SK-N-BE(2)人神(shen)經母細(xi)胞瘤細(xi)胞

公(gong)司(si)產(chan)品僅(jin)供科(ke)研(yan)研(yan)究(jiu)使用(yong)、不(bu)得(de)用(yong)於臨(lin)床(chuang)診(zhen)斷！

1、細胞傳代(dai)：

1）細(xi)胞生(sheng)長至(zhi)覆(fu)蓋(gai)培養瓶(ping)的 80%面積時，棄 25cm2培養瓶(ping)中(zhong)的培養液，用(yong) PBS 清洗細胞壹次；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消(xiao)化液約(yue) 1ml 至(zhi)培養瓶(ping)中(zhong)，倒置(zhi)顯微(wei)鏡(jing)下觀(guan)察(cha)，待細胞回縮變(bian)圓後(hou)加(jia)入(ru) 5ml 培養

液終(zhong)止(zhi)消(xiao)化，再(zai)輕輕吹(chui)打(da)細胞使之脫落，然後(hou)將(jiang)懸液轉(zhuan)移(yi)至(zhi) 15ml 離(li)心管(guan)中(zhong)，1000rpm 離(li)心 5min；

3）棄上清，沈(chen)澱(dian)細(xi)胞用 1-2ml 培養基(ji)重懸，然後(hou)按(an) 1:2 比(bi)例(li)進行(xing)分(fen)瓶(ping)傳代(dai)，最(zui)後(hou)放(fang)入(ru) 37℃，5%CO2細胞

培養箱(xiang)中(zhong)培養；

2、細(xi)胞凍(dong)存(cun)：

1）細胞生(sheng)長至(zhi)覆(fu)蓋(gai)培養瓶(ping)的 80%面積時，棄 25cm2培養瓶(ping)中(zhong)的培養液，用(yong) PBS 清洗細胞壹次；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消(xiao)化液約(yue) 1ml 至(zhi)培養瓶(ping)中(zhong)，倒置(zhi)顯微(wei)鏡(jing)下觀(guan)察(cha)，待細胞回縮變(bian)圓後(hou)加(jia)入(ru)培養液終(zhong)

止(zhi)消(xiao)化，輕輕吹(chui)打(da)細胞使之脫落，然後(hou)將(jiang)懸液轉(zhuan)移(yi)至(zhi) 15ml 離(li)心管(guan)中(zhong)，1000rpm 離(li)心 5min；

3）用適量的凍(dong)存(cun)液（FBS：DMSO=9 ：1）重懸細胞，並放(fang)置於凍(dong)存(cun)管(guan)中(zhong)；

4）先(xian)將細(xi)胞凍(dong)存(cun)管(guan)放(fang)置於-20℃ 1.5h，然後(hou)將(jiang)其(qi)移(yi)入(ru)-80℃過夜，24h 後(hou)轉(zhuan)入(ru)液氮中(zhong)進行(xing)長(chang)期(qi)保存(cun)。使用(yong)程序(xu)

降溫盒(he)可直(zhi)接(jie)放(fang)入(ru)-80℃。

壹(yi)、商(shang)品(pin)介(jie)紹(shao)：

二(er)、細胞培養操作(zuo)

1) 復(fu)蘇細(xi)胞：以(yi)下細(xi)胞培養凍(dong)存(cun)處(chu)理僅(jin)供參考(kao)，具體(ti)操作(zuo)步(bu)驟(zhou)以(yi)隨(sui)貨產(chan)品說(shuo)明(ming)書為(wei)主。將(jiang)含(han)有1 mL細(xi)胞懸液的凍(dong)存(cun)管(guan)在 37℃水浴(yu)中(zhong)迅速(su)搖(yao)晃(huang)解凍(dong)，加(jia)4 mL培養基(ji)混合均勻。在1000 rpm條件(jian)下離(li)心3 min，棄去上清液，加(jia)1-2 mL培養基(ji)後(hou)吹(chui)勻(yun)。然後(hou)將(jiang)所(suo)有(you)細胞懸液加(jia)入(ru)含適量培養基(ji)的培養瓶(ping)中(zhong)培養過夜（或(huo)將細(xi)胞懸液加(jia)入(ru)10 cm皿中(zhong)，加(jia)入(ru)約8 mL培養基(ji)，培養過夜）。第(di)二天(tian)換液並檢查細胞密度。

2) 細胞傳代(dai)：如(ru)果細(xi)胞密度達 80%-90%，即(ji)可進行(xing)傳代(dai)培養。

a、棄去培養上(shang)清，用不含鈣、鎂離(li)子(zi)的PBS潤洗細胞1-2次。

b、加(jia)1 mL消(xiao)化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培養瓶(ping)中(zhong)，使消(xiao)化液浸(jin)潤所(suo)有(you)細胞，將培養瓶(ping)置於37℃培養箱(xiang)中(zhong)消(xiao)化1-2 min（視(shi)細胞情(qing)況(kuang)而(er)定），然後(hou)在(zai)顯微(wei)鏡(jing)下觀(guan)察(cha)細(xi)胞消(xiao)化情(qing)況(kuang)，若細胞大部(bu)分(fen)變(bian)圓並脫落，迅速(su)拿回操作(zuo)臺(tai)，輕敲(qiao)幾(ji)下培養瓶(ping)後(hou)加(jia)2-3ml培養基(ji)終(zhong)止消(xiao)化。輕輕打(da)勻後(hou)裝入(ru)無菌(jun)離(li)心管(guan)中(zhong)，1000 rpm離(li)心5 min，棄去上清液，補加(jia)1-2 mL培養液後(hou)吹(chui)勻(yun)。

c、將細胞懸液按(an)1:2比(bi)例分(fen)到新(xin)的含(han)8 mL培養基(ji)的新(xin)皿中(zhong)或(huo)者(zhe)瓶(ping)中(zhong)，置於培養箱(xiang)中(zhong)培養。 3) 細(xi)胞凍(dong)存(cun)：待細胞生(sheng)長狀態良好時，可進行(xing)細(xi)胞凍(dong)存(cun)。下面 T25 瓶(ping)為(wei)例(li)；a、收集(ji)細(xi)胞及細(xi)胞培養液，裝入(ru)無菌(jun)離(li)心管(guan)中(zhong)，1000 rpm條件(jian)下離(li)心4 min，棄去上清液，用(yong)PBS清洗壹遍(bian)，棄盡PBS，進行(xing)細(xi)胞計數(shu)。

b、根(gen)據(ju)細(xi)胞數(shu)量加(jia)入(ru)無血(xue)清細胞凍(dong)存(cun)液，使(shi)細(xi)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻(yun)，每支凍(dong)存(cun)管(guan)凍(dong)存(cun)1mL細胞懸液，註(zhu)意凍(dong)存(cun)管(guan)做好標(biao)識(shi)。將凍(dong)存(cun)管(guan)放(fang)入(ru)-80℃冰箱(xiang)，24 h後(hou)轉(zhuan)入(ru)液氮灌(guan)儲(chu)存(cun)。記錄(lu)凍(dong)存(cun)管(guan)位(wei)置以(yi)便下次拿取。

公(gong)司(si)正在(zai)出售的產(chan)品：

HA Others H3N2 甲(jia)型流感(gan) H3N2 (A/Perth/16/2009) 血(xue)凝素(su) (Hemagglutinin / HA) 人(ren)細胞裂(lie)解液 (陽性對照(zhao)) 大(da)鼠型纖(xian)溶(rong)酶原激活(huo)因子(zi)(uPA)ELISA試劑盒 Cyclin-D3(Mouse Cyclin-D3)  小(xiao)鼠細(xi)胞周(zhou)期(qi)3 96T

Neuronal thread protein AD7c-NTP： 神(shen)經絲(si)蛋白(bai)抗體(ti) 腎系(xi)膜細(xi)胞Many types of cells包裝：5 ×105次方(1ml)

TE-1人(ren)食(shi)管(guan)癌細胞 Human esophageal cancer cell line TE-1. RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS 大型(xing)纖溶(rong)酶原激活(huo)物(wu)受體(ti)(PLAUR/uPAR)ELISA試劑盒 Amylin  大(da)鼠胰澱(dian)素(su) 96T

phospho-NFKB p65(Ser536)： 0酸化細(xi)胞核(he)因子(zi)抗體(ti) TFPI Others Human 人 TFPI 人(ren)細胞裂(lie)解液 (陽性對照(zhao))

SV40轉(zhuan)化的非(fei)洲綠猴腎細(xi)胞;COS-1 大鼠(shu)型纖(xian)溶(rong)酶原激活(huo)物(wu)受體(ti)(PLAUR/uPAR)ELISA 試劑盒 CK-18(Human cytokeratin 18)  人(ren)細胞角蛋(dan)白18 96T

人(ren)神(shen)經束膜細(xi)胞cDNAHPC cDNA 牛淋(lin)巴(ba)細(xi)胞因子(zi)ELISA 試劑盒 ZNF300 (zinc finger protein ZNF300)- middle 鋅(xin)指蛋(dan)白300(抗原(yuan)) 0.5ml

Junctophilin-2： 親(qin)聯蛋白(bai)2抗體(ti) 人十(shi)二脂(zhi)腸腺(xian)癌;HuTu-80

BC-009(人(ren)癌細胞) 5×106cells/瓶(ping)×2 小鼠(shu)腎足細胞;Mouse podocyte 牛狂(kuang)犬病(bing)毒抗體(ti)ELISA試劑盒 ZNF268 (zinc finger protein ZNF268)- N-terminal (1a) 鋅(xin)指脂(zhi)蛋白(bai)-1a(抗原(yuan)) 0.5mg

KIF13B： 驅(qu)動(dong)蛋白(bai)家(jia)族(zu)蛋(dan)白(bai)13B抗體(ti) HK-2, 人腎(shen)皮(pi)質近曲(qu)小(xiao)管(guan)上皮(pi)細胞

EFNB1 Protein Mouse 重組小鼠 Ephrin-B1 / EFNB1 蛋(dan)白(bai) (His 標(biao)簽(qian)) 牛可溶(rong)性(xing)白細胞分(fen)化抗原(yuan)86(B7-2/sCD86)ELISA 試劑盒 ZNF268 (zinc finger protein ZNF268)- middle (1b) 鋅(xin)指脂(zhi)蛋白(bai)-1b(抗原(yuan)) 0.5mg

SK-N-BE(2)人(ren)神(shen)經母細(xi)胞瘤細(xi)胞HEL2 人(ren)胚胎(tai)肺成纖(xian)維(wei)細(xi)胞(女) 大(da)鼠Smad同(tong)源物(wu)3(Smad3)ELISA試(shi)劑盒 Human Protein Z  人(ren)蛋白(bai)Z 96T

SNAIL + SLUG： 鋅(xin)指轉(zhuan)錄(lu)因子(zi)Slug+SNAIL抗體(ti) HR-8348細胞，直(zhi)腸腺(xian)癌 人淋巴(ba)細(xi)胞瘤細(xi)胞,JK(Jurkat)細胞 人小(xiao)細胞肺癌;NCI-H2227

ENPP2 Others Mouse 小(xiao)鼠 Autotaxin / ENPP2 / NPP2 人(ren)細胞裂(lie)解液 (陽性對照(zhao)) 大(da)鼠Smad同(tong)源物(wu)1(Smad1)ELISA試(shi)劑盒 Human Protein S  人(ren)蛋白(bai)S 96T

phospho-SNAIL + SLUG (Ser246)： 0酸化鋅(xin)指轉(zhuan)錄(lu)因子(zi)Slug+SNAIL抗體(ti) 大額牛皮(pi)膚細胞;BFR-S3

CM-R067大(da)鼠腎(shen)足突細(xi)胞培養基(ji)100mL 大(da)鼠Slit同(tong)源物(wu)3(Slit3)ELISA試(shi)劑盒 sEPCR(Human soluble endothelial protein C receptor)  人(ren)可溶(rong)性(xing)血(xue)管(guan)內皮(pi)細胞蛋白(bai)C受體(ti) 96T

三(san)、培養註(zhu)意事(shi)項 

1. 收到細(xi)胞後(hou)首(shou)先(xian)觀(guan)察(cha)細(xi)胞瓶(ping)是否完好，培養液是否有(you)漏液、渾(hun)濁等(deng)現象(xiang)，若有上述現象(xiang) 發(fa)生(sheng)請及(ji)時和(he)我(wo)們聯系。

2. 仔(zai)細閱(yue)讀(du)細(xi)胞說(shuo)明(ming)書，了(le)解細胞相關(guan)信(xin)息(xi)，如細(xi)胞形(xing)態、所(suo)用(yong)培養基(ji)、血(xue)清比例、所(suo)需 細(xi)胞因子(zi)等(deng)，確保細胞培養條(tiao)件(jian)壹致，若由於培養條(tiao)件(jian)不壹致(zhi)而(er)導致細胞出現問(wen)題(ti)，責(ze)任(ren)由(you) 客(ke)戶自行(xing)承(cheng)擔(dan)。

3. 用(yong) 75%酒精擦(ca)拭(shi)細胞瓶(ping)表面，顯微(wei)鏡(jing)下觀(guan)察(cha)細(xi)胞狀態。因運(yun)輸問題(ti)，部(bu)分(fen)細胞由於溫(wen)度 變(bian)化及劇(ju)烈(lie)碰(peng)亡(wang)破碎(sui)形(xing)成碎(sui)片，是正常(chang)現象(xiang)。觀(guan)察(cha)好細(xi)胞狀態後(hou)，75%酒精消(xiao)毒瓶(ping)壁將(jiang) T25 瓶(ping)置於 37℃培養箱(xiang)放(fang)置 2-4h。

4. 貼壁(bi)細胞可以(yi)消(xiao)化，懸浮(fu)細胞直(zhi)接(jie)混勻(yun)收集(ji)細(xi)胞，900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，棄上 清。加(jia) 5 mL PBS 重懸細胞，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，用新(xin)鮮(xian)的培養基(ji)重懸 細胞，並接(jie)種到(dao)新的培養瓶(ping)或(huo)培養皿中(zhong)，置於培養箱(xiang)中(zhong)進行(xing)培養。

5. 請客(ke)戶(hu)用(yong)相同(tong)條件(jian)的培養基(ji)用(yong)於細(xi)胞培養。

6. 建(jian)議(yi)客戶(hu)收到細(xi)胞後(hou)前(qian) 3 天(tian)各(ge)拍(pai)幾(ji)張(zhang)細(xi)胞照(zhao)片(pian)，記錄(lu)細胞狀態，便於和(he)我(wo)司(si)技術(shu)部溝(gou)通 交(jiao)流。由(you)於運(yun)輸的原(yuan)因，個(ge)別敏(min)感(gan)細(xi)胞會出現不(bu)穩(wen)定的情(qing)況(kuang)，請及(ji)時和(he)我(wo)們聯系，告(gao)知細胞 的具(ju)體(ti)情(qing)況(kuang)，以(yi)便我(wo)們的技術(shu)人員(yuan)跟(gen)蹤回訪直(zhi)至(zhi)問題(ti)解決(jue)。

7. 該細(xi)胞僅(jin)供科(ke)研(yan)使(shi)用(yong)。

8. 備註(zhu)：運(yun)輸用(yong)的培養基(ji) (灌(guan)液培養基(ji)) 不(bu)能再(zai)用來培養細(xi)胞，請換用按(an)照(zhao)說(shuo)明(ming)書細(xi)胞培 養條(tiao)件(jian)新配(pei)制的培養基(ji)來(lai)培養細(xi)胞。     收到細(xi)胞後(hou)第(di)壹次傳代(dai)建(jian)議(yi) 1：2 傳代(dai) 。

9. 註(zhu)意：  1:2 傳代(dai)就(jiu)是 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳 2 個(ge) T25 瓶(ping)或(huo)者(zhe) 2 個(ge) 6cm 皿。不(bu)是 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳 2 個(ge)10cm 皿。