TU212人(ren)喉癌(ai)細胞

公(gong)司(si)產(chan)品(pin)僅(jin)供(gong)科研研究使用、不得用於臨(lin)床(chuang)診(zhen)斷！

壹(yi)、商品介(jie)紹(shao)：

1、細胞傳(chuan)代：

1）細胞生(sheng)長至(zhi)覆(fu)蓋(gai)培(pei)養瓶的 80%面(mian)積(ji)時，棄 25cm2培(pei)養瓶中的(de)培(pei)養液，用 PBS 清洗(xi)細胞壹(yi)次；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消(xiao)化液約(yue) 1ml 至培(pei)養瓶中，倒(dao)置顯(xian)微鏡(jing)下(xia)觀(guan)察(cha)，待細胞回(hui)縮變圓後(hou)加(jia)入(ru) 5ml 培(pei)養

液終止消(xiao)化，再輕輕吹(chui)打(da)細胞使(shi)之(zhi)脫(tuo)落，然後(hou)將(jiang)懸液轉(zhuan)移至(zhi) 15ml 離心管中，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）棄上(shang)清，沈(chen)澱(dian)細胞用 1-2ml 培(pei)養基重懸(xuan)，然(ran)後(hou)按 1:2 比(bi)例(li)進行分(fen)瓶(ping)傳代，最(zui)後(hou)放入(ru) 37℃，5%CO2細胞

培(pei)養箱中培(pei)養；

2、細胞凍存：

1）細胞生(sheng)長至(zhi)覆(fu)蓋(gai)培(pei)養瓶的 80%面(mian)積(ji)時，棄 25cm2培(pei)養瓶中的(de)培(pei)養液，用 PBS 清洗(xi)細胞壹(yi)次；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消(xiao)化液約(yue) 1ml 至培(pei)養瓶中，倒(dao)置顯(xian)微鏡(jing)下(xia)觀(guan)察(cha)，待細胞回(hui)縮變圓後(hou)加(jia)入(ru)培(pei)養液終

止消(xiao)化，輕輕吹(chui)打(da)細胞使(shi)之(zhi)脫(tuo)落，然後(hou)將(jiang)懸液轉(zhuan)移至(zhi) 15ml 離心管中，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）用適量(liang)的(de)凍存液（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸細胞，並放置(zhi)於凍存管中；

4）先(xian)將(jiang)細胞凍存管放置(zhi)於-20℃ 1.5h，然後(hou)將(jiang)其(qi)移入-80℃過夜(ye)，24h 後(hou)轉(zhuan)入液氮中進(jin)行長(chang)期(qi)保存。使(shi)用程序(xu)

降(jiang)溫盒(he)可(ke)直接放入(ru)-80℃。

二、細胞培(pei)養操作

1) 復(fu)蘇(su)細胞：以下(xia)細胞培(pei)養凍存處理(li)僅(jin)供(gong)參考，具體(ti)操作步(bu)驟(zhou)以隨貨產(chan)品(pin)說明書(shu)為(wei)主。將(jiang)含(han)有(you)1 mL細胞懸(xuan)液的(de)凍存管在(zai) 37℃水(shui)浴中迅速搖(yao)晃解(jie)凍，加(jia)4 mL培(pei)養基混合(he)均(jun)勻。在1000 rpm條件(jian)下(xia)離(li)心(xin)3 min，棄去上(shang)清(qing)液，加(jia)1-2 mL培(pei)養基後(hou)吹勻。然後(hou)將(jiang)所有(you)細胞懸(xuan)液加(jia)入(ru)含(han)適量(liang)培(pei)養基的培(pei)養瓶中培(pei)養過夜(ye)（或(huo)將(jiang)細胞懸(xuan)液加(jia)入(ru)10 cm皿(min)中，加(jia)入(ru)約8 mL培(pei)養基，培(pei)養過夜(ye)）。第(di)二天(tian)換液並檢查(zha)細胞密度(du)。

2) 細胞傳(chuan)代：如果細胞密度(du)達(da) 80%-90%，即可進(jin)行傳(chuan)代培(pei)養。

a、棄去培(pei)養上清，用不含(han)鈣、鎂(mei)離子的PBS潤洗(xi)細胞1-2次。

b、加(jia)1 mL消(xiao)化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培(pei)養瓶中，使(shi)消(xiao)化液浸潤所有(you)細胞，將(jiang)培(pei)養瓶置於37℃培(pei)養箱中消(xiao)化1-2 min（視細胞情(qing)況而(er)定(ding)），然(ran)後(hou)在顯(xian)微鏡(jing)下(xia)觀(guan)察(cha)細胞消(xiao)化情況，若細胞大(da)部(bu)分(fen)變圓並脫(tuo)落，迅速拿(na)回操作臺(tai)，輕敲(qiao)幾(ji)下(xia)培(pei)養瓶後(hou)加(jia)2-3ml培(pei)養基終止消(xiao)化。輕輕打(da)勻後(hou)裝入(ru)無菌離(li)心管中，1000 rpm離(li)心(xin)5 min，棄去上(shang)清(qing)液，補(bu)加(jia)1-2 mL培(pei)養液後(hou)吹勻。

c、將(jiang)細胞懸(xuan)液按(an)1:2比(bi)例(li)分到(dao)新的(de)含(han)8 mL培(pei)養基的新(xin)皿(min)中或(huo)者(zhe)瓶(ping)中，置(zhi)於培(pei)養箱中培(pei)養。 3) 細胞凍存：待(dai)細胞生(sheng)長狀(zhuang)態良好時，可(ke)進(jin)行細胞凍存。下(xia)面(mian) T25 瓶(ping)為例(li)；a、收(shou)集(ji)細胞及(ji)細胞培(pei)養液，裝入(ru)無菌離(li)心管中，1000 rpm條(tiao)件(jian)下(xia)離(li)心(xin)4 min，棄去上(shang)清(qing)液，用PBS清洗(xi)壹(yi)遍，棄盡(jin)PBS，進行細胞計數(shu)。

b、根據(ju)細胞數(shu)量(liang)加(jia)入(ru)無血清(qing)細胞凍存液，使(shi)細胞密度(du)5×106~1×107/mL，輕輕混(hun)勻，每支凍存管凍存1mL細胞懸(xuan)液，註(zhu)意(yi)凍存管做(zuo)好標識。將(jiang)凍存管放入(ru)-80℃冰(bing)箱，24 h後(hou)轉(zhuan)入液氮灌儲(chu)存。記(ji)錄(lu)凍存管位(wei)置以便下(xia)次拿(na)取。

三、培(pei)養註(zhu)意(yi)事(shi)項 

1. 收(shou)到(dao)細胞後(hou)首先(xian)觀察(cha)細胞瓶(ping)是否(fou)完好，培(pei)養液是否(fou)有(you)漏(lou)液、渾(hun)濁等(deng)現象(xiang)，若有(you)上(shang)述(shu)現(xian)象 發生(sheng)請及(ji)時和(he)我(wo)們(men)聯系(xi)。

2. 仔(zai)細閱(yue)讀(du)細胞說(shuo)明書(shu)，了解(jie)細胞相(xiang)關(guan)信息(xi)，如細胞形(xing)態(tai)、所(suo)用培(pei)養基、血清(qing)比(bi)例(li)、所需 細胞因子等(deng)，確保細胞培(pei)養條件(jian)壹(yi)致，若由於培(pei)養條件(jian)不(bu)壹(yi)致而(er)導致細胞出(chu)現問(wen)題(ti)，責(ze)任由 客(ke)戶自(zi)行承(cheng)擔(dan)。

3. 用 75%酒精(jing)擦拭細胞瓶(ping)表(biao)面(mian)，顯(xian)微鏡(jing)下(xia)觀(guan)察(cha)細胞狀(zhuang)態。因運輸問(wen)題(ti)，部(bu)分(fen)細胞由於溫度(du) 變(bian)化及劇烈(lie)碰(peng)亡破碎形(xing)成(cheng)碎片(pian)，是正(zheng)常現象(xiang)。觀察(cha)好細胞狀(zhuang)態後(hou)，75%酒精(jing)消(xiao)毒瓶(ping)壁將(jiang) T25 瓶置(zhi)於 37℃培(pei)養箱放置(zhi) 2-4h。

4. 貼(tie)壁細胞可(ke)以消(xiao)化，懸浮細胞直(zhi)接混(hun)勻收(shou)集(ji)細胞，900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，棄上(shang) 清。加(jia) 5 mL PBS 重(zhong)懸細胞，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，用新鮮(xian)的培(pei)養基重懸(xuan) 細胞，並接種(zhong)到(dao)新的(de)培(pei)養瓶或培(pei)養皿(min)中，置(zhi)於培(pei)養箱中進(jin)行培(pei)養。

5. 請客(ke)戶用相同條(tiao)件(jian)的(de)培(pei)養基用於細胞培(pei)養。

6. 建(jian)議客(ke)戶收(shou)到(dao)細胞後(hou)前 3 天(tian)各(ge)拍(pai)幾(ji)張細胞照(zhao)片(pian)，記(ji)錄(lu)細胞狀(zhuang)態，便於和(he)我(wo)司技(ji)術(shu)部(bu)溝(gou)通 交流。由於運輸的原(yuan)因，個別敏(min)感(gan)細胞會(hui)出(chu)現不(bu)穩定(ding)的(de)情(qing)況，請(qing)及(ji)時和(he)我(wo)們(men)聯系(xi)，告(gao)知(zhi)細胞 的(de)具體(ti)情況，以便我(wo)們(men)的技(ji)術(shu)人員(yuan)跟蹤回(hui)訪直(zhi)至(zhi)問(wen)題(ti)解(jie)決(jue)。

7. 該(gai)細胞僅(jin)供(gong)科研使用。

8. 備(bei)註(zhu)：運輸用的培(pei)養基 (灌液培(pei)養基) 不能再(zai)用來(lai)培(pei)養細胞，請(qing)換用按照(zhao)說(shuo)明書(shu)細胞培(pei) 養條件(jian)新(xin)配制的培(pei)養基來(lai)培(pei)養細胞。     收(shou)到(dao)細胞後(hou)第(di)壹(yi)次傳(chuan)代建(jian)議 1：2 傳代 。

9. 註(zhu)意(yi)：  1:2 傳(chuan)代就是 1 個 T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或者(zhe) 2 個 6cm 皿(min)。不(bu)是 1 個 T25 瓶傳 2 個10cm 皿(min)。

公(gong)司(si)正(zheng)在(zai)出(chu)售的(de)產品(pin)：

Oligophrenin 1： 精(jing)神發育遲滯(zhi)相關(guan)蛋白Oligophrenin-1抗(kang)體(ti) HMy2.CIR細胞，人(ren)B淋(lin)巴(ba)母(mu)細胞 人(ren)肝癌(ai)細胞,H7402細胞 CL-0200RWPE1(人(ren)前列(lie)腺上(shang)皮(pi)細胞)5×106cells/瓶(ping)×2

NGFR Others Mouse 小鼠 NGFR / P75 人(ren)細胞裂解(jie)液 (陽(yang)性對(dui)照(zhao)) 大(da)鼠膜(mo)聯蛋(dan)白A5(Annexin A5)ELISA試(shi)劑盒 PAP  大(da)鼠纖溶(rong)酶抗(kang)纖溶(rong)酶復合(he)物 96T

OGFOD2： 末端多聚(ju)腺苷(gan)酸(suan)2蛋(dan)白抗(kang)體(ti) 滑膜(mo)細胞Many types of cells包(bao)裝：5 × 105次方(1ml)

PK15-EGFP-puro(慢病毒構(gou)建(jian)穩定(ding)株(zhu))豬腎上皮(pi)細胞 PK15-EGFP-puro (leiviral consuct stable sain) porcine kidney epithelial cells EMEM+10%FBS+1%P/S+2ug/ml puromycin 大(da)鼠膜(mo)聯蛋(dan)白A2(ANXA2)ELISA試(shi)劑盒 SS(Mouse Somatostatin)  小鼠 96T

ORAV1： 口腔(qiang)癌(ai)高表達(da)的蛋(dan)白1抗(kang)體(ti) LDLR Others Mouse 小鼠 LDLR / LDL Receptor 人(ren)細胞裂解(jie)液 (陽(yang)性對(dui)照(zhao))

Ku-70： DNA修復酶Ku70抗(kang)體(ti) CL-0421RAG(小鼠腎(shen)腺癌(ai)細胞)5×106cells/瓶(ping)×2

EFNB1 Protein Human 重組(zu)人(ren) Ephrin-B1 / EFNB1 蛋(dan)白 (His & Fc 標簽(qian)) 雞維生(sheng)(VD)ELISA試(shi)劑盒 Gentamicin/FITC 熒(ying)光(guang)素(su)標記 1ml

Ku-80： DNA修復酶Ku-80抗(kang)體(ti) APOL1 Others Human 人 APOL1 / apolipoprotein L1 桿(gan)狀(zhuang)病毒-昆(kun)蟲(chong)細胞裂解(jie)液 (陽(yang)性對(dui)照(zhao))

人視網(wang)膜(mo)色素(su)上皮細胞培(pei)養基 100mL 雞透明質酸(suan)(HA)ELISA 試(shi)劑盒 GSK-3 Alpha 糖原(yuan)合(he)酶激(ji)酶(mei)-3α (多肽) 0.5mg

C14orf106： 14號(hao)染色體(ti)開(kai)放閱(yue)讀(du)框(kuang)106抗(kang)體(ti) 人羊膜(mo)上皮(pi)細胞 雙(shuang)位(wei)點HC-KIT受體(ti)細胞株(zhu)，DMF7細胞 BLO-11(小(xiao)鼠骨骼成(cheng)纖維細胞)

TU212人喉癌(ai)細胞HA Others H1N1 甲型流感(gan) H1N1 (A/Ohio/07/2009) HA 人(ren)細胞裂解(jie)液 (陽(yang)性對(dui)照(zhao)) 大(da)鼠DNA甲基轉(zhuan)移酶(mei)1(DNMT1)ELISA試(shi)劑盒 HPL(Human placenta lactogen)  人胎(tai)盤催(cui)乳素(su) 96T

Stabilin 2： 清道夫受體(ti)STAB2抗(kang)體(ti) 二氫(qing)還(hai)原(yuan)酶缺(que)陷型中國(guo)倉鼠卵巢細胞;CHO/dhFr-

CM-H075人腎足(zu)突(tu)細胞培(pei)養基100mL 大(da)鼠DNA甲基轉(zhuan)移酶(mei)1 (DNMT1) ELISA試(shi)劑盒 HBF(Human anti-cytomegalovirus IgM antibody)  人胎(tai)兒(er)血(xue)紅(hong)蛋(dan)白 96T

STRA6： 維誘(you)導蛋白6抗(kang)體(ti) CPE Others Human 人 CPE 人(ren)細胞裂解(jie)液 (陽(yang)性對(dui)照(zhao))

人毛細胞HHDPC 大(da)鼠Discs大(da)同源(yuan)物4(DLG4)ELISA試(shi)劑盒 anti-CMV IgM(Human anti-cytomegalovirus IgM antibody)  人抗(kang)巨(ju)細胞病(bing)毒抗(kang)體(ti) BNL CL.2(小鼠胚(pei)胎(tai)肝細胞) 5×106cells/瓶(ping)×2