TOV-112D人上(shang)皮性(xing)卵(luan)巢(chao)癌(ai)細胞

公司產品僅供(gong)科(ke)研研究(jiu)使用(yong)、不(bu)得(de)用(yong)於(yu)臨床(chuang)診斷(duan)！

1、細胞傳代(dai)：

1）細胞生(sheng)長至(zhi)覆(fu)蓋培(pei)養瓶(ping)的(de) 80%面積(ji)時，棄 25cm2培養瓶(ping)中(zhong)的(de)培養液，用(yong) PBS 清(qing)洗(xi)細胞壹(yi)次(ci)；

2）添(tian)加 0.25%消(xiao)化液約 1ml 至(zhi)培(pei)養瓶(ping)中(zhong)，倒(dao)置(zhi)顯(xian)微(wei)鏡下(xia)觀(guan)察(cha)，待(dai)細胞回縮(suo)變圓後(hou)加入(ru) 5ml 培(pei)養

液終止(zhi)消(xiao)化，再(zai)輕輕吹(chui)打(da)細胞使之脫落(luo)，然後(hou)將(jiang)懸(xuan)液轉(zhuan)移(yi)至(zhi) 15ml 離心(xin)管中(zhong)，1000rpm 離心(xin) 5min；

3）棄上(shang)清，沈(chen)澱細胞用(yong) 1-2ml 培(pei)養基(ji)重(zhong)懸(xuan)，然(ran)後(hou)按(an) 1:2 比(bi)例進(jin)行分瓶(ping)傳代(dai)，最(zui)後(hou)放(fang)入(ru) 37℃，5%CO2細胞

培養箱(xiang)中(zhong)培(pei)養；

2、細胞凍存(cun)：

1）細胞生(sheng)長至(zhi)覆(fu)蓋培(pei)養瓶(ping)的(de) 80%面積(ji)時，棄 25cm2培養瓶(ping)中(zhong)的(de)培養液，用(yong) PBS 清(qing)洗(xi)細胞壹(yi)次(ci)；

2）添(tian)加 0.25%消(xiao)化液約 1ml 至(zhi)培(pei)養瓶(ping)中(zhong)，倒(dao)置(zhi)顯(xian)微(wei)鏡下(xia)觀(guan)察(cha)，待(dai)細胞回縮(suo)變圓後(hou)加入(ru)培(pei)養液終

止(zhi)消(xiao)化，輕輕吹(chui)打(da)細胞使之脫落(luo)，然後(hou)將(jiang)懸(xuan)液轉(zhuan)移(yi)至(zhi) 15ml 離心(xin)管中(zhong)，1000rpm 離心(xin) 5min；

3）用(yong)適(shi)量(liang)的(de)凍存(cun)液（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸(xuan)細胞，並放(fang)置(zhi)於(yu)凍存(cun)管中(zhong)；

4）先(xian)將(jiang)細胞凍存(cun)管(guan)放置(zhi)於(yu)-20℃ 1.5h，然後(hou)將(jiang)其(qi)移(yi)入(ru)-80℃過(guo)夜(ye)，24h 後(hou)轉(zhuan)入(ru)液氮中(zhong)進(jin)行長期保(bao)存(cun)。使(shi)用(yong)程(cheng)序

降溫(wen)盒(he)可(ke)直接(jie)放(fang)入(ru)-80℃。

壹(yi)、商品介紹：

二(er)、細胞培養操(cao)作

1) 復蘇細胞：以下細胞培養凍(dong)存(cun)處理(li)僅供(gong)參考，具(ju)體(ti)操作步驟(zhou)以隨(sui)貨(huo)產品說明(ming)書(shu)為(wei)主。將(jiang)含有1 mL細胞懸(xuan)液的(de)凍存(cun)管在(zai) 37℃水浴(yu)中(zhong)迅(xun)速(su)搖晃(huang)解(jie)凍(dong)，加4 mL培(pei)養基(ji)混合均勻。在(zai)1000 rpm條(tiao)件(jian)下離心(xin)3 min，棄去上(shang)清液，加1-2 mL培(pei)養基(ji)後(hou)吹(chui)勻。然後(hou)將(jiang)所(suo)有細胞懸(xuan)液加入(ru)含適量(liang)培養基(ji)的(de)培養瓶(ping)中(zhong)培(pei)養過(guo)夜(ye)（或(huo)將(jiang)細胞懸(xuan)液加入(ru)10 cm皿(min)中(zhong)，加入(ru)約(yue)8 mL培(pei)養基(ji)，培養過(guo)夜(ye)）。第(di)二(er)天換液並檢(jian)查細胞密度(du)。

2) 細胞傳代(dai)：如(ru)果細胞密度(du)達 80%-90%，即(ji)可(ke)進(jin)行傳代培養。

a、棄去培(pei)養上(shang)清，用(yong)不(bu)含鈣、鎂(mei)離子(zi)的(de)PBS潤洗(xi)細胞1-2次。

b、加1 mL消(xiao)化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培養瓶(ping)中(zhong)，使(shi)消(xiao)化液浸(jin)潤所(suo)有細胞，將(jiang)培(pei)養瓶(ping)置(zhi)於(yu)37℃培養箱(xiang)中(zhong)消(xiao)化1-2 min（視(shi)細胞情況(kuang)而定），然(ran)後(hou)在(zai)顯(xian)微(wei)鏡下(xia)觀(guan)察(cha)細胞消化情(qing)況(kuang)，若(ruo)細胞大(da)部(bu)分(fen)變(bian)圓並脫(tuo)落(luo)，迅(xun)速(su)拿(na)回操作臺，輕敲幾下(xia)培(pei)養瓶(ping)後(hou)加2-3ml培(pei)養基(ji)終止(zhi)消化。輕輕打勻後(hou)裝(zhuang)入(ru)無(wu)菌離心(xin)管中(zhong)，1000 rpm離心(xin)5 min，棄去上(shang)清液，補加1-2 mL培(pei)養液後(hou)吹(chui)勻。

c、將(jiang)細胞懸(xuan)液按(an)1:2比(bi)例分到新的(de)含8 mL培養基(ji)的(de)新皿(min)中(zhong)或(huo)者(zhe)瓶(ping)中(zhong)，置(zhi)於(yu)培養箱(xiang)中(zhong)培(pei)養。 3) 細胞凍存(cun)：待(dai)細胞生(sheng)長狀(zhuang)態良(liang)好(hao)時，可(ke)進(jin)行細胞凍存(cun)。下(xia)面 T25 瓶(ping)為(wei)例；a、收(shou)集細胞及細胞培養液，裝入(ru)無(wu)菌離心(xin)管中(zhong)，1000 rpm條(tiao)件(jian)下離心(xin)4 min，棄去上(shang)清液，用(yong)PBS清(qing)洗(xi)壹(yi)遍(bian)，棄盡PBS，進(jin)行細胞計數(shu)。

b、根據細胞數(shu)量(liang)加入(ru)無(wu)血(xue)清(qing)細胞凍存(cun)液，使細胞密度(du)5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支(zhi)凍(dong)存(cun)管(guan)凍(dong)存1mL細胞懸(xuan)液，註意凍存管(guan)做好(hao)標識。將(jiang)凍(dong)存管放入(ru)-80℃冰(bing)箱(xiang)，24 h後(hou)轉(zhuan)入(ru)液氮灌(guan)儲(chu)存。記錄(lu)凍存管(guan)位(wei)置(zhi)以便下(xia)次拿(na)取。

公司正(zheng)在(zai)出售(shou)的(de)產品：

人肺動(dong)脈內皮細胞(HPAEC) ( 5×105 ) rCSC, 大(da)鼠(shu)心(xin)肌細胞 Rattus 大(da)鼠(shu)膜(mo)聯(lian)蛋白(bai)IV(ANX-IV)ELISA試(shi)劑盒(he) Human Cyclin-D2  人(ren)細胞周期(qi)2 96T

ORC1L： 起始(shi)識別復(fu)合蛋白(bai)亞(ya)基(ji)1抗體(ti) 人髓(sui)母細胞瘤(liu)細胞;Daoy

IL13 Protein Human 重(zhong)組(zu)人 IL13 / ALRH 蛋白(bai) (Fc 標簽(qian)) 大(da)鼠(shu)膜(mo)聯(lian)蛋白(bai)I(ANX-I)ELISA試(shi)劑盒(he) MTL(Mouse Motilin)  小(xiao)鼠(shu)胃(wei)動(dong)素(su) 96T

OTUB： 泛素(su)特異(yi)性(xing)蛋白(bai)酶(mei)Otubain2抗體(ti) CNDP2 Others Mouse 小(xiao)鼠(shu) CNDP2 / CN2 / CPGL 桿(gan)狀(zhuang)病毒(du)-昆(kun)蟲細胞裂(lie)解(jie)液 (陽性(xing)對(dui)照(zhao))

(含100mL酶(mei)解(jie)緩(huan)沖(chong)液) 10mL 大(da)鼠(shu)膜(mo)聯(lian)蛋白(bai)A5(ANXA5)ELISA試(shi)劑盒(he) VWF  大(da)鼠(shu)血(xue)管(guan)性(xing)血(xue)友病(bing)因(yin)子/瑞(rui)斯托輔(fu)因子 96T

HPT-8細胞，小(xiao)鼠(shu)飼養層(ceng)上(shang)皮細胞 293(轉(zhuan)染腺病(bing)毒(du)E1A基(ji)因的(de)人腎(shen)上(shang)皮細胞) 長白(bai)山豬胚(pei)胎皮膚成(cheng)纖(xian)維(wei)樣細胞;201184 雞血(xue)管(guan)活性(xing)腸(chang)肽(tai)(VIP)ELISA試(shi)劑盒(he) GABA/KLH γ1基(ji)偶聯(lian)血藍蛋白(bai) 1mg

KCTD12： 離子(zi)通道多聚體(ti)結(jie)構(gou)域(yu)蛋白(bai)12抗體 ICAM1 Others Mouse 小(xiao)鼠(shu) ICAM-1 / CD54 人(ren)細胞裂(lie)解(jie)液 (陽性(xing)對(dui)照(zhao))

人腦微(wei)血管(guan)內皮細胞裂(lie)解(jie)物(wu)HBMECL 雞(ji)新城疫(yi)抗體(ti)(NDV-ab)ELISA試(shi)劑盒(he) GABA/BSA γ1基(ji)偶聯(lian)血清(qing)白(bai)蛋白(bai) 1mg

KMT6： 抑(yi)癌(ai)蛋白(bai)EZH2抗體 人胰(yi)腺腺泡(pao)上(shang)皮癌(ai);HPAC

EA.hy926(人臍(qi)靜脈(mai)細胞融(rong)合細胞) 5×106cells/瓶(ping)×2 大(da)隱(yin)靜脈(mai)平(ping)滑(hua)肌細胞Many types of cells包(bao)裝(zhuang)：5 × 105次(ci)方(fang)(1ml) 雞(ji)新城疫(yi)病毒(du)(NDV)ELISA試(shi)劑盒(he) GSK-3 Beta, (Glycogen Synthase Kinase-3) 糖(tang)原(yuan)合酶(mei)激(ji)酶(mei)-3 beta(多肽(tai)) 0.5mg

TOV-112D人上(shang)皮性(xing)卵(luan)巢(chao)癌(ai)細胞SLC20A2： 溶質(zhi)載體(ti)蛋白(bai)家族20成(cheng)員(yuan)2抗體 CL-0053Calu-1(人(ren)肺癌(ai)細胞)5×106cells/瓶(ping)×2

QBC-939, 人膽管癌(ai)細胞 大(da)鼠(shu)D二(er)聚(ju)體(D2D)ELISA試(shi)劑盒(he) HPRI(Human placental ribonuclease inhibitor)  人(ren)胎盤(pan)核糖(tang)抑(yi)止(zhi)劑 96T

S100A6： S100鈣結(jie)合蛋白(bai)A6抗體 GAL2 Others Human 人 GAL2 / GalNAc-T2 人(ren)細胞裂(lie)解(jie)液 (陽性(xing)對(dui)照(zhao))

KMML1 小(xiao)白(bai)鼠肺成纖(xian)維(wei)樣細胞 大(da)鼠(shu)D-二(er)聚(ju)體(D2D)ELISA試(shi)劑盒(he) PP(Human placental protein)  人(ren)胎盤(pan)蛋白(bai) 96T

SCXA： 堿(jian)性(xing)螺(luo)旋(xuan)-環(huan)-螺旋(xuan)轉(zhuan)錄(lu)因子SCXA抗(kang)體 ZR-75-30細胞，人癌(ai)細胞系(xi) 人T淋巴(ba)細胞(白(bai)血病CD8+),Molt-4細胞 tTA基(ji)因修飾的(de)小(xiao)鼠(shu)胰(yi)腺癌(ai)細胞(B類);Pan02-CAG-tTA-4C5

三、培(pei)養註意事(shi)項 

1. 收(shou)到(dao)細胞後(hou)首先(xian)觀(guan)察(cha)細胞瓶(ping)是否完好(hao)，培養液是否有漏(lou)液、渾濁(zhuo)等(deng)現(xian)象(xiang)，若(ruo)有(you)上(shang)述(shu)現象(xiang) 發(fa)生(sheng)請(qing)及時和我(wo)們(men)聯(lian)系(xi)。

2. 仔細閱讀(du)細胞說明(ming)書(shu)，了(le)解(jie)細胞相關信(xin)息(xi)，如細胞形態(tai)、所(suo)用(yong)培(pei)養基(ji)、血清(qing)比(bi)例、所需 細胞因子(zi)等(deng)，確(que)保細胞培養條(tiao)件(jian)壹(yi)致(zhi)，若(ruo)由(you)於(yu)培養條(tiao)件(jian)不壹(yi)致(zhi)而導(dao)致(zhi)細胞出現(xian)問題，責(ze)任(ren)由(you) 客戶(hu)自(zi)行承擔(dan)。

3. 用(yong) 75%酒(jiu)精(jing)擦(ca)拭細胞瓶(ping)表面，顯(xian)微(wei)鏡下(xia)觀(guan)察(cha)細胞狀(zhuang)態。因(yin)運(yun)輸問題，部(bu)分(fen)細胞由(you)於(yu)溫度(du) 變化及劇烈(lie)碰亡破碎形成(cheng)碎(sui)片，是(shi)正常(chang)現象(xiang)。觀(guan)察(cha)好(hao)細胞狀(zhuang)態後(hou)，75%酒(jiu)精(jing)消(xiao)毒(du)瓶(ping)壁(bi)將(jiang) T25 瓶(ping)置(zhi)於(yu) 37℃培養箱(xiang)放(fang)置(zhi) 2-4h。

4. 貼(tie)壁(bi)細胞可(ke)以消化，懸(xuan)浮(fu)細胞直接(jie)混(hun)勻收(shou)集細胞，900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，棄上(shang) 清。加 5 mL PBS 重(zhong)懸(xuan)細胞，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，用(yong)新鮮的(de)培養基(ji)重(zhong)懸(xuan) 細胞，並接(jie)種到新的(de)培養瓶(ping)或培(pei)養皿(min)中(zhong)，置(zhi)於(yu)培養箱(xiang)中(zhong)進(jin)行培養。

5. 請(qing)客戶(hu)用(yong)相同條件(jian)的(de)培養基(ji)用(yong)於(yu)細胞培養。

6. 建(jian)議客戶(hu)收(shou)到(dao)細胞後(hou)前 3 天各拍(pai)幾張(zhang)細胞照(zhao)片，記錄(lu)細胞狀(zhuang)態，便(bian)於(yu)和我(wo)司技(ji)術(shu)部溝(gou)通 交流。由(you)於(yu)運輸的(de)原(yuan)因，個(ge)別敏(min)感細胞會出現(xian)不(bu)穩定的(de)情況(kuang)，請及時和我(wo)們(men)聯(lian)系(xi)，告知(zhi)細胞 的(de)具體(ti)情況，以便我(wo)們(men)的(de)技術(shu)人員(yuan)跟蹤回訪直至(zhi)問題解(jie)決(jue)。

7. 該(gai)細胞僅供(gong)科(ke)研使用(yong)。

8. 備(bei)註：運(yun)輸用(yong)的(de)培養基(ji) (灌(guan)液培養基(ji)) 不能再(zai)用(yong)來(lai)培養細胞，請換用(yong)按(an)照(zhao)說明(ming)書(shu)細胞培 養條(tiao)件(jian)新配(pei)制(zhi)的(de)培養基(ji)來培(pei)養細胞。     收(shou)到(dao)細胞後(hou)第(di)壹(yi)次(ci)傳(chuan)代(dai)建(jian)議 1：2 傳(chuan)代 。

9. 註意：  1:2 傳代就(jiu)是 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳 2 個(ge) T25 瓶(ping)或者(zhe) 2 個(ge) 6cm 皿(min)。不(bu)是(shi) 1 個 T25 瓶(ping)傳 2 個(ge)10cm 皿(min)。