U-937 人(ren)淋巴(ba)瘤細(xi)胞(bao)

公司(si)產(chan)品僅供(gong)科(ke)研研究使用、不(bu)得用於(yu)臨(lin)床(chuang)診斷(duan)！

1、細(xi)胞(bao)傳代(dai)：

1）細胞(bao)生長(chang)至(zhi)覆(fu)蓋(gai)培(pei)養(yang)瓶(ping)的 80%面積(ji)時(shi)，棄(qi) 25cm2培養(yang)瓶(ping)中(zhong)的培養液，用 PBS 清(qing)洗(xi)細胞(bao)壹(yi)次(ci)；

2）添加 0.25%消化液約(yue) 1ml 至培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)，倒(dao)置顯(xian)微(wei)鏡下觀(guan)察(cha)，待(dai)細(xi)胞(bao)回(hui)縮(suo)變(bian)圓(yuan)後(hou)加入(ru) 5ml 培(pei)養

液(ye)終(zhong)止(zhi)消化，再輕(qing)輕(qing)吹打細(xi)胞(bao)使(shi)之(zhi)脫(tuo)落(luo)，然(ran)後(hou)將(jiang)懸(xuan)液轉(zhuan)移(yi)至(zhi) 15ml 離(li)心管中(zhong)，1000rpm 離(li)心 5min；

3）棄(qi)上清(qing)，沈澱細胞(bao)用 1-2ml 培養基(ji)重(zhong)懸，然後(hou)按 1:2 比例(li)進行(xing)分(fen)瓶(ping)傳代(dai)，最後(hou)放入(ru) 37℃，5%CO2細(xi)胞(bao)

培(pei)養(yang)箱(xiang)中(zhong)培(pei)養(yang)；

2、細胞(bao)凍(dong)存：

1）細胞(bao)生長(chang)至(zhi)覆(fu)蓋(gai)培(pei)養(yang)瓶(ping)的 80%面積(ji)時(shi)，棄(qi) 25cm2培養(yang)瓶(ping)中(zhong)的培養液，用 PBS 清(qing)洗(xi)細胞(bao)壹(yi)次(ci)；

2）添加 0.25%消化液約(yue) 1ml 至培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)，倒(dao)置顯(xian)微(wei)鏡下觀(guan)察(cha)，待(dai)細(xi)胞(bao)回(hui)縮(suo)變(bian)圓(yuan)後(hou)加入(ru)培(pei)養液(ye)終(zhong)

止(zhi)消化，輕(qing)輕(qing)吹打細(xi)胞(bao)使(shi)之(zhi)脫(tuo)落(luo)，然(ran)後(hou)將(jiang)懸(xuan)液轉(zhuan)移(yi)至(zhi) 15ml 離(li)心管中(zhong)，1000rpm 離(li)心 5min；

3）用適量的凍(dong)存液（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸細胞(bao)，並(bing)放置(zhi)於(yu)凍(dong)存管中(zhong)；

4）先(xian)將(jiang)細(xi)胞(bao)凍(dong)存管放置(zhi)於(yu)-20℃ 1.5h，然(ran)後(hou)將(jiang)其(qi)移(yi)入(ru)-80℃過(guo)夜(ye)，24h 後(hou)轉(zhuan)入液(ye)氮(dan)中(zhong)進(jin)行(xing)長(chang)期(qi)保(bao)存。使用程序(xu)

降(jiang)溫盒可(ke)直接(jie)放入(ru)-80℃。

二、細胞(bao)培(pei)養(yang)操作(zuo)

1) 復蘇細(xi)胞(bao)：以(yi)下細胞(bao)培(pei)養(yang)凍(dong)存處理僅供(gong)參(can)考(kao)，具體(ti)操作(zuo)步(bu)驟(zhou)以(yi)隨(sui)貨(huo)產(chan)品說明(ming)書(shu)為(wei)主(zhu)。將(jiang)含有1 mL細胞(bao)懸(xuan)液(ye)的凍(dong)存管在 37℃水浴中(zhong)迅(xun)速(su)搖晃解凍(dong)，加4 mL培(pei)養(yang)基(ji)混(hun)合均勻。在1000 rpm條(tiao)件下離心3 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清(qing)液，加1-2 mL培(pei)養(yang)基(ji)後(hou)吹勻。然後(hou)將(jiang)所(suo)有細胞(bao)懸(xuan)液(ye)加入(ru)含適量培(pei)養(yang)基(ji)的培養瓶(ping)中(zhong)培(pei)養(yang)過夜（或(huo)將(jiang)細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)加入(ru)10 cm皿(min)中(zhong)，加入(ru)約(yue)8 mL培養(yang)基(ji)，培(pei)養過(guo)夜）。第(di)二天換(huan)液並(bing)檢查細胞(bao)密度(du)。

2) 細胞(bao)傳代(dai)：如(ru)果(guo)細(xi)胞(bao)密度(du)達(da) 80%-90%，即(ji)可進行(xing)傳代(dai)培養。

a、棄(qi)去(qu)培(pei)養(yang)上(shang)清(qing)，用不(bu)含鈣、鎂(mei)離子的PBS潤(run)洗(xi)細胞(bao)1-2次(ci)。

b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培(pei)養瓶(ping)中(zhong)，使(shi)消化液浸潤(run)所(suo)有(you)細(xi)胞(bao)，將(jiang)培(pei)養瓶(ping)置(zhi)於(yu)37℃培(pei)養箱中(zhong)消化1-2 min（視細胞(bao)情(qing)況(kuang)而(er)定(ding)），然(ran)後(hou)在顯(xian)微(wei)鏡下觀(guan)察(cha)細胞(bao)消化情況(kuang)，若(ruo)細胞(bao)大(da)部分變(bian)圓(yuan)並(bing)脫(tuo)落(luo)，迅(xun)速(su)拿(na)回操作(zuo)臺，輕(qing)敲(qiao)幾(ji)下培養(yang)瓶(ping)後(hou)加2-3ml培(pei)養(yang)基(ji)終(zhong)止(zhi)消化。輕(qing)輕(qing)打(da)勻後(hou)裝(zhuang)入無(wu)菌離(li)心管中(zhong)，1000 rpm離(li)心5 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清(qing)液，補加1-2 mL培(pei)養(yang)液後(hou)吹勻。

c、將(jiang)細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)按(an)1:2比例(li)分到(dao)新(xin)的含8 mL培養基(ji)的新皿(min)中(zhong)或(huo)者(zhe)瓶(ping)中(zhong)，置(zhi)於(yu)培(pei)養箱中(zhong)培(pei)養(yang)。 3) 細胞(bao)凍(dong)存：待(dai)細(xi)胞(bao)生長(chang)狀(zhuang)態良好時(shi)，可進(jin)行(xing)細(xi)胞(bao)凍(dong)存。下面 T25 瓶(ping)為(wei)例；a、收(shou)集(ji)細胞(bao)及(ji)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)液(ye)，裝(zhuang)入無(wu)菌離(li)心管中(zhong)，1000 rpm條(tiao)件下離心4 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清(qing)液，用PBS清(qing)洗(xi)壹(yi)遍，棄(qi)盡PBS，進(jin)行(xing)細(xi)胞(bao)計(ji)數。

b、根據細(xi)胞(bao)數量加入(ru)無(wu)血清(qing)細胞(bao)凍(dong)存液，使細胞(bao)密度(du)5×106~1×107/mL，輕(qing)輕(qing)混(hun)勻，每(mei)支凍(dong)存管凍(dong)存1mL細胞(bao)懸(xuan)液(ye)，註(zhu)意凍(dong)存管做(zuo)好標識(shi)。將(jiang)凍(dong)存管放入(ru)-80℃冰(bing)箱，24 h後(hou)轉(zhuan)入液(ye)氮(dan)灌(guan)儲(chu)存。記錄(lu)凍(dong)存管位置以(yi)便(bian)下次拿(na)取(qu)。

公司正(zheng)在出售的產(chan)品：

小(xiao)鼠(shu)腎(shen)動脈內(nei)皮細胞(bao)培(pei)養(yang)基(ji) 100mL 大(da)鼠腎(shen)損傷(shang)分子(zi)1(Kim-1)ELISA試劑盒 ACV-A(Human Activin A)  人(ren)活(huo)化素A 96T

Phospho-NFKBIA (Tyr42)： 0酸(suan)化IKB α抗(kang)體(ti) Mv.1.Lu細(xi)胞(bao)，貂(diao)肺(fei)上(shang)皮細胞(bao) 人(ren)結(jie)腸癌(ai)細(xi)胞(bao),CW-2細(xi)胞(bao) CM-H093人(ren)顱蓋造骨(gu)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)基(ji)100mL

TIGIT Others Mouse 小(xiao)鼠(shu) TIGIT / VSTM3 人(ren)細(xi)胞(bao)裂(lie)解液 (陽性(xing)對照(zhao)) 大鼠(shu)腎損傷(shang)分子(zi)1(Kim1)ELISA試劑盒 NRG-1(human Neuregulin 1)  人(ren)神經(jing)調節(jie)蛋(dan)白1 96T

phospho-NFKBIA(Tyr305)： 0酸(suan)化IKB alpha抗(kang)體(ti) 狗間(jian)充(chong)質幹(gan)細胞(bao)-脂肪(fang)DMSC-ad

WEHI-231小(xiao)鼠(shu)B淋巴(ba)細胞(bao) WEHI-231 B lymphocyte in mice DMEM+10% FBS+0.05mM β-Mercaptoethanol 大(da)鼠(shu)腎(shen)損傷(shang)分子(zi)1(Kim-1)ELISA 試劑盒 CXCL16  大(da)鼠(shu)CXC趨(qu)化因(yin)子(zi)配(pei)體(ti)16 96T

IL1R2 Others Mouse 小(xiao)鼠(shu) IL1R2 / CD121b 人(ren)細(xi)胞(bao)裂(lie)解液 (陽性(xing)對照(zhao)) 人(ren)preptin ELISA 試劑盒 SSTR5 (somatostatin receptor 5) 受(shou)體(ti)5抗(kang)原 0.5mg

Interferon alpha 6： 幹(gan)擾(rao)素α6抗(kang)體(ti) 牛腎(shen)細(xi)胞(bao);MDBK

RH-35細(xi)胞(bao)，大(da)鼠(shu)肝(gan)癌(ai)細(xi)胞(bao) HeLa(細(xi)胞(bao)) EB病毒轉(zhuan)化的人(ren)B淋巴(ba)細胞(bao);KMY1036 人(ren)PL7抗(kang)體(ti)/抗(kang)蘇酰(xian)NA合成酶(mei)(PL7)ELISA 試劑盒 STAT1(signal transducers and activators of transcription 1) 信號轉(zhuan)導與轉(zhuan)錄(lu)激活(huo)因(yin)子(zi)1抗(kang)原 0.5mg

CD18： 整(zheng)合(he)素β2/Integrin β2抗(kang)體(ti) EFNA3 Others Human 人(ren) EphrinA3 / EFNA3 / EFL2 人(ren)細(xi)胞(bao)裂(lie)解液 (陽性(xing)對照(zhao))

人(ren)胚腎細(xi)胞(bao);293 [HEK-293] 人(ren)PL12抗(kang)體(ti)/抗(kang)酰(xian)NA合(he)成酶(mei)(PL12/AlaRS)ELISA 試劑盒 phospho-STAT1(p-Tyr701) peptide 0酸(suan)化信號轉(zhuan)導與轉(zhuan)錄(lu)激活(huo)因(yin)子(zi)1抗(kang)原 0.5mg

U-937 人(ren)淋巴(ba)瘤細(xi)胞(bao)ROR beta： 維(wei)相(xiang)關孤(gu)兒(er)受(shou)體(ti)β抗(kang)體(ti) 恒(heng)河(he)猴(hou)腎(shen)細胞(bao);MMK3

人(ren)胚腎細(xi)胞(bao)-F克(ke)隆(long);293F 人(ren)腎(shen)成(cheng)纖(xian)維(wei)細胞(bao)培(pei)養(yang)基(ji) 100mL 大(da)鼠白(bai)介素5(IL-5)ELISA試劑盒 ICD(Human isocitrate dehydrogenase)  人(ren)異(yi)檸(ning)檬(meng)酸(suan)脫(tuo)氫酶 96T

RAP1GDS1： G蛋(dan)白(bai)GTP-GDP解離刺激因(yin)子(zi)1抗(kang)體(ti) MN-s, 小(xiao)鼠(shu)紋狀體(ti)神經(jing)元

MM, 小(xiao)鼠(shu)小(xiao)膠(jiao)質細(xi)胞(bao) 大(da)鼠(shu)白(bai)介素5(IL5)ELISA試劑盒 Try- II (Human Trypsinogen-2)  人(ren)原Ⅱ 96T

Rab3A+Rab3B+Rab3C+Rab3D： ras癌(ai)基(ji)因(yin)家(jia)族Rab3A--Rab3D抗(kang)體(ti) CD81 Others Human 人(ren) CD81 / TAPA-1 人(ren)細(xi)胞(bao)裂(lie)解液 (陽性(xing)對照(zhao))

三(san)、培(pei)養(yang)註(zhu)意事項 

1. 收到(dao)細(xi)胞(bao)後(hou)首(shou)先觀(guan)察(cha)細胞(bao)瓶(ping)是否(fou)完(wan)好，培養(yang)液是否(fou)有(you)漏(lou)液(ye)、渾(hun)濁等(deng)現(xian)象(xiang)，若(ruo)有上(shang)述(shu)現(xian)象(xiang) 發(fa)生請及時(shi)和(he)我們聯(lian)系(xi)。

2. 仔(zai)細(xi)閱讀細胞(bao)說(shuo)明(ming)書(shu)，了解細胞(bao)相(xiang)關信息(xi)，如(ru)細(xi)胞(bao)形(xing)態、所用培養基(ji)、血(xue)清(qing)比例、所(suo)需 細胞(bao)因(yin)子(zi)等(deng)，確保(bao)細胞(bao)培(pei)養(yang)條(tiao)件壹(yi)致(zhi)，若(ruo)由於(yu)培(pei)養條(tiao)件不(bu)壹(yi)致(zhi)而導致細(xi)胞(bao)出(chu)現(xian)問題(ti)，責任由 客戶(hu)自行(xing)承擔(dan)。

3. 用 75%酒精(jing)擦(ca)拭細胞(bao)瓶(ping)表(biao)面，顯(xian)微(wei)鏡下觀(guan)察(cha)細胞(bao)狀(zhuang)態。因(yin)運(yun)輸問題(ti)，部分細胞(bao)由於(yu)溫(wen)度 變(bian)化及劇(ju)烈碰(peng)亡破(po)碎(sui)形(xing)成碎(sui)片，是正(zheng)常現(xian)象(xiang)。觀(guan)察(cha)好細胞(bao)狀(zhuang)態後(hou)，75%酒精(jing)消毒(du)瓶(ping)壁將(jiang) T25 瓶(ping)置(zhi)於(yu) 37℃培(pei)養箱放置(zhi) 2-4h。

4. 貼(tie)壁細(xi)胞(bao)可(ke)以(yi)消化，懸浮(fu)細胞(bao)直接(jie)混(hun)勻收集(ji)細(xi)胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，棄(qi)上 清(qing)。加 5 mL PBS 重(zhong)懸細胞(bao)，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，用新鮮的培養基(ji)重(zhong)懸 細胞(bao)，並(bing)接(jie)種(zhong)到(dao)新(xin)的培養瓶(ping)或(huo)培(pei)養(yang)皿(min)中(zhong)，置(zhi)於(yu)培(pei)養箱中(zhong)進(jin)行(xing)培(pei)養(yang)。

5. 請客戶用相(xiang)同(tong)條(tiao)件的培養基(ji)用於(yu)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)。

6. 建(jian)議客戶收到(dao)細(xi)胞(bao)後(hou)前 3 天各(ge)拍幾(ji)張細(xi)胞(bao)照(zhao)片，記(ji)錄(lu)細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態，便(bian)於(yu)和(he)我司(si)技(ji)術(shu)部溝通 交(jiao)流。由於(yu)運(yun)輸的原因(yin)，個別敏感(gan)細(xi)胞(bao)會(hui)出(chu)現(xian)不(bu)穩定(ding)的情況，請及時(shi)和(he)我們聯(lian)系(xi)，告(gao)知(zhi)細(xi)胞(bao) 的具體(ti)情(qing)況(kuang)，以(yi)便(bian)我們的技(ji)術(shu)人(ren)員(yuan)跟蹤回(hui)訪直至(zhi)問題(ti)解決。

7. 該細(xi)胞(bao)僅供(gong)科(ke)研使用。

8. 備(bei)註(zhu)：運(yun)輸用的培養基(ji) (灌(guan)液培(pei)養基(ji)) 不(bu)能再用來培養細胞(bao)，請換(huan)用按照(zhao)說明(ming)書(shu)細(xi)胞(bao)培(pei) 養(yang)條(tiao)件新(xin)配制(zhi)的培養基(ji)來培養細胞(bao)。     收(shou)到(dao)細(xi)胞(bao)後(hou)第(di)壹(yi)次(ci)傳代(dai)建議 1：2 傳代(dai) 。

9. 註(zhu)意：  1:2 傳代(dai)就是 1 個 T25 瓶(ping)傳 2 個 T25 瓶(ping)或(huo)者(zhe) 2 個 6cm 皿(min)。不(bu)是 1 個 T25 瓶(ping)傳 2 個10cm 皿(min)。