TE-12人(ren)食管癌(ai)細胞(bao)

公(gong)司(si)產(chan)品僅(jin)供(gong)科研(yan)研(yan)究使(shi)用(yong)、不得用(yong)於臨(lin)床(chuang)診(zhen)斷(duan)！

1、細胞(bao)傳代：

1）細胞(bao)生長(chang)至(zhi)覆蓋(gai)培(pei)養(yang)瓶的(de) 80%面(mian)積(ji)時，棄(qi) 25cm2培(pei)養(yang)瓶中(zhong)的(de)培(pei)養(yang)液，用(yong) PBS 清(qing)洗細胞(bao)壹次；

2）添(tian)加 0.25%消(xiao)化液約 1ml 至(zhi)培(pei)養(yang)瓶中(zhong)，倒置顯(xian)微(wei)鏡下(xia)觀(guan)察，待(dai)細胞(bao)回縮變(bian)圓後加入(ru) 5ml 培(pei)養(yang)

液終(zhong)止消(xiao)化，再(zai)輕輕(qing)吹打(da)細胞(bao)使(shi)之脫(tuo)落(luo)，然後將懸液(ye)轉(zhuan)移(yi)至(zhi) 15ml 離心管(guan)中(zhong)，1000rpm 離(li)心 5min；

3）棄(qi)上(shang)清，沈(chen)澱(dian)細胞(bao)用(yong) 1-2ml 培(pei)養(yang)基重(zhong)懸(xuan)，然後按 1:2 比例(li)進(jin)行(xing)分瓶傳(chuan)代(dai)，最後放入(ru) 37℃，5%CO2細胞(bao)

培(pei)養(yang)箱(xiang)中(zhong)培(pei)養(yang)；

2、細胞(bao)凍(dong)存(cun)：

1）細胞(bao)生長(chang)至(zhi)覆蓋(gai)培(pei)養(yang)瓶的(de) 80%面(mian)積(ji)時，棄(qi) 25cm2培(pei)養(yang)瓶中(zhong)的(de)培(pei)養(yang)液，用(yong) PBS 清(qing)洗細胞(bao)壹次；

2）添(tian)加 0.25%消(xiao)化液約 1ml 至(zhi)培(pei)養(yang)瓶中(zhong)，倒置顯(xian)微(wei)鏡下(xia)觀(guan)察，待(dai)細胞(bao)回縮變(bian)圓後加入(ru)培(pei)養(yang)液終(zhong)

止消(xiao)化，輕輕吹打(da)細胞(bao)使(shi)之脫(tuo)落(luo)，然後將懸液(ye)轉(zhuan)移(yi)至(zhi) 15ml 離心管(guan)中(zhong)，1000rpm 離(li)心 5min；

3）用(yong)適(shi)量的凍(dong)存(cun)液(ye)（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸(xuan)細胞(bao)，並放置(zhi)於凍(dong)存(cun)管(guan)中(zhong)；

4）先(xian)將細胞(bao)凍(dong)存(cun)管(guan)放置(zhi)於-20℃ 1.5h，然後將其(qi)移(yi)入(ru)-80℃過夜，24h 後轉(zhuan)入(ru)液氮(dan)中(zhong)進(jin)行(xing)長(chang)期(qi)保(bao)存(cun)。使(shi)用(yong)程(cheng)序

降溫盒可直(zhi)接(jie)放入(ru)-80℃。

二、細胞(bao)培(pei)養(yang)操作(zuo)

1) 復(fu)蘇細胞(bao)：以下細胞(bao)培(pei)養(yang)凍(dong)存(cun)處(chu)理(li)僅(jin)供參考(kao)，具(ju)體操作(zuo)步(bu)驟(zhou)以(yi)隨(sui)貨(huo)產品說(shuo)明書為(wei)主(zhu)。將含(han)有(you)1 mL細胞(bao)懸液的凍(dong)存(cun)管(guan)在(zai) 37℃水(shui)浴(yu)中(zhong)迅(xun)速(su)搖(yao)晃(huang)解凍(dong)，加4 mL培(pei)養(yang)基混(hun)合(he)均(jun)勻(yun)。在1000 rpm條(tiao)件(jian)下(xia)離心3 min，棄(qi)去上(shang)清液(ye)，加1-2 mL培(pei)養(yang)基後(hou)吹勻(yun)。然後將所(suo)有(you)細胞(bao)懸液加入(ru)含適(shi)量培(pei)養(yang)基的(de)培(pei)養(yang)瓶中(zhong)培(pei)養(yang)過夜（或(huo)將(jiang)細胞(bao)懸液加入(ru)10 cm皿中(zhong)，加入(ru)約8 mL培(pei)養(yang)基，培(pei)養(yang)過夜）。第二天換(huan)液(ye)並檢(jian)查細胞(bao)密度。

2) 細胞(bao)傳代：如果細胞(bao)密度達 80%-90%，即(ji)可(ke)進(jin)行(xing)傳(chuan)代(dai)培(pei)養(yang)。

a、棄(qi)去培(pei)養(yang)上(shang)清，用(yong)不含鈣、鎂離(li)子(zi)的(de)PBS潤(run)洗細胞(bao)1-2次。

b、加1 mL消(xiao)化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培(pei)養(yang)瓶中(zhong)，使(shi)消(xiao)化液浸(jin)潤(run)所(suo)有(you)細胞(bao)，將培(pei)養(yang)瓶置(zhi)於37℃培(pei)養(yang)箱(xiang)中(zhong)消(xiao)化1-2 min（視(shi)細胞(bao)情(qing)況(kuang)而定(ding)），然後在顯微(wei)鏡下(xia)觀(guan)察細胞(bao)消(xiao)化情(qing)況(kuang)，若細胞(bao)大部分變(bian)圓並脫(tuo)落(luo)，迅(xun)速(su)拿(na)回(hui)操作(zuo)臺(tai)，輕敲幾下(xia)培(pei)養(yang)瓶後(hou)加2-3ml培(pei)養(yang)基終(zhong)止(zhi)消(xiao)化。輕輕打勻後(hou)裝入(ru)無(wu)菌離心管(guan)中(zhong)，1000 rpm離(li)心5 min，棄(qi)去上(shang)清液(ye)，補(bu)加1-2 mL培(pei)養(yang)液後(hou)吹勻(yun)。

c、將(jiang)細胞(bao)懸液按1:2比例(li)分到(dao)新的(de)含8 mL培(pei)養(yang)基的(de)新皿中(zhong)或(huo)者瓶中(zhong)，置(zhi)於培(pei)養(yang)箱(xiang)中(zhong)培(pei)養(yang)。 3) 細胞(bao)凍(dong)存(cun)：待(dai)細胞(bao)生長(chang)狀(zhuang)態良好(hao)時，可(ke)進(jin)行(xing)細胞(bao)凍(dong)存(cun)。下(xia)面(mian) T25 瓶(ping)為例(li)；a、收(shou)集細胞(bao)及細胞(bao)培(pei)養(yang)液，裝入(ru)無(wu)菌離心管(guan)中(zhong)，1000 rpm條(tiao)件(jian)下(xia)離心4 min，棄(qi)去上(shang)清液(ye)，用(yong)PBS清(qing)洗壹遍(bian)，棄(qi)盡PBS，進(jin)行(xing)細胞(bao)計數(shu)。

b、根(gen)據細胞(bao)數(shu)量加入(ru)無(wu)血清(qing)細胞(bao)凍(dong)存(cun)液(ye)，使(shi)細胞(bao)密度5×106~1×107/mL，輕輕混(hun)勻(yun)，每支(zhi)凍(dong)存(cun)管(guan)凍(dong)存(cun)1mL細胞(bao)懸液，註(zhu)意凍(dong)存(cun)管(guan)做(zuo)好(hao)標識。將凍(dong)存(cun)管(guan)放入(ru)-80℃冰箱(xiang)，24 h後轉入(ru)液氮(dan)灌儲(chu)存(cun)。記(ji)錄凍(dong)存(cun)管(guan)位(wei)置以(yi)便下(xia)次拿取。

公(gong)司(si)正(zheng)在(zai)出(chu)售的產(chan)品：

Nidogen： 巢蛋白(bai)1抗體 KITLG Others Human 人(ren) SCF / C-kit ligand (aa 1-189 ) 桿狀病毒-昆(kun)蟲細胞(bao)裂解液(ye) (陽性對(dui)照(zhao))

小鼠(shu)子(zi)宮頸(jing)上(shang)皮細胞(bao)培(pei)養(yang)基 100mL 大(da)鼠(shu)水通(tong)道(dao)蛋白(bai)0(AQP-0)ELISA 試劑盒 大(da)鼠(shu)Smad7  大鼠(shu)Smad7 96T

NPFF： 痛覺(jiao)調節肽(tai)NPFF抗體 YAC-1細胞(bao)，淋巴瘤(liu)細胞(bao) 人(ren)結腸(chang)腺癌(ai)細胞(bao),HT-29細胞(bao) CM-H021人(ren)前列腺平(ping)滑肌細胞(bao)培(pei)養(yang)基100mL

KDR Others Rat 大鼠(shu) VEGFR2 / Flk-1 / CD309 / KDR 人(ren)細胞(bao)裂解液(ye) (陽性對(dui)照(zhao)) 大鼠(shu)雙氧(yang)化酶2(DUOX2)ELISA試(shi)劑盒 26S PSM  大(da)鼠(shu)26S蛋白(bai)酶體 96T

Neurotensin： 神經緊(jin)張素抗體 雪(xue)旺(wang)細胞(bao)培(pei)養(yang)基SCM-prf

人(ren)腎小球(qiu)內(nei)皮細胞(bao)培(pei)養(yang)基 100mL 人(ren)β2糖蛋白(bai)1抗體IgA/G/M(β2-GP1 IgA/G/M)ELISA 試(shi)劑盒 RASSF1A(Ras association domain family 1A) Ras相(xiang)關區域家族1A抗原 0.5mg

phospho-IKK gamma(Ser43)： 0酸化KB抑制蛋白(bai)激(ji)酶γ抗(kang)體 恒(heng)河猴(hou)皮膚(fu)細胞(bao);RM-S1 人(ren)結腸(chang)癌(ai)細胞(bao)，LoVo細胞(bao) TE-1(食管癌(ai)細胞(bao))

CD7 Others Rat 大鼠(shu) CD7 人(ren)細胞(bao)裂解液(ye) (陽性對(dui)照(zhao)) 人(ren)β2糖蛋白(bai)1抗體IgA(β2-GP1 Ab IgA)ELISA 試(shi)劑盒 Resistin 抵(di)抗(kang)素抗原 0.5mg

phospho-IL-1R1(Tyr496)： 0酸化白(bai)介素1受體1抗(kang)體 恒(heng)河猴(hou)腎(shen)細胞(bao);RM-1

EL4.IL-2細胞(bao)，小鼠(shu)淋巴瘤(liu)細胞(bao) Mo-MuLv/3T3(Mo-MuLv感(gan)染的3T3細胞(bao)) 人(ren)皮膚(fu)成(cheng)纖維(wei)樣(yang)細胞(bao);HSF2 人(ren)β2糖蛋白(bai)(β2-GP)ELISA 試劑盒 RGS2 peptide G蛋白(bai)信號(hao)轉(zhuan)導(dao)調節因子(zi)2抗(kang)原 0.5mg

TE-12人(ren)食管癌(ai)細胞(bao)人(ren)骨骼肌成(cheng)肌細胞(bao)cDNAHSkMM cDNA 大鼠(shu)半乳凝(ning)素1(GAL1)ELISA試劑盒 TS(Human thymidylate synthetase)  人(ren)胸苷酸(suan)合(he)成(cheng)酶 96T

RAB3GAP2： RAB3-GTP酶激(ji)活蛋白(bai)催(cui)化亞單位(wei)2抗體 非洲綠猴(hou)腎(shen)細胞(bao)系(xi)/HCV-NS4A;Vero-HCV-NS4A

穩(wen)定(ding)表(biao)達EBNA1的(de)人(ren)胚腎細胞(bao);293E 人(ren)腎皮層上(shang)皮細胞(bao)培(pei)養(yang)基 100mL 大(da)鼠(shu)半胱酰白(bai)三烯受體2(CYSL2)ELISA試(shi)劑盒 TPHuman thymidinephosphorylase)  人(ren)胸腺嘧(mi)啶核(he)苷0酸(suan)化酶 96T

RAI1： 維(wei)誘(you)導(dao)蛋白(bai)1抗體 A549, 人(ren)肺癌(ai)細胞(bao)系(xi)

MN-h, 小鼠(shu)海馬神經元(yuan) 大(da)鼠(shu)半胱酸蛋白(bai)酶抑(yi)制(zhi)劑3(CST3)ELISA試劑盒 PARP(Human Poly ADP ribose polymerase)  人(ren)多聚(ju)ADP核(he)糖聚(ju)合(he)酶 96T

三、培(pei)養(yang)註(zhu)意事項(xiang) 

1. 收(shou)到(dao)細胞(bao)後首先(xian)觀(guan)察細胞(bao)瓶是否(fou)完好(hao)，培(pei)養(yang)液是否(fou)有(you)漏液(ye)、渾(hun)濁(zhuo)等(deng)現(xian)象(xiang)，若(ruo)有(you)上(shang)述現(xian)象(xiang) 發(fa)生請(qing)及(ji)時和(he)我(wo)們聯系(xi)。

2. 仔(zai)細閱讀細胞(bao)說明書，了解細胞(bao)相(xiang)關信息(xi)，如細胞(bao)形態、所(suo)用(yong)培(pei)養(yang)基、血清(qing)比例(li)、所(suo)需 細胞(bao)因子(zi)等(deng)，確保(bao)細胞(bao)培(pei)養(yang)條(tiao)件(jian)壹(yi)致，若(ruo)由(you)於培(pei)養(yang)條(tiao)件(jian)不壹致而導(dao)致細胞(bao)出現(xian)問(wen)題(ti)，責(ze)任(ren)由(you) 客戶(hu)自(zi)行(xing)承(cheng)擔(dan)。

3. 用(yong) 75%酒(jiu)精(jing)擦(ca)拭(shi)細胞(bao)瓶表(biao)面(mian)，顯(xian)微(wei)鏡下(xia)觀(guan)察細胞(bao)狀態。因運輸問題(ti)，部分細胞(bao)由(you)於溫(wen)度 變(bian)化及劇烈碰亡破碎(sui)形(xing)成(cheng)碎(sui)片(pian)，是正(zheng)常現(xian)象(xiang)。觀(guan)察好(hao)細胞(bao)狀態後，75%酒(jiu)精(jing)消(xiao)毒瓶(ping)壁將 T25 瓶(ping)置於 37℃培(pei)養(yang)箱(xiang)放置(zhi) 2-4h。

4. 貼壁細胞(bao)可以消(xiao)化，懸浮細胞(bao)直接(jie)混(hun)勻(yun)收(shou)集(ji)細胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄(qi)上(shang) 清。加 5 mL PBS 重懸細胞(bao)，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，用(yong)新鮮(xian)的培(pei)養(yang)基重(zhong)懸(xuan) 細胞(bao)，並接(jie)種(zhong)到(dao)新的(de)培(pei)養(yang)瓶或(huo)培(pei)養(yang)皿中(zhong)，置(zhi)於培(pei)養(yang)箱(xiang)中(zhong)進(jin)行(xing)培(pei)養(yang)。

5. 請(qing)客戶(hu)用(yong)相(xiang)同(tong)條(tiao)件(jian)的(de)培(pei)養(yang)基用(yong)於細胞(bao)培(pei)養(yang)。

6. 建議客戶(hu)收(shou)到(dao)細胞(bao)後前 3 天各拍(pai)幾張(zhang)細胞(bao)照片，記錄細胞(bao)狀態，便於和(he)我(wo)司(si)技(ji)術(shu)部(bu)溝(gou)通 交流(liu)。由(you)於運(yun)輸的原因，個別敏(min)感(gan)細胞(bao)會出現(xian)不穩(wen)定(ding)的(de)情(qing)況(kuang)，請(qing)及(ji)時和(he)我(wo)們聯系(xi)，告(gao)知細胞(bao) 的具(ju)體情(qing)況(kuang)，以便我(wo)們的技(ji)術(shu)人(ren)員(yuan)跟(gen)蹤(zong)回訪(fang)直至(zhi)問題(ti)解決(jue)。

7. 該(gai)細胞(bao)僅供科研(yan)使(shi)用(yong)。

8. 備(bei)註(zhu)：運輸用(yong)的(de)培(pei)養(yang)基 (灌液(ye)培(pei)養(yang)基) 不能再(zai)用(yong)來(lai)培(pei)養(yang)細胞(bao)，請(qing)換(huan)用(yong)按照說明書細胞(bao)培(pei) 養(yang)條(tiao)件(jian)新配制(zhi)的培(pei)養(yang)基來(lai)培(pei)養(yang)細胞(bao)。     收到(dao)細胞(bao)後第壹次傳代建議 1：2 傳(chuan)代(dai) 。

9. 註(zhu)意：  1:2 傳(chuan)代就(jiu)是 1 個 T25 瓶傳(chuan) 2 個 T25 瓶或(huo)者 2 個 6cm 皿。不是 1 個 T25 瓶傳(chuan) 2 個10cm 皿。