現常(chang)用(yong)血清(qing)主(zhu)要(yao)是牛血清(qing)、人(ren)血清(qing)、馬(ma)血清(qing)等(deng)。其(qi)中(zhong)牛(niu)血清(qing)來(lai)源充(chong)足、制(zhi)備(bei)技術成(cheng)熟、經過(guo)長(chang)時間(jian)的應(ying)用(yong)考(kao)驗人(ren)們對(dui)其(qi)有(you)比較(jiao)深入的(de)理解(jie),故(gu)而(er)是常用(yong)的血清(qing)。牛(niu)血清(qing)有(you)小(xiao)牛血清(qing)、新(xin)牛(niu)血清(qing)、胎(tai)牛(niu)血清(qing)。胎(tai)牛(niu)血清(qing)是品質(zhi)高(gao)的,因(yin)為胎(tai)牛還(hai)未(wei)接(jie)觸(chu)外界(jie),血清(qing)中(zhong)所(suo)含(han)的(de)抗(kang)體(ti)、補(bu)體(ti)等(deng)對(dui)細胞(bao)有(you)害(hai)的成(cheng)分(fen)最(zui)少。
血清(qing)的(de)質(zhi)量(liang)標準:
1. 內(nei)毒(du)素標準為(wei)不(bu)高(gao)於5EU/ml
2. 總蛋(dan)白(bai)含(han)量(liang)胎(tai)牛(niu)血清(qing)壹(yi)般(ban)範(fan)圍是30-40mg/ml,數值偏高(gao)偏低(di)都(dou)會(hui)影(ying)響(xiang)實驗(yan)的(de)正常進行
3. 血紅(hong)蛋(dan)白(bai)標準為(wei)不(bu)高(gao)於20mg/dl
4. pH。國產(chan)血清(qing)、大(da)多(duo)高(gao)於7.5,進(jin)口(kou)胎(tai)牛血清(qing),大(da)多(duo)低於7.5,根據PH的高(gao)低可(ke)用(yong)來初步(bu)鑒別(bie)血清(qing)的(de)來(lai)源
5. 微(wei)生(sheng)物。包(bao)括(kuo)細(xi)菌(jun)、黴(mei)菌(jun)、支原體、噬(shi)菌體、各類(lei)病(bing)原(yuan)性(xing)病(bing)毒(du)等,大(da)多(duo)都(dou)能清除。大(da)腸(chang)桿菌噬菌(jun)體(ti)無(wu)法過濾(lv),很難(nan)全清(qing)除,但(dan)對(dui)血清(qing)質(zhi)量(liang)影(ying)響(xiang)不(bu)大(da)。病(bing)原(yuan)性(xing)病(bing)毒(du),在(zai)國產(chan)血清(qing)中(zhong)幾(ji)乎(hu)90%以(yi)上都(dou)存(cun)在(zai),是影(ying)響(xiang)國(guo)產血清(qing)質(zhi)量(liang)的(de)重(zhong)要(yao)原(yuan)因(yin)之(zhi)壹(yi)。
在(zai)實際篩選(xuan)時(shi),主(zhu)要(yao)從血清(qing)外(wai)觀和(he)實驗(yan)操作(zuo)時(shi)細(xi)胞(bao)的(de)生(sheng)長狀(zhuang)態進行。
從外(wai)觀上:
1. 顏(yan)色(se):根據血紅(hong)蛋(dan)白(bai)含(han)量(liang)的(de)不(bu)同(tong),胎(tai)牛血清(qing)可(ke)表(biao)現(xian)出(chu)黃(huang)色或(huo)紅(hong)色,這(zhe)個指(zhi)標的意(yi)義(yi)在(zai)於能(neng)體現(xian)出(chu)采(cai)血過(guo)程(cheng)的嚴(yan)謹規範(fan)程(cheng)度。胎(tai)牛(niu)血清(qing)或(huo)多(duo)或(huo)少總有(you)點溶(rong)血,因(yin)為胎(tai)牛血清(qing)凝(ning)血功能差(cha),紅(hong)細胞(bao)容(rong)易(yi)破(po)裂;
2. 澄清(qing)度:高(gao)質(zhi)量(liang)的(de)胎牛(niu)血清(qing)由(you)於(yu)蛋白(bai)和(he)脂類(lei)等物(wu)質(zhi)含(han)量(liang)低(di),表(biao)現(xian)為(wei)稀薄、清(qing)淡(dan);
3. 血清(qing)沈(chen)澱(dian):血清(qing)中(zhong)的(de)沈澱(dian)是由纖維蛋白(bai)的凝(ning)聚(ju)產(chan)生(sheng),對(dui)血清(qing)質(zhi)量(liang)沒有(you)影(ying)響(xiang),沈(chen)澱的產(chan)生(sheng)原因(yin)跟加(jia)工生(sheng)產方(fang)式(shi)、是否(fou)反復凍(dong)融密切相關,在(zai)實驗(yan)操作(zuo)中(zhong)可(ke)能會(hui)對(dui)細胞(bao)觀察(cha)產(chan)生(sheng)影(ying)響(xiang)。
從性(xing)能(neng)上:
1. 細(xi)胞(bao)形(xing)態,在(zai)進行血清(qing)篩(shai)選(xuan)時首(shou)先(xian)觀察(cha)細(xi)胞(bao)的(de)生(sheng)長形(xing)態是否(fou)產生(sheng)明(ming)顯變(bian)化,以(yi)及(ji)觀察(cha)貼(tie)壁(bi)細(xi)胞(bao)的(de)貼(tie)壁(bi)情況,細胞(bao)在(zai)不(bu)同(tong)血清(qing)培(pei)養中可(ke)能會(hui)出(chu)現(xian)形(xing)態上的差異;
2. 倍增時間(jian),壹(yi)般(ban)情況下會(hui)選(xuan)擇(ze)倍增時間(jian)短的(de)血清(qing),值得(de)註(zhu)意(yi)的(de)是血清(qing)的(de)影(ying)響(xiang)會(hui)傳(chuan)至(zhi)5代,在(zai)進行測試時(shi),最(zui)好(hao)培養五代後進(jin)行計倍增時間(jian)的計算(suan)。