Taq酶(mei)活性的(de)定義是(shi)基於(yu)其(qi)在特定條(tiao)件(jian)下的(de)催化(hua)能力(li)，通(tong)常(chang)用單位酶(mei)活來表(biao)示(shi)。Taq酶(mei)活性檢測(ce)方(fang)法(fa)主要(yao)包括以下幾(ji)種(zhong)技(ji)術手段：

壹、生物(wu)發(fa)光(guang)技(ji)術：

1、通(tong)過檢測(ce)PCR反應中(zhong)產(chan)生的(de)焦磷酸(suan)(PPi)間接測(ce)定酶(mei)活性。具(ju)體(ti)步(bu)驟包括：

2、利用ATP硫(liu)酰化(hua)酶(mei)將PPi轉化(hua)為(wei)ATP。

3、通(tong)過蟲熒(ying)光(guang)素(su)酶(mei)系統發光檢測(ce)ATP量(liang)。

4、繪制焦磷酸(suan)標(biao)準(zhun)曲線計算酶(mei)活性。

二、熒(ying)光(guang)定量PCR：

利(li)用擴(kuo)增產(chan)物(wu)的(de)熒(ying)光(guang)信(xin)號強(qiang)度動(dong)態(tai)監測(ce)活(huo)性(xing)。

三、絕(jue)對活(huo)性(xing)測(ce)定法：

通(tong)過dATP消(xiao)耗量直(zhi)接計算活性，適用於(yu)精(jing)準(zhun)定量。

四(si)、功能標(biao)記檢測(ce)：

針(zhen)對特(te)定應用場(chang)景(jing)的(de)檢測(ce)：

使用基(ji)因(yin)型與表(biao)型方(fang)差(cha)分析評(ping)估(gu)等(deng)位變(bian)異(yi)類型。

通(tong)過POD活(huo)性等(deng)指標(biao)量(liang)化(hua)酶(mei)功能表(biao)現(xian)。

五(wu)、dNTP摻入法(fa)：

標(biao)準(zhun)活性(xing)定義方(fang)法(fa)：

1個酶(mei)單位(U)定義為(wei)在74℃下，30分鐘(zhong)內催化(hua)10 nmol dNTP摻入酸(suan)不溶物(wu)所(suo)需(xu)的(de)酶(mei)量

通(tong)過測(ce)定dNTP消(xiao)耗(hao)量(liang)或(huo)DNA合成量(liang)計算活性。

六(liu)、質量控制檢測(ce)：

包括：

1、核(he)酸(suan)內切(qie)酶(mei)活性檢測(ce)（質粒(li)DNA完整性(xing)）。

2、非特(te)異(yi)性(xing)核(he)酸(suan)酶(mei)活性檢測(ce)。

3、宿(xiu)主DNA殘(can)留檢測(ce)（qPCR法(fa)）。

不同(tong)檢測(ce)方(fang)法(fa)各有優劣(lie)，生物(wu)發(fa)光(guang)法(fa)靈敏(min)度高但操作復雜，dNTP摻入法(fa)簡(jian)便(bian)但特異(yi)性(xing)較(jiao)低，實際應用中(zhong)需(xu)根(gen)據檢測(ce)目(mu)的(de)選擇(ze)合適(shi)方(fang)法(fa)。‌