Ocut-2C人甲(jia)狀(zhuang)腺(xian)癌細胞(bao)（未(wei)分化(hua)）

公(gong)司產(chan)品僅(jin)供科研(yan)研(yan)究(jiu)使用、不(bu)得用於(yu)臨(lin)床(chuang)診(zhen)斷！

1、細胞(bao)傳(chuan)代(dai)：

1）細胞(bao)生(sheng)長(chang)至(zhi)覆(fu)蓋(gai)培養瓶(ping)的(de) 80%面(mian)積時，棄(qi) 25cm2培(pei)養瓶(ping)中(zhong)的(de)培養液，用(yong) PBS 清(qing)洗(xi)細胞(bao)壹(yi)次；

2）添加(jia) 0.25%消化(hua)液約 1ml 至(zhi)培(pei)養瓶(ping)中(zhong)，倒(dao)置(zhi)顯(xian)微鏡(jing)下觀(guan)察，待(dai)細胞(bao)回(hui)縮變(bian)圓(yuan)後(hou)加(jia)入 5ml 培(pei)養

液終(zhong)止(zhi)消化(hua)，再輕輕吹打細胞(bao)使之(zhi)脫(tuo)落(luo)，然(ran)後(hou)將懸(xuan)液(ye)轉(zhuan)移(yi)至(zhi) 15ml 離心(xin)管(guan)中(zhong)，1000rpm 離心(xin) 5min；

3）棄上(shang)清(qing)，沈澱(dian)細胞(bao)用(yong) 1-2ml 培養基(ji)重懸(xuan)，然(ran)後(hou)按(an) 1:2 比例(li)進(jin)行分瓶(ping)傳(chuan)代(dai)，最(zui)後(hou)放入(ru) 37℃，5%CO2細胞(bao)

培(pei)養箱中(zhong)培(pei)養；

2、細胞(bao)凍(dong)存：

1）細胞(bao)生(sheng)長(chang)至(zhi)覆(fu)蓋(gai)培養瓶(ping)的(de) 80%面(mian)積時，棄(qi) 25cm2培(pei)養瓶(ping)中(zhong)的(de)培養液，用(yong) PBS 清(qing)洗(xi)細胞(bao)壹(yi)次；

2）添加(jia) 0.25%消化(hua)液約 1ml 至(zhi)培(pei)養瓶(ping)中(zhong)，倒(dao)置(zhi)顯(xian)微鏡(jing)下觀(guan)察，待(dai)細胞(bao)回(hui)縮變(bian)圓(yuan)後(hou)加(jia)入培(pei)養液終(zhong)

止(zhi)消化(hua)，輕輕吹打細胞(bao)使之(zhi)脫(tuo)落(luo)，然(ran)後(hou)將懸(xuan)液(ye)轉(zhuan)移(yi)至(zhi) 15ml 離心(xin)管(guan)中(zhong)，1000rpm 離心(xin) 5min；

3）用適(shi)量的凍(dong)存液（FBS：DMSO=9 ：1）重懸(xuan)細胞(bao)，並放置於(yu)凍(dong)存管(guan)中(zhong)；

4）先(xian)將細胞(bao)凍(dong)存管(guan)放(fang)置於-20℃ 1.5h，然(ran)後(hou)將其移入-80℃過(guo)夜，24h 後(hou)轉入(ru)液(ye)氮(dan)中(zhong)進(jin)行長期(qi)保(bao)存。使用程序

降(jiang)溫盒(he)可(ke)直(zhi)接(jie)放(fang)入-80℃。

二(er)、細胞(bao)培(pei)養操作

1) 復(fu)蘇細胞(bao)：以下細胞(bao)培(pei)養凍(dong)存處理僅(jin)供參考(kao)，具(ju)體操作步驟以隨(sui)貨(huo)產(chan)品說(shuo)明書為(wei)主(zhu)。將含有(you)1 mL細胞(bao)懸(xuan)液(ye)的(de)凍(dong)存管(guan)在(zai) 37℃水浴中(zhong)迅(xun)速(su)搖(yao)晃(huang)解凍(dong)，加(jia)4 mL培養基(ji)混合(he)均(jun)勻(yun)。在(zai)1000 rpm條件下離心(xin)3 min，棄去(qu)上(shang)清(qing)液，加(jia)1-2 mL培養基(ji)後(hou)吹勻(yun)。然(ran)後(hou)將所有(you)細胞(bao)懸(xuan)液(ye)加(jia)入含(han)適(shi)量培養基(ji)的培養瓶(ping)中(zhong)培(pei)養過(guo)夜（或(huo)將細胞(bao)懸(xuan)液(ye)加(jia)入10 cm皿(min)中(zhong)，加(jia)入約8 mL培養基(ji)，培養過(guo)夜）。第(di)二(er)天(tian)換(huan)液並檢查細胞(bao)密(mi)度。

2) 細胞(bao)傳(chuan)代(dai)：如果細胞(bao)密(mi)度達(da) 80%-90%，即可(ke)進(jin)行傳(chuan)代(dai)培養。

a、棄去(qu)培(pei)養上(shang)清(qing)，用不含鈣、鎂離子(zi)的(de)PBS潤洗(xi)細胞(bao)1-2次。

b、加(jia)1 mL消化(hua)液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培(pei)養瓶(ping)中(zhong)，使消化(hua)液浸潤所(suo)有(you)細胞(bao)，將培養瓶(ping)置(zhi)於(yu)37℃培(pei)養箱中(zhong)消(xiao)化(hua)1-2 min（視細胞(bao)情(qing)況而定），然(ran)後(hou)在顯(xian)微鏡(jing)下觀(guan)察細胞(bao)消(xiao)化(hua)情況，若細胞(bao)大(da)部分變(bian)圓(yuan)並脫(tuo)落(luo)，迅(xun)速(su)拿(na)回(hui)操作臺(tai)，輕敲(qiao)幾下培(pei)養瓶(ping)後(hou)加(jia)2-3ml培養基(ji)終止消化(hua)。輕輕打勻(yun)後(hou)裝入(ru)無菌離心(xin)管(guan)中(zhong)，1000 rpm離心(xin)5 min，棄去(qu)上(shang)清(qing)液，補加(jia)1-2 mL培養液後(hou)吹勻(yun)。

c、將細胞(bao)懸(xuan)液(ye)按(an)1:2比例(li)分(fen)到新(xin)的含8 mL培養基(ji)的新皿(min)中(zhong)或(huo)者瓶(ping)中(zhong)，置(zhi)於培(pei)養箱中(zhong)培(pei)養。 3) 細胞(bao)凍(dong)存：待(dai)細胞(bao)生(sheng)長(chang)狀(zhuang)態(tai)良(liang)好時，可(ke)進(jin)行細胞(bao)凍(dong)存。下面(mian) T25 瓶(ping)為(wei)例(li)；a、收集細胞(bao)及細胞(bao)培(pei)養液，裝入(ru)無菌離心(xin)管(guan)中(zhong)，1000 rpm條件下離心(xin)4 min，棄去(qu)上(shang)清(qing)液，用PBS清(qing)洗(xi)壹遍(bian)，棄盡PBS，進(jin)行細胞(bao)計(ji)數。

b、根(gen)據(ju)細胞(bao)數量加(jia)入無血清(qing)細胞(bao)凍(dong)存液，使細胞(bao)密(mi)度5×106~1×107/mL，輕輕混勻(yun)，每(mei)支(zhi)凍(dong)存管(guan)凍(dong)存1mL細胞(bao)懸(xuan)液(ye)，註意(yi)凍(dong)存管(guan)做(zuo)好標(biao)識。將凍(dong)存管(guan)放(fang)入-80℃冰(bing)箱，24 h後(hou)轉入(ru)液(ye)氮(dan)灌儲(chu)存。記錄(lu)凍(dong)存管(guan)位(wei)置以便下次拿(na)取。

公(gong)司正在(zai)出(chu)售的(de)產(chan)品：

PC14人(ren)肺(fei)癌細胞(bao) PC14 human lung cancer cells DMEM+10% FBS 大(da)鼠(shu)胃(wei)動(dong)蛋白1(GKN1)ELISA試劑(ji)盒(he) VEGF-B(Human Vascular Endothelial cell Growth Factor B)  人(ren)血(xue)管(guan)內皮細胞(bao)生(sheng)長(chang)因(yin)子(zi)B 96T

phospho-MAP4K1(Ser171)： 0酸化(hua)造血(xue)祖(zu)細胞(bao)激(ji)酶(mei)抗(kang)體 ERBB2 Others Human 人 ErbB2 / HER2 人(ren)細胞(bao)裂(lie)解液 (陽(yang)性對(dui)照(zhao))

CL-0291MKN-28(人(ren)胃(wei)癌高轉(zhuan)移(yi)細胞(bao))5×106cells/瓶(ping)×2 大(da)鼠(shu)原C(PGC)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) PGF2 Alpha  大(da)鼠(shu)前(qian)列腺(xian)素(su)F2α 96T

PRAK： p38調(tiao)節(jie)/激(ji)活蛋(dan)白(bai)激(ji)酶(mei)抗(kang)體 小鼠(shu)誘(you)導性(xing)多潛能幹(gan)細胞(bao);PUMC-mips-C2

P3/NSI/1-Ag4-1 [NS-1] (小(xiao)鼠(shu)骨髓(sui)瘤細胞(bao)) 5×106cells/瓶(ping)×2 MC3T3-E1 Subclone 14(小(xiao)鼠(shu)原成(cheng)骨細胞(bao)) 大(da)鼠(shu)原A(PGA)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) Beta-EPR(Mouse Beta-Endorphin receptor)  小(xiao)鼠(shu)β內啡肽受體 96T

IDO： 吲哚胺(an)2,3-雙加(jia)氧(yang)酶抗(kang)體 小鼠(shu)海(hai)馬趾星(xing)形膠質(zhi)細胞(bao)MA-h

CCL3 Protein Mouse 重(zhong)組小鼠(shu) CCL3 / Mip1a 蛋(dan)白(bai) 人程序性死亡(wang)配(pei)體-1(PDL1)ELISA試劑(ji)盒(he) IL-6R Alpha (IL6R-alpha) 白(bai)細胞(bao)介素(su)6受體α抗原 0.5mg

IL-19： 白(bai)細胞(bao)介素(su)19抗(kang)體 HA Others H7N9 甲型(xing)流(liu)感(gan) H7N9 (A/Pigeon/Shanghai/S1069/2013) 血(xue)凝(ning)素(su) (Hemagglutinin / HA) 桿狀(zhuang)病(bing)毒(du)-昆(kun)蟲(chong)細胞(bao)裂(lie)解液 (陽(yang)性對(dui)照(zhao))

人(ren)淋(lin)巴血管(guan)內皮細胞(bao)培(pei)養基(ji) 100mL 人程序性死亡(wang)分(fen)子-1(PD-1)ELISA 試劑(ji)盒(he) gp130/IL-6R 白(bai)介素(su)-6受體抗原 0.5mg

Inhibin Alpha： 抑(yi)制(zhi)素(su)A/Inhibin α抗(kang)體 猴腎(shen)細胞(bao);Vero IgCD4 人(ren)巨核(he)細胞(bao)白(bai)血病(bing)，CHRF細胞(bao) SK-N-MC(神(shen)經上(shang)皮(pi)瘤細胞(bao))

Ocut-2C人(ren)甲(jia)狀腺(xian)癌細胞(bao)（未(wei)分化(hua)）OS-RC-2 人(ren)腎(shen)癌細胞(bao) 大(da)鼠(shu)膽(dan)囊收縮素(su)/腸(chang)促(cu)肽(CCK)ELISA 試(shi)劑(ji)盒(he) NN-T4(Human Neonatal Thyroxine)  人(ren)新(xin)生(sheng)甲(jia)狀(zhuang)腺(xian)素(su) 96T

PDHA1： 酸脫(tuo)氫(qing)酶α1抗(kang)體 SF9細胞(bao)，昆(kun)蟲(chong)卵(luan)巢(chao)細胞(bao) 人(ren)卵(luan)巢(chao)癌細胞(bao),Sw626細胞(bao) 人(ren)生(sheng)發(fa)基(ji)質(zhi)細胞(bao)裂(lie)解物HHGMCL

LBP Others Human 人(ren) LBP / Lipopolysaccharide Binding 人(ren)細胞(bao)裂(lie)解液 (陽(yang)性對(dui)照(zhao)) 大鼠(shu)膽(dan)囊收縮素(su)(CCK)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) INS(Human Insulin)  人(ren)胰島素(su) 96T

phospho-PDHA1(Ser293)： 0酸化(hua)酸脫(tuo)氫(qing)酶α1抗(kang)體 大耳(er)山羊(yang)肺細胞(bao);LDG-1

MEF, 小(xiao)鼠(shu)胚(pei)胎成(cheng)纖維細胞(bao) 大(da)鼠(shu)膽(dan)綠素(su)還(hai)原酶(mei)A(BLVRA)ELISA試(shi)劑(ji)盒(he) Human C-Peptide  人(ren)C肽 96T

三、培(pei)養註意(yi)事(shi)項 

1. 收到細胞(bao)後(hou)首(shou)先觀(guan)察細胞(bao)瓶(ping)是(shi)否完(wan)好，培養液是(shi)否有(you)漏(lou)液、渾(hun)濁等(deng)現(xian)象(xiang)，若有(you)上(shang)述現(xian)象(xiang) 發生(sheng)請(qing)及時和(he)我(wo)們聯(lian)系。

2. 仔細閱(yue)讀細胞(bao)說(shuo)明書，了(le)解細胞(bao)相(xiang)關(guan)信(xin)息(xi)，如細胞(bao)形態、所(suo)用(yong)培養基(ji)、血清(qing)比例(li)、所(suo)需(xu) 細胞(bao)因(yin)子等(deng)，確(que)保(bao)細胞(bao)培(pei)養條件壹(yi)致(zhi)，若由(you)於(yu)培養條件不(bu)壹致(zhi)而導致(zhi)細胞(bao)出(chu)現(xian)問(wen)題，責任(ren)由(you) 客(ke)戶(hu)自(zi)行(xing)承(cheng)擔。

3. 用 75%酒(jiu)精擦拭細胞(bao)瓶(ping)表(biao)面(mian)，顯(xian)微鏡(jing)下觀(guan)察細胞(bao)狀(zhuang)態。因(yin)運(yun)輸(shu)問(wen)題(ti)，部分細胞(bao)由(you)於(yu)溫度 變(bian)化(hua)及劇烈(lie)碰(peng)亡(wang)破碎形成(cheng)碎片，是正常現(xian)象(xiang)。觀察好細胞(bao)狀(zhuang)態後(hou)，75%酒(jiu)精消毒(du)瓶(ping)壁(bi)將 T25 瓶(ping)置(zhi)於(yu) 37℃培(pei)養箱放置 2-4h。

4. 貼(tie)壁(bi)細胞(bao)可(ke)以消化(hua)，懸(xuan)浮(fu)細胞(bao)直(zhi)接(jie)混勻(yun)收集細胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，棄上(shang) 清(qing)。加(jia) 5 mL PBS 重懸(xuan)細胞(bao)，再 900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，用新鮮(xian)的(de)培養基(ji)重懸(xuan) 細胞(bao)，並接種到新(xin)的(de)培(pei)養瓶(ping)或(huo)培養皿(min)中(zhong)，置(zhi)於培(pei)養箱中(zhong)進(jin)行培養。

5. 請客(ke)戶(hu)用相(xiang)同(tong)條件的(de)培養基(ji)用於細胞(bao)培(pei)養。

6. 建(jian)議客戶(hu)收到細胞(bao)後(hou)前 3 天(tian)各(ge)拍(pai)幾張(zhang)細胞(bao)照(zhao)片，記(ji)錄(lu)細胞(bao)狀(zhuang)態，便於和我(wo)司技(ji)術(shu)部溝(gou)通 交(jiao)流。由(you)於(yu)運(yun)輸(shu)的(de)原因(yin)，個(ge)別敏(min)感細胞(bao)會(hui)出現(xian)不(bu)穩定的情(qing)況，請(qing)及時和(he)我(wo)們聯(lian)系，告(gao)知(zhi)細胞(bao) 的(de)具(ju)體情況，以便我(wo)們的(de)技(ji)術人(ren)員跟蹤(zong)回(hui)訪直(zhi)至(zhi)問(wen)題解決。

7. 該細胞(bao)僅(jin)供科研(yan)使用。

8. 備(bei)註：運(yun)輸(shu)用(yong)的(de)培養基(ji) (灌液(ye)培養基(ji)) 不能再用來培(pei)養細胞(bao)，請(qing)換(huan)用按(an)照(zhao)說明(ming)書細胞(bao)培(pei) 養條件新(xin)配制(zhi)的(de)培(pei)養基(ji)來培(pei)養細胞(bao)。     收到細胞(bao)後(hou)第(di)壹(yi)次傳(chuan)代(dai)建(jian)議 1：2 傳(chuan)代(dai) 。

9. 註意(yi)：  1:2 傳(chuan)代(dai)就是(shi) 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個(ge) T25 瓶(ping)或(huo)者 2 個(ge) 6cm 皿(min)。不是(shi) 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個(ge)10cm 皿(min)。