SCC-25人(ren)口(kou)腔(qiang)鱗癌(ai)細胞

公(gong)司產(chan)品僅(jin)供科研研究(jiu)使用、不(bu)得(de)用於臨床診(zhen)斷(duan)！

1、細胞傳代(dai)：

1）細胞生長至覆(fu)蓋培(pei)養(yang)瓶的(de) 80%面(mian)積(ji)時，棄(qi) 25cm2培(pei)養(yang)瓶中(zhong)的(de)培(pei)養(yang)液，用(yong) PBS 清洗細胞壹次；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消化液約(yue) 1ml 至培(pei)養(yang)瓶中(zhong)，倒(dao)置顯(xian)微(wei)鏡下(xia)觀察，待細胞回(hui)縮變(bian)圓後(hou)加(jia)入(ru) 5ml 培(pei)養(yang)

液終(zhong)止消化，再(zai)輕輕吹(chui)打(da)細胞使(shi)之(zhi)脫落(luo)，然後(hou)將(jiang)懸(xuan)液轉(zhuan)移(yi)至 15ml 離(li)心管(guan)中(zhong)，1000rpm 離(li)心 5min；

3）棄(qi)上清，沈澱細胞用(yong) 1-2ml 培(pei)養(yang)基重(zhong)懸(xuan)，然後(hou)按(an) 1:2 比例(li)進(jin)行分(fen)瓶(ping)傳代(dai)，最後(hou)放入(ru) 37℃，5%CO2細胞

培(pei)養(yang)箱中(zhong)培(pei)養(yang)；

2、細胞凍(dong)存：

1）細胞生長至覆(fu)蓋培(pei)養(yang)瓶的(de) 80%面(mian)積(ji)時，棄(qi) 25cm2培(pei)養(yang)瓶中(zhong)的(de)培(pei)養(yang)液，用(yong) PBS 清洗細胞壹次；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消化液約(yue) 1ml 至培(pei)養(yang)瓶中(zhong)，倒(dao)置顯(xian)微(wei)鏡下(xia)觀察，待細胞回(hui)縮變(bian)圓後(hou)加(jia)入(ru)培(pei)養(yang)液終(zhong)

止消化，輕(qing)輕吹打(da)細胞使(shi)之(zhi)脫落(luo)，然後(hou)將(jiang)懸(xuan)液轉(zhuan)移(yi)至 15ml 離(li)心管(guan)中(zhong)，1000rpm 離(li)心 5min；

3）用(yong)適量的(de)凍(dong)存液（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸(xuan)細胞，並(bing)放置於凍存管(guan)中(zhong)；

4）先(xian)將(jiang)細胞凍(dong)存管(guan)放置於-20℃ 1.5h，然後(hou)將(jiang)其移(yi)入(ru)-80℃過夜(ye)，24h 後(hou)轉(zhuan)入液氮(dan)中(zhong)進(jin)行長期保(bao)存。使用(yong)程(cheng)序(xu)

降(jiang)溫盒(he)可直接放入(ru)-80℃。

二、細胞培(pei)養(yang)操作(zuo)

1) 復(fu)蘇(su)細胞：以(yi)下(xia)細胞培(pei)養(yang)凍存(cun)處(chu)理(li)僅供參(can)考(kao)，具體(ti)操作(zuo)步驟(zhou)以(yi)隨(sui)貨(huo)產(chan)品說(shuo)明書為(wei)主(zhu)。將(jiang)含(han)有(you)1 mL細胞懸(xuan)液的(de)凍(dong)存(cun)管在(zai) 37℃水浴中(zhong)迅速(su)搖(yao)晃解凍，加(jia)4 mL培(pei)養(yang)基混(hun)合(he)均勻。在1000 rpm條(tiao)件(jian)下(xia)離(li)心3 min，棄(qi)去上清液，加(jia)1-2 mL培(pei)養(yang)基後(hou)吹(chui)勻。然後(hou)將(jiang)所(suo)有(you)細胞懸(xuan)液加(jia)入(ru)含(han)適量培(pei)養(yang)基的(de)培(pei)養(yang)瓶中(zhong)培(pei)養(yang)過夜(ye)（或(huo)將(jiang)細胞懸(xuan)液加(jia)入(ru)10 cm皿(min)中(zhong)，加(jia)入(ru)約(yue)8 mL培(pei)養(yang)基，培(pei)養(yang)過夜(ye)）。第二天換(huan)液並(bing)檢查細胞密(mi)度。

2) 細胞傳代(dai)：如果細胞密(mi)度達 80%-90%，即(ji)可進(jin)行傳代(dai)培(pei)養(yang)。

a、棄去(qu)培(pei)養(yang)上清，用不含鈣(gai)、鎂離(li)子(zi)的(de)PBS潤洗細胞1-2次。

b、加(jia)1 mL消(xiao)化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培(pei)養(yang)瓶中(zhong)，使(shi)消(xiao)化液浸(jin)潤(run)所(suo)有細胞，將(jiang)培(pei)養(yang)瓶置於37℃培(pei)養(yang)箱中(zhong)消(xiao)化1-2 min（視(shi)細胞情(qing)況而定），然後(hou)在(zai)顯(xian)微(wei)鏡下(xia)觀察細胞消(xiao)化情(qing)況，若(ruo)細胞大(da)部分(fen)變(bian)圓並脫落(luo)，迅速(su)拿回操(cao)作臺(tai)，輕敲(qiao)幾(ji)下(xia)培(pei)養(yang)瓶後(hou)加(jia)2-3ml培(pei)養(yang)基終(zhong)止消化。輕(qing)輕打(da)勻後(hou)裝(zhuang)入(ru)無菌(jun)離(li)心管(guan)中(zhong)，1000 rpm離(li)心5 min，棄(qi)去上清液，補加1-2 mL培(pei)養(yang)液後(hou)吹(chui)勻。

c、將(jiang)細胞懸(xuan)液按(an)1:2比例(li)分(fen)到新的(de)含(han)8 mL培(pei)養(yang)基的(de)新(xin)皿(min)中(zhong)或(huo)者瓶(ping)中(zhong)，置於培(pei)養(yang)箱中(zhong)培(pei)養(yang)。 3) 細胞凍(dong)存：待細胞生長狀(zhuang)態(tai)良(liang)好(hao)時，可進(jin)行細胞凍(dong)存。下(xia)面(mian) T25 瓶為(wei)例(li)；a、收集(ji)細胞及細胞培(pei)養(yang)液，裝(zhuang)入(ru)無菌(jun)離(li)心管(guan)中(zhong)，1000 rpm條(tiao)件(jian)下(xia)離(li)心4 min，棄(qi)去上清液，用(yong)PBS清洗壹遍(bian)，棄(qi)盡PBS，進(jin)行細胞計(ji)數(shu)。

b、根據(ju)細胞數(shu)量加(jia)入(ru)無血清細胞凍(dong)存液，使(shi)細胞密(mi)度5×106~1×107/mL，輕輕(qing)混勻，每(mei)支凍(dong)存(cun)管凍(dong)存(cun)1mL細胞懸(xuan)液，註(zhu)意凍(dong)存(cun)管做(zuo)好(hao)標(biao)識(shi)。將(jiang)凍(dong)存(cun)管放入(ru)-80℃冰(bing)箱(xiang)，24 h後(hou)轉(zhuan)入液氮(dan)灌(guan)儲(chu)存(cun)。記(ji)錄凍(dong)存管位(wei)置以(yi)便(bian)下(xia)次拿取(qu)。

公(gong)司正在出售的(de)產(chan)品：

CL-0167NCI-H292(人(ren)肺(fei)癌(ai)細胞)5×106cells/瓶(ping)×2 大鼠天冬(dong)酸(suan)轉(zhuan)酶(AST)ELISA試劑盒(he) M-CSF(Human Macrophage Colony-Stimulating Factor)  人(ren)巨(ju)噬細胞集(ji)落(luo)刺激因子(zi) 96T

Marek's Disease Vaccine, Live： 雞馬立克(ke)氏(shi)病火(huo)雞皰疹(zhen)病毒(du)抗體 tTA基因修(xiu)飾的小鼠胰(yi)腺癌(ai)細胞(B類(lei));Pan02-CAG-tTA-4B3

RK1(大(da)鼠腎細胞) 5×106cells/瓶(ping)×2 786-0(腎透(tou)明(ming)細胞腺(xian)癌(ai)) 大(da)鼠天冬(dong)酸(suan)基(ji)轉(zhuan)移(yi)酶(AST)ELISA試劑盒(he) P-PKC(Mouse phospho Protein Kinase C)  小鼠0酸化蛋(dan)白(bai)激酶C 96T

MDR1： 多(duo)藥耐(nai)藥蛋(dan)白(bai)/P-糖(tang)蛋(dan)白(bai)抗體 人口(kou)腔(qiang)表皮(pi)樣癌(ai)細胞;KB

LIF Protein Human 重(zhong)組(zu)人 LIF 蛋(dan)白(bai) (His 標(biao)簽) 大(da)鼠糖(tang)原0酸化酶同(tong)工酶MM(GP-MM)ELISA試劑盒(he) PPAR- Alpha  大(da)鼠過氧(yang)化物(wu)酶體增殖物(wu)激(ji)活(huo)受體(ti)α 96T

PC-3(人(ren)前(qian)列腺(xian)癌(ai)細胞) 5×106cells/瓶(ping)×2 食蟹猴 FGFR3 人(ren)細胞裂(lie)解液 (陽性對照) 人白細胞介(jie)素-2 受(shou)體(ti)(IL-2R)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) Muc-1/CD227 粘(zhan)蛋(dan)白(bai)-1/上皮(pi)膜 0.5mg

IL-33： 白(bai)介(jie)素33抗體 人肺(fei)成(cheng)纖(xian)維細胞HPF

CXCL12 Protein Human 重(zhong)組(zu)人 CXCL12 / SDF-1 蛋(dan)白(bai) (isoform a, His 標(biao)簽) 人(ren)白(bai)細胞介(jie)素17α(IL-17α)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) MyD88 (myeloid differential protein-88) 髓(sui)樣分(fen)化蛋(dan)白(bai)抗原 0.5mg

Importin 9： 核(he)蛋(dan)白(bai)9抗體 NMNAT2 Others Human 人 NMNAT2 / NMNAT-2 桿(gan)狀(zhuang)病毒(du)-昆(kun)蟲細胞裂(lie)解液 (陽性對照)

人(ren)肝實質細胞培(pei)養(yang)基 100mL 人(ren)白(bai)細胞介(jie)素-17(L-17)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) PMP2/FABP8(peripheral myelin protein 2) 周(zhou)圍神經(jing)髓(sui)鞘(qiao)蛋(dan)白(bai)2抗原 0.5mg

SCC-25人(ren)口(kou)腔(qiang)鱗癌(ai)細胞RBM3： RNA結(jie)合基(ji)因蛋(dan)白(bai)3抗體 IgG Others Human 人 IgG1-Fc 人(ren)細胞裂(lie)解液 (陽性對照)

人(ren)絨(rong)毛間(jian)葉成纖維細胞總(zong)RNAHVMF NA 大(da)鼠成纖(xian)維細胞生長因子(zi)6(FGF6)ELISA試(shi)劑盒(he) BSP(Human bone sialoprotein)  人(ren)骨涎蛋(dan)白(bai) 96T

RAB5： ras癌(ai)基(ji)因家(jia)族Rab5蛋(dan)白(bai)抗體 長尾綠猴(hou)腎(shen)細胞;4647

人(ren)永(yong)生化淋巴細胞;CNLMG-B5538LC 人(ren)肝動脈平(ping)滑(hua)肌(ji)細胞培(pei)養(yang)基 100mL 大(da)鼠成纖(xian)維細胞生長因子(zi)4(FGF4)ELISA試(shi)劑盒(he) BALP(Human bone alkaline phosphatase)  人(ren)骨堿性0酸酶 96T

Rab11： ras癌(ai)基(ji)因家(jia)族Rab11蛋(dan)白(bai)抗體 腹膜毛(mao)細血管(guan)內(nei)皮(pi)細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(fang)(1ml)

三(san)、培(pei)養(yang)註(zhu)意事(shi)項(xiang) 

1. 收到細胞後(hou)首(shou)先(xian)觀(guan)察細胞瓶(ping)是(shi)否完(wan)好(hao)，培(pei)養(yang)液是(shi)否有漏(lou)液、渾(hun)濁等(deng)現象(xiang)，若(ruo)有(you)上述(shu)現象(xiang) 發(fa)生請(qing)及時和(he)我(wo)們聯系。

2. 仔(zai)細閱讀(du)細胞說(shuo)明書(shu)，了(le)解(jie)細胞相關(guan)信(xin)息，如細胞形(xing)態(tai)、所(suo)用(yong)培(pei)養(yang)基、血(xue)清比例(li)、所(suo)需(xu) 細胞因子(zi)等(deng)，確保(bao)細胞培(pei)養(yang)條(tiao)件(jian)壹致，若(ruo)由(you)於培(pei)養(yang)條(tiao)件(jian)不(bu)壹致而導(dao)致細胞出現問題(ti)，責(ze)任(ren)由(you) 客(ke)戶自行承(cheng)擔(dan)。

3. 用 75%酒精(jing)擦拭(shi)細胞瓶(ping)表面(mian)，顯(xian)微(wei)鏡下(xia)觀察細胞狀(zhuang)態(tai)。因運輸問題(ti)，部分(fen)細胞由(you)於溫度 變(bian)化及劇烈(lie)碰(peng)亡破(po)碎(sui)形(xing)成(cheng)碎(sui)片(pian)，是(shi)正常現象(xiang)。觀(guan)察好(hao)細胞狀(zhuang)態(tai)後(hou)，75%酒(jiu)精(jing)消毒(du)瓶(ping)壁(bi)將(jiang) T25 瓶(ping)置於 37℃培(pei)養(yang)箱放置 2-4h。

4. 貼壁(bi)細胞可以(yi)消(xiao)化，懸(xuan)浮(fu)細胞直(zhi)接混勻收集(ji)細胞，900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，棄(qi)上 清。加 5 mL PBS 重懸(xuan)細胞，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，用(yong)新鮮的培(pei)養(yang)基重(zhong)懸(xuan) 細胞，並(bing)接種(zhong)到新的(de)培(pei)養(yang)瓶或(huo)培(pei)養(yang)皿(min)中(zhong)，置於培(pei)養(yang)箱中(zhong)進(jin)行培(pei)養(yang)。

5. 請(qing)客(ke)戶用(yong)相同(tong)條(tiao)件(jian)的(de)培(pei)養(yang)基用(yong)於細胞培(pei)養(yang)。

6. 建議(yi)客(ke)戶收到細胞後(hou)前(qian) 3 天各(ge)拍幾(ji)張(zhang)細胞照片(pian)，記(ji)錄細胞狀(zhuang)態(tai)，便(bian)於和(he)我(wo)司技術(shu)部溝通(tong) 交(jiao)流(liu)。由(you)於運輸的(de)原因，個(ge)別(bie)敏(min)感(gan)細胞會(hui)出現不(bu)穩定的(de)情(qing)況，請(qing)及時和(he)我(wo)們聯系，告(gao)知細胞 的(de)具體(ti)情(qing)況(kuang)，以(yi)便(bian)我(wo)們的(de)技術(shu)人員跟蹤回(hui)訪直至問題(ti)解決。

7. 該(gai)細胞僅(jin)供科研使用(yong)。

8. 備(bei)註(zhu)：運(yun)輸用的培(pei)養(yang)基 (灌(guan)液培(pei)養(yang)基) 不(bu)能(neng)再用來(lai)培(pei)養(yang)細胞，請(qing)換(huan)用按(an)照說明書細胞培(pei) 養(yang)條(tiao)件(jian)新(xin)配(pei)制(zhi)的培(pei)養(yang)基來(lai)培(pei)養(yang)細胞。     收到細胞後(hou)第(di)壹次傳代(dai)建議(yi) 1：2 傳代(dai) 。

9. 註(zhu)意：  1:2 傳代(dai)就是(shi) 1 個(ge) T25 瓶傳 2 個(ge) T25 瓶或(huo)者 2 個(ge) 6cm 皿(min)。不是(shi) 1 個(ge) T25 瓶傳 2 個(ge)10cm 皿(min)。