SW620人(ren)結直(zhi)腸腺(xian)癌(ai)細(xi)胞

公(gong)司(si)產品(pin)僅供科(ke)研研究(jiu)使(shi)用、不(bu)得(de)用於(yu)臨(lin)床(chuang)診(zhen)斷！

1、細(xi)胞傳(chuan)代：

1）細(xi)胞生長(chang)至覆蓋培養瓶(ping)的 80%面積(ji)時(shi)，棄(qi) 25cm2培養瓶(ping)中的培(pei)養液(ye)，用 PBS 清洗細(xi)胞壹(yi)次(ci)；

2）添加 0.25%消(xiao)化(hua)液約(yue) 1ml 至(zhi)培(pei)養瓶(ping)中，倒置(zhi)顯微(wei)鏡(jing)下(xia)觀察(cha)，待(dai)細(xi)胞回(hui)縮變(bian)圓(yuan)後(hou)加(jia)入 5ml 培(pei)養

液(ye)終(zhong)止(zhi)消(xiao)化(hua)，再(zai)輕(qing)輕(qing)吹打細(xi)胞使(shi)之脫(tuo)落，然(ran)後將懸液轉(zhuan)移至 15ml 離心管(guan)中，1000rpm 離心 5min；

3）棄(qi)上清，沈澱細(xi)胞用 1-2ml 培(pei)養基重懸(xuan)，然(ran)後按(an) 1:2 比例(li)進(jin)行分瓶(ping)傳(chuan)代，最(zui)後放入 37℃，5%CO2細(xi)胞

培(pei)養箱(xiang)中培養；

2、細(xi)胞凍存：

1）細(xi)胞生長(chang)至覆蓋培養瓶(ping)的 80%面積(ji)時(shi)，棄(qi) 25cm2培養瓶(ping)中的培(pei)養液(ye)，用 PBS 清洗細(xi)胞壹(yi)次(ci)；

2）添加 0.25%消(xiao)化(hua)液約(yue) 1ml 至(zhi)培(pei)養瓶(ping)中，倒置(zhi)顯微(wei)鏡(jing)下(xia)觀察(cha)，待(dai)細(xi)胞回(hui)縮變(bian)圓(yuan)後(hou)加(jia)入培(pei)養液(ye)終(zhong)

止(zhi)消(xiao)化(hua)，輕(qing)輕(qing)吹打細(xi)胞使(shi)之脫(tuo)落，然(ran)後將懸液轉(zhuan)移至 15ml 離心管(guan)中，1000rpm 離心 5min；

3）用適(shi)量的(de)凍存液(ye)（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸(xuan)細(xi)胞，並(bing)放置(zhi)於(yu)凍存管(guan)中；

4）先將細(xi)胞凍存管(guan)放置(zhi)於(yu)-20℃ 1.5h，然(ran)後將(jiang)其移入-80℃過(guo)夜(ye)，24h 後(hou)轉(zhuan)入液(ye)氮(dan)中進(jin)行長(chang)期(qi)保存。使(shi)用程(cheng)序(xu)

降溫(wen)盒可(ke)直(zhi)接放入-80℃。

二(er)、細(xi)胞培(pei)養操(cao)作

1) 復蘇細(xi)胞：以(yi)下(xia)細(xi)胞培(pei)養凍存處(chu)理僅供參考，具(ju)體(ti)操作步(bu)驟以(yi)隨貨產品(pin)說明(ming)書(shu)為主。將含有1 mL細(xi)胞懸(xuan)液的凍存管(guan)在 37℃水(shui)浴(yu)中迅(xun)速(su)搖晃解凍，加4 mL培(pei)養基混(hun)合均(jun)勻。在(zai)1000 rpm條件下(xia)離心3 min，棄(qi)去上(shang)清液(ye)，加(jia)1-2 mL培(pei)養基後吹(chui)勻(yun)。然後(hou)將所(suo)有細(xi)胞懸(xuan)液加入含適(shi)量培(pei)養基的培(pei)養瓶(ping)中培養過(guo)夜(ye)（或(huo)將(jiang)細(xi)胞懸(xuan)液加入10 cm皿中，加入約(yue)8 mL培(pei)養基，培養過(guo)夜(ye)）。第二(er)天(tian)換液(ye)並(bing)檢查細(xi)胞密度(du)。

2) 細(xi)胞傳(chuan)代：如(ru)果(guo)細(xi)胞密度(du)達(da) 80%-90%，即(ji)可(ke)進(jin)行傳(chuan)代培(pei)養。

a、棄(qi)去培(pei)養上(shang)清，用不(bu)含鈣(gai)、鎂(mei)離子(zi)的PBS潤(run)洗細(xi)胞1-2次(ci)。

b、加(jia)1 mL消(xiao)化(hua)液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培(pei)養瓶(ping)中，使(shi)消(xiao)化(hua)液浸潤(run)所(suo)有細(xi)胞，將(jiang)培養瓶(ping)置(zhi)於(yu)37℃培(pei)養箱(xiang)中消(xiao)化(hua)1-2 min（視細(xi)胞情況而定），然(ran)後(hou)在顯微(wei)鏡(jing)下(xia)觀察(cha)細(xi)胞消(xiao)化(hua)情況，若細(xi)胞大(da)部分(fen)變圓(yuan)並(bing)脫(tuo)落，迅(xun)速(su)拿(na)回(hui)操作臺，輕(qing)敲幾下(xia)培養瓶(ping)後加(jia)2-3ml培(pei)養基終止(zhi)消(xiao)化(hua)。輕(qing)輕(qing)打勻(yun)後(hou)裝入無(wu)菌離心管(guan)中，1000 rpm離心5 min，棄(qi)去上(shang)清液(ye)，補加1-2 mL培(pei)養液(ye)後(hou)吹勻。

c、將(jiang)細(xi)胞懸(xuan)液按1:2比例(li)分到(dao)新的含8 mL培養基的新皿中或(huo)者(zhe)瓶(ping)中，置(zhi)於(yu)培(pei)養箱(xiang)中培養。 3) 細(xi)胞凍存：待(dai)細(xi)胞生長(chang)狀態良好時(shi)，可(ke)進(jin)行細(xi)胞凍存。下(xia)面 T25 瓶(ping)為例(li)；a、收(shou)集(ji)細(xi)胞及(ji)細(xi)胞培(pei)養液(ye)，裝(zhuang)入無(wu)菌離心管(guan)中，1000 rpm條件下(xia)離心4 min，棄(qi)去上(shang)清液(ye)，用PBS清洗壹遍，棄(qi)盡(jin)PBS，進(jin)行細(xi)胞計(ji)數。

b、根據(ju)細(xi)胞數量加(jia)入無(wu)血清細(xi)胞凍存液(ye)，使(shi)細(xi)胞密度(du)5×106~1×107/mL，輕(qing)輕(qing)混(hun)勻，每支凍存管(guan)凍存1mL細(xi)胞懸(xuan)液，註(zhu)意(yi)凍存管(guan)做(zuo)好標識。將凍存管(guan)放入-80℃冰(bing)箱(xiang)，24 h後(hou)轉(zhuan)入液(ye)氮(dan)灌(guan)儲(chu)存。記(ji)錄(lu)凍存管(guan)位(wei)置(zhi)以(yi)便下(xia)次(ci)拿(na)取(qu)。

公(gong)司(si)正在出(chu)售的(de)產品(pin)：

NMDAR2B： 谷(gu)酸(suan)受(shou)體(ti)2B抗體(ti) SRPK3 Others Human 人(ren) STK23 / MSSK1 / SRPK3 桿狀病毒-昆(kun)蟲細(xi)胞裂(lie)解液 (陽(yang)性(xing)對照(zhao))

小(xiao)鼠(shu)腸上皮細(xi)胞培(pei)養基 100mL 大鼠(shu)酸脫(tuo)氫酶(mei)α(PDHα)ELISA試劑(ji)盒(he) CR  大(da)鼠(shu)鈣(gai)結合(he)蛋(dan)白(bai) 96T

Neuropilin 2： 神(shen)經(jing)纖(xian)毛蛋(dan)白(bai)2抗體(ti) NG108-15[108CC15]細(xi)胞，小(xiao)鼠(shu)神經(jing)細(xi)胞瘤(liu)與大鼠(shu)神經(jing)膠(jiao)質瘤之融合(he)細(xi)胞 人(ren)結腸(chang)癌細(xi)胞,Colo205細(xi)胞 高背鯽(ji)魚(yu)尾(wei)鰭(qi)細(xi)胞;GBJd

ANGPT4 Others Human 人(ren) Angiopoietin 4 / ANG4 / ANGPT4 人(ren)細(xi)胞裂(lie)解液 (陽(yang)性(xing)對照(zhao)) 大鼠(shu)酸脫(tuo)氫酶(mei)E1(PDH E1) ELISA 試劑(ji)盒(he) IL-4(Mouse Interleukin 4)  小(xiao)鼠(shu)白介(jie)素(su)4 96T

NR2D： 谷(gu)酸(suan)受(shou)體(ti)2D抗體(ti) 周細(xi)胞生長(chang)添加物PGS

phospho-IKK beta(Tyr199)： 0酸(suan)化(hua)KB抑制(zhi)蛋(dan)白(bai)激酶β抗體(ti) SCLY Others Human 人(ren) SCLY / Selenocysteine Lyase 桿狀病毒-昆(kun)蟲細(xi)胞裂(lie)解液 (陽(yang)性(xing)對照(zhao))

人(ren)卵(luan)巢成(cheng)纖(xian)維(wei)細(xi)胞培(pei)養基 100mL 人(ren)γ幹(gan)擾(rao)素(su)誘(you)導(dao)蛋(dan)白(bai)16/p16(IFI16/p16)ELISA 試劑(ji)盒(he) PEPT2 (Peptide-transporters 2) 腸(chang)道(dao)肽轉(zhuan)運蛋(dan)白(bai)2/小肽轉(zhuan)運蛋(dan)白(bai)2抗原 0.5mg

phospho-IKK beta(Tyr188)： 0酸(suan)化(hua)KB抑制(zhi)蛋(dan)白(bai)激酶β抗體(ti) 恒河猴(hou)腎(shen)細(xi)胞;MMK2 人(ren)腦(nao)星(xing)型(xing)膠(jiao)質瘤細(xi)胞，SW 1088[SW-1088;SW1088]細(xi)胞 T-47D(管(guan)癌細(xi)胞)

CD47 Others Rat 大(da)鼠(shu) CD47 人(ren)細(xi)胞裂(lie)解液 (陽(yang)性(xing)對照(zhao)) 人(ren)γ幹(gan)擾(rao)素(su)誘(you)導(dao)單(dan)核細(xi)胞因(yin)子(MIGF/CXCL9)ELISA 試劑(ji)盒(he) PERK(PRKR-like endoplasmic reticulum kinase) 蛋(dan)白(bai)激酶R樣內質網激酶抗原 0.5mg

phospho-IKK alpha (Tyr463)： 0酸(suan)化(hua)KB抑制(zhi)蛋(dan)白(bai)激酶α抗體(ti) CM-H014人(ren)氣(qi)管(guan)平滑(hua)肌(ji)細(xi)胞培(pei)養基100mL

SW620人(ren)結直(zhi)腸腺(xian)癌(ai)細(xi)胞RFTN2： RFTN2蛋(dan)白(bai)抗體(ti) 非洲(zhou)綠(lv)猴(hou)腎(shen)細(xi)胞系/HCV-E1;Vero-HCV-E1

雙位(wei)點HC-kit受(shou)體(ti)細(xi)胞株(zhu);DMF7 人(ren)子(zi)宮內膜(mo)上皮細(xi)胞培(pei)養基 100mL 大鼠(shu)二(er)(MDA)ELISA試劑(ji)盒(he) DPYSL3(Human dihydropyrimidinase-like 3)  人(ren)二(er)氫(qing)嘧(mi)啶(ding)酶樣3 96T

RNF213： 環(huan)指(zhi)蛋(dan)白(bai)213 0.1ml

Rhesus antibody Rh MAP-9 微(wei)管(guan)相關(guan)蛋(dan)白(bai)9抗體(ti) CaEs-17, 人(ren)食管(guan)癌細(xi)胞株(zhu)

rRTEC, 大(da)鼠(shu)腎(shen)小管(guan)上皮細(xi)胞 大(da)鼠(shu)二(er)(MDA)ELISA 試劑(ji)盒(he) WARS(Human tryptophanyl-tRNA synthetase)  人(ren)色(se)酰tRNA合成(cheng)酶(mei) 96T

三、培養註(zhu)意(yi)事(shi)項 

1. 收(shou)到(dao)細(xi)胞後(hou)首先觀察(cha)細(xi)胞瓶(ping)是否完(wan)好(hao)，培(pei)養液(ye)是(shi)否有漏液、渾(hun)濁(zhuo)等現(xian)象(xiang)，若有上(shang)述現(xian)象(xiang) 發生請(qing)及(ji)時(shi)和我(wo)們(men)聯(lian)系。

2. 仔(zai)細(xi)閱讀(du)細(xi)胞說(shuo)明(ming)書(shu)，了解細(xi)胞相(xiang)關信息，如細(xi)胞形態、所(suo)用培(pei)養基、血清比例(li)、所(suo)需 細(xi)胞因(yin)子等(deng)，確保(bao)細(xi)胞培(pei)養條(tiao)件壹致(zhi)，若由於(yu)培(pei)養條(tiao)件不(bu)壹(yi)致而導致(zhi)細(xi)胞出(chu)現(xian)問題，責(ze)任由(you) 客戶自行(xing)承(cheng)擔(dan)。

3. 用 75%酒(jiu)精(jing)擦(ca)拭(shi)細(xi)胞瓶(ping)表面，顯微(wei)鏡(jing)下(xia)觀察(cha)細(xi)胞狀態。因(yin)運輸(shu)問題，部分(fen)細(xi)胞由(you)於溫(wen)度(du) 變(bian)化(hua)及(ji)劇(ju)烈(lie)碰亡(wang)破碎(sui)形成(cheng)碎(sui)片(pian)，是正常現(xian)象(xiang)。觀察(cha)好(hao)細(xi)胞狀態後(hou)，75%酒精(jing)消(xiao)毒瓶(ping)壁將 T25 瓶(ping)置(zhi)於(yu) 37℃培(pei)養箱(xiang)放置(zhi) 2-4h。

4. 貼(tie)壁細(xi)胞可(ke)以(yi)消(xiao)化(hua)，懸浮(fu)細(xi)胞直(zhi)接混(hun)勻收(shou)集(ji)細(xi)胞，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄(qi)上 清。加(jia) 5 mL PBS 重(zhong)懸(xuan)細(xi)胞，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，用新鮮的培(pei)養基重懸(xuan) 細(xi)胞，並(bing)接(jie)種到(dao)新的培養瓶(ping)或(huo)培(pei)養皿中，置(zhi)於(yu)培(pei)養箱(xiang)中進(jin)行培養。

5. 請(qing)客戶用相(xiang)同(tong)條件的培(pei)養基用於(yu)細(xi)胞培(pei)養。

6. 建議客戶收到(dao)細(xi)胞後(hou)前 3 天(tian)各拍(pai)幾張(zhang)細(xi)胞照(zhao)片(pian)，記錄(lu)細(xi)胞狀態，便於(yu)和我(wo)司(si)技(ji)術部溝(gou)通 交流。由於(yu)運輸的原因(yin)，個別(bie)敏(min)感細(xi)胞會(hui)出(chu)現(xian)不(bu)穩(wen)定的情況，請(qing)及(ji)時(shi)和我(wo)們(men)聯(lian)系，告知細(xi)胞 的(de)具(ju)體(ti)情況，以(yi)便我(wo)們(men)的技(ji)術人(ren)員(yuan)跟蹤回(hui)訪直(zhi)至問題解決。

7. 該(gai)細(xi)胞僅供科(ke)研使(shi)用。

8. 備(bei)註(zhu)：運(yun)輸用的(de)培(pei)養基 (灌液(ye)培(pei)養基) 不(bu)能(neng)再(zai)用來培(pei)養細(xi)胞，請(qing)換用按(an)照(zhao)說明(ming)書(shu)細(xi)胞培(pei) 養條(tiao)件新配制的(de)培(pei)養基來培(pei)養細(xi)胞。     收(shou)到(dao)細(xi)胞後(hou)第壹(yi)次(ci)傳(chuan)代建議 1：2 傳(chuan)代 。

9. 註(zhu)意(yi)：  1:2 傳(chuan)代就(jiu)是 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個 T25 瓶(ping)或(huo)者(zhe) 2 個(ge) 6cm 皿。不(bu)是(shi) 1 個 T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個10cm 皿。