ProPakA.6人胚腎細胞(bao)

公司產品(pin)僅(jin)供科(ke)研(yan)研(yan)究(jiu)使用、不(bu)得(de)用於(yu)臨(lin)床診斷(duan)！

1、細胞(bao)傳代：

1）細(xi)胞(bao)生(sheng)長(chang)至覆(fu)蓋培(pei)養(yang)瓶的 80%面積時(shi)，棄 25cm2培(pei)養(yang)瓶中(zhong)的培(pei)養(yang)液(ye)，用 PBS 清(qing)洗(xi)細(xi)胞(bao)壹(yi)次；

2）添加(jia) 0.25%消(xiao)化(hua)液(ye)約(yue) 1ml 至培養(yang)瓶中(zhong)，倒置顯微鏡下(xia)觀察(cha)，待(dai)細(xi)胞(bao)回(hui)縮變圓後加(jia)入(ru) 5ml 培(pei)養(yang)

液(ye)終止消(xiao)化(hua)，再(zai)輕(qing)輕吹(chui)打細(xi)胞(bao)使之脫(tuo)落(luo)，然(ran)後(hou)將(jiang)懸液(ye)轉(zhuan)移至(zhi) 15ml 離(li)心(xin)管中(zhong)，1000rpm 離心(xin) 5min；

3）棄上(shang)清(qing)，沈(chen)澱(dian)細(xi)胞(bao)用 1-2ml 培(pei)養(yang)基(ji)重(zhong)懸，然後按 1:2 比(bi)例進行分(fen)瓶傳代，最(zui)後放(fang)入(ru) 37℃，5%CO2細(xi)胞(bao)

培養(yang)箱中(zhong)培養(yang)；

2、細(xi)胞(bao)凍存(cun)：

1）細胞(bao)生(sheng)長(chang)至覆(fu)蓋培(pei)養(yang)瓶的 80%面積時(shi)，棄 25cm2培(pei)養(yang)瓶中(zhong)的培(pei)養(yang)液(ye)，用 PBS 清(qing)洗(xi)細(xi)胞(bao)壹(yi)次；

2）添加(jia) 0.25%消(xiao)化(hua)液(ye)約(yue) 1ml 至培養(yang)瓶中(zhong)，倒置顯微鏡下(xia)觀察(cha)，待(dai)細(xi)胞(bao)回(hui)縮變圓後加(jia)入(ru)培(pei)養(yang)液(ye)終

止消(xiao)化(hua)，輕輕(qing)吹(chui)打細(xi)胞(bao)使之脫(tuo)落(luo)，然(ran)後(hou)將(jiang)懸液(ye)轉(zhuan)移至(zhi) 15ml 離(li)心(xin)管中(zhong)，1000rpm 離心(xin) 5min；

3）用適(shi)量(liang)的凍(dong)存(cun)液(ye)（FBS：DMSO=9 ：1）重懸(xuan)細胞(bao)，並放置於(yu)凍(dong)存(cun)管中(zhong)；

4）先將(jiang)細(xi)胞(bao)凍存(cun)管放置於(yu)-20℃ 1.5h，然(ran)後(hou)將(jiang)其(qi)移入(ru)-80℃過夜，24h 後轉(zhuan)入(ru)液(ye)氮(dan)中(zhong)進行長(chang)期保(bao)存(cun)。使用程(cheng)序(xu)

降溫(wen)盒可(ke)直接(jie)放入(ru)-80℃。

二(er)、細(xi)胞(bao)培養(yang)操(cao)作(zuo)

1) 復蘇細(xi)胞(bao)：以下細胞(bao)培養(yang)凍(dong)存(cun)處理僅(jin)供參(can)考(kao)，具(ju)體(ti)操作(zuo)步(bu)驟(zhou)以隨貨產品(pin)說(shuo)明書為(wei)主(zhu)。將(jiang)含有(you)1 mL細(xi)胞(bao)懸液(ye)的凍(dong)存(cun)管在 37℃水浴中(zhong)迅(xun)速搖晃解(jie)凍(dong)，加(jia)4 mL培養(yang)基(ji)混(hun)合(he)均(jun)勻。在1000 rpm條(tiao)件(jian)下(xia)離心(xin)3 min，棄去上(shang)清(qing)液(ye)，加(jia)1-2 mL培養(yang)基(ji)後(hou)吹(chui)勻。然後(hou)將所(suo)有(you)細(xi)胞(bao)懸液(ye)加(jia)入(ru)含(han)適(shi)量(liang)培(pei)養(yang)基(ji)的培(pei)養(yang)瓶中(zhong)培養(yang)過夜（或(huo)將(jiang)細胞(bao)懸液(ye)加(jia)入(ru)10 cm皿(min)中(zhong)，加(jia)入(ru)約(yue)8 mL培養(yang)基(ji)，培(pei)養(yang)過夜）。第(di)二(er)天換液(ye)並檢(jian)查(zha)細胞(bao)密(mi)度(du)。

2) 細(xi)胞(bao)傳代：如(ru)果(guo)細胞(bao)密(mi)度(du)達(da) 80%-90%，即可(ke)進行傳代培(pei)養(yang)。

a、棄(qi)去(qu)培(pei)養(yang)上(shang)清(qing)，用不(bu)含(han)鈣(gai)、鎂(mei)離子的PBS潤(run)洗(xi)細(xi)胞(bao)1-2次。

b、加(jia)1 mL消(xiao)化(hua)液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培(pei)養(yang)瓶中(zhong)，使消(xiao)化(hua)液(ye)浸潤所(suo)有(you)細(xi)胞(bao)，將培養(yang)瓶置於(yu)37℃培(pei)養(yang)箱中(zhong)消(xiao)化(hua)1-2 min（視(shi)細胞(bao)情況(kuang)而定），然(ran)後(hou)在顯微鏡下(xia)觀察(cha)細胞(bao)消(xiao)化(hua)情況(kuang)，若(ruo)細胞(bao)大部分(fen)變圓並脫(tuo)落(luo)，迅(xun)速拿回(hui)操作臺(tai)，輕(qing)敲(qiao)幾(ji)下(xia)培(pei)養(yang)瓶後(hou)加(jia)2-3ml培養(yang)基(ji)終(zhong)止消(xiao)化(hua)。輕輕(qing)打勻後裝(zhuang)入(ru)無(wu)菌(jun)離(li)心(xin)管中(zhong)，1000 rpm離心(xin)5 min，棄去上(shang)清(qing)液(ye)，補加(jia)1-2 mL培養(yang)液(ye)後吹(chui)勻。

c、將細(xi)胞(bao)懸液(ye)按1:2比(bi)例分(fen)到新(xin)的含(han)8 mL培(pei)養(yang)基(ji)的新(xin)皿(min)中(zhong)或(huo)者瓶中(zhong)，置於(yu)培(pei)養(yang)箱中(zhong)培養(yang)。 3) 細(xi)胞(bao)凍存(cun)：待(dai)細(xi)胞(bao)生(sheng)長(chang)狀態(tai)良好(hao)時(shi)，可(ke)進行細胞(bao)凍存(cun)。下面 T25 瓶為(wei)例；a、收(shou)集(ji)細胞(bao)及細胞(bao)培養(yang)液(ye)，裝(zhuang)入(ru)無(wu)菌(jun)離(li)心(xin)管中(zhong)，1000 rpm條(tiao)件(jian)下(xia)離心(xin)4 min，棄去上(shang)清(qing)液(ye)，用PBS清(qing)洗(xi)壹(yi)遍，棄盡(jin)PBS，進行細胞(bao)計數。

b、根(gen)據(ju)細(xi)胞(bao)數量加(jia)入(ru)無(wu)血清(qing)細(xi)胞(bao)凍存(cun)液(ye)，使細胞(bao)密(mi)度(du)5×106~1×107/mL，輕(qing)輕(qing)混(hun)勻，每(mei)支凍存(cun)管凍存(cun)1mL細胞(bao)懸液(ye)，註意(yi)凍存(cun)管做好標(biao)識(shi)。將(jiang)凍存(cun)管放入(ru)-80℃冰(bing)箱，24 h後(hou)轉(zhuan)入(ru)液(ye)氮(dan)灌(guan)儲(chu)存(cun)。記(ji)錄凍(dong)存(cun)管位(wei)置以(yi)便(bian)下次拿取(qu)。

公司正在(zai)出(chu)售(shou)的產品(pin)：

IL18BP Protein Human 重組(zu)人(ren) IL18BPa 蛋白(bai) (His 標(biao)簽(qian)) 大(da)鼠(shu)拓撲(pu)異構(gou)酶(mei)Ⅱ(TOP2)ELISA試劑(ji)盒 sCD30L(Human Soluble Cluster of differentiation 30 ligand)  人可(ke)溶(rong)性(xing)CD30配體(ti) 96T

Phospho-MAP2 (Thr1620 + Thr1623)： 0酸(suan)化(hua)微管相(xiang)關(guan)蛋白(bai)2抗體(ti) PRKCD Others Mouse 小(xiao)鼠(shu) PKC delta / PRKCD 桿(gan)狀病(bing)毒-昆(kun)蟲細胞(bao)裂解(jie)液(ye) (陽性(xing)對(dui)照)

小(xiao)鼠(shu)骨髓基(ji)質(zhi)細胞(bao)培養(yang)基(ji) 100mL 大(da)鼠(shu)脫(tuo)氧膠原交聯(lian)(DPD)ELISA試劑(ji)盒 BrdU(Mouse Bromodeoxyuridine)  小(xiao)鼠(shu)溴(xiu)脫(tuo)氧核苷 96T

MAPKAP Kinase 2： 原活化(hua)蛋白(bai)激(ji)酶(mei)活化(hua)的蛋(dan)白(bai)激(ji)酶(mei)2抗體(ti) Acc-3細胞(bao)，涎(xian)腺腺樣囊(nang)性(xing)癌(ai)細胞(bao) 人胃癌細胞(bao),BSG823細胞(bao) 犬胸腺細胞(bao);cf2Th

APOM Others Human 人 APOM 人細(xi)胞(bao)裂解(jie)液(ye) (陽性(xing)對(dui)照) 大鼠(shu)脫(tuo)氧酚/脫(tuo)氧啉(DPD)ELISA試劑(ji)盒 ODF  大鼠(shu)破(po)骨細胞(bao)分(fen)化(hua)因子 96T

IGFBP4/IBP4： 結合(he)蛋(dan)白(bai)4抗體(ti) HA Others H5N1 甲型(xing)流感(gan) H5N1 (A/Anhui/1/2005) 血凝(ning)素 (Hemagglutinin / HA) 桿(gan)狀病(bing)毒-昆(kun)蟲細胞(bao)裂解(jie)液(ye) (陽性(xing)對(dui)照)

人小(xiao)腸(chang)平滑肌細(xi)胞(bao)培養(yang)基(ji) 100mL 人(ren)肝(gan)抗原(yuan)(HCV-Ag)ELISA試劑(ji)盒 LYVE-1(lymphalic vessel endotheilial hyaluronan receptor 1) 淋(lin)巴管內(nei)皮(pi)透(tou)明質(zhi)酸(suan)受(shou)體(ti)抗原(yuan) 0.5mg

ITGA7： 整合(he)素α7抗體(ti) 恒河(he)猴(hou)胚(pei)腎(shen)細(xi)胞(bao);FRhK-4 [FRhK4] 組(zu)織(zhi)細(xi)胞(bao)淋(lin)巴瘤，U937細胞(bao) A-673(橫紋肌瘤細胞(bao))

MSLN Others Human 人 MSLN / Mesothelin (aa 296-580) 人細(xi)胞(bao)裂解(jie)液(ye) (陽性(xing)對(dui)照) 人肝(gan)抗體(ti)(HCV)ELISA試劑(ji)盒 ACE( ACE, testis-specific isoform precursor) 血管緊張(zhang)素轉(zhuan)換(huan)酶(mei)(抗原(yuan)) 0.5mg

IL-7： 白(bai)介(jie)素7抗體(ti) CM-R023大鼠(shu)淋(lin)巴管內(nei)皮(pi)細(xi)胞(bao)培養(yang)基(ji)100mL

ProPakA.6人胚腎(shen)細胞(bao)TIG2： 受(shou)體(ti)應答(da)蛋(dan)白(bai)2抗體(ti) 結腸粘(zhan)膜(mo)上(shang)皮(pi)細(xi)胞(bao)Many types of cells包(bao)裝(zhuang)：5 × 105次方(1ml)

人星(xing)形膠質細胞(bao) 大鼠(shu)促(cu)腎上(shang)腺皮(pi)質(zhi)激(ji)素(ACTH)ELISA 試劑(ji)盒 GPI(Human glycophosphatidylinositol)  人糖0脂酰(xian)肌醇(chun) 96T

RAP1A： 抗Rap1A抗體(ti) CD63 Others Cynomolgus 食蟹猴(hou) CD63 / Tspan-30 / Teaspanin-30 人(ren)細(xi)胞(bao)裂解(jie)液(ye) (陽性(xing)對(dui)照)

U251 人神經(jing)膠質瘤細胞(bao) 大鼠(shu)促(cu)腎上(shang)皮(pi)質(zhi)激(ji)素釋放激(ji)素(CRH)ELISA試劑(ji)盒 PWM(Human pokeweed mitogen)  人美洲商陸素 96T

RAB7： RAS癌基(ji)因相(xiang)關(guan)蛋白(bai)RAB7抗體(ti) MEF-7/Adr細胞(bao)，腺癌阿(e)耐藥(yao)株 人卵巢癌(ai)細(xi)胞(bao),HOC1細胞(bao) 人成纖(xian)維(wei)細胞(bao)裂解(jie)物(wu)HMFL

三(san)、培養(yang)註(zhu)意(yi)事(shi)項 

1. 收(shou)到細(xi)胞(bao)後首先(xian)觀察(cha)細胞(bao)瓶是(shi)否完好(hao)，培養(yang)液(ye)是(shi)否有(you)漏液(ye)、渾(hun)濁等現(xian)象(xiang)，若(ruo)有(you)上(shang)述現(xian)象(xiang) 發生(sheng)請及(ji)時(shi)和我(wo)們(men)聯系。

2. 仔(zai)細閱(yue)讀(du)細胞(bao)說(shuo)明書，了解(jie)細(xi)胞(bao)相(xiang)關(guan)信(xin)息，如(ru)細(xi)胞(bao)形態、所用培(pei)養(yang)基(ji)、血清(qing)比(bi)例、所需 細胞(bao)因子等，確(que)保(bao)細(xi)胞(bao)培養(yang)條(tiao)件(jian)壹(yi)致，若(ruo)由於(yu)培(pei)養(yang)條(tiao)件(jian)不(bu)壹(yi)致而導致細胞(bao)出現(xian)問(wen)題，責任由 客戶(hu)自行承(cheng)擔(dan)。

3. 用 75%酒(jiu)精(jing)擦拭細胞(bao)瓶表面，顯微鏡下(xia)觀察(cha)細胞(bao)狀態。因運輸(shu)問(wen)題，部分(fen)細胞(bao)由於溫度 變化(hua)及劇(ju)烈(lie)碰(peng)亡破碎形成碎片(pian)，是(shi)正(zheng)常(chang)現(xian)象(xiang)。觀察(cha)好細(xi)胞(bao)狀態後，75%酒(jiu)精(jing)消(xiao)毒瓶壁(bi)將(jiang) T25 瓶置於(yu) 37℃培(pei)養(yang)箱放(fang)置 2-4h。

4. 貼壁(bi)細(xi)胞(bao)可(ke)以消(xiao)化(hua)，懸浮細(xi)胞(bao)直接(jie)混(hun)勻收(shou)集(ji)細胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，棄上(shang) 清(qing)。加(jia) 5 mL PBS 重懸(xuan)細胞(bao)，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，用新(xin)鮮的培(pei)養(yang)基(ji)重(zhong)懸 細胞(bao)，並接(jie)種(zhong)到新(xin)的培(pei)養(yang)瓶或(huo)培(pei)養(yang)皿(min)中(zhong)，置於(yu)培(pei)養(yang)箱中(zhong)進行培養(yang)。

5. 請(qing)客戶(hu)用相(xiang)同條(tiao)件(jian)的培(pei)養(yang)基(ji)用於(yu)細(xi)胞(bao)培養(yang)。

6. 建議客戶(hu)收(shou)到細(xi)胞(bao)後前 3 天各拍幾(ji)張(zhang)細(xi)胞(bao)照片(pian)，記(ji)錄細(xi)胞(bao)狀態，便(bian)於和我(wo)司技術(shu)部(bu)溝(gou)通 交(jiao)流(liu)。由於(yu)運(yun)輸(shu)的原(yuan)因，個別敏感(gan)細(xi)胞(bao)會出現(xian)不(bu)穩定的情(qing)況(kuang)，請(qing)及(ji)時(shi)和我(wo)們(men)聯系，告(gao)知細胞(bao) 的具(ju)體(ti)情況(kuang)，以(yi)便(bian)我(wo)們(men)的技(ji)術(shu)人員(yuan)跟蹤(zong)回(hui)訪直至問(wen)題解(jie)決(jue)。

7. 該(gai)細胞(bao)僅供科研(yan)使用。

8. 備註(zhu)：運(yun)輸(shu)用的培(pei)養(yang)基(ji) (灌(guan)液(ye)培養(yang)基(ji)) 不(bu)能再(zai)用來(lai)培(pei)養(yang)細(xi)胞(bao)，請換用按照說(shuo)明書細(xi)胞(bao)培 養(yang)條(tiao)件(jian)新(xin)配制(zhi)的培(pei)養(yang)基(ji)來(lai)培養(yang)細(xi)胞(bao)。     收(shou)到細(xi)胞(bao)後第(di)壹(yi)次傳代建議 1：2 傳代 。

9. 註(zhu)意(yi)：  1:2 傳代就是(shi) 1 個(ge) T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或(huo)者 2 個 6cm 皿(min)。不是(shi) 1 個(ge) T25 瓶傳 2 個10cm 皿(min)。