MRC-5（有限細胞(bao)系）人(ren)胚(pei)肺成(cheng)纖(xian)維細胞(bao)

公司(si)產品(pin)僅供(gong)科研研(yan)究(jiu)使用(yong)、不(bu)得(de)用(yong)於(yu)臨床診(zhen)斷！

1、細胞(bao)傳(chuan)代：

1）細胞(bao)生長(chang)至(zhi)覆(fu)蓋(gai)培(pei)養瓶(ping)的(de) 80%面(mian)積(ji)時(shi)，棄 25cm2培(pei)養瓶(ping)中的(de)培(pei)養液(ye)，用(yong) PBS 清洗細胞(bao)壹次；

2）添加 0.25%消(xiao)化液約 1ml 至(zhi)培(pei)養瓶(ping)中，倒置(zhi)顯微(wei)鏡下觀察(cha)，待細胞(bao)回縮(suo)變(bian)圓(yuan)後(hou)加入(ru) 5ml 培(pei)養

液(ye)終(zhong)止消(xiao)化，再輕(qing)輕(qing)吹(chui)打細胞(bao)使之(zhi)脫落，然(ran)後(hou)將(jiang)懸(xuan)液(ye)轉移(yi)至(zhi) 15ml 離(li)心管(guan)中，1000rpm 離(li)心 5min；

3）棄上(shang)清，沈澱(dian)細胞(bao)用(yong) 1-2ml 培(pei)養基重懸(xuan)，然(ran)後(hou)按 1:2 比例(li)進行分瓶(ping)傳(chuan)代，最(zui)後(hou)放入(ru) 37℃，5%CO2細胞(bao)

培(pei)養箱(xiang)中培(pei)養；

2、細胞(bao)凍(dong)存(cun)：

1）細胞(bao)生長(chang)至(zhi)覆(fu)蓋(gai)培(pei)養瓶(ping)的(de) 80%面(mian)積(ji)時(shi)，棄 25cm2培(pei)養瓶(ping)中的(de)培(pei)養液(ye)，用(yong) PBS 清洗細胞(bao)壹次；

2）添加 0.25%消(xiao)化液約 1ml 至(zhi)培(pei)養瓶(ping)中，倒置(zhi)顯微(wei)鏡下觀察(cha)，待細胞(bao)回縮(suo)變(bian)圓(yuan)後(hou)加入(ru)培(pei)養液(ye)終(zhong)

止消(xiao)化，輕(qing)輕(qing)吹(chui)打細胞(bao)使之(zhi)脫落，然(ran)後(hou)將(jiang)懸(xuan)液(ye)轉移(yi)至(zhi) 15ml 離(li)心管(guan)中，1000rpm 離(li)心 5min；

3）用(yong)適量的凍(dong)存(cun)液（FBS：DMSO=9 ：1）重懸細胞(bao)，並放置(zhi)於(yu)凍(dong)存(cun)管(guan)中；

4）先將細胞(bao)凍(dong)存(cun)管(guan)放置(zhi)於(yu)-20℃ 1.5h，然(ran)後(hou)將(jiang)其(qi)移(yi)入(ru)-80℃過(guo)夜(ye)，24h 後(hou)轉入(ru)液氮(dan)中進行長(chang)期(qi)保存(cun)。使用(yong)程序

降溫盒(he)可(ke)直接(jie)放入(ru)-80℃。

二(er)、細胞(bao)培(pei)養操作

1) 復蘇(su)細胞(bao)：以下細胞(bao)培(pei)養凍(dong)存(cun)處理僅供參(can)考，具體(ti)操作步(bu)驟以隨貨產品(pin)說(shuo)明書為主(zhu)。將含(han)有1 mL細胞(bao)懸液的(de)凍(dong)存(cun)管(guan)在 37℃水(shui)浴(yu)中迅(xun)速(su)搖晃(huang)解凍(dong)，加4 mL培(pei)養基混合(he)均(jun)勻。在1000 rpm條(tiao)件(jian)下離(li)心3 min，棄去上(shang)清液，加1-2 mL培(pei)養基後(hou)吹(chui)勻(yun)。然(ran)後(hou)將(jiang)所(suo)有細胞(bao)懸液加入(ru)含(han)適量培(pei)養基的培(pei)養瓶(ping)中培(pei)養過(guo)夜(ye)（或(huo)將細胞(bao)懸液加入(ru)10 cm皿(min)中，加入(ru)約8 mL培(pei)養基，培(pei)養過(guo)夜(ye)）。第二(er)天換(huan)液(ye)並檢(jian)查(zha)細胞(bao)密度(du)。

2) 細胞(bao)傳(chuan)代：如(ru)果細胞(bao)密度(du)達(da) 80%-90%，即可進行傳(chuan)代培(pei)養。

a、棄去培(pei)養上(shang)清，用(yong)不(bu)含(han)鈣、鎂(mei)離(li)子的(de)PBS潤洗細胞(bao)1-2次。

b、加1 mL消(xiao)化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培(pei)養瓶(ping)中，使消(xiao)化液浸潤所(suo)有細胞(bao)，將培(pei)養瓶(ping)置(zhi)於(yu)37℃培(pei)養箱(xiang)中消(xiao)化1-2 min（視細胞(bao)情況而(er)定），然(ran)後(hou)在顯微鏡下觀察(cha)細胞(bao)消(xiao)化情況，若(ruo)細胞(bao)大(da)部(bu)分變(bian)圓(yuan)並脫落，迅(xun)速拿回(hui)操作臺，輕(qing)敲(qiao)幾下培(pei)養瓶(ping)後(hou)加2-3ml培(pei)養基終止消(xiao)化。輕(qing)輕(qing)打勻(yun)後(hou)裝入(ru)無菌(jun)離(li)心管(guan)中，1000 rpm離(li)心5 min，棄去上(shang)清液，補(bu)加1-2 mL培(pei)養液(ye)後(hou)吹(chui)勻(yun)。

c、將(jiang)細胞(bao)懸液按1:2比例(li)分到(dao)新(xin)的(de)含(han)8 mL培(pei)養基的新(xin)皿(min)中或(huo)者瓶中，置(zhi)於(yu)培(pei)養箱(xiang)中培(pei)養。 3) 細胞(bao)凍(dong)存(cun)：待細胞(bao)生長(chang)狀態(tai)良好(hao)時(shi)，可(ke)進行細胞(bao)凍(dong)存(cun)。下面 T25 瓶(ping)為例；a、收(shou)集細胞(bao)及細胞(bao)培(pei)養液(ye)，裝入(ru)無菌(jun)離(li)心管(guan)中，1000 rpm條(tiao)件(jian)下離(li)心4 min，棄去上(shang)清液，用(yong)PBS清洗壹遍(bian)，棄盡(jin)PBS，進行細胞(bao)計數(shu)。

b、根據細胞(bao)數(shu)量加入(ru)無血(xue)清細胞(bao)凍(dong)存(cun)液，使細胞(bao)密度(du)5×106~1×107/mL，輕(qing)輕(qing)混勻，每(mei)支凍(dong)存(cun)管(guan)凍(dong)存(cun)1mL細胞(bao)懸液，註(zhu)意凍(dong)存(cun)管(guan)做(zuo)好標識。將凍(dong)存(cun)管(guan)放入(ru)-80℃冰(bing)箱(xiang)，24 h後(hou)轉入(ru)液氮(dan)灌(guan)儲存(cun)。記錄(lu)凍(dong)存(cun)管(guan)位(wei)置(zhi)以便下次拿取。

公司(si)正在出售(shou)的(de)產品(pin)：

EFNA5 Others Cynomolgus 食(shi)蟹(xie)猴(hou) Ephrin-A5 / EFNA5 人(ren)細胞(bao)裂解液(ye) (陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao)) 大(da)鼠(shu)纖(xian)維蛋(dan)白原γ(FGγ)ELISA試(shi)劑(ji)盒 AChE  大(da)鼠(shu)乙(yi)酰酯(zhi)酶 96T

MUSK： 肌(ji)肉骨骼受體(ti)酪酸激(ji)酶抗(kang)體 人(ren)支氣(qi)管(guan)上(shang)皮細胞(bao)總RNAHBEpiC NA

PIEC豬(zhu)髖動(dong)脈(mai)內(nei)皮(pi)細胞(bao) PIEC pig iliac artery endothelial cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS 大(da)鼠(shu)纖(xian)維蛋(dan)白原β鏈(Fgb/Ab1-181/Ab1-216/Ac1-581)ELISA試(shi)劑(ji)盒 BGP(Osteocalcin/Bone Gla-protein) 兔骨(gu)鈣素(su) ELISA試(shi)劑(ji)盒 96T

Mycobacterium tuberculosis Ag85B： 結(jie)核(he)分枝(zhi)桿(gan)菌(jun)抗體(ti) ULBP1 Others Human 人(ren) ULBP1 / N2DL1 人(ren)細胞(bao)裂解液(ye) (陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao))

CL-0411PA-1(人(ren)卵(luan)巢(chao)腺(xian)癌(ai)細胞(bao))5×106cells/瓶×2 大(da)鼠(shu)纖(xian)維蛋(dan)白原β(FGβ)ELISA試(shi)劑(ji)盒 CDT  大(da)鼠(shu)糖(tang)缺失(shi)性(xing)轉鐵(tie)蛋白 96T

HRG Beta1： 神經膠(jiao)質(zhi)生長(chang)因(yin)子/神經調(tiao)節(jie)蛋(dan)白β抗體(ti) 大(da)額(e)牛(niu)皮膚成(cheng)纖(xian)維樣(yang)細胞(bao);BOS-2 7721肝癌(ai)細胞(bao)，7721細胞(bao) HuT78(T淋(lin)巴(ba)細胞(bao)白血病細胞(bao))

ANGPT4 Others Human 人(ren) Angiopoietin 4 / ANG4 / ANGPT4 人(ren)細胞(bao)裂解液(ye) (陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao)) 人(ren)毒(du)性(xing)休(xiu)克綜合(he)征(zheng)毒(du)素(su)1(TSST-1)ELISA 試(shi)劑(ji)盒 GLP-1/KG-31(Glucagon-like peptide-1) peptide 胰高(gao)血糖(tang)素樣(yang)肽-1(多(duo)肽) 0.5mg

HINT1： 組(zu)酸三(san)聚(ju)體核苷(gan)結(jie)合(he)蛋(dan)白1抗體(ti) T-101B(含(han)100mL 酶解緩(huan)沖(chong)液)10mL

HS-1細胞(bao)，人(ren)皮膚(fu)癌(ai)細胞(bao)系 滑念(nian)珠(zhu)菌(jun) 小(xiao)鼠(shu)胰腺(xian)癌(ai)細胞(bao)(B類);Pan02 人(ren)丁型(xing)肝(gan)炎(yan)IgM(HDV IgM)ELISA 試(shi)劑(ji)盒 GLP-1 peptide 胰高(gao)血糖(tang)素樣(yang)肽-1(多(duo)肽) 0.1mg

HDAC3： 組(zu)蛋白去乙(yi)酰化(hua)酶3抗(kang)體(ti) GFRA3 Others Human 人(ren) GFRA3 / GFR-alpha-3 人(ren)細胞(bao)裂解液(ye) (陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao))

MRC-5（有限細胞(bao)系）人(ren)胚(pei)肺成(cheng)纖(xian)維細胞(bao)PDGFC Others Mouse 小(xiao)鼠(shu) PDGF-C / SCDGF 人(ren)細胞(bao)裂解液(ye) (陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao)) 大(da)鼠(shu)多(duo)聚蛋(dan)白1(MMRN1)ELISA試(shi)劑(ji)盒 irGH(Human Immunoreactive growth hormone)  人(ren)免(mian)疫(yi)反應性(xing)生(sheng)長(chang)激(ji)素 96T

Phospho-PSD93 (Tyr340)： 0酸化突(tu)觸後(hou)密度(du)蛋(dan)白93抗體(ti) 高(gao)背鯽魚尾(wei)鰭(qi)細胞(bao);GBJd

SW 1353人(ren)軟(ruan)骨肉(rou)瘤(liu)細胞(bao) SW 1353 in human chondrosarcoma cells L-15培(pei)養基+10%FBS 大(da)鼠(shu)多(duo)功能(neng)肽酶2(LMP2)ELISA試(shi)劑(ji)盒 MS(Human melatonin sulfate)  人(ren)褪黑(hei)色素 96T

Phospho-PSD95 (Tyr236 + Tyr240)： 0酸化突(tu)觸後(hou)密度(du)蛋(dan)白95抗體(ti) IL27RA Others Human 人(ren) IL27Ra / TCCR / WSX1 人(ren)細胞(bao)裂解液(ye) (陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao))

EB病毒(du)轉化(hua)的人(ren)B淋(lin)巴(ba)細胞(bao);KMYF 大(da)鼠(shu)多(duo)巴胺(an)轉運蛋白(DAT)ELISA試(shi)劑(ji)盒 IL-1 Alpha  大(da)鼠(shu)白介素1α 96T

三(san)、培(pei)養註(zhu)意事項 

1. 收(shou)到(dao)細胞(bao)後(hou)首(shou)先觀察(cha)細胞(bao)瓶是否完好，培(pei)養液(ye)是否有漏液、渾濁(zhuo)等(deng)現(xian)象，若(ruo)有上(shang)述(shu)現(xian)象 發(fa)生請及時和我(wo)們聯(lian)系(xi)。

2. 仔(zai)細閱(yue)讀(du)細胞(bao)說(shuo)明書，了解細胞(bao)相(xiang)關信息(xi)，如細胞(bao)形態(tai)、所(suo)用(yong)培(pei)養基、血清比例、所(suo)需 細胞(bao)因子等(deng)，確保(bao)細胞(bao)培(pei)養條(tiao)件(jian)壹(yi)致，若(ruo)由(you)於(yu)培(pei)養條(tiao)件(jian)不(bu)壹(yi)致而(er)導致細胞(bao)出現(xian)問題(ti)，責任由(you) 客(ke)戶自(zi)行承(cheng)擔。

3. 用(yong) 75%酒(jiu)精(jing)擦(ca)拭細胞(bao)瓶表面(mian)，顯微鏡下觀察(cha)細胞(bao)狀態(tai)。因運輸問題(ti)，部分細胞(bao)由(you)於(yu)溫度(du) 變(bian)化(hua)及劇烈碰亡(wang)破碎形成(cheng)碎片，是正常(chang)現(xian)象。觀察(cha)好細胞(bao)狀態(tai)後(hou)，75%酒(jiu)精(jing)消(xiao)毒(du)瓶(ping)壁(bi)將 T25 瓶(ping)置(zhi)於(yu) 37℃培(pei)養箱(xiang)放置(zhi) 2-4h。

4. 貼壁(bi)細胞(bao)可以消(xiao)化，懸浮細胞(bao)直接混勻收(shou)集細胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，棄上(shang) 清。加 5 mL PBS 重(zhong)懸(xuan)細胞(bao)，再 900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，用(yong)新鮮(xian)的(de)培(pei)養基重懸(xuan) 細胞(bao)，並接種(zhong)到(dao)新(xin)的(de)培(pei)養瓶(ping)或(huo)培(pei)養皿(min)中，置(zhi)於(yu)培(pei)養箱(xiang)中進行培(pei)養。

5. 請(qing)客(ke)戶(hu)用(yong)相(xiang)同條(tiao)件(jian)的(de)培(pei)養基用(yong)於(yu)細胞(bao)培(pei)養。

6. 建(jian)議(yi)客(ke)戶收到(dao)細胞(bao)後(hou)前(qian) 3 天各拍(pai)幾張(zhang)細胞(bao)照片，記錄(lu)細胞(bao)狀態(tai)，便於(yu)和我(wo)司(si)技術(shu)部(bu)溝(gou)通 交(jiao)流。由(you)於(yu)運輸的原因，個別敏(min)感(gan)細胞(bao)會出現(xian)不(bu)穩(wen)定的(de)情況，請及時和我(wo)們聯(lian)系(xi)，告(gao)知(zhi)細胞(bao) 的具體(ti)情況，以便我(wo)們的(de)技(ji)術(shu)人(ren)員跟蹤(zong)回(hui)訪(fang)直至(zhi)問題(ti)解決。

7. 該(gai)細胞(bao)僅供科研使用(yong)。

8. 備註(zhu)：運輸用(yong)的培(pei)養基 (灌(guan)液(ye)培(pei)養基) 不(bu)能(neng)再用(yong)來培(pei)養細胞(bao)，請換用(yong)按照說(shuo)明書細胞(bao)培(pei) 養條(tiao)件(jian)新(xin)配制(zhi)的培(pei)養基來培(pei)養細胞(bao)。     收到(dao)細胞(bao)後(hou)第(di)壹(yi)次傳(chuan)代建(jian)議(yi) 1：2 傳(chuan)代 。

9. 註(zhu)意：  1:2 傳(chuan)代就(jiu)是 1 個 T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個 T25 瓶(ping)或(huo)者 2 個 6cm 皿(min)。不(bu)是 1 個 T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個10cm 皿(min)。