WERI-RB-1人視網膜(mo)神經(jing)膠質(zhi)瘤細(xi)胞

公(gong)司產(chan)品(pin)僅(jin)供(gong)科研研究(jiu)使用、不得(de)用於臨(lin)床(chuang)診斷(duan)！

1、細(xi)胞傳代(dai)：

1）細(xi)胞生長(chang)至覆(fu)蓋培養瓶的(de) 80%面積時，棄 25cm2培養瓶中(zhong)的(de)培養液(ye)，用 PBS 清洗(xi)細胞壹次；

2）添加(jia) 0.25%消(xiao)化液(ye)約 1ml 至培養瓶中(zhong)，倒置(zhi)顯微鏡(jing)下(xia)觀(guan)察(cha)，待(dai)細胞回縮變圓後加入(ru) 5ml 培養

液(ye)終止(zhi)消(xiao)化，再(zai)輕(qing)輕吹打細胞使之脫(tuo)落，然後將懸(xuan)液(ye)轉移(yi)至 15ml 離心(xin)管(guan)中(zhong)，1000rpm 離心(xin) 5min；

3）棄(qi)上(shang)清，沈(chen)澱細(xi)胞用 1-2ml 培養基重(zhong)懸(xuan)，然(ran)後按(an) 1:2 比(bi)例(li)進(jin)行(xing)分(fen)瓶傳代(dai)，最後放(fang)入(ru) 37℃，5%CO2細胞

培養箱中(zhong)培養；

2、細胞凍存(cun)：

1）細胞生長(chang)至覆(fu)蓋培養瓶的(de) 80%面積時，棄 25cm2培養瓶中(zhong)的(de)培養液(ye)，用 PBS 清洗(xi)細胞壹次；

2）添加(jia) 0.25%消(xiao)化液(ye)約 1ml 至培養瓶中(zhong)，倒置(zhi)顯微鏡(jing)下(xia)觀(guan)察(cha)，待(dai)細胞回縮變圓後加入(ru)培養液(ye)終

止(zhi)消(xiao)化，輕(qing)輕(qing)吹打細胞使之脫(tuo)落，然後將懸(xuan)液(ye)轉移(yi)至 15ml 離心(xin)管(guan)中(zhong)，1000rpm 離心(xin) 5min；

3）用適量(liang)的(de)凍存(cun)液(ye)（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸(xuan)細(xi)胞，並放(fang)置(zhi)於凍(dong)存(cun)管中(zhong)；

4）先(xian)將(jiang)細胞凍存(cun)管放(fang)置(zhi)於-20℃ 1.5h，然(ran)後將其移(yi)入-80℃過(guo)夜，24h 後轉入液(ye)氮(dan)中進(jin)行(xing)長(chang)期保(bao)存(cun)。使用程序

降(jiang)溫(wen)盒(he)可(ke)直接(jie)放(fang)入(ru)-80℃。

壹、商品(pin)介(jie)紹(shao)：

二、細胞培養操作(zuo)

1) 復(fu)蘇(su)細(xi)胞：以(yi)下細胞培養凍存(cun)處理(li)僅(jin)供(gong)參考，具體操作(zuo)步(bu)驟以(yi)隨(sui)貨產(chan)品(pin)說明(ming)書(shu)為(wei)主(zhu)。將(jiang)含有(you)1 mL細(xi)胞懸(xuan)液(ye)的(de)凍存(cun)管在(zai) 37℃水(shui)浴中(zhong)迅速(su)搖(yao)晃(huang)解(jie)凍(dong)，加(jia)4 mL培養基混(hun)合均(jun)勻。在1000 rpm條(tiao)件下離心(xin)3 min，棄(qi)去上(shang)清液(ye)，加(jia)1-2 mL培養基後吹勻。然後將所有(you)細(xi)胞懸(xuan)液(ye)加(jia)入含適量(liang)培養基的(de)培養瓶中(zhong)培養過(guo)夜（或將(jiang)細胞懸(xuan)液(ye)加(jia)入10 cm皿中，加(jia)入(ru)約8 mL培養基，培養過(guo)夜）。第二(er)天換液(ye)並(bing)檢查細(xi)胞密(mi)度。

2) 細胞傳代(dai)：如(ru)果(guo)細胞密(mi)度達 80%-90%，即(ji)可(ke)進行(xing)傳代(dai)培養。

a、棄去培養上(shang)清，用不含鈣(gai)、鎂離子(zi)的(de)PBS潤(run)洗(xi)細胞1-2次。

b、加1 mL消(xiao)化液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培養瓶中(zhong)，使消(xiao)化液(ye)浸(jin)潤(run)所有(you)細(xi)胞，將培養瓶置(zhi)於37℃培養箱中(zhong)消(xiao)化1-2 min（視(shi)細(xi)胞情況(kuang)而(er)定），然(ran)後在顯微鏡(jing)下(xia)觀(guan)察(cha)細胞消(xiao)化情(qing)況(kuang)，若(ruo)細(xi)胞大部分變(bian)圓並脫落，迅速(su)拿回操作(zuo)臺(tai)，輕(qing)敲(qiao)幾下培養瓶後加2-3ml培養基終止(zhi)消(xiao)化。輕(qing)輕(qing)打勻後裝入(ru)無(wu)菌離心(xin)管(guan)中(zhong)，1000 rpm離心(xin)5 min，棄(qi)去上(shang)清液(ye)，補(bu)加1-2 mL培養液(ye)後吹勻。

c、將細(xi)胞懸(xuan)液(ye)按(an)1:2比(bi)例(li)分(fen)到新(xin)的(de)含8 mL培養基的(de)新(xin)皿中或(huo)者瓶(ping)中(zhong)，置於培養箱中(zhong)培養。 3) 細胞凍存(cun)：待(dai)細胞生長(chang)狀(zhuang)態良(liang)好(hao)時，可(ke)進行(xing)細(xi)胞凍存(cun)。下面 T25 瓶(ping)為(wei)例(li)；a、收集細胞及細胞培養液(ye)，裝(zhuang)入無菌離心(xin)管(guan)中(zhong)，1000 rpm條(tiao)件下離心(xin)4 min，棄(qi)去上(shang)清液(ye)，用PBS清洗(xi)壹遍，棄(qi)盡(jin)PBS，進(jin)行(xing)細(xi)胞計數(shu)。

b、根據(ju)細(xi)胞數(shu)量(liang)加(jia)入無血(xue)清細胞凍存(cun)液(ye)，使(shi)細胞密(mi)度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支(zhi)凍(dong)存(cun)管凍(dong)存(cun)1mL細胞懸(xuan)液(ye)，註(zhu)意凍存(cun)管做好(hao)標識。將凍(dong)存(cun)管放(fang)入(ru)-80℃冰箱，24 h後轉入液(ye)氮(dan)灌儲存(cun)。記錄(lu)凍(dong)存(cun)管位(wei)置以(yi)便下次拿取。

公(gong)司正在出售(shou)的(de)產(chan)品(pin)：

OGG1： 8-羥基(ji)NA糖基化酶(mei) 0.1ml

Rhesus antibody Rh GPV/Goose parvovirus 鵝(e)細小(xiao)病毒GPV抗體(ti) 肝(gan)動脈平滑(hua)肌(ji)細(xi)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)

marc-145-EGFP-puro(慢病毒構建(jian)穩定株(zhu))猴(hou)胚胎腎上(shang)皮(pi)細(xi)胞 Marc-145-EGFP-puro (leiviral consuct stable sain) monkey embryonic kidney epithelial cells DMEM+10%FBS+1%P/S+2ug/ml puromycin 大鼠絡絲(si)蛋(dan)白(bai)(RL)ELISA試劑(ji)盒(he) ENA-78/CXCL5(Mouse Epithelial neutrophil activating peptide 78)  小鼠上(shang)皮(pi)中(zhong)性(xing)粒細(xi)胞活化肽(tai)78 96T

OR10J3： 嗅覺受(shou)體(ti)家族10亞基J3抗體(ti) TGFBI Others Human 人(ren) BIGH3 / BIG-H3 / TGFBI 人細(xi)胞裂(lie)解(jie)液(ye) (陽(yang)性(xing)對照)

貓腎細(xi)胞;CRFK 大鼠卵清蛋(dan)白(bai)特(te)異性(xing)IgG(OVA sIgG)ELISA試劑(ji)盒(he) HO-2  大鼠血(xue)紅(hong)素氧(yang)合酶(mei)2 96T

KAT2B： 組(zu)蛋(dan)白(bai)乙(yi)酰(xian)轉移(yi)酶PCAF抗體(ti) PROK1 Others Human 人(ren) EG-VEGF / prokineticin-1 桿狀(zhuang)病毒-昆(kun)蟲細胞裂(lie)解(jie)液(ye) (陽(yang)性(xing)對照)

人視(shi)網膜(mo)muller細(xi)胞培養基 100mL 雞(ji)可(ke)溶(rong)性(xing)血管(guan)內皮(pi)細胞蛋(dan)白(bai)C受(shou)體(ti)(sEPCR)ELISA 試劑(ji)盒(he) IAA/BSA 吲(yin)哚(duo)-3-乙(yi)酸偶(ou)聯(lian)血清白蛋(dan)白(bai) 5mg

Phospho-c-Kit(Ser741)： 0酸化原癌(ai)基(ji)因(yin)c-kit抗體(ti) NRK-52E，大(da)鼠腎細(xi)胞 Sars蛋(dan)白(bai)表(biao)達(da)株(zhu)，293sars181A細(xi)胞 NCI-H1703 [H1703](人肺(fei)癌細(xi)胞)

IL13RA2 Others Rat 大鼠(shu) IL13RA2 / IL13R 人細(xi)胞裂(lie)解(jie)液(ye) (陽(yang)性(xing)對照) 雞(ji)可(ke)溶(rong)性(xing)細胞間粘附分子1(sICAM-1)ELISA 試劑(ji)盒(he) IL-17(Interleukin-17) 白介(jie)素(su)-17抗原 0.5mg

Phospho-c-Kit(Ser721)： 0酸化原癌(ai)基(ji)因(yin)c-kit抗體(ti) EB病毒轉化的(de)人B淋(lin)巴細(xi)胞;Mao

WERI-RB-1人視(shi)網膜(mo)神經(jing)膠質(zhi)瘤細(xi)胞CM-H035人腸(chang)靜脈內皮(pi)細胞培養基100mL 大(da)鼠CD80分(fen)子(zi)(CD80/B7-1)ELISA試劑(ji)盒(he) SDPR(human serum deprivation response)  人血清剝奪(duo)反應相(xiang)關蛋(dan)白(bai) 96T

SLAIN1： 13號染(ran)色(se)體開(kai)放(fang)閱(yue)讀(du)框(kuang)32抗體(ti) CN3 Others Human 人(ren) CN3 / Coactin-3 人細(xi)胞裂(lie)解(jie)液(ye) (陽(yang)性(xing)對照)

人腦(nao)血管(guan)周(zhou)細胞HBVP 大鼠CD68分子(zi)(CD68)ELISA試劑(ji)盒(he) HNP1-3(Human neutrophil peptide 1-3)  人中性(xing)粒細(xi)胞防禦(yu)素1-3 96T

SMCP： 線粒體(ti)相關富含半(ban)胱(guang)酸(suan)蛋(dan)白(bai)抗體(ti) BxPC-3(人(ren)原位(wei)胰腺(xian)腺(xian)癌細(xi)胞) 5×106cells/瓶×2

人卵巢腺(xian)癌細(xi)胞;SK-OV-3 大鼠肺(fei)微血(xue)管內皮(pi)細胞培養基 100mL 大(da)鼠CD63分(fen)子(zi)(CD63)ELISA試劑(ji)盒(he) ECP(Human eosinophil cationic protein)  人嗜(shi)酸性(xing)粒細(xi)胞陽(yang)離子(zi)蛋(dan)白(bai) 96T

三(san)、培養註意(yi)事項(xiang) 

1. 收到細(xi)胞後首(shou)先(xian)觀(guan)察(cha)細胞瓶是(shi)否完好(hao)，培養液(ye)是(shi)否有(you)漏(lou)液(ye)、渾濁等現象，若(ruo)有(you)上(shang)述現象 發生請(qing)及時和我們聯(lian)系。

2. 仔(zai)細閱讀(du)細(xi)胞說明(ming)書(shu)，了(le)解(jie)細(xi)胞相關信息(xi)，如(ru)細(xi)胞形態、所用培養基、血(xue)清比(bi)例(li)、所需 細(xi)胞因(yin)子等，確(que)保(bao)細胞培養條(tiao)件壹致，若(ruo)由(you)於培養條(tiao)件不壹致而(er)導致細(xi)胞出現問題，責(ze)任由(you) 客戶(hu)自行(xing)承擔(dan)。

3. 用 75%酒精(jing)擦拭(shi)細胞瓶表(biao)面，顯微鏡(jing)下(xia)觀(guan)察(cha)細胞狀(zhuang)態。因(yin)運(yun)輸(shu)問題，部分細胞由於溫(wen)度(du) 變(bian)化及(ji)劇(ju)烈碰(peng)亡破(po)碎(sui)形成(cheng)碎(sui)片(pian)，是(shi)正常現象。觀(guan)察(cha)好(hao)細胞狀(zhuang)態後，75%酒精(jing)消(xiao)毒瓶壁(bi)將 T25 瓶置於 37℃培養箱放(fang)置(zhi) 2-4h。

4. 貼壁(bi)細胞可(ke)以(yi)消(xiao)化，懸(xuan)浮(fu)細胞直接(jie)混勻收集細胞，900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，棄(qi)上(shang) 清。加 5 mL PBS 重(zhong)懸(xuan)細(xi)胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，用新(xin)鮮(xian)的(de)培養基重(zhong)懸(xuan) 細(xi)胞，並接(jie)種到新(xin)的(de)培養瓶或(huo)培養皿中，置(zhi)於(yu)培養箱中(zhong)進行(xing)培養。

5. 請(qing)客戶用相同條(tiao)件的(de)培養基用於細(xi)胞培養。

6. 建議(yi)客戶(hu)收到細(xi)胞後前 3 天各(ge)拍(pai)幾張細胞照片，記錄(lu)細(xi)胞狀(zhuang)態，便於和我司技(ji)術(shu)部(bu)溝(gou)通(tong) 交流。由於運(yun)輸(shu)的(de)原因(yin)，個別敏(min)感(gan)細胞會出現不穩定的(de)情況(kuang)，請(qing)及時和我們聯(lian)系，告(gao)知(zhi)細(xi)胞 的(de)具體(ti)情況(kuang)，以(yi)便我們的(de)技(ji)術(shu)人(ren)員(yuan)跟蹤回訪直(zhi)至問題解(jie)決(jue)。

7. 該(gai)細胞僅(jin)供(gong)科研使(shi)用。

8. 備(bei)註(zhu)：運(yun)輸(shu)用的(de)培養基 (灌(guan)液(ye)培養基) 不能再用來(lai)培養細胞，請(qing)換用按(an)照(zhao)說明(ming)書(shu)細(xi)胞培 養條(tiao)件新(xin)配(pei)制(zhi)的(de)培養基來(lai)培養細胞。     收到細(xi)胞後次傳代(dai)建(jian)議(yi) 1：2 傳代(dai) 。

9. 註(zhu)意：  1:2 傳代(dai)就(jiu)是(shi) 1 個 T25 瓶(ping)傳 2 個(ge) T25 瓶(ping)或者 2 個(ge) 6cm 皿。不是(shi) 1 個 T25 瓶(ping)傳 2 個(ge)10cm 皿。