YAC-1小(xiao)鼠淋(lin)巴(ba)瘤細(xi)胞(bao)

公司(si)產品僅(jin)供(gong)科研(yan)研(yan)究(jiu)使(shi)用、不(bu)得用於(yu)臨(lin)床診斷(duan)！

1、細(xi)胞(bao)傳代：

1）細(xi)胞(bao)生(sheng)長至(zhi)覆(fu)蓋培養瓶的(de) 80%面積(ji)時，棄(qi) 25cm2培養瓶中(zhong)的(de)培養液，用 PBS 清(qing)洗細(xi)胞(bao)壹(yi)次；

2）添加(jia) 0.25%消(xiao)化(hua)液約 1ml 至(zhi)培養瓶中(zhong)，倒置顯(xian)微(wei)鏡下(xia)觀(guan)察，待(dai)細(xi)胞(bao)回(hui)縮變圓(yuan)後加(jia)入 5ml 培養

液終止消(xiao)化(hua)，再輕(qing)輕(qing)吹(chui)打(da)細(xi)胞(bao)使(shi)之脫落(luo)，然(ran)後將(jiang)懸(xuan)液(ye)轉移至(zhi) 15ml 離(li)心管(guan)中(zhong)，1000rpm 離(li)心 5min；

3）棄(qi)上(shang)清，沈澱細(xi)胞(bao)用(yong) 1-2ml 培養基重(zhong)懸(xuan)，然(ran)後按(an) 1:2 比例進行(xing)分(fen)瓶(ping)傳代，最(zui)後放入 37℃，5%CO2細(xi)胞(bao)

培養箱中(zhong)培養；

2、細(xi)胞(bao)凍(dong)存：

1）細(xi)胞(bao)生(sheng)長至(zhi)覆(fu)蓋培養瓶的(de) 80%面積(ji)時，棄(qi) 25cm2培養瓶中(zhong)的(de)培養液，用 PBS 清(qing)洗細(xi)胞(bao)壹(yi)次；

2）添加(jia) 0.25%消(xiao)化(hua)液約 1ml 至(zhi)培養瓶中(zhong)，倒置顯(xian)微(wei)鏡下(xia)觀(guan)察，待(dai)細(xi)胞(bao)回(hui)縮變圓(yuan)後加(jia)入培養液終

止消(xiao)化(hua)，輕(qing)輕(qing)吹(chui)打(da)細(xi)胞(bao)使(shi)之脫落(luo)，然(ran)後將(jiang)懸(xuan)液(ye)轉移至(zhi) 15ml 離(li)心管(guan)中(zhong)，1000rpm 離(li)心 5min；

3）用(yong)適(shi)量(liang)的(de)凍存(cun)液（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸(xuan)細(xi)胞(bao)，並(bing)放置於(yu)凍存(cun)管(guan)中(zhong)；

4）先將(jiang)細(xi)胞(bao)凍(dong)存管(guan)放置於(yu)-20℃ 1.5h，然後將(jiang)其移入-80℃過(guo)夜(ye)，24h 後轉入液(ye)氮(dan)中(zhong)進行(xing)長期(qi)保存(cun)。使用程(cheng)序(xu)

降溫(wen)盒(he)可直(zhi)接放入-80℃。

壹(yi)、商品介紹(shao)：

二、細(xi)胞(bao)培養操(cao)作

1) 復(fu)蘇(su)細(xi)胞(bao)：以(yi)下(xia)細(xi)胞(bao)培養凍存處(chu)理(li)僅(jin)供(gong)參考(kao)，具(ju)體(ti)操(cao)作步驟以(yi)隨貨(huo)產品說(shuo)明書(shu)為主(zhu)。將(jiang)含(han)有1 mL細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)的(de)凍存(cun)管(guan)在 37℃水浴(yu)中(zhong)迅速搖(yao)晃解凍(dong)，加(jia)4 mL培養基混合均(jun)勻。在(zai)1000 rpm條件下(xia)離(li)心3 min，棄(qi)去上(shang)清液(ye)，加(jia)1-2 mL培養基後吹勻。然後將(jiang)所有細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)加(jia)入含(han)適(shi)量(liang)培養基的(de)培養瓶中(zhong)培養過(guo)夜(ye)（或(huo)將(jiang)細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)加(jia)入10 cm皿(min)中(zhong)，加(jia)入約8 mL培養基，培養過(guo)夜(ye)）。第(di)二(er)天換(huan)液(ye)並(bing)檢查(zha)細(xi)胞(bao)密度。

2) 細(xi)胞(bao)傳代：如果(guo)細(xi)胞(bao)密度達(da) 80%-90%，即可進行(xing)傳代培養。

a、棄(qi)去培養上(shang)清，用(yong)不(bu)含(han)鈣、鎂離(li)子的(de)PBS潤洗(xi)細(xi)胞(bao)1-2次(ci)。

b、加(jia)1 mL消(xiao)化(hua)液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培養瓶中(zhong)，使消(xiao)化(hua)液浸潤所有細(xi)胞(bao)，將(jiang)培養瓶置於(yu)37℃培養箱中(zhong)消(xiao)化(hua)1-2 min（視細(xi)胞(bao)情況而(er)定(ding)），然後在顯(xian)微(wei)鏡下(xia)觀(guan)察細(xi)胞(bao)消(xiao)化(hua)情況，若(ruo)細(xi)胞(bao)大部分(fen)變(bian)圓(yuan)並脫(tuo)落，迅(xun)速拿回(hui)操(cao)作臺，輕(qing)敲幾下(xia)培養瓶後加(jia)2-3ml培養基終止消(xiao)化(hua)。輕(qing)輕(qing)打(da)勻後裝入無菌(jun)離(li)心管(guan)中(zhong)，1000 rpm離(li)心5 min，棄(qi)去上(shang)清液(ye)，補(bu)加(jia)1-2 mL培養液後吹勻。

c、將(jiang)細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)按(an)1:2比例分(fen)到(dao)新(xin)的(de)含(han)8 mL培養基的(de)新(xin)皿(min)中(zhong)或(huo)者(zhe)瓶中(zhong)，置於(yu)培養箱中(zhong)培養。 3) 細(xi)胞(bao)凍(dong)存：待(dai)細(xi)胞(bao)生(sheng)長狀態(tai)良(liang)好時，可進行(xing)細(xi)胞(bao)凍(dong)存。下(xia)面(mian) T25 瓶為例；a、收集(ji)細(xi)胞(bao)及(ji)細(xi)胞(bao)培養液，裝入(ru)無菌(jun)離(li)心管(guan)中(zhong)，1000 rpm條件下(xia)離(li)心4 min，棄(qi)去上(shang)清液(ye)，用(yong)PBS清(qing)洗壹遍(bian)，棄(qi)盡(jin)PBS，進行(xing)細(xi)胞(bao)計數。

b、根(gen)據(ju)細(xi)胞(bao)數(shu)量(liang)加(jia)入無(wu)血(xue)清細(xi)胞(bao)凍(dong)存液，使細(xi)胞(bao)密度5×106~1×107/mL，輕(qing)輕(qing)混勻，每支(zhi)凍存管(guan)凍存1mL細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)，註意凍(dong)存(cun)管(guan)做好標(biao)識。將(jiang)凍存(cun)管(guan)放入-80℃冰箱，24 h後轉入液(ye)氮(dan)灌儲(chu)存(cun)。記錄凍(dong)存管(guan)位(wei)置以(yi)便(bian)下(xia)次(ci)拿取。

公司(si)正(zheng)在(zai)出(chu)售(shou)的(de)產品：

Osteocalcin： 骨鈣(gai)蛋白(bai)/骨鈣(gai)素(su)抗(kang)體(ti) SiHa細(xi)胞(bao)，子(zi)細(xi)胞(bao) 人(ren)鼻(bi)咽(yan)癌(ai)母(mu)系細(xi)胞(bao),CNE-2Z細(xi)胞(bao) CL-0240V79(倉(cang)鼠肺(fei)細(xi)胞(bao))5×106cells/瓶(ping)×2

IGFBP7 Others Human 人(ren) IGFBP7 / IBP-7 人(ren)細(xi)胞(bao)裂(lie)解液(ye) (陽性對(dui)照) 大鼠卵(luan)泡(pao)抑(yi)素(su)(FS)ELISA 試劑盒 ASMA(Mouse Anti-Smooth Muscle Antibody)  小鼠(shu)抗(kang)平滑(hua)肌抗(kang)體(ti) 肝癌(ai)組(zu)織源(yuan)性原(yuan)代細(xi)胞(bao)Many types of cells包(bao)裝：5 × 105次方(1ml)/1ml

SK-HEP-1人(ren)肝癌(ai)細(xi)胞(bao) SK-HEP-1 human hepatocarcinoma cells MEM(GIBCO)+10%FBS 大鼠卵(luan)0脂脂酰(xian)轉移酶(mei)(LCAT)ELISA試(shi)劑盒 C I CP  大鼠Ⅰ型(xing)前(qian)膠原(yuan)C末(mo)端肽(tai) 96T

CT135： /抗(kang)原(yuan)135抗(kang)體(ti) FIGF Others Human 人(ren) VEGF-D / VEGFD / FIGF 人(ren)細(xi)胞(bao)裂(lie)解液(ye) (陽性對(dui)照)

豚(tun)鼠皮膚(fu)細(xi)胞(bao);GP-S1 大鼠卵(luan)0脂酰(xian)基轉移酶(mei)(LCAT)ELISA試(shi)劑盒 Human Pancreatic carcinoma markers-CA242  人(ren)胰腺(xian)癌標(biao)誌物CA242 96T

Kappa Light Chain： k輕(qing)鏈抗(kang)體(ti) CL-0396NCI-H226(人(ren)肺(fei)鱗癌(ai)細(xi)胞(bao))5×106cells/瓶(ping)×2

EFNA5 Protein Human 重(zhong)組(zu)人(ren) Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白(bai) (Fc 標(biao)簽) 雞(ji)堿性(xing)成(cheng)纖(xian)維(wei)細(xi)胞(bao)生(sheng)長因(yin)子(bFGF)ELISA 試劑盒 KLH (keyhole limpet hemocyanin) 血(xue)藍蛋白(bai) 10mg

KIST： 絲酸/蘇(su)酸蛋白(bai)激(ji)酶(mei)KIST抗(kang)體(ti) TLR2 Others Mouse 小(xiao)鼠 TLR2 桿(gan)狀病毒(du)-昆(kun)蟲(chong)細(xi)胞(bao)裂(lie)解液(ye) (陽性對(dui)照)

人(ren)角(jiao)膜內皮細(xi)胞(bao)培養基 100mL 雞(ji)甲(jia)狀腺(xian)素(T4)ELISA試(shi)劑盒 Ki-67 Ki-67 0.5mg

KIF5A/NKHC1： 驅動(dong)蛋白(bai)KIF5A抗(kang)體(ti) H9c2大鼠心(xin)肌細(xi)胞(bao)(ATCC來(lai)源(yuan)) 人(ren)髓母(mu)細(xi)胞(bao)瘤，D341 Med細(xi)胞(bao) NCI-H226 [H226](人(ren)肺(fei)癌細(xi)胞(bao))

YAC-1小(xiao)鼠淋(lin)巴(ba)瘤細(xi)胞(bao)CDON Others Human 人(ren) CDON / CDO 人(ren)細(xi)胞(bao)裂(lie)解液(ye) (陽性對(dui)照) 大鼠CD44分(fen)子(zi)(CD44)ELISA試(shi)劑盒 Fc Gamma(Human Fc region of immunoglobulin G)  G Fc片段 96T

SPANXB1： /抗(kang)原(yuan)11.2抗(kang)體(ti) 大鼠肝癌(ai)細(xi)胞(bao);CBRH-7919 [CBRH7919]

CM-H027人(ren)淋(lin)巴(ba)成(cheng)纖(xian)維細(xi)胞(bao)培養基100mL 大鼠CD40配體(ti)(CD40L)ELISA試(shi)劑盒 CyPB(Human cyclophilin B)  人(ren)嗜環蛋白(bai)/親(qin)環(huan)素B 96T

Smoothelin： 平(ping)滑(hua)肌蛋白(bai)抗(kang)體(ti) CN3 Others Human 人(ren) CN3 / Coactin-3 人(ren)細(xi)胞(bao)裂(lie)解液(ye) (陽性對(dui)照)

子(zi)宮內膜上(shang)皮細(xi)胞(bao)Many types of cells包(bao)裝：5 × 105次方(1ml) 大鼠CD3分(fen)子(zi)(CD3)ELISA試(shi)劑盒 C4BP(Human C4 binding protein)  人(ren)C4結(jie)合蛋白(bai) 96T

三、培養註意事(shi)項(xiang) 

1. 收到細(xi)胞(bao)後首先觀(guan)察細(xi)胞(bao)瓶(ping)是(shi)否完(wan)好，培養液是(shi)否有漏(lou)液(ye)、渾濁等(deng)現(xian)象，若(ruo)有上(shang)述(shu)現象 發生(sheng)請及(ji)時和我們聯(lian)系(xi)。

2. 仔(zai)細(xi)閱(yue)讀(du)細(xi)胞(bao)說(shuo)明書(shu)，了解細(xi)胞(bao)相(xiang)關信息，如細(xi)胞(bao)形(xing)態(tai)、所用(yong)培養基、血(xue)清比例、所需 細(xi)胞(bao)因(yin)子等(deng)，確(que)保細(xi)胞(bao)培養條件壹(yi)致(zhi)，若由(you)於(yu)培養條件不(bu)壹(yi)致而(er)導(dao)致細(xi)胞(bao)出(chu)現(xian)問(wen)題，責(ze)任(ren)由 客(ke)戶(hu)自(zi)行(xing)承擔(dan)。

3. 用 75%酒精(jing)擦拭(shi)細(xi)胞(bao)瓶(ping)表(biao)面(mian)，顯(xian)微(wei)鏡下(xia)觀(guan)察細(xi)胞(bao)狀態(tai)。因(yin)運(yun)輸問(wen)題，部分(fen)細(xi)胞(bao)由(you)於(yu)溫(wen)度 變化及(ji)劇(ju)烈(lie)碰(peng)亡破碎形(xing)成碎片，是(shi)正(zheng)常(chang)現象。觀(guan)察好細(xi)胞(bao)狀態(tai)後，75%酒精消(xiao)毒(du)瓶壁(bi)將(jiang) T25 瓶置於(yu) 37℃培養箱放置 2-4h。

4. 貼(tie)壁(bi)細(xi)胞(bao)可以(yi)消(xiao)化(hua)，懸(xuan)浮細(xi)胞(bao)直(zhi)接混勻收集(ji)細(xi)胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，棄(qi)上(shang) 清。加(jia) 5 mL PBS 重懸(xuan)細(xi)胞(bao)，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，用(yong)新(xin)鮮(xian)的(de)培養基重(zhong)懸(xuan) 細(xi)胞(bao)，並(bing)接種到(dao)新(xin)的(de)培養瓶或(huo)培養皿(min)中(zhong)，置於(yu)培養箱中(zhong)進行(xing)培養。

5. 請客戶(hu)用相(xiang)同條件的(de)培養基用(yong)於(yu)細(xi)胞(bao)培養。

6. 建議客戶收到細(xi)胞(bao)後前(qian) 3 天各(ge)拍(pai)幾張(zhang)細(xi)胞(bao)照片(pian)，記錄(lu)細(xi)胞(bao)狀態(tai)，便(bian)於(yu)和我司(si)技術(shu)部溝(gou)通(tong) 交(jiao)流(liu)。由於(yu)運(yun)輸的(de)原(yuan)因，個(ge)別敏(min)感(gan)細(xi)胞(bao)會(hui)出(chu)現(xian)不穩(wen)定(ding)的(de)情況，請(qing)及(ji)時和我們聯(lian)系(xi)，告(gao)知細(xi)胞(bao) 的(de)具體(ti)情況，以(yi)便(bian)我(wo)們(men)的(de)技術(shu)人(ren)員(yuan)跟蹤回(hui)訪(fang)直(zhi)至(zhi)問(wen)題解決(jue)。

7. 該細(xi)胞(bao)僅(jin)供(gong)科研(yan)使(shi)用(yong)。

8. 備(bei)註：運(yun)輸用的(de)培養基 (灌液培養基) 不(bu)能(neng)再(zai)用來(lai)培養細(xi)胞(bao)，請(qing)換(huan)用(yong)按(an)照說(shuo)明書(shu)細(xi)胞(bao)培 養條件新(xin)配制的(de)培養基來(lai)培養細(xi)胞(bao)。     收到細(xi)胞(bao)後第壹次傳代建(jian)議 1：2 傳代 。

9. 註(zhu)意：  1:2 傳代就(jiu)是(shi) 1 個 T25 瓶(ping)傳 2 個 T25 瓶(ping)或(huo)者(zhe) 2 個 6cm 皿(min)。不(bu)是(shi) 1 個 T25 瓶(ping)傳 2 個10cm 皿(min)。