CCF-STTG1細(xi)胞

公司產(chan)品(pin)僅(jin)供(gong)科研研究(jiu)使用(yong)、不得用(yong)於臨(lin)床診(zhen)斷！

1、細(xi)胞傳代：

1）細(xi)胞生長至覆(fu)蓋培(pei)養瓶(ping)的 80%面(mian)積時(shi)，棄 25cm2培養瓶(ping)中(zhong)的培(pei)養液，用(yong) PBS 清洗細(xi)胞壹次；

2）添加 0.25%消化液約(yue) 1ml 至(zhi)培養瓶(ping)中(zhong)，倒(dao)置(zhi)顯微鏡下(xia)觀察(cha)，待(dai)細(xi)胞回(hui)縮變圓後(hou)加入(ru) 5ml 培養

液終(zhong)止(zhi)消化，再輕(qing)輕(qing)吹打(da)細(xi)胞使(shi)之脫(tuo)落，然(ran)後(hou)將(jiang)懸液轉(zhuan)移(yi)至(zhi) 15ml 離心管中(zhong)，1000rpm 離心(xin) 5min；

3）棄上清(qing)，沈澱(dian)細(xi)胞用(yong) 1-2ml 培養基(ji)重(zhong)懸(xuan)，然(ran)後(hou)按(an) 1:2 比例進(jin)行分瓶(ping)傳代，最(zui)後放(fang)入(ru) 37℃，5%CO2細(xi)胞

培(pei)養箱(xiang)中(zhong)培(pei)養；

壹、商(shang)品介(jie)紹：

2、細(xi)胞凍存(cun)：

1）細(xi)胞生長至覆(fu)蓋培(pei)養瓶(ping)的 80%面(mian)積時(shi)，棄 25cm2培養瓶(ping)中(zhong)的培(pei)養液，用(yong) PBS 清洗細(xi)胞壹次；

2）添加 0.25%消化液約(yue) 1ml 至(zhi)培養瓶(ping)中(zhong)，倒(dao)置(zhi)顯微鏡下(xia)觀察(cha)，待(dai)細(xi)胞回(hui)縮變圓後(hou)加入(ru)培養液終(zhong)

止(zhi)消化，輕輕(qing)吹打(da)細(xi)胞使(shi)之脫(tuo)落，然(ran)後(hou)將(jiang)懸液轉(zhuan)移(yi)至(zhi) 15ml 離心管中(zhong)，1000rpm 離心(xin) 5min；

3）用(yong)適量(liang)的凍存(cun)液（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸(xuan)細(xi)胞，並(bing)放(fang)置(zhi)於(yu)凍存(cun)管中(zhong)；

4）先(xian)將(jiang)細(xi)胞凍存(cun)管放(fang)置於(yu)-20℃ 1.5h，然(ran)後(hou)將(jiang)其(qi)移(yi)入(ru)-80℃過夜(ye)，24h 後(hou)轉(zhuan)入(ru)液氮(dan)中進(jin)行長期保(bao)存(cun)。使用(yong)程(cheng)序(xu)

降(jiang)溫(wen)盒(he)可(ke)直接(jie)放入(ru)-80℃。

二、細(xi)胞培(pei)養操(cao)作(zuo)

1) 復蘇細(xi)胞：以下(xia)細(xi)胞培(pei)養凍存(cun)處理(li)僅(jin)供(gong)參(can)考(kao)，具(ju)體(ti)操(cao)作(zuo)步(bu)驟以隨(sui)貨(huo)產(chan)品(pin)說(shuo)明書為(wei)主。將(jiang)含有(you)1 mL細(xi)胞懸(xuan)液(ye)的凍存(cun)管在(zai) 37℃水(shui)浴(yu)中(zhong)迅速搖(yao)晃解(jie)凍，加4 mL培養基(ji)混合(he)均勻。在1000 rpm條件下(xia)離心(xin)3 min，棄去(qu)上清(qing)液，加1-2 mL培養基(ji)後吹勻。然(ran)後(hou)將(jiang)所有(you)細(xi)胞懸(xuan)液(ye)加入(ru)含適量(liang)培養基(ji)的培(pei)養瓶(ping)中(zhong)培養過夜(ye)（或將(jiang)細(xi)胞懸(xuan)液(ye)加入(ru)10 cm皿中(zhong)，加入(ru)約8 mL培(pei)養基(ji)，培養過夜(ye)）。第(di)二(er)天(tian)換液(ye)並(bing)檢查細(xi)胞密(mi)度(du)。

2) 細(xi)胞傳代：如果(guo)細(xi)胞密(mi)度(du)達 80%-90%，即可(ke)進(jin)行傳代培養。

a、棄去(qu)培養上清，用(yong)不含鈣、鎂離(li)子的PBS潤(run)洗細(xi)胞1-2次。

b、加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培(pei)養瓶(ping)中(zhong)，使消化液浸潤(run)所(suo)有(you)細(xi)胞，將(jiang)培養瓶(ping)置(zhi)於37℃培養箱(xiang)中(zhong)消化1-2 min（視(shi)細(xi)胞情(qing)況而(er)定(ding)），然(ran)後(hou)在顯微鏡下(xia)觀察(cha)細(xi)胞消化情況，若細(xi)胞大(da)部(bu)分變圓並(bing)脫(tuo)落，迅速拿回(hui)操(cao)作(zuo)臺，輕(qing)敲(qiao)幾(ji)下(xia)培養瓶(ping)後(hou)加2-3ml培養基(ji)終(zhong)止(zhi)消化。輕輕(qing)打(da)勻後裝入(ru)無菌(jun)離心管中(zhong)，1000 rpm離心(xin)5 min，棄去(qu)上清(qing)液，補加1-2 mL培養液後吹勻。

c、將(jiang)細(xi)胞懸(xuan)液(ye)按(an)1:2比例分到新(xin)的含8 mL培養基(ji)的新(xin)皿(min)中(zhong)或者瓶(ping)中(zhong)，置於培養箱(xiang)中(zhong)培(pei)養。 3) 細(xi)胞凍存(cun)：待細(xi)胞生長狀態良好時(shi)，可進(jin)行細(xi)胞凍存(cun)。下(xia)面(mian) T25 瓶(ping)為(wei)例；a、收集細(xi)胞及細(xi)胞培(pei)養液，裝入(ru)無菌(jun)離心管中(zhong)，1000 rpm條件下(xia)離心(xin)4 min，棄去(qu)上清(qing)液，用(yong)PBS清洗壹遍，棄盡(jin)PBS，進(jin)行細(xi)胞計(ji)數(shu)。

b、根(gen)據(ju)細(xi)胞數(shu)量(liang)加入(ru)無血(xue)清細(xi)胞凍存(cun)液，使(shi)細(xi)胞密(mi)度(du)5×106~1×107/mL，輕(qing)輕(qing)混(hun)勻，每(mei)支凍存(cun)管凍存(cun)1mL細(xi)胞懸(xuan)液(ye)，註意凍存(cun)管做(zuo)好標識(shi)。將(jiang)凍存(cun)管放(fang)入(ru)-80℃冰箱(xiang)，24 h後(hou)轉(zhuan)入(ru)液氮(dan)灌(guan)儲(chu)存(cun)。記錄凍存(cun)管位(wei)置以便(bian)下(xia)次拿取(qu)。

公司正在(zai)出(chu)售的產(chan)品(pin)：

體(ti)液單胺(an)氧化酶A型（MAO－A）活性(xing)熒(ying)光(guang)定(ding)量(liang)檢測試劑盒(he)

－蛋白(bai)結(jie)合凝(ning)膠(jiao)電泳定量(liang)分析（McKay）試劑盒(he)

通用(yong)型WNV（WEST NILE）病(bing)毒定(ding)性(xing)檢測試劑盒(he)

MYC蛋白(bai)表(biao)達西方雜(za)交(jiao)分析試(shi)劑盒(he)

體(ti)液遊(you)離氨(an)基(ji)酸(suan)含量(liang)熒(ying)光(guang)定(ding)量(liang)檢測試劑盒(he)

全(quan)組(zu)織(zhi)免疫熒(ying)光(guang)顯(xian)微鏡間接(jie)檢測試劑盒(he)（含壹抗和熒(ying)光(guang)二(er)抗）

組(zu)織(zhi)JAK3激酶活性(xing)定(ding)量(liang)檢測試劑盒(he)（A/B/C）

植物(wu)細(xi)胞周(zhou)期G2期同(tong)步(bu)（SYNCHRONY）處理(li)試(shi)劑盒(he)

細(xi)胞/組(zu)織(zhi)多(duo)聚賴載玻(bo)片制(zhi)備(bei)試(shi)劑盒(he)

體(ti)液乙(yi)酰(xian)酯(zhi)酶活性(xing)熒(ying)光(guang)法定(ding)量(liang)檢測試劑盒(he)

精(jing)液(ye)組(zu)分氧化應激活性(xing)氧(yang)（ROS）光(guang)澤(ze)精(jing)化學發光(guang)法定(ding)量(liang)

體(ti)外(wai)非細(xi)胞系(xi)統(tong)細(xi)胞色素P450亞(ya)酶3A4（TESTOSTERONE）活性(xing)高(gao)效(xiao)液相色譜法（HPLC）定量(liang)檢測試劑盒(he)

鈣ATP酶SERCA蛋白(bai)表(biao)達ELISA定量(liang)檢測試劑盒(he)

細(xi)胞基(ji)質(zhi)金(jin)屬(shu)抑(yi)制(zhi)劑1（TIMP-1）活性(xing)熒(ying)光(guang)定(ding)量(liang)檢測試劑盒(he)

幹細(xi)胞成脂分化潛力比色法定(ding)量(liang)檢測試劑盒(he)

載脂蛋(dan)白(bai)E4抗體(ti)

鈣依(yi)賴分泌激活蛋(dan)白(bai)1抗體(ti)

驅動(dong)蛋白(bai)2抗體(ti)

I類(lei)組(zu)織(zhi)相容(rong)性(xing)H-2抗原D-Dalpha鏈(lian)抗體(ti)

細(xi)胞分裂周(zhou)期蛋白(bai)8抗體(ti)

X染色體(ti)開(kai)放閱(yue)讀框32抗體(ti)

跨膜蛋(dan)白(bai)28/TMEM28抗體(ti)

CCF-STTG1細(xi)胞APC標記人CD69單克(ke)隆(long)抗體(ti)

鋅(xin)指(zhi)蛋白(bai)768抗體(ti)

三、培(pei)養註意事(shi)項(xiang) 

1. 收到細(xi)胞後(hou)首先(xian)觀察(cha)細(xi)胞瓶(ping)是否(fou)完好，培養液是否(fou)有(you)漏液、渾濁(zhuo)等現象，若有(you)上述(shu)現(xian)象 發生請及時(shi)和我們(men)聯(lian)系(xi)。

2. 仔(zai)細(xi)閱(yue)讀細(xi)胞說(shuo)明書，了解(jie)細(xi)胞相關信息(xi)，如(ru)細(xi)胞形態、所用(yong)培養基(ji)、血(xue)清比例、所需 細(xi)胞因(yin)子等，確保(bao)細(xi)胞培(pei)養條件壹致，若(ruo)由(you)於(yu)培養條件不壹致而(er)導(dao)致細(xi)胞出(chu)現(xian)問(wen)題，責任(ren)由(you) 客(ke)戶(hu)自行承(cheng)擔(dan)。

3. 用(yong) 75%酒精(jing)擦(ca)拭(shi)細(xi)胞瓶(ping)表(biao)面(mian)，顯微鏡下(xia)觀察(cha)細(xi)胞狀(zhuang)態。因運(yun)輸(shu)問(wen)題，部分細(xi)胞由(you)於(yu)溫度 變化及劇(ju)烈(lie)碰亡(wang)破碎(sui)形成碎(sui)片，是正常(chang)現(xian)象。觀察(cha)好細(xi)胞狀(zhuang)態後，75%酒精(jing)消毒瓶(ping)壁(bi)將(jiang) T25 瓶(ping)置(zhi)於 37℃培養箱(xiang)放(fang)置(zhi) 2-4h。

4. 貼壁(bi)細(xi)胞可(ke)以消化，懸浮(fu)細(xi)胞直接(jie)混勻收集細(xi)胞，900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，棄(qi)上 清。加 5 mL PBS 重(zhong)懸(xuan)細(xi)胞，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，用(yong)新(xin)鮮(xian)的培(pei)養基(ji)重(zhong)懸(xuan) 細(xi)胞，並(bing)接(jie)種到(dao)新(xin)的培(pei)養瓶(ping)或培養皿中，置於培(pei)養箱(xiang)中(zhong)進(jin)行培(pei)養。

5. 請客戶(hu)用(yong)相同(tong)條件的培(pei)養基(ji)用(yong)於細(xi)胞培(pei)養。

6. 建議(yi)客戶(hu)收到細(xi)胞後(hou)前(qian) 3 天(tian)各拍(pai)幾(ji)張(zhang)細(xi)胞照(zhao)片，記錄細(xi)胞狀(zhuang)態，便(bian)於和我司技(ji)術部(bu)溝通 交(jiao)流(liu)。由(you)於(yu)運輸的原(yuan)因，個別敏感細(xi)胞會(hui)出(chu)現不穩定的情(qing)況，請及時(shi)和我們(men)聯(lian)系(xi)，告(gao)知細(xi)胞 的具(ju)體(ti)情況，以便(bian)我們(men)的技(ji)術人員(yuan)跟(gen)蹤回(hui)訪(fang)直至問(wen)題解(jie)決。

7. 該細(xi)胞僅(jin)供(gong)科研使(shi)用(yong)。

8. 備註：運輸(shu)用(yong)的培(pei)養基(ji) (灌(guan)液培(pei)養基(ji)) 不能(neng)再用(yong)來(lai)培養細(xi)胞，請(qing)換用(yong)按(an)照(zhao)說(shuo)明書細(xi)胞培(pei) 養條件新(xin)配制(zhi)的培(pei)養基(ji)來(lai)培養細(xi)胞。     收到細(xi)胞後(hou)第(di)壹次傳代建議(yi) 1：2 傳代 。

9. 註意：  1:2 傳代就(jiu)是 1 個 T25 瓶(ping)傳 2 個 T25 瓶(ping)或者 2 個 6cm 皿。不是 1 個 T25 瓶(ping)傳 2 個10cm 皿。