U14小(xiao)鼠子(zi)宮(gong)頸癌細(xi)胞(bao)

公司(si)產品(pin)僅(jin)供科研(yan)研(yan)究使(shi)用(yong)、不(bu)得用(yong)於(yu)臨(lin)床(chuang)診斷！

1、細(xi)胞(bao)傳(chuan)代(dai)：

1）細(xi)胞(bao)生長至(zhi)覆(fu)蓋(gai)培養瓶(ping)的 80%面積(ji)時，棄(qi) 25cm2培養瓶(ping)中的培養液(ye)，用(yong) PBS 清(qing)洗(xi)細(xi)胞(bao)壹次(ci)；

2）添加 0.25%消化液約 1ml 至(zhi)培養瓶(ping)中，倒置顯微鏡下觀察(cha)，待(dai)細(xi)胞(bao)回縮變(bian)圓後(hou)加入 5ml 培養

液(ye)終(zhong)止(zhi)消化，再輕(qing)輕(qing)吹(chui)打細(xi)胞(bao)使(shi)之脫落，然(ran)後(hou)將懸(xuan)液轉移至(zhi) 15ml 離心(xin)管(guan)中(zhong)，1000rpm 離心(xin) 5min；

3）棄(qi)上清(qing)，沈(chen)澱細(xi)胞(bao)用(yong) 1-2ml 培養基(ji)重懸，然後(hou)按(an) 1:2 比(bi)例(li)進行分瓶傳(chuan)代(dai)，最後(hou)放(fang)入(ru) 37℃，5%CO2細(xi)胞(bao)

培養箱中培養；

2、細(xi)胞(bao)凍(dong)存：

1）細(xi)胞(bao)生長至(zhi)覆(fu)蓋(gai)培養瓶(ping)的 80%面積(ji)時，棄(qi) 25cm2培養瓶(ping)中的培養液(ye)，用(yong) PBS 清(qing)洗(xi)細(xi)胞(bao)壹次(ci)；

2）添加 0.25%消化液約 1ml 至(zhi)培養瓶(ping)中，倒置顯微鏡下觀察(cha)，待(dai)細(xi)胞(bao)回縮變(bian)圓後(hou)加入培養液(ye)終(zhong)

止(zhi)消化，輕(qing)輕(qing)吹(chui)打細(xi)胞(bao)使(shi)之脫落，然(ran)後(hou)將懸(xuan)液轉移至(zhi) 15ml 離心(xin)管(guan)中(zhong)，1000rpm 離心(xin) 5min；

3）用(yong)適(shi)量(liang)的凍(dong)存液(ye)（FBS：DMSO=9 ：1）重懸細(xi)胞(bao)，並放(fang)置於(yu)凍(dong)存管(guan)中(zhong)；

4）先將細(xi)胞(bao)凍(dong)存管(guan)放(fang)置於(yu)-20℃ 1.5h，然(ran)後(hou)將其(qi)移入-80℃過(guo)夜(ye)，24h 後(hou)轉入液(ye)氮中進(jin)行長期(qi)保存。使(shi)用(yong)程(cheng)序(xu)

降(jiang)溫盒可直接(jie)放(fang)入(ru)-80℃。

壹、商品(pin)介紹(shao)：

二(er)、細(xi)胞(bao)培養操(cao)作

1) 復蘇細(xi)胞(bao)：以下(xia)細(xi)胞(bao)培養凍(dong)存處理僅(jin)供參考，具體操(cao)作步驟以(yi)隨(sui)貨(huo)產(chan)品(pin)說(shuo)明書(shu)為主(zhu)。將含(han)有(you)1 mL細(xi)胞(bao)懸液(ye)的凍(dong)存管(guan)在 37℃水(shui)浴(yu)中(zhong)迅(xun)速(su)搖晃解凍(dong)，加(jia)4 mL培養基(ji)混合(he)均勻。在1000 rpm條(tiao)件(jian)下離心(xin)3 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清(qing)液(ye)，加(jia)1-2 mL培養基(ji)後(hou)吹勻。然(ran)後(hou)將所(suo)有(you)細(xi)胞(bao)懸液(ye)加入(ru)含(han)適(shi)量(liang)培養基(ji)的培養瓶(ping)中培養過(guo)夜(ye)（或(huo)將細(xi)胞(bao)懸液(ye)加入(ru)10 cm皿中(zhong)，加(jia)入約(yue)8 mL培養基(ji)，培養過(guo)夜(ye)）。第(di)二天(tian)換(huan)液(ye)並檢(jian)查(zha)細(xi)胞(bao)密度(du)。

2) 細(xi)胞(bao)傳(chuan)代(dai)：如果細(xi)胞(bao)密度(du)達 80%-90%，即(ji)可進行傳(chuan)代(dai)培養。

a、棄(qi)去(qu)培養上(shang)清(qing)，用(yong)不(bu)含(han)鈣(gai)、鎂離子(zi)的PBS潤(run)洗(xi)細(xi)胞(bao)1-2次。

b、加(jia)1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培養瓶(ping)中，使(shi)消化液浸(jin)潤(run)所(suo)有(you)細(xi)胞(bao)，將培養瓶(ping)置於(yu)37℃培養箱中消化1-2 min（視細(xi)胞(bao)情況(kuang)而定），然後(hou)在顯微鏡下觀察(cha)細(xi)胞(bao)消化情況(kuang)，若細(xi)胞(bao)大部(bu)分變圓並脫落，迅(xun)速(su)拿回操作臺，輕(qing)敲(qiao)幾(ji)下(xia)培養瓶(ping)後(hou)加2-3ml培養基(ji)終(zhong)止(zhi)消化。輕(qing)輕(qing)打勻後(hou)裝(zhuang)入無(wu)菌(jun)離心(xin)管(guan)中(zhong)，1000 rpm離心(xin)5 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清(qing)液(ye)，補(bu)加(jia)1-2 mL培養液(ye)後(hou)吹勻。

c、將細(xi)胞(bao)懸液(ye)按(an)1:2比(bi)例(li)分到新的含(han)8 mL培養基(ji)的新皿中(zhong)或(huo)者瓶(ping)中，置於(yu)培養箱中培養。 3) 細(xi)胞(bao)凍(dong)存：待(dai)細(xi)胞(bao)生長狀態(tai)良(liang)好(hao)時(shi)，可進行細(xi)胞(bao)凍(dong)存。下(xia)面(mian) T25 瓶為例(li)；a、收集細(xi)胞(bao)及(ji)細(xi)胞(bao)培養液(ye)，裝(zhuang)入無(wu)菌(jun)離心(xin)管(guan)中(zhong)，1000 rpm條(tiao)件(jian)下離心(xin)4 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清(qing)液(ye)，用(yong)PBS清(qing)洗(xi)壹(yi)遍(bian)，棄(qi)盡(jin)PBS，進行細(xi)胞(bao)計(ji)數(shu)。

b、根據細(xi)胞(bao)數(shu)量(liang)加(jia)入(ru)無(wu)血(xue)清(qing)細(xi)胞(bao)凍(dong)存液(ye)，使(shi)細(xi)胞(bao)密度(du)5×106~1×107/mL，輕(qing)輕(qing)混勻(yun)，每(mei)支凍(dong)存管(guan)凍(dong)存1mL細(xi)胞(bao)懸液(ye)，註意凍(dong)存管(guan)做(zuo)好標識(shi)。將凍(dong)存管(guan)放(fang)入(ru)-80℃冰(bing)箱，24 h後(hou)轉入液(ye)氮灌儲(chu)存。記錄凍(dong)存管(guan)位(wei)置以便下次拿(na)取。

公司(si)正在出(chu)售的產品(pin)：

OCC1： 結腸(chang)癌過(guo)度(du)表(biao)達蛋(dan)白(bai)1抗(kang)體(ti) TLR3 Others Mouse 小(xiao)鼠 TLR3 / CD283 桿(gan)狀病毒-昆蟲細(xi)胞(bao)裂解(jie)液 (陽(yang)性(xing)對(dui)照)

5637 人(ren)膀胱(guang)癌細(xi)胞(bao) 大鼠(shu)繆勒管(guan)抑(yi)制物(wu)質(zhi)/抗(kang)繆勒管(guan)激(ji)素(MIS/AMH)ELISA 試劑盒 TAT  大(da)鼠(shu)抗(kang)復(fu)合(he)物(wu) 96T

OCIAD2： 卵(luan)巢(chao)癌免疫反(fan)應(ying)抗(kang)原(yuan)抗(kang)體(ti) FO細(xi)胞(bao)，骨(gu)髓瘤細(xi)胞(bao) 人(ren)胚肝二倍體細(xi)胞(bao),CCC-HEL-1細(xi)胞(bao) CL-0208SH-SY5Y(人(ren)神經母(mu)細(xi)胞(bao)瘤細(xi)胞(bao))5×106cells/瓶×2

CCL1 Others Mouse 小(xiao)鼠 I-309 / CCL1 / TCA-3 人(ren)細(xi)胞(bao)裂解(jie)液 (陽(yang)性(xing)對(dui)照) 大(da)鼠繆勒管(guan)抑(yi)制物(wu)質(zhi)/抗(kang)繆勒管(guan)激(ji)素(AMH)ELISA試劑盒 ATR  大(da)鼠(shu)抗(kang)受體(ti) 96T

OVCA1： 卵(luan)巢(chao)癌相關基(ji)因(yin)1抗(kang)體(ti) 冠狀動(dong)脈(mai)平(ping)滑(hua)肌細(xi)胞(bao)Many types of cells包裝(zhuang)：5 × 105次方(fang)(1ml)

Katanin p60 A1： 劍(jian)蛋(dan)白(bai)p60亞(ya)基(ji)A1抗(kang)體(ti) 人(ren)T淋巴細(xi)胞(bao)白(bai)血(xue)病細(xi)胞(bao);HuT 78

ECV-304(人(ren)臍(qi)靜(jing)脈內(nei)皮細(xi)胞(bao)) 5×106cells/瓶×2 肺(fei)成纖維細(xi)胞(bao)Many types of cells包裝(zhuang)：5 × 105次方(fang)(1ml) 雞生長因(yin)子(zi)(GH)ELISA 試劑(ji)盒 GAD-65 (glutamate decarboxylase) 谷(gu)酸(suan)脫羧酶-65(抗(kang)原(yuan)) 0.5mg

Kazrin： Kazrin蛋白(bai)抗(kang)體(ti) CL-0413PC-3M-2B4(人(ren)前列(lie)腺(xian)癌低轉移(yi)細(xi)胞(bao)株)5×106cells/瓶(ping)×2

EFNA1 Protein Human 重組人(ren) Ephrin-A1 / EFNA1 蛋白(bai) (His 標(biao)簽) 雞(ji)腎上腺髓(sui)質素(su)(ADM)ELISA 試(shi)劑盒 GSK-3 Beta(NT) (Glycogen Synthase Kinase-3 Beta) 糖(tang)原(yuan)合(he)酶激酶-3β(多肽) 0.5mg

KCTD8： 離子(zi)通道(dao)多聚體(ti)結構域(yu)蛋白(bai)8抗(kang)體(ti) ADAMTSL1 Others Human 人(ren) ADAMTSL1 / PUNCTIN 桿(gan)狀病毒-昆蟲細(xi)胞(bao)裂解(jie)液 (陽(yang)性(xing)對(dui)照)

U14小(xiao)鼠子(zi)宮(gong)頸癌細(xi)胞(bao)CM-H067人(ren)腎系膜(mo)細(xi)胞(bao)培養基(ji)100mL 大(da)鼠(shu)C型(xing)尿肽(CNP)ELISA試(shi)劑(ji)盒 N-TSH(Human Neonatal Thyroid Stimulating Hormone)  人(ren)新生兒(er)促(cu)甲狀(zhuang)腺素 96T

Somatostatin： 抗(kang)體(ti) CPB1 Others Human 人(ren) CPB1 / PCPB 人(ren)細(xi)胞(bao)裂解(jie)液 (陽(yang)性(xing)對(dui)照)

人(ren)表(biao)皮黑(hei)色(se)素(su)細(xi)胞(bao)-淺色(se)素(su)HEM-l 大(da)鼠(shu)C-型(xing)尿肽(CNP)ELISA試(shi)劑(ji)盒 SP1/PS Beta1-G(Human Pregnancy Specific Beta1Glycoprotein)  人(ren)特異性(xing)β1糖(tang)蛋(dan)白(bai) 96T

phospho-Syntaxin 1a(Ser188)： 0酸化突觸(chu)融(rong)合(he)蛋(dan)白(bai)1抗(kang)體(ti) BRL(大(da)鼠(shu)肝細(xi)胞(bao)) 5×106cells/瓶×2

人(ren)卵(luan)巢(chao)畸胎(tai)瘤(liu)細(xi)胞(bao);PA-1 人(ren)視網(wang)膜(mo)muller細(xi)胞(bao)培養基(ji) 100mL 大(da)鼠(shu)C型(xing)尿肽(CNP)ELISA 試(shi)劑(ji)盒 PL(Human placetal lactogen)  人(ren)胎盤泌(mi)乳素(su) 96T

三、培養註意事(shi)項(xiang) 

1. 收到細(xi)胞(bao)後(hou)首先觀察(cha)細(xi)胞(bao)瓶是(shi)否完(wan)好，培養液(ye)是否有(you)漏液(ye)、渾濁(zhuo)等(deng)現象(xiang)，若有(you)上述(shu)現象(xiang) 發生(sheng)請及(ji)時(shi)和我(wo)們(men)聯系。

2. 仔(zai)細(xi)閱讀(du)細(xi)胞(bao)說(shuo)明書(shu)，了(le)解(jie)細(xi)胞(bao)相關信(xin)息(xi)，如細(xi)胞(bao)形態(tai)、所(suo)用(yong)培養基(ji)、血(xue)清(qing)比(bi)例(li)、所(suo)需(xu) 細(xi)胞(bao)因(yin)子(zi)等(deng)，確保細(xi)胞(bao)培養條(tiao)件(jian)壹致，若由(you)於(yu)培養條(tiao)件(jian)不(bu)壹致而導(dao)致細(xi)胞(bao)出(chu)現問(wen)題，責任(ren)由 客(ke)戶(hu)自(zi)行承擔。

3. 用(yong) 75%酒(jiu)精(jing)擦拭(shi)細(xi)胞(bao)瓶表(biao)面，顯微鏡下觀察(cha)細(xi)胞(bao)狀態(tai)。因(yin)運輸問(wen)題(ti)，部分細(xi)胞(bao)由於(yu)溫度(du) 變化及(ji)劇烈(lie)碰亡(wang)破(po)碎(sui)形成碎(sui)片(pian)，是正常(chang)現象(xiang)。觀察(cha)好(hao)細(xi)胞(bao)狀態(tai)後(hou)，75%酒精(jing)消毒(du)瓶(ping)壁(bi)將 T25 瓶(ping)置於(yu) 37℃培養箱放(fang)置 2-4h。

4. 貼壁(bi)細(xi)胞(bao)可以消(xiao)化，懸浮(fu)細(xi)胞(bao)直接(jie)混勻(yun)收(shou)集細(xi)胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，棄(qi)上 清(qing)。加(jia) 5 mL PBS 重懸細(xi)胞(bao)，再 900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，用(yong)新(xin)鮮(xian)的培養基(ji)重懸 細(xi)胞(bao)，並接種到新的培養瓶(ping)或(huo)培養皿中(zhong)，置於(yu)培養箱中進行培養。

5. 請客(ke)戶(hu)用(yong)相同條(tiao)件(jian)的培養基(ji)用(yong)於(yu)細(xi)胞(bao)培養。

6. 建(jian)議客(ke)戶(hu)收(shou)到細(xi)胞(bao)後(hou)前 3 天(tian)各拍(pai)幾(ji)張(zhang)細(xi)胞(bao)照片(pian)，記錄細(xi)胞(bao)狀態(tai)，便於(yu)和我(wo)司(si)技術部溝通(tong) 交(jiao)流(liu)。由(you)於(yu)運(yun)輸的原因(yin)，個(ge)別(bie)敏感(gan)細(xi)胞(bao)會出(chu)現不(bu)穩(wen)定的情況(kuang)，請及(ji)時(shi)和我(wo)們(men)聯系，告(gao)知(zhi)細(xi)胞(bao) 的具體情況(kuang)，以便我們(men)的技術人(ren)員跟蹤(zong)回訪(fang)直(zhi)至(zhi)問(wen)題(ti)解決。

7. 該(gai)細(xi)胞(bao)僅(jin)供科研(yan)使(shi)用(yong)。

8. 備(bei)註：運(yun)輸用(yong)的培養基(ji) (灌(guan)液(ye)培養基(ji)) 不(bu)能再(zai)用(yong)來培養細(xi)胞(bao)，請換用(yong)按(an)照說(shuo)明書(shu)細(xi)胞(bao)培 養條(tiao)件(jian)新配(pei)制的培養基(ji)來培養細(xi)胞(bao)。     收到細(xi)胞(bao)後(hou)次傳(chuan)代(dai)建(jian)議(yi) 1：2 傳(chuan)代(dai) 。

9. 註意：  1:2 傳(chuan)代(dai)就是 1 個(ge) T25 瓶傳(chuan) 2 個(ge) T25 瓶或(huo)者 2 個(ge) 6cm 皿。不(bu)是 1 個(ge) T25 瓶傳(chuan) 2 個(ge)10cm 皿。