SW982 SW-982人(ren)滑(hua)膜(mo)肉瘤(liu)細胞(bao)

公(gong)司產品僅供(gong)科研研究使(shi)用(yong)、不(bu)得(de)用(yong)於臨床(chuang)診斷！

1、細胞(bao)傳代(dai)：

1）細胞(bao)生(sheng)長至(zhi)覆(fu)蓋(gai)培養瓶的(de) 80%面(mian)積(ji)時，棄(qi) 25cm2培(pei)養瓶中的(de)培(pei)養液(ye)，用(yong) PBS 清洗細胞(bao)壹次；

2）添加(jia) 0.25%消化(hua)液約(yue) 1ml 至(zhi)培(pei)養瓶中，倒置顯微鏡(jing)下(xia)觀察，待(dai)細胞(bao)回(hui)縮(suo)變圓(yuan)後加(jia)入(ru) 5ml 培養

液(ye)終止(zhi)消化(hua)，再輕輕吹打(da)細胞(bao)使(shi)之(zhi)脫(tuo)落，然(ran)後將懸(xuan)液轉(zhuan)移(yi)至 15ml 離(li)心管(guan)中，1000rpm 離(li)心 5min；

3）棄(qi)上(shang)清，沈澱細胞(bao)用(yong) 1-2ml 培(pei)養基(ji)重(zhong)懸(xuan)，然(ran)後按(an) 1:2 比(bi)例(li)進(jin)行(xing)分(fen)瓶傳代(dai)，最(zui)後(hou)放(fang)入 37℃，5%CO2細胞(bao)

培養箱(xiang)中培(pei)養；

2、細胞(bao)凍(dong)存(cun)：

1）細胞(bao)生(sheng)長至(zhi)覆(fu)蓋(gai)培養瓶的(de) 80%面(mian)積(ji)時，棄(qi) 25cm2培(pei)養瓶中的(de)培(pei)養液(ye)，用(yong) PBS 清洗細胞(bao)壹次；

2）添加(jia) 0.25%消化(hua)液約(yue) 1ml 至(zhi)培(pei)養瓶中，倒置顯微鏡(jing)下(xia)觀察，待(dai)細胞(bao)回(hui)縮(suo)變圓(yuan)後加(jia)入(ru)培養液(ye)終

止(zhi)消化(hua)，輕輕(qing)吹(chui)打(da)細胞(bao)使(shi)之(zhi)脫(tuo)落，然(ran)後將懸(xuan)液轉(zhuan)移(yi)至 15ml 離(li)心管(guan)中，1000rpm 離(li)心 5min；

3）用(yong)適量的(de)凍(dong)存(cun)液（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸(xuan)細胞(bao)，並放(fang)置於凍(dong)存(cun)管(guan)中；

4）先(xian)將細胞(bao)凍(dong)存(cun)管(guan)放(fang)置於-20℃ 1.5h，然(ran)後將其移(yi)入-80℃過(guo)夜(ye)，24h 後(hou)轉(zhuan)入(ru)液氮中進(jin)行(xing)長期保存(cun)。使(shi)用(yong)程(cheng)序(xu)

降(jiang)溫(wen)盒(he)可直接放入(ru)-80℃。

二(er)、細胞(bao)培養操(cao)作(zuo)

1) 復(fu)蘇細胞(bao)：以(yi)下(xia)細胞(bao)培養凍(dong)存(cun)處理僅供參考(kao)，具(ju)體操作(zuo)步驟以(yi)隨(sui)貨產品說明書為主(zhu)。將含有1 mL細胞(bao)懸(xuan)液的(de)凍(dong)存(cun)管(guan)在 37℃水(shui)浴(yu)中迅(xun)速(su)搖晃(huang)解凍(dong)，加(jia)4 mL培(pei)養基(ji)混(hun)合均(jun)勻(yun)。在1000 rpm條(tiao)件下(xia)離(li)心3 min，棄(qi)去(qu)上清液，加(jia)1-2 mL培(pei)養基(ji)後(hou)吹(chui)勻(yun)。然(ran)後將所(suo)有(you)細胞(bao)懸(xuan)液加(jia)入(ru)含適量培(pei)養基(ji)的(de)培(pei)養瓶中培(pei)養過(guo)夜(ye)（或(huo)將細胞(bao)懸(xuan)液加(jia)入(ru)10 cm皿(min)中，加(jia)入(ru)約8 mL培養基(ji)，培(pei)養過(guo)夜(ye)）。第二天換液(ye)並檢(jian)查細胞(bao)密度(du)。

2) 細胞(bao)傳代(dai)：如(ru)果細胞(bao)密度(du)達 80%-90%，即(ji)可(ke)進行傳(chuan)代(dai)培(pei)養。

a、棄(qi)去(qu)培養上(shang)清，用(yong)不(bu)含鈣、鎂(mei)離(li)子的(de)PBS潤(run)洗細胞(bao)1-2次。

b、加(jia)1 mL消化(hua)液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培養瓶中，使(shi)消化(hua)液浸(jin)潤(run)所(suo)有(you)細胞(bao)，將培養瓶置於37℃培養箱(xiang)中消化(hua)1-2 min（視細胞(bao)情況而定(ding)），然(ran)後在顯微鏡(jing)下(xia)觀察細胞(bao)消化(hua)情況，若(ruo)細胞(bao)大(da)部分(fen)變(bian)圓(yuan)並脫(tuo)落，迅(xun)速(su)拿回(hui)操作(zuo)臺，輕(qing)敲(qiao)幾(ji)下(xia)培(pei)養瓶後加(jia)2-3ml培(pei)養基(ji)終(zhong)止(zhi)消化(hua)。輕輕(qing)打(da)勻(yun)後(hou)裝(zhuang)入(ru)無菌離(li)心管(guan)中，1000 rpm離(li)心5 min，棄(qi)去(qu)上清液，補加(jia)1-2 mL培(pei)養液(ye)後吹(chui)勻(yun)。

c、將細胞(bao)懸(xuan)液按(an)1:2比(bi)例(li)分(fen)到(dao)新(xin)的(de)含8 mL培養基(ji)的(de)新(xin)皿(min)中或(huo)者(zhe)瓶中，置於培養箱(xiang)中培(pei)養。 3) 細胞(bao)凍(dong)存(cun)：待(dai)細胞(bao)生(sheng)長狀態(tai)良(liang)好(hao)時(shi)，可(ke)進(jin)行細胞(bao)凍(dong)存(cun)。下(xia)面(mian) T25 瓶為例(li)；a、收(shou)集細胞(bao)及(ji)細胞(bao)培養液(ye)，裝(zhuang)入(ru)無菌離(li)心管(guan)中，1000 rpm條(tiao)件下(xia)離(li)心4 min，棄(qi)去(qu)上清液，用(yong)PBS清洗壹(yi)遍(bian)，棄(qi)盡(jin)PBS，進(jin)行(xing)細胞(bao)計(ji)數(shu)。

b、根(gen)據細胞(bao)數量(liang)加(jia)入(ru)無血(xue)清細胞(bao)凍(dong)存(cun)液，使(shi)細胞(bao)密度(du)5×106~1×107/mL，輕(qing)輕(qing)混(hun)勻(yun)，每(mei)支凍(dong)存(cun)管(guan)凍(dong)存(cun)1mL細胞(bao)懸(xuan)液，註意(yi)凍(dong)存(cun)管(guan)做好標識。將凍(dong)存(cun)管(guan)放(fang)入-80℃冰(bing)箱(xiang)，24 h後轉(zhuan)入液(ye)氮灌(guan)儲存(cun)。記錄(lu)凍(dong)存(cun)管(guan)位(wei)置以(yi)便(bian)下(xia)次拿取。

三(san)、培養註意(yi)事(shi)項 

1. 收到(dao)細胞(bao)後首(shou)先(xian)觀察細胞(bao)瓶是否完(wan)好(hao)，培(pei)養液(ye)是否有漏(lou)液(ye)、渾濁等現(xian)象(xiang)，若(ruo)有上(shang)述(shu)現象 發生(sheng)請及(ji)時和我(wo)們(men)聯系。

2. 仔(zai)細閱讀(du)細胞(bao)說明書，了解細胞(bao)相(xiang)關信息(xi)，如細胞(bao)形態(tai)、所(suo)用(yong)培(pei)養基(ji)、血(xue)清比(bi)例(li)、所(suo)需(xu) 細胞(bao)因子等，確(que)保細胞(bao)培養條(tiao)件壹(yi)致，若(ruo)由於培養條(tiao)件不(bu)壹致(zhi)而導致(zhi)細胞(bao)出現問題(ti)，責(ze)任由(you) 客(ke)戶(hu)自行承(cheng)擔。

3. 用(yong) 75%酒精(jing)擦(ca)拭細胞(bao)瓶表(biao)面(mian)，顯微鏡(jing)下(xia)觀察細胞(bao)狀態(tai)。因運(yun)輸問題(ti)，部分(fen)細胞(bao)由於溫(wen)度(du) 變化(hua)及(ji)劇烈碰(peng)亡破碎(sui)形(xing)成(cheng)碎(sui)片(pian)，是(shi)正常現象。觀察好細胞(bao)狀態(tai)後(hou)，75%酒精(jing)消毒(du)瓶壁將 T25 瓶置於 37℃培養箱(xiang)放置 2-4h。

4. 貼(tie)壁(bi)細胞(bao)可以(yi)消化(hua)，懸(xuan)浮(fu)細胞(bao)直接混(hun)勻(yun)收(shou)集細胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，棄(qi)上(shang) 清。加(jia) 5 mL PBS 重(zhong)懸(xuan)細胞(bao)，再 900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，用(yong)新(xin)鮮(xian)的(de)培(pei)養基(ji)重(zhong)懸(xuan) 細胞(bao)，並接種到(dao)新的(de)培(pei)養瓶或培養皿(min)中，置於培養箱(xiang)中進(jin)行(xing)培養。

5. 請客(ke)戶(hu)用(yong)相(xiang)同條(tiao)件的(de)培(pei)養基(ji)用(yong)於細胞(bao)培養。

6. 建(jian)議(yi)客(ke)戶(hu)收(shou)到(dao)細胞(bao)後前(qian) 3 天(tian)各(ge)拍(pai)幾(ji)張(zhang)細胞(bao)照片(pian)，記錄(lu)細胞(bao)狀態(tai)，便(bian)於和我(wo)司(si)技術部溝(gou)通 交(jiao)流。由於運(yun)輸的(de)原(yuan)因，個別(bie)敏感細胞(bao)會出現不穩定(ding)的(de)情況，請及(ji)時和我(wo)們(men)聯系，告知細胞(bao) 的(de)具(ju)體情況，以(yi)便(bian)我們(men)的(de)技術人(ren)員(yuan)跟(gen)蹤回(hui)訪(fang)直(zhi)至(zhi)問題解(jie)決。

7. 該細胞(bao)僅供(gong)科(ke)研使(shi)用(yong)。

8. 備註：運(yun)輸用(yong)的(de)培(pei)養基(ji) (灌(guan)液培(pei)養基(ji)) 不(bu)能(neng)再用(yong)來(lai)培(pei)養細胞(bao)，請換(huan)用(yong)按(an)照說(shuo)明書細胞(bao)培 養條(tiao)件新(xin)配(pei)制(zhi)的(de)培(pei)養基(ji)來(lai)培(pei)養細胞(bao)。     收到(dao)細胞(bao)後第壹次傳代(dai)建(jian)議(yi) 1：2 傳(chuan)代(dai) 。

9. 註意(yi)：  1:2 傳(chuan)代(dai)就(jiu)是(shi) 1 個(ge) T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或者(zhe) 2 個(ge) 6cm 皿(min)。不是(shi) 1 個 T25 瓶傳 2 個10cm 皿(min)。

公司(si)正在出售(shou)的(de)產品：

Neurotrophin 3： 神(shen)經營(ying)養因子-3前(qian)蛋(dan)白抗(kang)體(ti) 成(cheng)纖(xian)維(wei)細胞(bao)生(sheng)長添(tian)加(jia)物-2FGS-2

Y1小鼠腎上腺皮(pi)質(zhi)瘤(liu)細胞(bao) Y1 mouse adrenocortical tumor cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS 大(da)鼠酸(suan)性(xing)0酸(suan)酶1(ACP1)ELISA試劑(ji)盒(he) IGFBP-1(Mouse Insulin-like growth factor binding protein 1)  小鼠結合蛋(dan)白1 96T

Nurr1： 核(he)受體(ti)相(xiang)關因子-1抗(kang)體(ti) SCARB1 Others Mouse 小鼠 SCARB1 / CD36L1 / CLA-1 人(ren)細胞(bao)裂解液(ye) (陽性(xing)對照)

CL-0071CT26.WT(小鼠結腸癌細胞(bao))5×106cells/瓶×2 大(da)鼠酸(suan)性(xing)0酸(suan)酶(ACP)ELISA試劑(ji)盒(he) Beta-DF  大(da)鼠β-防(fang)禦素 96T

Nrf2： 核(he)因子2相(xiang)關因子2抗(kang)體(ti) 大(da)鼠肝細胞(bao);IAR20

IL-12： 白介(jie)素12抗(kang)體(ti) CM-H030人(ren)外(wai)周血(xue)白細胞(bao)培養基(ji)100mL

SP2/0細胞(bao)，小鼠骨髓瘤(liu)細胞(bao) CTLL-2(T細胞(bao)) 人(ren)胚肺(fei)成(cheng)纖(xian)維(wei)細胞(bao);HFL1 人(ren)阿(e)米巴(Amebiasis)ELISA 試劑(ji)盒(he) LI-cadherin(liver-intestine cadherin) 肝腸鈣粘(zhan)連蛋(dan)白抗(kang)原(yuan) 0.5mg

IL-4： 白介(jie)素4抗(kang)體(ti) IL3RA Others Human 人(ren) IL3RA / CD123 人(ren)細胞(bao)裂解液(ye) (陽性(xing)對照)

人(ren)前(qian)列(lie)腺(xian)癌(ai)細胞(bao);DU 145 [DU145;DU-145] 人(ren)阿(e)立(li)新(xin)A(Orexin A)ELISA 試劑(ji)盒(he) PDCD4(programmed cell death 4) 雕(diao)亡(wang)相(xiang)關蛋(dan)白4抗(kang)原(yuan) 0.5mg

IGFBP9： 結合(he)蛋(dan)白9抗(kang)體(ti) 人(ren)腎(shen)癌(ai)Wilms細胞(bao);G401

SW982 [SW-982]人(ren)滑(hua)膜(mo)肉瘤(liu)細胞(bao)RAB6C： RAS癌基(ji)因相(xiang)關蛋(dan)白Rab6C抗(kang)體(ti) TDGF1 Others Rat 大(da)鼠 Cripto / TDGF1 人(ren)細胞(bao)裂解液(ye) (陽性(xing)對照)

肝癌(ai)細胞(bao)HBV病(bing)毒(du)株 大(da)鼠補體C3a(C3a)ELISA試劑(ji)盒(he) BACE2(Human beta-site APP-cleaving enzyme 2)  人(ren)β位(wei)澱(dian)粉(fen)樣(yang)前(qian)體(ti)蛋(dan)白裂解酶2 96T

RAP1GAP： RAP1GAP酶激(ji)活(huo)蛋(dan)白抗(kang)體(ti) RCC-krause細胞(bao)，腎癌(ai)細胞(bao) 人(ren)細胞(bao),CaSKi細胞(bao) 人(ren)內(nei)根殼細胞(bao)總RNAHHIRSC NA

ACPP Others Human 人(ren) ACPP / PSAP 人(ren)細胞(bao)裂解液(ye) (陽性(xing)對照) 大(da)鼠補體5a(C5a)ELISA 試劑(ji)盒(he) UPP1(Human uridine phosphorylase 1)  人(ren)核(he)苷(gan)0酸(suan)化(hua)酶1 96T

Ret： 原癌(ai)基(ji)因酪(lao)酸(suan)蛋(dan)白激(ji)酶受(shou)體RET/多(duo)發性(xing)內(nei)分泌腺瘤(liu)和甲(jia)狀腺(xian)髓樣(yang)癌(ai)蛋(dan)白抗(kang)體(ti) 小鼠B細胞(bao)雜交瘤(liu)細胞(bao);W6/32