OVCAR-8人卵巢(chao)癌(ai)腺癌(ai)細(xi)胞(bao)

公司產品僅(jin)供科研(yan)研究(jiu)使用、不得(de)用於(yu)臨(lin)床診斷！

1、細(xi)胞(bao)傳(chuan)代(dai)：

1）細(xi)胞(bao)生(sheng)長(chang)至覆蓋培(pei)養瓶的 80%面積時，棄 25cm2培(pei)養瓶中的培(pei)養液，用 PBS 清(qing)洗(xi)細(xi)胞(bao)壹(yi)次；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消化(hua)液約(yue) 1ml 至(zhi)培(pei)養瓶中，倒(dao)置(zhi)顯(xian)微(wei)鏡下觀察(cha)，待(dai)細(xi)胞(bao)回(hui)縮(suo)變(bian)圓(yuan)後加(jia)入 5ml 培(pei)養

液終(zhong)止(zhi)消(xiao)化(hua)，再輕輕吹打(da)細(xi)胞(bao)使(shi)之(zhi)脫(tuo)落，然(ran)後將懸(xuan)液(ye)轉(zhuan)移(yi)至(zhi) 15ml 離(li)心(xin)管中，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）棄上(shang)清(qing)，沈(chen)澱細(xi)胞(bao)用(yong) 1-2ml 培(pei)養基重(zhong)懸，然(ran)後按 1:2 比(bi)例進行分(fen)瓶(ping)傳(chuan)代(dai)，最(zui)後放(fang)入 37℃，5%CO2細(xi)胞(bao)

培(pei)養箱(xiang)中(zhong)培(pei)養；

2、細(xi)胞(bao)凍存：

1）細(xi)胞(bao)生(sheng)長(chang)至覆蓋培(pei)養瓶的 80%面積時，棄 25cm2培(pei)養瓶中的培(pei)養液，用 PBS 清(qing)洗(xi)細(xi)胞(bao)壹(yi)次；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消化(hua)液約(yue) 1ml 至(zhi)培(pei)養瓶中，倒(dao)置(zhi)顯(xian)微(wei)鏡下觀察(cha)，待(dai)細(xi)胞(bao)回(hui)縮(suo)變(bian)圓(yuan)後加(jia)入培(pei)養液終(zhong)

止(zhi)消(xiao)化(hua)，輕輕吹打(da)細(xi)胞(bao)使(shi)之(zhi)脫(tuo)落，然(ran)後將懸(xuan)液(ye)轉(zhuan)移(yi)至(zhi) 15ml 離(li)心(xin)管中，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）用適(shi)量的凍存液(ye)（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸細(xi)胞(bao)，並(bing)放(fang)置於(yu)凍存管中；

4）先(xian)將細(xi)胞(bao)凍存管放(fang)置於(yu)-20℃ 1.5h，然(ran)後將其(qi)移(yi)入-80℃過夜，24h 後轉入液(ye)氮中(zhong)進行長期保(bao)存。使(shi)用(yong)程序(xu)

降(jiang)溫(wen)盒(he)可(ke)直(zhi)接(jie)放(fang)入-80℃。

二(er)、細(xi)胞(bao)培(pei)養操(cao)作(zuo)

1) 復(fu)蘇(su)細(xi)胞(bao)：以下細(xi)胞(bao)培(pei)養凍存處(chu)理(li)僅(jin)供參考(kao)，具體(ti)操(cao)作(zuo)步(bu)驟以隨貨產品說明書為主(zhu)。將(jiang)含(han)有(you)1 mL細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)的凍存管在(zai) 37℃水浴中迅(xun)速(su)搖晃解(jie)凍，加(jia)4 mL培(pei)養基混(hun)合均(jun)勻。在(zai)1000 rpm條(tiao)件(jian)下離(li)心(xin)3 min，棄去(qu)上清(qing)液(ye)，加(jia)1-2 mL培(pei)養基後吹勻。然(ran)後將所有(you)細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)加(jia)入含(han)適(shi)量培(pei)養基的培(pei)養瓶中培(pei)養過夜（或(huo)將細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)加(jia)入10 cm皿中，加(jia)入約(yue)8 mL培(pei)養基，培(pei)養過夜）。第(di)二(er)天(tian)換(huan)液並(bing)檢查(zha)細(xi)胞(bao)密(mi)度(du)。

2) 細(xi)胞(bao)傳(chuan)代(dai)：如果細(xi)胞(bao)密(mi)度(du)達(da) 80%-90%，即(ji)可(ke)進行(xing)傳代培(pei)養。

a、棄去(qu)培(pei)養上清(qing)，用(yong)不(bu)含(han)鈣、鎂離(li)子的PBS潤洗(xi)細(xi)胞(bao)1-2次。

b、加(jia)1 mL消化(hua)液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培(pei)養瓶中，使(shi)消(xiao)化(hua)液浸(jin)潤所有(you)細(xi)胞(bao)，將(jiang)培(pei)養瓶置於(yu)37℃培(pei)養箱(xiang)中(zhong)消化(hua)1-2 min（視細(xi)胞(bao)情(qing)況(kuang)而定），然(ran)後在(zai)顯(xian)微(wei)鏡下觀察(cha)細(xi)胞(bao)消(xiao)化(hua)情況(kuang)，若(ruo)細(xi)胞(bao)大(da)部分(fen)變(bian)圓(yuan)並脫(tuo)落，迅(xun)速(su)拿回(hui)操(cao)作(zuo)臺(tai)，輕敲(qiao)幾(ji)下培(pei)養瓶後加(jia)2-3ml培(pei)養基終(zhong)止(zhi)消(xiao)化(hua)。輕輕打(da)勻後裝入無菌(jun)離(li)心(xin)管中，1000 rpm離(li)心(xin)5 min，棄去(qu)上清(qing)液(ye)，補(bu)加(jia)1-2 mL培(pei)養液後吹勻。

c、將(jiang)細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)按1:2比(bi)例分(fen)到新(xin)的含8 mL培(pei)養基的新皿中或(huo)者瓶中(zhong)，置於(yu)培(pei)養箱(xiang)中(zhong)培(pei)養。 3) 細(xi)胞(bao)凍存：待(dai)細(xi)胞(bao)生(sheng)長(chang)狀態良好(hao)時，可(ke)進行(xing)細(xi)胞(bao)凍存。下面(mian) T25 瓶(ping)為例；a、收集(ji)細(xi)胞(bao)及(ji)細(xi)胞(bao)培(pei)養液，裝入無菌(jun)離(li)心(xin)管中，1000 rpm條(tiao)件(jian)下離(li)心(xin)4 min，棄去(qu)上清(qing)液(ye)，用(yong)PBS清(qing)洗(xi)壹(yi)遍(bian)，棄(qi)盡(jin)PBS，進(jin)行細(xi)胞(bao)計(ji)數(shu)。

b、根(gen)據細(xi)胞(bao)數(shu)量(liang)加(jia)入無血(xue)清(qing)細(xi)胞(bao)凍存液(ye)，使(shi)細(xi)胞(bao)密(mi)度(du)5×106~1×107/mL，輕輕混(hun)勻，每(mei)支(zhi)凍存管凍存1mL細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)，註意凍存管做好(hao)標(biao)識。將(jiang)凍存管放(fang)入-80℃冰(bing)箱(xiang)，24 h後轉入液(ye)氮灌(guan)儲存。記(ji)錄凍存管位置(zhi)以便(bian)下次拿取。

三、培(pei)養註意事項(xiang) 

1. 收(shou)到細(xi)胞(bao)後首先(xian)觀察(cha)細(xi)胞(bao)瓶(ping)是(shi)否(fou)完好(hao)，培(pei)養液是否(fou)有(you)漏液、渾(hun)濁(zhuo)等(deng)現象，若(ruo)有(you)上述(shu)現(xian)象 發生請及時(shi)和我們聯系。

2. 仔細(xi)閱讀(du)細(xi)胞(bao)說(shuo)明書，了解(jie)細(xi)胞(bao)相(xiang)關(guan)信息(xi)，如細(xi)胞(bao)形態、所用培(pei)養基、血(xue)清(qing)比(bi)例、所需 細(xi)胞(bao)因(yin)子(zi)等(deng)，確(que)保細(xi)胞(bao)培(pei)養條(tiao)件(jian)壹(yi)致，若(ruo)由(you)於(yu)培(pei)養條(tiao)件(jian)不壹(yi)致而(er)導(dao)致細(xi)胞(bao)出(chu)現(xian)問(wen)題，責(ze)任(ren)由 客(ke)戶自行承(cheng)擔。

3. 用(yong) 75%酒精擦拭(shi)細(xi)胞(bao)瓶(ping)表(biao)面，顯(xian)微(wei)鏡下觀察(cha)細(xi)胞(bao)狀態。因(yin)運(yun)輸(shu)問(wen)題，部分(fen)細(xi)胞(bao)由(you)於(yu)溫(wen)度(du) 變(bian)化(hua)及劇(ju)烈(lie)碰亡(wang)破碎形成碎片，是(shi)正(zheng)常(chang)現象。觀察(cha)好(hao)細(xi)胞(bao)狀態後，75%酒精消毒瓶壁將 T25 瓶(ping)置於(yu) 37℃培(pei)養箱(xiang)放(fang)置 2-4h。

4. 貼(tie)壁(bi)細(xi)胞(bao)可(ke)以消化(hua)，懸浮細(xi)胞(bao)直(zhi)接(jie)混(hun)勻收(shou)集(ji)細(xi)胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，棄上(shang) 清(qing)。加(jia) 5 mL PBS 重(zhong)懸細(xi)胞(bao)，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，用新(xin)鮮的培(pei)養基重(zhong)懸 細(xi)胞(bao)，並(bing)接(jie)種到新(xin)的培(pei)養瓶或培(pei)養皿中，置(zhi)於(yu)培(pei)養箱(xiang)中(zhong)進行培(pei)養。

5. 請客(ke)戶用(yong)相同條(tiao)件(jian)的培(pei)養基用(yong)於(yu)細(xi)胞(bao)培(pei)養。

6. 建(jian)議(yi)客(ke)戶收(shou)到細(xi)胞(bao)後前 3 天(tian)各拍幾(ji)張細(xi)胞(bao)照(zhao)片，記(ji)錄細(xi)胞(bao)狀態，便(bian)於(yu)和我司技術(shu)部溝(gou)通 交(jiao)流(liu)。由(you)於(yu)運(yun)輸的原因(yin)，個(ge)別敏(min)感(gan)細(xi)胞(bao)會(hui)出(chu)現不穩定的情況(kuang)，請及(ji)時(shi)和我們聯系，告(gao)知(zhi)細(xi)胞(bao) 的具體(ti)情況(kuang)，以便(bian)我們的技術(shu)人員(yuan)跟蹤(zong)回(hui)訪(fang)直(zhi)至(zhi)問(wen)題解(jie)決(jue)。

7. 該(gai)細(xi)胞(bao)僅(jin)供科研(yan)使用(yong)。

8. 備註：運輸(shu)用的培(pei)養基 (灌(guan)液(ye)培(pei)養基) 不(bu)能(neng)再用來(lai)培(pei)養細(xi)胞(bao)，請(qing)換(huan)用按照(zhao)說明書細(xi)胞(bao)培(pei) 養條(tiao)件(jian)新配制的培(pei)養基來(lai)培(pei)養細(xi)胞(bao)。     收(shou)到細(xi)胞(bao)後第壹(yi)次傳代(dai)建(jian)議(yi) 1：2 傳代(dai) 。

9. 註意：  1:2 傳(chuan)代就是 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳 2 個(ge) T25 瓶(ping)或者 2 個(ge) 6cm 皿。不是(shi) 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳 2 個(ge)10cm 皿。

公司正在(zai)出(chu)售的產品：

phospho-MLF1 Interacting Protein(Thr78)： 0酸化(hua)卡(ka)波西(xi)氏肉瘤皰疹(zhen)病(bing)毒(du)潛伏(fu)核抗(kang)原(yuan)相(xiang)互作用(yong)蛋白1抗(kang)體(ti) AGO3 Others Human 人 AGO3 / Argonaute 3 / EIF2C3 桿狀病(bing)毒(du)-昆蟲(chong)細(xi)胞(bao)裂解(jie)液(ye) (陽(yang)性對(dui)照(zhao))

小(xiao)鼠上(shang)皮細(xi)胞(bao)培(pei)養基 100mL 大(da)鼠(shu)維生結合蛋白(DBP)ELISA試劑(ji)盒(he) TRAIL-R3(Human tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand 3)  人壞死(si)因(yin)子(zi)相(xiang)關(guan)雕亡誘導(dao)配體(ti)3 96T

MATK： 酪(lao)酸蛋(dan)白激酶細(xi)胞(bao)分(fen)裂素(su)抗(kang)體(ti) MDA-MB-453細(xi)胞(bao)，癌(ai)細(xi)胞(bao) 人食(shi)管鱗癌(ai),KYSE 450細(xi)胞(bao) 中(zhong)國(guo)倉(cang)鼠(shu)卵(luan)巢(chao)細(xi)胞(bao)(亞(ya)系克隆);CHO-beta2(414) CL.32 pTGF-beta2(414)

HA Others H4N8 甲型(xing)流感(gan) H4N8 (A/chicken/Alabama/1/1975) 血(xue)凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細(xi)胞(bao)裂解(jie)液(ye) (陽(yang)性對(dui)照(zhao)) 大鼠(shu)維生3(VD3)ELISA試劑(ji)盒(he) HBsAb(Mouse hepatitis B virus surface antibody)  小(xiao)鼠乙(yi)型(xing)肝(gan)炎(yan)表(biao)面(mian)抗(kang)體(ti) 人成纖(xian)維細(xi)胞(bao)裂解(jie)物(wu)HMFL

NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Sain L]小(xiao)鼠成纖(xian)維細(xi)胞(bao) NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Sain L] mouse fibroblast cells MEM(NaHCO3 1.5g/L, Sodium Pyruvate 0.11g/L)+10%FBS 大(da)鼠(shu)維生3(VD3)ELISA 試劑(ji)盒(he) DAO(Mouse diamine oxidase)  小(xiao)鼠氧化(hua)酶 96T

phospho-IRS1(Tyr1222)： 0酸化(hua)胰島(dao)素受(shou)體(ti)底物-1抗(kang)體(ti) 非洲綠(lv)猴(hou)腎細(xi)胞(bao);VERO-76 惡(e)性胚胎橫(heng)紋(wen)肌(ji)瘤，RD細(xi)胞(bao) KP-N-NS(腎上(shang)腺神(shen)經母細(xi)胞(bao)瘤細(xi)胞(bao)(腦轉移(yi)))

GBP2 Others Human 人 GBP-2 / GBP2 人細(xi)胞(bao)裂解(jie)液(ye) (陽(yang)性對(dui)照(zhao)) 人叉頭(tou)框(kuang)蛋(dan)白04(FoxO4)ELISA 試劑(ji)盒(he) IRF-1(Interferon regulatory factor-1) 幹擾素(su)調節因(yin)子(zi)抗(kang)原(yuan) 0.5mg

phospho-IRS1(Tyr895)： 0酸化(hua)胰島(dao)素受(shou)體(ti)底物-1抗(kang)體(ti) CM-R071大鼠(shu)輸尿管上皮(pi)細(xi)胞(bao)培(pei)養基100mL

7WD10細(xi)胞(bao)，人APP基因(yin)轉(zhuan)染(ran)CHO細(xi)胞(bao)株(zhu) 短(duan)小(xiao)芽孢(bao)桿菌(jun) 犬胸(xiong)腺細(xi)胞(bao);cf2Th 人叉頭(tou)框(kuang)蛋(dan)白03(FoxO3)ELISA 試劑(ji)盒(he) IRAK 2 白介(jie)素-1受(shou)體(ti)相關(guan)激酶2 0.5mg

phospho-IRS1(Ser1101)： 0酸化(hua)胰島(dao)素受(shou)體(ti)底物-1抗(kang)體(ti) FLRT3 Others Human 人 FLRT3 人細(xi)胞(bao)裂解(jie)液(ye) (陽(yang)性對(dui)照(zhao))

OVCAR-8人卵巢(chao)癌(ai)腺癌(ai)細(xi)胞(bao)人小(xiao)梁網細(xi)胞(bao)RNAHTMC miRNA5 μg 大(da)鼠(shu)單核細(xi)胞(bao)趨(qu)化(hua)蛋白3(MCP-3/CCL7)ELISA試劑(ji)盒(he) HIV(Human anti-immunodeficiency virus antibody)  人抗(kang)人類免(mian)疫(yi)缺陷病(bing)毒(du)抗(kang)體(ti) 恒(heng)河猴(hou)腎細(xi)胞(bao);LLC-MK2

人正常(chang)前列腺上皮細(xi)胞(bao);RWPE-1 人食(shi)管平(ping)滑(hua)肌(ji)細(xi)胞(bao)培(pei)養基 100mL 大(da)鼠(shu)單核細(xi)胞(bao)趨(qu)化(hua)蛋白3(MCP-3/CCL7)ELISA 試劑(ji)盒(he) UU-Ab(Human Ureaplasma urealyticum antibody)  人解(jie)脲脲原體(ti)抗(kang)體(ti) 皮膚(fu)癌(ai)組織源性原(yuan)代(dai)細(xi)胞(bao)Many types of cells包(bao)裝(zhuang)：5 × 105次方(1ml)/1ml

小(xiao)鼠皮(pi)層神(shen)經膠質細(xi)胞(bao)(EGFP標(biao)記) 大(da)鼠(shu)單核細(xi)胞(bao)趨(qu)化(hua)蛋白3(MCP3)ELISA試劑(ji)盒(he) CPSA(Human complex edprostate specific antigen)  人復(fu)合前列腺特異性(xing)抗(kang)原(yuan) 96T

QPRT/QAPRTase： 酸0酸核糖基轉(zhuan)移(yi)酶(mei)抗(kang)體(ti) CD53 Others Mouse 小(xiao)鼠 CD53 (aa 107-181) 人細(xi)胞(bao)裂解(jie)液(ye) (陽(yang)性對(dui)照(zhao))

P3X63Ag8 小(xiao)鼠骨髓(sui)瘤細(xi)胞(bao) 大(da)鼠(shu)單核細(xi)胞(bao)趨(qu)化(hua)蛋白2(MCP-2/CCL8)ELISA試劑(ji)盒(he) HSV II -Ab(Human Herpes simplexvirus II antibody)  人單皰疹(zhen)病(bing)毒(du)Ⅱ型(xing)抗(kang)體(ti) GT1.1細(xi)胞(bao)，小(xiao)鼠垂(chui)體(ti)瘤細(xi)胞(bao)(分(fen)泌(mi)促(cu)生(sheng)長(chang)激素分(fen)泌(mi)激素) 人卵巢(chao)癌(ai)細(xi)胞(bao)系(xi),Anglne細(xi)胞(bao) 人骨骼(ge)肌(ji)細(xi)胞(bao)裂解(jie)物(wu)HSkMCL