U-2 OS人(ren)成(cheng)骨(gu)肉(rou)瘤細胞(bao)

公司產(chan)品僅供(gong)科研(yan)研(yan)究(jiu)使用、不得用(yong)於(yu)臨床(chuang)診(zhen)斷！

1、細胞傳代：

1）細胞生(sheng)長(chang)至(zhi)覆蓋培(pei)養(yang)瓶(ping)的 80%面(mian)積時(shi)，棄 25cm2培(pei)養(yang)瓶(ping)中的培(pei)養(yang)液，用 PBS 清(qing)洗(xi)細胞壹次(ci)；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消化(hua)液約 1ml 至(zhi)培(pei)養(yang)瓶(ping)中，倒置顯微鏡下觀(guan)察(cha)，待細胞回(hui)縮(suo)變(bian)圓後加(jia)入(ru) 5ml 培養(yang)

液終(zhong)止(zhi)消化，再(zai)輕(qing)輕(qing)吹(chui)打細(xi)胞使之(zhi)脫(tuo)落(luo)，然後將懸(xuan)液轉移(yi)至(zhi) 15ml 離心(xin)管(guan)中，1000rpm 離心(xin) 5min；

3）棄上(shang)清(qing)，沈(chen)澱(dian)細(xi)胞(bao)用 1-2ml 培(pei)養(yang)基(ji)重(zhong)懸(xuan)，然後按(an) 1:2 比(bi)例(li)進(jin)行(xing)分瓶(ping)傳代，最後放(fang)入(ru) 37℃，5%CO2細胞(bao)

培養(yang)箱(xiang)中培(pei)養(yang)；

2、細胞凍(dong)存：

1）細胞(bao)生長(chang)至(zhi)覆蓋培(pei)養(yang)瓶(ping)的 80%面(mian)積時(shi)，棄 25cm2培(pei)養(yang)瓶(ping)中的培(pei)養(yang)液，用 PBS 清(qing)洗(xi)細胞壹次(ci)；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消化(hua)液約 1ml 至(zhi)培(pei)養(yang)瓶(ping)中，倒置顯微鏡下觀(guan)察(cha)，待細胞回(hui)縮(suo)變(bian)圓後加(jia)入(ru)培養(yang)液終(zhong)

止(zhi)消化，輕輕吹(chui)打細(xi)胞使之(zhi)脫(tuo)落(luo)，然後將懸(xuan)液轉移(yi)至(zhi) 15ml 離心(xin)管(guan)中，1000rpm 離心(xin) 5min；

3）用適(shi)量(liang)的凍(dong)存液（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸(xuan)細胞(bao)，並(bing)放(fang)置於凍(dong)存管(guan)中；

4）先(xian)將細(xi)胞(bao)凍(dong)存管(guan)放(fang)置於-20℃ 1.5h，然(ran)後將其(qi)移(yi)入(ru)-80℃過夜，24h 後轉入(ru)液氮中進(jin)行長(chang)期保存。使用程(cheng)序(xu)

降溫盒可(ke)直(zhi)接(jie)放(fang)入(ru)-80℃。

壹、商品介(jie)紹(shao)：

二、細(xi)胞(bao)培養(yang)操(cao)作

1) 復(fu)蘇(su)細胞(bao)：以(yi)下(xia)細胞培(pei)養(yang)凍存處(chu)理僅供(gong)參(can)考(kao)，具(ju)體操(cao)作步驟(zhou)以(yi)隨(sui)貨(huo)產品說(shuo)明(ming)書(shu)為主。將(jiang)含(han)有1 mL細(xi)胞(bao)懸(xuan)液的凍(dong)存管(guan)在(zai) 37℃水(shui)浴(yu)中迅(xun)速(su)搖晃(huang)解凍(dong)，加(jia)4 mL培養(yang)基(ji)混合均(jun)勻(yun)。在(zai)1000 rpm條件下(xia)離心(xin)3 min，棄去(qu)上清(qing)液，加(jia)1-2 mL培養(yang)基(ji)後吹(chui)勻(yun)。然(ran)後將所有(you)細(xi)胞(bao)懸(xuan)液加(jia)入(ru)含(han)適(shi)量(liang)培(pei)養(yang)基(ji)的培(pei)養(yang)瓶(ping)中培(pei)養(yang)過夜（或將(jiang)細(xi)胞懸(xuan)液加(jia)入(ru)10 cm皿中，加(jia)入(ru)約8 mL培養(yang)基(ji)，培(pei)養(yang)過夜）。第(di)二(er)天換液並(bing)檢查(zha)細(xi)胞(bao)密(mi)度(du)。

2) 細胞傳代：如(ru)果細胞密(mi)度(du)達 80%-90%，即可(ke)進(jin)行(xing)傳代培養(yang)。

a、棄去(qu)培養(yang)上清，用(yong)不含(han)鈣(gai)、鎂離子(zi)的PBS潤洗(xi)細胞1-2次(ci)。

b、加(jia)1 mL消化(hua)液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培(pei)養(yang)瓶(ping)中，使消化(hua)液浸(jin)潤所有(you)細(xi)胞(bao)，將(jiang)培養(yang)瓶(ping)置(zhi)於(yu)37℃培養(yang)箱(xiang)中消(xiao)化1-2 min（視細胞情況而定(ding)），然後在(zai)顯微鏡下觀(guan)察(cha)細(xi)胞消化情況，若細胞(bao)大(da)部分變(bian)圓並(bing)脫(tuo)落(luo)，迅(xun)速(su)拿(na)回(hui)操(cao)作臺，輕敲幾下培養(yang)瓶(ping)後加(jia)2-3ml培養(yang)基(ji)終(zhong)止(zhi)消化。輕輕打勻(yun)後裝入(ru)無菌(jun)離心(xin)管(guan)中，1000 rpm離心(xin)5 min，棄去(qu)上清(qing)液，補加(jia)1-2 mL培養(yang)液後吹(chui)勻(yun)。

c、將(jiang)細胞(bao)懸(xuan)液按(an)1:2比(bi)例(li)分到新的含(han)8 mL培養(yang)基(ji)的新皿中或者(zhe)瓶(ping)中，置(zhi)於培(pei)養(yang)箱(xiang)中培(pei)養(yang)。 3) 細胞凍(dong)存：待細胞生長(chang)狀(zhuang)態(tai)良好(hao)時，可(ke)進(jin)行(xing)細胞(bao)凍存。下面(mian) T25 瓶(ping)為例(li)；a、收(shou)集細(xi)胞及(ji)細胞培(pei)養(yang)液，裝入(ru)無菌(jun)離心(xin)管(guan)中，1000 rpm條件下(xia)離心(xin)4 min，棄去(qu)上清(qing)液，用PBS清(qing)洗(xi)壹遍(bian)，棄盡(jin)PBS，進(jin)行(xing)細(xi)胞計(ji)數(shu)。

b、根(gen)據細(xi)胞數(shu)量加(jia)入(ru)無血(xue)清細胞凍存液，使細胞(bao)密(mi)度(du)5×106~1×107/mL，輕輕混勻(yun)，每(mei)支凍(dong)存管(guan)凍存1mL細胞(bao)懸(xuan)液，註意(yi)凍存管(guan)做(zuo)好(hao)標識(shi)。將(jiang)凍(dong)存管(guan)放(fang)入(ru)-80℃冰箱(xiang)，24 h後轉入(ru)液氮灌(guan)儲(chu)存。記錄(lu)凍存管(guan)位置(zhi)以(yi)便下(xia)次拿(na)取。

公司正(zheng)在(zai)出(chu)售的產(chan)品：

Hep 3B2.1-7人(ren)肝癌(ai)細(xi)胞(bao) Hep 3B2.1-7 human hepatocarcinoma cells MEM培(pei)養(yang)基(ji)(GIBCO)+10%FBS 大(da)鼠(shu)苗(miao)條素受體(LR/Ob-R)ELISA試劑盒 FE(Human ferritin)  人(ren)鐵蛋(dan)白 96T

OSGIN1： 氧化(hua)應激(ji)誘導生長(chang)抑(yi)制因子(zi)1抗(kang)體 LAMP3 Others Human 人(ren) CD208 / LAMP3 / DC-LAMP 人(ren)細胞(bao)裂解(jie)液 (陽性(xing)對(dui)照(zhao))

犬(quan)腎(shen)細胞系/IgR;MDCK/IgR 大(da)鼠苗(miao)條素受體(LR/Ob-R)ELISA 試劑盒 PAF(Mouse platelet activating factor)  小鼠(shu)血(xue)小(xiao)板活(huo)化(hua)因子(zi) 96T

ORP8： 氧化(hua)結(jie)合(he)蛋(dan)白8抗(kang)體 中國(guo)倉鼠卵(luan)巢(chao)細胞(亞系克(ke)隆);CHO-HCV-C

人(ren)肺動(dong)脈(mai)成(cheng)纖(xian)維(wei)細胞(bao) (HPAF)( 5×105 ) RLFs, 大(da)鼠肺(fei)成(cheng)纖(xian)維(wei)細胞(bao) Rattus 大(da)鼠免(mian)疫(yi)球(qiu)蛋(dan)白樣EGF樣域(yu)酪酸激(ji)酶(mei)1(Tie1)ELISA試(shi)劑盒 MTF(Human microtransferrinuria)  人(ren)微量(liang)轉鐵蛋(dan)白 96T

人(ren)視網(wang)膜(mo)微血(xue)管(guan)內皮(pi)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)基(ji) 100mL 雞(ji)神(shen)經膠質(zhi)纖(xian)維(wei)酸性蛋(dan)白(GFAP)ELISA 試(shi)劑盒 Gamma-Synuclein/SNCG 核突(tu)觸(chu)蛋(dan)白-γ抗(kang)原(yuan) 0.5mg

Phospho-KSR1 (Ser392)： 0酸化Ras信號轉導KSR1蛋(dan)白抗(kang)體 人(ren)絨毛(mao)間(jian)充質(zhi)成(cheng)纖(xian)維(wei)細胞(bao) 人(ren)皮(pi)膚成(cheng)纖(xian)維(wei)細胞(bao)，HSF細(xi)胞 NOR-10(小(xiao)鼠(shu)骨(gu)骼(ge)肌成(cheng)纖(xian)維(wei)細胞(bao))

F11R Others Rat 大鼠 JAM-A / F11R 人(ren)細胞(bao)裂解(jie)液 (陽性(xing)對(dui)照(zhao)) 雞(ji)(LZM)ELISA 試(shi)劑盒 GLP-1R peptide 胰(yi)高(gao)血(xue)糖素樣肽(tai)-1受(shou)體多肽(tai) 0.5mg

-4.00E+02： 抗(kang)體 EB病(bing)毒(du)轉化的人(ren)B淋(lin)巴(ba)細胞(bao);HH-29

FAT細(xi)胞(bao)，大(da)鼠鼻咽(yan)癌(ai)細(xi)胞(bao) SHZ-88(大(da)鼠癌(ai)細(xi)胞(bao)) 大(da)額牛(niu)肺(fei)細胞(bao);BFR-L1 雞(ji)熱(re)休(xiu)克(ke)蛋(dan)白72(Hsp72)ELISA試(shi)劑盒 Gentamicin/BSA 慶大(da)偶(ou)聯(lian)血清(qing)白(bai)蛋(dan)白 2mg

U-2 OS人(ren)成(cheng)骨(gu)肉(rou)瘤細胞(bao)SCD1： 酰(xian)脫(tuo)氫(qing)酶1抗(kang)體 CL-0037BNL CL.2(小鼠(shu)胚(pei)胎(tai)肝細(xi)胞(bao))5×106cells/瓶(ping)×2

SGC-7901, 人(ren)胃腺(xian)癌(ai)細(xi)胞(bao)系 大(da)鼠C-肽(tai)(C-Peptide)ELISA試(shi)劑盒 ABP(Human Androgen Binding Protein)  人(ren)雄激(ji)素結(jie)合(he)蛋(dan)白 96T

SNF2L： 解旋(xuan)酶SNF2L抗(kang)體 PNLIPRP1 Others Human 人(ren) PNLIPRP1 / PLRP1 人(ren)細胞(bao)裂解(jie)液 (陽性(xing)對(dui)照(zhao))

L132 人(ren)肺上(shang)皮(pi)細(xi)胞(bao) 大(da)鼠(shu)C肽(tai)(C-Peptide)ELISA試(shi)劑盒 ATA(Human anti-trophoblast antibody,ATA )  人(ren)抗(kang)滋(zi)養(yang)膜(mo)細胞(bao)抗(kang)體 BI U-87細胞(bao)，膀(pang)胱(guang)癌(ai)細(xi)胞(bao) 總T淋(lin)巴(ba)細胞(bao),OKT3細胞(bao) 大鼠嗜(shi)堿性粒(li)細(xi)胞性白(bai)血病(bing)細(xi)胞;RBL-1

CD44 Others Human 人(ren) CD44 人(ren)細胞(bao)裂解(jie)液 (陽性(xing)對(dui)照(zhao)) 大(da)鼠C肽(tai)(C-Peptide)ELISA 試(shi)劑盒 aZP(Human anti-zona pellucida antibody,aZP)  人(ren)抗(kang)透(tou)明(ming)帶(dai)抗(kang)體 中國(guo)倉鼠卵(luan)巢(chao)細胞K1(亞系克(ke)隆);CHO-K1

三(san)、培(pei)養(yang)註意(yi)事項(xiang) 

1. 收(shou)到細(xi)胞後首(shou)先觀(guan)察(cha)細(xi)胞瓶(ping)是(shi)否(fou)完(wan)好(hao)，培養(yang)液是(shi)否(fou)有(you)漏液、渾(hun)濁等現(xian)象(xiang)，若(ruo)有上述現(xian)象(xiang) 發(fa)生請及(ji)時(shi)和我們聯(lian)系。

2. 仔(zai)細閱讀細(xi)胞說明(ming)書(shu)，了(le)解(jie)細(xi)胞(bao)相關信息，如(ru)細胞形(xing)態(tai)、所用(yong)培(pei)養(yang)基(ji)、血(xue)清(qing)比(bi)例(li)、所需 細胞(bao)因子(zi)等，確(que)保(bao)細胞(bao)培(pei)養(yang)條件壹致(zhi)，若由(you)於培(pei)養(yang)條件不壹致(zhi)而導致(zhi)細胞(bao)出現(xian)問題，責(ze)任(ren)由(you) 客戶(hu)自行承(cheng)擔。

3. 用(yong) 75%酒精擦拭細胞(bao)瓶(ping)表(biao)面(mian)，顯微鏡下觀(guan)察(cha)細(xi)胞狀(zhuang)態(tai)。因運(yun)輸(shu)問題，部分細胞由(you)於溫度(du) 變(bian)化(hua)及(ji)劇(ju)烈碰(peng)亡破碎形(xing)成(cheng)碎(sui)片(pian)，是(shi)正(zheng)常(chang)現(xian)象(xiang)。觀(guan)察(cha)好(hao)細胞(bao)狀(zhuang)態(tai)後，75%酒精消毒瓶(ping)壁(bi)將(jiang) T25 瓶(ping)置(zhi)於(yu) 37℃培養(yang)箱(xiang)放(fang)置 2-4h。

4. 貼壁細(xi)胞可(ke)以(yi)消(xiao)化，懸(xuan)浮細(xi)胞(bao)直(zhi)接(jie)混勻(yun)收(shou)集細(xi)胞，900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，棄上(shang) 清(qing)。加(jia) 5 mL PBS 重(zhong)懸(xuan)細胞(bao)，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，用新鮮(xian)的培(pei)養(yang)基(ji)重(zhong)懸(xuan) 細胞(bao)，並(bing)接(jie)種到新的培(pei)養(yang)瓶(ping)或培(pei)養(yang)皿中，置(zhi)於培(pei)養(yang)箱(xiang)中進(jin)行培(pei)養(yang)。

5. 請客(ke)戶(hu)用(yong)相(xiang)同(tong)條件的培(pei)養(yang)基(ji)用(yong)於(yu)細(xi)胞(bao)培養(yang)。

6. 建(jian)議客(ke)戶(hu)收(shou)到細(xi)胞後前 3 天(tian)各拍(pai)幾張細胞(bao)照片(pian)，記錄(lu)細胞狀(zhuang)態(tai)，便於(yu)和我司(si)技(ji)術部溝通(tong) 交流(liu)。由(you)於運(yun)輸的原(yuan)因，個(ge)別(bie)敏(min)感細(xi)胞會出現(xian)不穩(wen)定(ding)的情況，請及(ji)時(shi)和我們聯(lian)系，告(gao)知細(xi)胞 的具(ju)體情況，以便我們的技(ji)術(shu)人(ren)員跟蹤(zong)回(hui)訪(fang)直(zhi)至(zhi)問題解決(jue)。

7. 該(gai)細(xi)胞(bao)僅供(gong)科研(yan)使用。

8. 備(bei)註：運輸用的培(pei)養(yang)基(ji) (灌(guan)液培養(yang)基(ji)) 不能再(zai)用(yong)來(lai)培(pei)養(yang)細胞，請換用按(an)照說明(ming)書(shu)細(xi)胞(bao)培(pei) 養(yang)條件新配(pei)制的培(pei)養(yang)基(ji)來(lai)培(pei)養(yang)細胞。     收(shou)到細(xi)胞後第(di)壹次(ci)傳代建(jian)議 1：2 傳代 。

9. 註意(yi)：  1:2 傳代就是(shi) 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳 2 個 T25 瓶(ping)或者(zhe) 2 個(ge) 6cm 皿。不是(shi) 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳 2 個10cm 皿。