PANC10.05人胰腺癌細胞(bao)

公司(si)產(chan)品僅供(gong)科(ke)研(yan)研(yan)究使(shi)用、不得(de)用於臨床診(zhen)斷！

1、細(xi)胞(bao)傳(chuan)代(dai)：

1）細胞(bao)生(sheng)長至(zhi)覆(fu)蓋(gai)培(pei)養瓶的 80%面(mian)積時(shi)，棄 25cm2培養(yang)瓶中的培養(yang)液，用 PBS 清洗(xi)細(xi)胞(bao)壹(yi)次；

2）添加(jia) 0.25%消(xiao)化液(ye)約(yue) 1ml 至(zhi)培(pei)養(yang)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細胞(bao)回縮(suo)變(bian)圓後(hou)加入(ru) 5ml 培(pei)養

液(ye)終(zhong)止(zhi)消(xiao)化(hua)，再(zai)輕(qing)輕(qing)吹打(da)細(xi)胞(bao)使(shi)之(zhi)脫(tuo)落(luo)，然(ran)後(hou)將懸(xuan)液(ye)轉(zhuan)移至(zhi) 15ml 離(li)心(xin)管中，1000rpm 離心 5min；

3）棄上清(qing)，沈澱(dian)細(xi)胞(bao)用 1-2ml 培養基重(zhong)懸(xuan)，然(ran)後(hou)按 1:2 比(bi)例(li)進行(xing)分瓶傳(chuan)代(dai)，最後(hou)放入(ru) 37℃，5%CO2細(xi)胞(bao)

培養箱中培養；

2、細(xi)胞(bao)凍存：

1）細胞(bao)生(sheng)長至(zhi)覆(fu)蓋(gai)培(pei)養瓶的 80%面(mian)積時(shi)，棄 25cm2培養(yang)瓶中的培養(yang)液，用 PBS 清洗(xi)細(xi)胞(bao)壹(yi)次；

2）添加(jia) 0.25%消(xiao)化液(ye)約(yue) 1ml 至(zhi)培(pei)養(yang)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細胞(bao)回縮(suo)變(bian)圓後(hou)加入(ru)培(pei)養液(ye)終(zhong)

止(zhi)消(xiao)化(hua)，輕(qing)輕吹打(da)細(xi)胞(bao)使(shi)之(zhi)脫(tuo)落(luo)，然(ran)後(hou)將懸(xuan)液(ye)轉(zhuan)移至(zhi) 15ml 離(li)心(xin)管中，1000rpm 離心 5min；

3）用適量(liang)的(de)凍(dong)存(cun)液(ye)（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸(xuan)細(xi)胞(bao)，並放置於凍(dong)存管中；

4）先將細(xi)胞(bao)凍存管放置(zhi)於-20℃ 1.5h，然(ran)後(hou)將其移入(ru)-80℃過夜，24h 後(hou)轉入(ru)液(ye)氮中進行(xing)長期保(bao)存。使(shi)用程(cheng)序(xu)

降溫盒可(ke)直(zhi)接放(fang)入(ru)-80℃。

二、細胞(bao)培養操(cao)作

1) 復(fu)蘇細(xi)胞(bao)：以下細胞(bao)培養凍存處(chu)理僅供(gong)參(can)考，具(ju)體(ti)操(cao)作步(bu)驟(zhou)以隨(sui)貨(huo)產(chan)品說明書為主(zhu)。將(jiang)含(han)有1 mL細胞(bao)懸(xuan)液(ye)的(de)凍(dong)存(cun)管在 37℃水浴(yu)中迅速搖晃解凍，加(jia)4 mL培(pei)養基混合(he)均勻(yun)。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清(qing)液，加1-2 mL培(pei)養基後(hou)吹勻。然(ran)後(hou)將所有細胞(bao)懸(xuan)液(ye)加(jia)入(ru)含(han)適量(liang)培(pei)養(yang)基的培(pei)養(yang)瓶中培養過夜（或將細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)加(jia)入(ru)10 cm皿(min)中，加入(ru)約(yue)8 mL培養(yang)基，培養(yang)過夜）。第(di)二天(tian)換(huan)液並(bing)檢查細(xi)胞(bao)密度。

2) 細胞(bao)傳(chuan)代(dai)：如果(guo)細胞(bao)密度達(da) 80%-90%，即(ji)可(ke)進行(xing)傳(chuan)代(dai)培養(yang)。

a、棄去培養(yang)上清，用不含(han)鈣(gai)、鎂離(li)子(zi)的(de)PBS潤(run)洗(xi)細(xi)胞(bao)1-2次。

b、加1 mL消(xiao)化(hua)液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培(pei)養瓶中，使(shi)消化(hua)液浸(jin)潤(run)所有細胞(bao)，將培養瓶置於37℃培(pei)養箱中消化1-2 min（視細胞(bao)情況而定），然後(hou)在顯微鏡下觀察細(xi)胞(bao)消化情況，若(ruo)細(xi)胞(bao)大部分變(bian)圓並脫(tuo)落(luo)，迅速拿(na)回操(cao)作臺，輕(qing)敲(qiao)幾下培養瓶後(hou)加2-3ml培養(yang)基終(zhong)止(zhi)消(xiao)化(hua)。輕(qing)輕打(da)勻(yun)後(hou)裝入(ru)無(wu)菌離心(xin)管(guan)中，1000 rpm離心5 min，棄去上清(qing)液，補加(jia)1-2 mL培養液(ye)後(hou)吹勻。

c、將(jiang)細胞(bao)懸(xuan)液(ye)按(an)1:2比(bi)例(li)分(fen)到新的含(han)8 mL培養基的新(xin)皿(min)中或者(zhe)瓶中，置於培(pei)養箱中培養。 3) 細(xi)胞(bao)凍存：待細胞(bao)生(sheng)長狀(zhuang)態(tai)良好(hao)時(shi)，可(ke)進行(xing)細胞(bao)凍存。下面 T25 瓶為例(li)；a、收(shou)集細(xi)胞(bao)及(ji)細(xi)胞(bao)培養液，裝入(ru)無(wu)菌離心(xin)管(guan)中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清(qing)液，用PBS清洗(xi)壹(yi)遍，棄盡PBS，進行(xing)細胞(bao)計(ji)數。

b、根(gen)據(ju)細胞(bao)數量(liang)加(jia)入(ru)無(wu)血清細(xi)胞(bao)凍存液，使(shi)細胞(bao)密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻(yun)，每支(zhi)凍(dong)存管凍存(cun)1mL細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)，註(zhu)意(yi)凍(dong)存管做(zuo)好(hao)標識。將凍存(cun)管(guan)放入(ru)-80℃冰(bing)箱，24 h後(hou)轉入(ru)液(ye)氮灌(guan)儲(chu)存(cun)。記(ji)錄(lu)凍存(cun)管(guan)位(wei)置以便(bian)下次拿(na)取。

三(san)、培(pei)養註意事項(xiang) 

1. 收到細胞(bao)後(hou)首先(xian)觀察(cha)細(xi)胞(bao)瓶是否(fou)完好(hao)，培養(yang)液是(shi)否(fou)有漏液(ye)、渾濁等(deng)現象(xiang)，若(ruo)有上述(shu)現象(xiang) 發(fa)生(sheng)請及(ji)時(shi)和(he)我(wo)們聯系。

2. 仔(zai)細(xi)閱(yue)讀(du)細(xi)胞(bao)說明書，了(le)解細胞(bao)相關信(xin)息(xi)，如(ru)細胞(bao)形態、所用培養基、血清(qing)比(bi)例(li)、所(suo)需(xu) 細胞(bao)因(yin)子(zi)等(deng)，確保(bao)細胞(bao)培養條件壹(yi)致，若(ruo)由於培(pei)養條件不壹(yi)致而導致細(xi)胞(bao)出現問(wen)題(ti)，責(ze)任由 客戶(hu)自(zi)行(xing)承擔(dan)。

3. 用 75%酒(jiu)精擦拭細胞(bao)瓶表面(mian)，顯微鏡下觀察細(xi)胞(bao)狀態。因(yin)運輸(shu)問題，部分細胞(bao)由於溫度(du) 變(bian)化(hua)及(ji)劇(ju)烈碰亡(wang)破碎形成碎片(pian)，是(shi)正(zheng)常(chang)現象(xiang)。觀(guan)察(cha)好(hao)細胞(bao)狀態後(hou)，75%酒(jiu)精消(xiao)毒瓶壁將(jiang) T25 瓶置於 37℃培(pei)養箱放(fang)置(zhi) 2-4h。

4. 貼壁細(xi)胞(bao)可(ke)以消(xiao)化(hua)，懸(xuan)浮(fu)細(xi)胞(bao)直(zhi)接混勻(yun)收集(ji)細胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄上 清(qing)。加 5 mL PBS 重(zhong)懸(xuan)細(xi)胞(bao)，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，用新鮮的培養(yang)基重(zhong)懸(xuan) 細(xi)胞(bao)，並接種到新的培養瓶或培養(yang)皿中，置於培(pei)養箱中進行(xing)培養(yang)。

5. 請客戶(hu)用相同條件的培養基用於細(xi)胞(bao)培養。

6. 建議(yi)客戶(hu)收(shou)到細胞(bao)後(hou)前(qian) 3 天(tian)各拍(pai)幾張(zhang)細胞(bao)照片(pian)，記(ji)錄(lu)細胞(bao)狀態，便(bian)於和(he)我(wo)司(si)技(ji)術部溝(gou)通 交流。由於運輸(shu)的原因(yin)，個(ge)別(bie)敏(min)感細(xi)胞(bao)會出現不穩(wen)定(ding)的(de)情(qing)況，請及(ji)時(shi)和(he)我(wo)們聯系，告知細胞(bao) 的具(ju)體(ti)情(qing)況(kuang)，以便(bian)我(wo)們的(de)技(ji)術人員(yuan)跟(gen)蹤(zong)回訪直(zhi)至(zhi)問(wen)題(ti)解決。

7. 該細胞(bao)僅供(gong)科(ke)研(yan)使(shi)用。

8. 備註：運輸(shu)用的培養基 (灌(guan)液(ye)培(pei)養(yang)基) 不能(neng)再(zai)用來培(pei)養(yang)細胞(bao)，請換(huan)用按照說明書細(xi)胞(bao)培 養條件新配制的(de)培(pei)養基來培(pei)養(yang)細胞(bao)。     收到細胞(bao)後(hou)第(di)壹(yi)次傳(chuan)代(dai)建議(yi) 1：2 傳(chuan)代(dai) 。

9. 註意(yi)：  1:2 傳(chuan)代(dai)就(jiu)是 1 個(ge) T25 瓶傳(chuan) 2 個(ge) T25 瓶或者(zhe) 2 個(ge) 6cm 皿(min)。不是(shi) 1 個(ge) T25 瓶傳(chuan) 2 個(ge)10cm 皿(min)。

公(gong)司(si)正(zheng)在出售的產(chan)品：

B16-F10小(xiao)鼠皮(pi)膚(fu)黑(hei)色(se)素(su)瘤(liu)細(xi)胞(bao) B16-F10 mouse melanoma cell DMEM培養基+10%FBS 大鼠微(wei)管(guan)關聯蛋(dan)白(bai)τ(MAPτ)ELISA試劑盒 TGF- Alpha(Human transforming growth factor Alpha)  人轉化生(sheng)長因(yin)子(zi)α 96T

Phospho-MKP1 (Ser318)： 0酸(suan)化原(yuan)活(huo)化(hua)蛋(dan)白(bai)激酶0酸(suan)酶(mei)1抗(kang)體(ti) HA Others H5N1 甲(jia)型(xing)流感 H5N1 (A/Vietnam/1194/2004) 血(xue)凝素(su) (Hemagglutinin / HA) 人(ren)細胞(bao)裂解液 (陽(yang)性(xing)對照)

CL-0239U-937(人(ren)組(zu)織(zhi)細(xi)胞(bao)淋巴瘤(liu)細(xi)胞(bao))5×106cells/瓶×2 大鼠微(wei)管(guan)關聯蛋(dan)白(bai)4(MAP4)ELISA試劑盒 N-AChR  大鼠型(xing)乙(yi)酰受(shou)體 48T96T

Metabotropic glutamate receptor 2： 促(cu)代(dai)謝(xie)型谷酸(suan)受(shou)體2抗(kang)體(ti) tTA基因(yin)修飾(shi)的(de)小(xiao)鼠畸(ji)胎(tai)瘤(liu)細(xi)胞(bao)(B類);F9-CAG-tTA-3E5

PLC/PRF/5(人(ren)肝(gan)癌亞(ya)力(li)山大細(xi)胞(bao)) 5×106cells/瓶×2 293T/17 [HEK 293T/17] (人胚(pei)腎(shen)細胞(bao)) 大鼠微(wei)管(guan)蛋(dan)白(bai)β3(TUBB3)ELISA試劑盒 ODF(Mouse osteoclast differentiation factor)  小鼠破骨(gu)細(xi)胞(bao)分化因(yin)子(zi) 96T

Involucrin： 囊(nang)包蛋(dan)白(bai)/內披蛋(dan)白(bai)抗(kang)體(ti) SCARB2 Others Mouse 小(xiao)鼠 SCARB2 / LIMP2 / CD36L2 人(ren)細(xi)胞(bao)裂解液 (陽(yang)性(xing)對照)

小(xiao)鼠T淋(lin)巴細胞(bao);Cl.Ly1+2-/9 人補體片(pian)段(duan)3c(C3c)ELISA 試劑盒 LH(Luteinizing Hormone) 促(cu)黃(huang)體(ti)生(sheng)成(cheng)素(su)抗(kang)原(yuan) 0.5mg

Insulin Receptor R： 胰(yi)島素受體相(xiang)關(guan)受(shou)體抗(kang)體(ti) EB病毒轉(zhuan)化(hua)的人(ren)B淋巴細胞(bao);KMY1002

OP9(小(xiao)鼠骨(gu)髓基質(zhi)細胞(bao)) 5×106cells/瓶×2 人 CD8B / P37 / LEU2 人(ren)細胞(bao)裂解液 (陽(yang)性(xing)對照) 人補體(ti)片(pian)段(duan)3b受體(ti)(C3bR)ELISA 試劑盒 LH(Luteinizing Hormone) 人促(cu)黃(huang)體(ti)生(sheng)成(cheng)素(su)(多(duo)肽) 0.5mg

INCA1： INCA1蛋(dan)白(bai)抗(kang)體(ti) 人(ren)臍(qi)帶間(jian)充質(zhi)幹細(xi)胞(bao)HUMSC

PANC10.05人(ren)胰腺癌細胞(bao)phospho-RUNX1 (Ser249)： 0酸(suan)化急性(xing)髓細胞(bao)白(bai)血病1蛋(dan)白(bai)抗(kang)體(ti) 豚鼠皮(pi)膚(fu)細(xi)胞(bao);GP-S2

CL-0450SW 982(人(ren)滑膜肉瘤(liu)細(xi)胞(bao))5×106cells/瓶×2 大鼠釋(shi)放(fang)激素受(shou)體(ti)抗(kang)體(ti)(GHR-Ab)ELISA試(shi)劑盒 apo-A5(Human apoprotein A5)  人載脂蛋(dan)白(bai)A5 96T

RIPK3： 受(shou)體結(jie)合(he)絲(si)酸蘇(su)酸(suan)激酶3抗(kang)體(ti) IFNA5 Others Human 人(ren) IFNαG / IFNaG / Ierferon alpha-G 人(ren)細胞(bao)裂解液 (陽(yang)性(xing)對照)

人(ren)腎(shen)近曲(qu)小管(guan)上皮(pi)細(xi)胞(bao)RNAHRPTEpiC miRNA5 μg 大鼠釋(shi)放(fang)激素受(shou)體(ti)(GHR)ELISA試劑盒 DBP(Human Vitamin D-binding protein)  人維生(sheng)結(jie)合(he)蛋(dan)白(bai) 96T

Insulin (1G11)： 胰(yi)島素單克(ke)隆抗(kang)體(ti) SV40轉(zhuan)化(hua)的非洲綠猴(hou)腎(shen)細胞(bao);COS-7