(xi)胞(bao)瓶(ping)是否(fou)完(wan)好，培(pei)養液是否(fou)有漏液(ye)、渾(hun)濁等(deng)現象(xiang)，若有(you)上(shang)述現(xian)象(xiang) 發生(sheng)請(qing)及時(shi)和我(wo)們聯系(xi)。

2. 仔細閱讀細(xi)胞(bao)說明書(shu)，了解細(xi)胞(bao)相(xiang)關信(xin)息，如(ru)細(xi)胞(bao)形(xing)態(tai)、所(suo)用培(pei)養基、血(xue)清(qing)比例(li)、所(suo)需 細(xi)胞(bao)因子等(deng)，確(que)保細胞(bao)培(pei)養條件壹致(zhi)，若由於培(pei)養條件不(bu)壹致(zhi)而(er)導致(zhi)細(xi)胞(bao)出(chu)現(xian)問(wen)題，責任(ren)由 客戶(hu)自(zi)行(xing)承(cheng)擔。

3. 用 75%酒(jiu)精(jing)擦(ca)拭細(xi)胞(bao)瓶(ping)表(biao)面(mian)，顯(xian)微(wei)鏡下(xia)觀(guan)察細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態(tai)。因運輸問(wen)題，部分細胞(bao)由於溫度(du) 變化及(ji)劇(ju)烈碰(peng)亡破(po)碎(sui)形(xing)成(cheng)碎(sui)片，是正(zheng)常現象(xiang)。觀(guan)察好(hao)細胞(bao)狀(zhuang)態(tai)後(hou)，75%酒(jiu)精(jing)消(xiao)毒(du)瓶(ping)壁(bi)將(jiang) T25 瓶置(zhi)於(yu) 37℃培(pei)養箱放置(zhi) 2-4h。

4. 貼(tie)壁(bi)細胞(bao)可以(yi)消(xiao)化，懸浮(fu)細(xi)胞(bao)直接(jie)混(hun)勻(yun)收集(ji)細(xi)胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，棄(qi)上(shang) 清(qing)。加(jia) 5 mL PBS 重懸細胞(bao)，再 900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，用新鮮的(de)培(pei)養基重懸 細胞(bao)，並(bing)接(jie)種(zhong)到(dao)新的培(pei)養瓶或(huo)培(pei)養皿中(zhong)，置(zhi)於(yu)培(pei)養箱中(zhong)進(jin)行(xing)培(pei)養。

5. 請(qing)客戶(hu)用相同條件的培(pei)養基用於細胞(bao)培(pei)養。

6. 建議客戶(hu)收到(dao)細胞(bao)後(hou)前(qian) 3 天各(ge)拍(pai)幾(ji)張(zhang)細(xi)胞(bao)照片，記(ji)錄(lu)細胞(bao)狀(zhuang)態(tai)，便(bian)於(yu)和我(wo)司(si)技(ji)術(shu)部溝(gou)通 交流(liu)。由於運輸的(de)原(yuan)因，個(ge)別(bie)敏感(gan)細胞(bao)會出現不(bu)穩定(ding)的(de)情(qing)況，請(qing)及時(shi)和我(wo)們聯系(xi)，告(gao)知(zhi)細(xi)胞(bao) 的(de)具(ju)體情(qing)況，以(yi)便(bian)我(wo)們的技術(shu)人(ren)員跟(gen)蹤(zong)回訪(fang)直至(zhi)問(wen)題解決。

7. 該細胞(bao)僅(jin)供(gong)科(ke)研(yan)使(shi)用。

8. 備(bei)註(zhu)：運輸用的培(pei)養基 (灌(guan)液(ye)培(pei)養基) 不(bu)能(neng)再用來(lai)培(pei)養細胞(bao)，請(qing)換(huan)用按(an)照說明書(shu)細胞(bao)培(pei) 養條件新配(pei)制的(de)培(pei)養基來(lai)培(pei)養細胞(bao)。     收到(dao)細胞(bao)後(hou)第(di)壹次傳代(dai)建(jian)議 1：2 傳代(dai) 。

9. 註(zhu)意(yi)：  1:2 傳代(dai)就是 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳 2 個(ge) T25 瓶(ping)或(huo)者 2 個(ge) 6cm 皿。不(bu)是 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳 2 個(ge)10cm 皿。

公(gong)司(si)正(zheng)在(zai)出售的(de)產品：

NR1D1： 細(xi)胞(bao)核(he)受(shou)體Rev-Erbα抗體 大鼠垂(chui)體瘤細(xi)胞(bao);GH3

RT4(人(ren)膀(pang)胱移行(xing)細(xi)胞(bao)瘤細(xi)胞(bao)) 5×106cells/瓶(ping)×2 T-24(膀(pang)胱變移細(xi)胞(bao)癌(ai)) 大(da)鼠(shu)胎(tai)球蛋白B(FETUB)ELISA試劑盒 AmAC-1  大(da)鼠巨(ju)噬細胞(bao)替(ti)代(dai)激(ji)活相關化(hua)學因子1 96T

NCR2： 細(xi)胞(bao)毒(du)性(xing)受(shou)體NK-p44抗體 黑人(ren)Butt淋(lin)巴(ba)瘤細(xi)胞(bao);RAJI

LIF Protein Mouse 重組小(xiao)鼠 LIF 蛋(dan)白 (Fc 標簽) 大鼠(shu)胎(tai)盤(pan)生(sheng)長因子(PLGF)ELISA試(shi)劑盒 IL-1 Alpha (Human Interleukin 1 Alpha)  人(ren)白介(jie)素1α 96T

NKG2C： NK細(xi)胞(bao)受(shou)體2C抗體 MAP2K6 Others Human 人(ren) MKK6 / MEK6 / MAP2K6 桿狀(zhuang)病(bing)毒-昆(kun)蟲細胞(bao)裂(lie)解液(ye) (陽性(xing)對照)

RBL-2H3(大(da)鼠嗜(shi)堿(jian)性(xing)細胞(bao)白(bai)血(xue)病(bing)細(xi)胞(bao)) 5×106cells/瓶(ping)×2 小(xiao)鼠 EphA3 人(ren)細胞(bao)裂(lie)解液(ye) (陽性(xing)對照) 人(ren)白介(jie)素1β轉(zhuan)換(huan)酶(mei)(ICE)ELISA 試劑盒 OCLN(Occluding) 咬(yao)合(he)蛋(dan)白(bai)抗(kang)原(yuan) 0.5mg

AIF1： 離(li)子鈣(gai)接(jie)頭蛋(dan)白(bai)抗(kang)體 人(ren)少突(tu)膠質細(xi)胞(bao)HO

CCL11 Protein Human 重組人(ren) CCL11 蛋白(bai) (His 標簽) 人(ren)白介(jie)素1β (IL-1β)ELISA 試(shi)劑盒 Oct-4(Octamer-4) 胚(pei)胎(tai)幹(gan)細(xi)胞(bao)關鍵(jian)蛋(dan)白抗(kang)原(yuan) 0.5mg

IRX4： Iroquois同(tong)源蛋白4抗體 PDHA1 Others Human 人(ren) PDHA1 / C54G1 (aa 30-390) 桿狀(zhuang)病(bing)毒-昆(kun)蟲細胞(bao)裂(lie)解液(ye) (陽性(xing)對照)

人(ren)胎盤(pan)羊膜(mo)細胞(bao)培(pei)養基 100mL 人(ren)白介(jie)素1α(IL-1α )ELISA 試(shi)劑盒 ODC(Ornithine decarboxylase) 鳥酸(suan)脫羧(suo)酶(mei)抗原(yuan) 0.5mg

MDA-MB-415人(ren)乳腺癌(ai)細(xi)胞(bao)RPS27A： RPS27A抗(kang)體 CSF3 Others Human 人(ren) G-CSF / GCSF 人(ren)細胞(bao)裂(lie)解液(ye) (陽性(xing)對照)

人(ren)牙周(zhou)膜成(cheng)纖(xian)維細(xi)胞(bao)總(zong)RNAHPLF NA 大(da)鼠(shu)層粘(zhan)蛋白(bai)α1(LAMA1)ELISA試劑盒 BMP-7(Human Bone morphogenetic protein 7)  人(ren)骨成(cheng)型蛋白7 96T

RANK： 核(he)轉(zhuan)錄(lu)因子NF-κB受(shou)體抗體 VERO細胞(bao)衍(yan)生(sheng)株;SVP

人(ren)皮膚(fu)成(cheng)纖(xian)維細(xi)胞(bao);HSAS4 人(ren)胎盤(pan)絨毛膜細胞(bao)培(pei)養基 100mL 大(da)鼠(shu)層連(lian)蛋白(bai)/板(ban)層素(su)(LN)ELISA試劑盒 25(OH)D3/25 HVD3(Human 25-Dihydroxy vitamin D3) 人(ren)25羥基(ji)維生(sheng)3 96T

ROR alpha： 維相(xiang)關孤(gu)兒(er)受(shou)體α抗體 膀(pang)胱上皮細(xi)胞(bao)Many types of cells包(bao)裝(zhuang)：5 × 105次方(1ml)