Hep3B2.1-7 Hep3B 人肝(gan)癌細胞(bao)

公司產(chan)品僅供(gong)科研(yan)研(yan)究(jiu)使用、不得(de)用於臨床(chuang)診(zhen)斷！

1、細胞(bao)傳(chuan)代(dai)：

1）細胞(bao)生(sheng)長至(zhi)覆(fu)蓋(gai)培養(yang)瓶的(de) 80%面積時(shi)，棄(qi) 25cm2培養(yang)瓶中的(de)培養(yang)液，用 PBS 清洗(xi)細胞(bao)壹(yi)次；

2）添加 0.25%消化液約(yue) 1ml 至(zhi)培(pei)養(yang)瓶中，倒置顯(xian)微(wei)鏡下觀(guan)察，待(dai)細胞(bao)回(hui)縮變(bian)圓後(hou)加入 5ml 培(pei)養(yang)

液終(zhong)止(zhi)消化，再輕輕(qing)吹(chui)打細胞(bao)使(shi)之(zhi)脫(tuo)落(luo)，然(ran)後(hou)將懸(xuan)液轉(zhuan)移(yi)至(zhi) 15ml 離(li)心(xin)管(guan)中，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）棄(qi)上清，沈(chen)澱細胞(bao)用 1-2ml 培養(yang)基重(zhong)懸(xuan)，然後(hou)按 1:2 比(bi)例進行分(fen)瓶傳(chuan)代(dai)，最後(hou)放入 37℃，5%CO2細胞(bao)

培(pei)養(yang)箱中培(pei)養(yang)；

2、細胞(bao)凍(dong)存：

1）細胞(bao)生(sheng)長至(zhi)覆(fu)蓋(gai)培養(yang)瓶的(de) 80%面積時(shi)，棄(qi) 25cm2培養(yang)瓶中的(de)培養(yang)液，用 PBS 清洗(xi)細胞(bao)壹(yi)次；

2）添加 0.25%消化液約(yue) 1ml 至(zhi)培(pei)養(yang)瓶中，倒置顯(xian)微(wei)鏡下觀(guan)察，待(dai)細胞(bao)回(hui)縮變(bian)圓後(hou)加入培(pei)養(yang)液終(zhong)

止(zhi)消化，輕輕(qing)吹(chui)打細胞(bao)使(shi)之(zhi)脫(tuo)落(luo)，然(ran)後(hou)將懸(xuan)液轉(zhuan)移(yi)至(zhi) 15ml 離(li)心(xin)管(guan)中，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）用適量(liang)的(de)凍(dong)存液(ye)（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸(xuan)細胞(bao)，並放置於凍(dong)存管(guan)中；

4）先(xian)將(jiang)細胞(bao)凍(dong)存管(guan)放置於-20℃ 1.5h，然後(hou)將其(qi)移(yi)入-80℃過夜，24h 後(hou)轉入液(ye)氮中進行長期(qi)保(bao)存。使(shi)用程(cheng)序

降溫(wen)盒可(ke)直(zhi)接(jie)放入-80℃。

二、細胞(bao)培(pei)養(yang)操(cao)作(zuo)

1) 復(fu)蘇細胞(bao)：以(yi)下細胞(bao)培(pei)養(yang)凍(dong)存處(chu)理(li)僅供(gong)參(can)考(kao)，具(ju)體(ti)操(cao)作(zuo)步驟以隨(sui)貨(huo)產(chan)品說(shuo)明書(shu)為(wei)主(zhu)。將含(han)有(you)1 mL細胞(bao)懸(xuan)液的(de)凍(dong)存管(guan)在 37℃水浴中迅(xun)速(su)搖(yao)晃解凍(dong)，加4 mL培養(yang)基混(hun)合(he)均勻。在1000 rpm條(tiao)件下離(li)心(xin)3 min，棄(qi)去(qu)上清液，加1-2 mL培養(yang)基後(hou)吹(chui)勻。然(ran)後(hou)將所有細胞(bao)懸(xuan)液加入含(han)適量(liang)培(pei)養(yang)基的(de)培養(yang)瓶中培(pei)養(yang)過夜（或(huo)將細胞(bao)懸(xuan)液加入10 cm皿(min)中，加入約(yue)8 mL培養(yang)基，培(pei)養(yang)過夜）。第二天(tian)換(huan)液(ye)並檢(jian)查細胞(bao)密度。

2) 細胞(bao)傳(chuan)代(dai)：如果細胞(bao)密度達(da) 80%-90%，即可(ke)進行傳(chuan)代培(pei)養(yang)。

a、棄(qi)去(qu)培養(yang)上清(qing)，用不含(han)鈣、鎂離(li)子(zi)的(de)PBS潤洗細胞(bao)1-2次。

b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培養(yang)瓶中，使(shi)消(xiao)化液浸(jin)潤(run)所有細胞(bao)，將(jiang)培(pei)養(yang)瓶置(zhi)於37℃培養(yang)箱中消(xiao)化1-2 min（視(shi)細胞(bao)情況而定(ding)），然(ran)後(hou)在顯(xian)微(wei)鏡下觀(guan)察細胞(bao)消(xiao)化情況，若(ruo)細胞(bao)大(da)部(bu)分變(bian)圓並脫落(luo)，迅(xun)速(su)拿(na)回(hui)操(cao)作(zuo)臺(tai)，輕(qing)敲(qiao)幾下培(pei)養(yang)瓶後(hou)加2-3ml培養(yang)基終(zhong)止(zhi)消化。輕輕(qing)打勻後(hou)裝入無菌離(li)心(xin)管(guan)中，1000 rpm離(li)心(xin)5 min，棄(qi)去(qu)上清液，補加1-2 mL培養(yang)液後(hou)吹(chui)勻。

c、將(jiang)細胞(bao)懸(xuan)液按(an)1:2比(bi)例分到(dao)新(xin)的(de)含(han)8 mL培(pei)養(yang)基的(de)新皿(min)中或(huo)者瓶中，置(zhi)於培養(yang)箱中培(pei)養(yang)。 3) 細胞(bao)凍(dong)存：待(dai)細胞(bao)生(sheng)長狀態良(liang)好時，可(ke)進行細胞(bao)凍(dong)存。下面 T25 瓶為(wei)例；a、收集(ji)細胞(bao)及(ji)細胞(bao)培(pei)養(yang)液，裝入無菌離(li)心(xin)管(guan)中，1000 rpm條(tiao)件下離(li)心(xin)4 min，棄(qi)去(qu)上清液，用PBS清洗(xi)壹(yi)遍(bian)，棄(qi)盡(jin)PBS，進行細胞(bao)計(ji)數(shu)。

b、根(gen)據細胞(bao)數(shu)量(liang)加入無血(xue)清(qing)細胞(bao)凍(dong)存液(ye)，使(shi)細胞(bao)密度5×106~1×107/mL，輕(qing)輕(qing)混(hun)勻，每(mei)支凍(dong)存管(guan)凍(dong)存1mL細胞(bao)懸(xuan)液，註意(yi)凍(dong)存管(guan)做(zuo)好標識。將凍(dong)存管(guan)放入-80℃冰箱，24 h後(hou)轉入液(ye)氮灌(guan)儲(chu)存。記錄(lu)凍(dong)存管(guan)位(wei)置(zhi)以便(bian)下次拿(na)取(qu)。

三、培養(yang)註意(yi)事項(xiang) 

1. 收到(dao)細胞(bao)後(hou)首先(xian)觀(guan)察細胞(bao)瓶是(shi)否(fou)完好，培養(yang)液是(shi)否(fou)有漏液(ye)、渾濁(zhuo)等現象(xiang)，若有(you)上(shang)述(shu)現象(xiang) 發生(sheng)請及(ji)時和我們聯(lian)系。

2. 仔細閱(yue)讀(du)細胞(bao)說(shuo)明書(shu)，了(le)解(jie)細胞(bao)相關(guan)信息(xi)，如細胞(bao)形(xing)態(tai)、所用培養(yang)基、血(xue)清(qing)比(bi)例、所需 細胞(bao)因(yin)子等，確(que)保細胞(bao)培(pei)養(yang)條(tiao)件壹(yi)致，若由於培養(yang)條(tiao)件不(bu)壹致而導致細胞(bao)出現問(wen)題，責任(ren)由 客戶(hu)自(zi)行(xing)承(cheng)擔(dan)。

3. 用 75%酒精(jing)擦(ca)拭細胞(bao)瓶表(biao)面，顯(xian)微(wei)鏡下觀(guan)察細胞(bao)狀態。因(yin)運(yun)輸問(wen)題，部分(fen)細胞(bao)由於溫度 變(bian)化及劇(ju)烈碰(peng)亡破(po)碎形(xing)成(cheng)碎片，是(shi)正(zheng)常現象(xiang)。觀察好細胞(bao)狀態後(hou)，75%酒精消(xiao)毒(du)瓶壁將(jiang) T25 瓶置(zhi)於 37℃培養(yang)箱放置 2-4h。

4. 貼(tie)壁細胞(bao)可(ke)以(yi)消(xiao)化，懸(xuan)浮細胞(bao)直(zhi)接(jie)混(hun)勻收(shou)集(ji)細胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，棄(qi)上 清。加 5 mL PBS 重懸(xuan)細胞(bao)，再 900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，用新鮮(xian)的(de)培養(yang)基重(zhong)懸(xuan) 細胞(bao)，並接種(zhong)到(dao)新(xin)的(de)培養(yang)瓶或(huo)培養(yang)皿(min)中，置(zhi)於培養(yang)箱中進行培(pei)養(yang)。

5. 請客戶(hu)用相同(tong)條(tiao)件的(de)培養(yang)基用於細胞(bao)培(pei)養(yang)。

6. 建議(yi)客戶(hu)收(shou)到(dao)細胞(bao)後(hou)前(qian) 3 天(tian)各拍幾張(zhang)細胞(bao)照(zhao)片，記錄(lu)細胞(bao)狀態，便(bian)於和我司(si)技術(shu)部溝(gou)通 交(jiao)流。由於運(yun)輸的(de)原因(yin)，個別(bie)敏感(gan)細胞(bao)會(hui)出現不(bu)穩(wen)定(ding)的(de)情況，請(qing)及(ji)時和我們聯(lian)系，告(gao)知(zhi)細胞(bao) 的(de)具(ju)體(ti)情況，以(yi)便(bian)我們的(de)技術人員(yuan)跟蹤(zong)回(hui)訪直(zhi)至(zhi)問(wen)題解決(jue)。

7. 該(gai)細胞(bao)僅供(gong)科研(yan)使用。

8. 備(bei)註：運(yun)輸用的(de)培養(yang)基 (灌(guan)液培養(yang)基) 不(bu)能再用來培(pei)養(yang)細胞(bao)，請(qing)換(huan)用按照(zhao)說(shuo)明書(shu)細胞(bao)培(pei) 養(yang)條(tiao)件新(xin)配制的(de)培養(yang)基來(lai)培養(yang)細胞(bao)。     收(shou)到(dao)細胞(bao)後(hou)第壹次傳(chuan)代(dai)建議(yi) 1：2 傳代(dai) 。

9. 註意(yi)：  1:2 傳代(dai)就是(shi) 1 個 T25 瓶傳(chuan) 2 個(ge) T25 瓶或(huo)者 2 個(ge) 6cm 皿(min)。不(bu)是(shi) 1 個 T25 瓶傳(chuan) 2 個(ge)10cm 皿(min)。

公司正(zheng)在出售的(de)產(chan)品：

Mammaglobin A： 珠(zhu)蛋(dan)白(bai)1抗(kang)體(ti) 6-10B, 人鼻咽癌細胞(bao)系(xi) 骨(gu)髓瘤(liu),P3-NS-1/1-Ag4.1細胞(bao) MRC-5(人正(zheng)常胚肺(fei)成纖(xian)維(wei)細胞(bao))

CST9L Others Human 人 CST9L / Testatin 人細胞(bao)裂解液 (陽(yang)性(xing)對照(zhao)) 大(da)鼠(FA)ELISA 試劑盒 EPBV IgG 乙型腦炎(yan)病毒(du) IgG(間(jian)接法(fa)二步法(fa))

MYL9： 肌球蛋(dan)白(bai)輕(qing)鏈(lian)9抗體 EB病毒(du)轉(zhuan)化的(de)人B淋(lin)巴細胞(bao);KMY1036

208F大(da)鼠成纖(xian)維(wei)細胞(bao) 208F rat fibroblasts 大(da)鼠成纖(xian)維(wei)細胞(bao) 大(da)鼠野(ye)鼠色基因(yin)相關(guan)蛋(dan)白(bai)(AGRP)ELISA試劑盒 EPBV IgM 乙型腦炎(yan)病毒(du) IgM(間(jian)接法(fa)二步法(fa))

phospho-MYL9(Thr19)： 0酸化肌球蛋(dan)白(bai)輕(qing)鏈(lian)9抗體 CLEC6A Others Mouse 小鼠 CLEC4N 人細胞(bao)裂解液 (陽(yang)性(xing)對照(zhao))

U266細胞(bao)，人骨(gu)髓瘤(liu)細胞(bao) 串(chuan)珠(zhu)鐮(lian)刀菌 人胚腎二倍體細胞(bao);HEK-2 人甲(jia)狀腺結(jie)合(he)球蛋(dan)白(bai)(TBG)ELISA 試劑盒 Caspase-8 (pro Mch5) 半(ban)胱(guang)酸蛋(dan)白(bai)酶(mei)8抗(kang)原(yuan) 0.5mg

HMGCS1： 三羥基基合(he)成酶(mei)1 0.2ml

Rhesus antibody Rh C20orf196 20號染(ran)色(se)體(ti)開放閱讀(du)框(kuang)196抗體 HA Others H5N1 甲型流感(gan) H5N1 血(xue)凝(ning)素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞(bao)裂解液 (陽(yang)性(xing)對照(zhao))

人整(zheng)合(he)SV40基因(yin)的(de)上皮(pi)細胞(bao);HBL-100 [HBL100] 人甲(jia)狀腺過氧(yang)化物酶(mei)(TPO)ELISA 試劑盒 TSHR (Thyroid stimulating hormone receptor)(CT) 促(cu)甲(jia)狀腺素受(shou)體(抗(kang)原(yuan)) 0.5mg

HSF1： 熱(re)休(xiu)克因(yin)子1抗(kang)體 人幹細胞(bao)因(yin)子單(dan)克隆抗(kang)體細胞(bao)株;AMS2(SCF3)

Hep3B2.1-7 [Hep3B] 人肝(gan)癌細胞(bao)HeLa 229人細胞(bao) HeLa 229 human cervical cancer cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS 大(da)鼠胱(guang)天(tian)蛋(dan)白(bai)酶(mei)3(CASP3)ELISA試劑盒 OPG  大(da)鼠骨保護素 96T

PKC beta 1 + 2： 蛋(dan)白(bai)激(ji)酶(mei)C beta 1/2抗(kang)體 SELPLG Others Human 人 RPSGL-1 人細胞(bao)裂解液 (陽(yang)性(xing)對照(zhao))

中國(guo)倉(cang)鼠肺(fei)細胞(bao);R 1610 [R1610] 大(da)鼠胱(guang)天(tian)蛋(dan)白(bai)酶(mei)3(Casp-3)ELISA 試劑盒 MPO-ANCA IgG(Human myeloperoxidase-antineutrophil cytoplasmic antibody IgG)  人髓過氧(yang)化物酶(mei)特異(yi)性(xing)抗中性(xing)粒細胞(bao)胞(bao)質(zhi)抗(kang)體(ti) 豬(zhu)腎(shen)細胞(bao);LLC-PK1

小鼠周(zhou)神經(jing)成(cheng)纖(xian)維(wei)細胞(bao)(MPNF)(5×105) HL-60, 人早(zao)幼(you)粒白血(xue)病(bing)細胞(bao) Human 大(da)鼠胱(guang)天(tian)蛋(dan)白(bai)酶(mei)14(CASP14)ELISA試劑盒 PR3 Ab-IgG(Human Anti-proteinase 3 antibody IgG)  人抗(kang)蛋(dan)白(bai)酶(mei)3抗(kang)體(ti) 動物上皮(pi)細胞(bao)培(pei)養(yang)基EpiCM-a-prf

SHH Protein Mouse 重組(zu)小鼠 SHH / Sonic hedgehog 蛋(dan)白(bai) (His 標(biao)簽(qian)) 大(da)鼠胱(guang)天(tian)蛋(dan)白(bai)酶(mei)11(CASP11)ELISA試劑盒 BF  大(da)鼠B因(yin)子 96T