MT-4人(ren)急性(xing)淋(lin)巴(ba)母(mu)細胞(bao)白血病(bing)細胞(bao)

公司產(chan)品(pin)僅(jin)供(gong)科研(yan)研究使用、不得(de)用於臨(lin)床(chuang)診(zhen)斷！

1、細胞(bao)傳(chuan)代(dai)：

1）細胞(bao)生長(chang)至覆(fu)蓋(gai)培養瓶的 80%面積(ji)時，棄(qi) 25cm2培養瓶中的培養液(ye)，用 PBS 清洗細胞(bao)壹次；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消化(hua)液(ye)約 1ml 至培養瓶中，倒(dao)置(zhi)顯微鏡下(xia)觀(guan)察(cha)，待細胞(bao)回縮變圓後加(jia)入(ru) 5ml 培養

液(ye)終止(zhi)消化(hua)，再(zai)輕輕吹打細胞(bao)使之(zhi)脫落，然後(hou)將(jiang)懸液(ye)轉(zhuan)移至 15ml 離心管(guan)中(zhong)，1000rpm 離心 5min；

3）棄(qi)上(shang)清，沈(chen)澱(dian)細胞(bao)用 1-2ml 培養基重(zhong)懸，然後(hou)按(an) 1:2 比(bi)例(li)進(jin)行(xing)分瓶傳(chuan)代(dai)，最後(hou)放入(ru) 37℃，5%CO2細胞(bao)

培養箱(xiang)中培養；

2、細胞(bao)凍(dong)存(cun)：

1）細胞(bao)生長(chang)至覆(fu)蓋(gai)培養瓶的 80%面積(ji)時，棄(qi) 25cm2培養瓶中的培養液(ye)，用 PBS 清洗細胞(bao)壹次；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消化(hua)液(ye)約 1ml 至培養瓶中，倒(dao)置(zhi)顯微鏡下(xia)觀(guan)察(cha)，待細胞(bao)回縮變圓後加(jia)入(ru)培養液(ye)終

止(zhi)消化(hua)，輕輕吹打細胞(bao)使之(zhi)脫落，然後(hou)將(jiang)懸液(ye)轉(zhuan)移至 15ml 離心管(guan)中(zhong)，1000rpm 離心 5min；

3）用適量(liang)的凍(dong)存(cun)液(ye)（FBS：DMSO=9 ：1）重懸細胞(bao)，並(bing)放置(zhi)於凍(dong)存(cun)管(guan)中(zhong)；

4）先(xian)將細胞(bao)凍(dong)存(cun)管(guan)放(fang)置(zhi)於-20℃ 1.5h，然後(hou)將(jiang)其移入-80℃過夜(ye)，24h 後轉(zhuan)入(ru)液(ye)氮中(zhong)進行(xing)長(chang)期保存(cun)。使用程(cheng)序

降溫盒可直接(jie)放(fang)入-80℃。

二、細胞(bao)培養操作

1) 復(fu)蘇細胞(bao)：以下(xia)細胞(bao)培養凍(dong)存(cun)處理(li)僅(jin)供(gong)參考，具(ju)體(ti)操(cao)作(zuo)步驟以隨貨(huo)產(chan)品(pin)說(shuo)明(ming)書(shu)為主。將含有(you)1 mL細胞(bao)懸液(ye)的凍(dong)存(cun)管(guan)在(zai) 37℃水(shui)浴中迅(xun)速搖(yao)晃解(jie)凍(dong)，加(jia)4 mL培養基混合均勻(yun)。在1000 rpm條件(jian)下(xia)離心3 min，棄(qi)去(qu)上清液(ye)，加1-2 mL培養基後(hou)吹勻(yun)。然後(hou)將(jiang)所有(you)細胞(bao)懸液(ye)加入(ru)含適量(liang)培養基的培養瓶中培養過夜(ye)（或將(jiang)細胞(bao)懸液(ye)加入(ru)10 cm皿中(zhong)，加(jia)入約(yue)8 mL培養基，培養過夜(ye)）。第二天(tian)換液(ye)並(bing)檢查(zha)細胞(bao)密度。

2) 細胞(bao)傳(chuan)代(dai)：如(ru)果(guo)細胞(bao)密度達 80%-90%，即(ji)可進行(xing)傳(chuan)代(dai)培養。

a、棄(qi)去(qu)培養上清，用不(bu)含(han)鈣、鎂(mei)離子(zi)的PBS潤洗細胞(bao)1-2次。

b、加(jia)1 mL消(xiao)化(hua)液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培養瓶中，使消(xiao)化(hua)液(ye)浸潤所有(you)細胞(bao)，將培養瓶置(zhi)於37℃培養箱(xiang)中消(xiao)化(hua)1-2 min（視細胞(bao)情況而定），然後(hou)在(zai)顯微鏡下(xia)觀(guan)察(cha)細胞(bao)消化(hua)情況，若(ruo)細胞(bao)大部(bu)分變圓(yuan)並(bing)脫落，迅(xun)速拿(na)回操作(zuo)臺，輕敲幾下(xia)培養瓶後加2-3ml培養基終(zhong)止消(xiao)化(hua)。輕輕打勻後(hou)裝入無(wu)菌(jun)離心管(guan)中(zhong)，1000 rpm離心5 min，棄(qi)去(qu)上清液(ye)，補加(jia)1-2 mL培養液(ye)後吹(chui)勻。

c、將(jiang)細胞(bao)懸液(ye)按1:2比(bi)例(li)分到(dao)新(xin)的含8 mL培養基的新皿中或者(zhe)瓶中(zhong)，置(zhi)於培養箱(xiang)中培養。 3) 細胞(bao)凍(dong)存(cun)：待細胞(bao)生長(chang)狀態良(liang)好(hao)時，可進行(xing)細胞(bao)凍(dong)存(cun)。下(xia)面(mian) T25 瓶(ping)為例；a、收集(ji)細胞(bao)及細胞(bao)培養液(ye)，裝入(ru)無(wu)菌(jun)離心管(guan)中(zhong)，1000 rpm條件(jian)下(xia)離心4 min，棄(qi)去(qu)上清液(ye)，用PBS清洗壹遍(bian)，棄(qi)盡PBS，進(jin)行(xing)細胞(bao)計數(shu)。

b、根(gen)據(ju)細胞(bao)數量(liang)加(jia)入(ru)無(wu)血清細胞(bao)凍(dong)存(cun)液(ye)，使細胞(bao)密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍(dong)存(cun)管(guan)凍(dong)存(cun)1mL細胞(bao)懸液(ye)，註意(yi)凍(dong)存(cun)管(guan)做(zuo)好(hao)標識。將凍(dong)存(cun)管(guan)放(fang)入(ru)-80℃冰(bing)箱(xiang)，24 h後轉(zhuan)入(ru)液(ye)氮灌(guan)儲存(cun)。記(ji)錄凍(dong)存(cun)管(guan)位(wei)置(zhi)以便下(xia)次拿(na)取(qu)。

三、培養註意(yi)事項(xiang) 

1. 收到(dao)細胞(bao)後首(shou)先(xian)觀(guan)察(cha)細胞(bao)瓶是(shi)否完(wan)好(hao)，培養液(ye)是否有(you)漏(lou)液(ye)、渾濁等現象(xiang)，若(ruo)有上述現象 發(fa)生(sheng)請及(ji)時和我們聯系。

2. 仔(zai)細閱(yue)讀細胞(bao)說明(ming)書(shu)，了(le)解(jie)細胞(bao)相(xiang)關(guan)信(xin)息(xi)，如(ru)細胞(bao)形態、所(suo)用(yong)培養基、血清比(bi)例(li)、所(suo)需(xu) 細胞(bao)因子(zi)等，確保細胞(bao)培養條件(jian)壹致(zhi)，若(ruo)由(you)於培養條件(jian)不(bu)壹致(zhi)而導(dao)致細胞(bao)出(chu)現問題(ti)，責任由(you) 客(ke)戶自行(xing)承(cheng)擔(dan)。

3. 用(yong) 75%酒精(jing)擦(ca)拭(shi)細胞(bao)瓶表(biao)面(mian)，顯微鏡下(xia)觀(guan)察(cha)細胞(bao)狀態。因運輸問題(ti)，部(bu)分細胞(bao)由(you)於溫(wen)度 變化(hua)及(ji)劇烈(lie)碰亡破碎形成碎片(pian)，是正(zheng)常現象。觀(guan)察(cha)好(hao)細胞(bao)狀態後(hou)，75%酒精(jing)消毒瓶(ping)壁(bi)將 T25 瓶(ping)置(zhi)於 37℃培養箱(xiang)放置(zhi) 2-4h。

4. 貼(tie)壁(bi)細胞(bao)可以消化(hua)，懸浮細胞(bao)直接(jie)混勻收集(ji)細胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，棄(qi)上(shang) 清。加 5 mL PBS 重(zhong)懸細胞(bao)，再 900 rpm-1000 rpm 離心 3 min，用新(xin)鮮(xian)的培養基重(zhong)懸 細胞(bao)，並(bing)接種到(dao)新(xin)的培養瓶或培養皿中，置(zhi)於培養箱(xiang)中進(jin)行(xing)培養。

5. 請客(ke)戶用相(xiang)同條件(jian)的培養基用(yong)於細胞(bao)培養。

6. 建(jian)議客(ke)戶收到(dao)細胞(bao)後前(qian) 3 天(tian)各拍幾張細胞(bao)照片(pian)，記(ji)錄細胞(bao)狀態，便於和(he)我司技術(shu)部(bu)溝(gou)通(tong) 交(jiao)流(liu)。由(you)於運(yun)輸的原因，個別(bie)敏感(gan)細胞(bao)會出(chu)現不(bu)穩(wen)定的情況，請及(ji)時和我們聯系，告知細胞(bao) 的具(ju)體(ti)情況，以便我(wo)們(men)的技術(shu)人(ren)員(yuan)跟蹤回(hui)訪直(zhi)至問題(ti)解(jie)決。

7. 該細胞(bao)僅(jin)供(gong)科研(yan)使用。

8. 備(bei)註：運輸(shu)用的培養基 (灌(guan)液(ye)培養基) 不(bu)能(neng)再用(yong)來培養細胞(bao)，請換(huan)用按照說(shuo)明(ming)書(shu)細胞(bao)培 養條件(jian)新(xin)配制(zhi)的培養基來(lai)培養細胞(bao)。     收到(dao)細胞(bao)後第壹次傳(chuan)代(dai)建(jian)議 1：2 傳(chuan)代(dai) 。

9. 註意(yi)：  1:2 傳(chuan)代(dai)就(jiu)是(shi) 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個 T25 瓶(ping)或者(zhe) 2 個 6cm 皿(min)。不是 1 個 T25 瓶傳(chuan) 2 個10cm 皿(min)。

公(gong)司正(zheng)在(zai)出(chu)售(shou)的產(chan)品(pin)：

小鼠(shu)肺微(wei)血管(guan)內(nei)皮細胞(bao)培養基 100mL 大(da)鼠(shu)纖(xian)維蛋白原(FG)ELISA試劑盒 PDGF-BB(Human Platelet-Derived Growth Factor-BB)  人(ren)血小板(ban)衍生(sheng)生長(chang)因子(zi)BB 96T

7-Mar： 膜相(xiang)關(guan)環(huan)指(zhi)蛋白7抗體(ti) BEL-7405細胞(bao)，肝(gan)癌細胞(bao) 膀(pang)胱癌(ai)細胞(bao),BI U-87細胞(bao) 615小鼠(shu)樹(shu)突狀細胞(bao)肉瘤瘤株;DCS

ESAM Others Rat 大鼠(shu) ESAM / Endothelial Cell Adhesion Molecule 人(ren)細胞(bao)裂解(jie)液(ye) (陽性(xing)對照) 大(da)鼠(shu)纖(xian)維蛋白原(Fbg)ELISA試劑盒 ANG- II (Mouse angiotension II )  小鼠(shu)血管(guan)緊張素Ⅱ 96T

8-Mar： 膜相(xiang)關(guan)環(huan)指(zhi)蛋白8抗體(ti) 人(ren)腸(chang)微血管(guan)內(nei)皮細胞(bao)總RNAHIMEC NA

293-mTLR5 人(ren)胚(pei)腎細胞(bao) Human embryonic kidney cell line 293-mTLR5 DMEM+10% FBS+10ug/ml Blasticidin 大鼠(shu)纖(xian)維蛋白原(Fb)ELISA試劑盒 TBA  大鼠(shu)總(zong)膽(dan)汁(zhi)酸 96T

HDLBP： 高密度脂蛋白結(jie)合蛋白抗體(ti) VWF Others Human 人(ren) vWF CHO細胞(bao)裂解(jie)液(ye) (陽性(xing)對照)

人(ren)淋巴(ba)成纖維(wei)細胞(bao)培養基 100mL 人(ren)雕亡誘導(dao)因子(zi)(AIF)ELISA 試劑(ji)盒 glypican 1 0脂酰(xian)基醇(chun)蛋白聚糖-1抗原 0.5mg

HNF3-alpha： 轉(zhuan)錄因子(zi)HNF-3α抗體(ti) 婆(po)羅(luo)門牛皮(pi)膚(fu)成纖維(wei)樣(yang)細胞(bao);BOS-3 神(shen)經母(mu)細胞(bao)瘤，SK-N-SH細胞(bao) SW-13(腎上腺(xian)皮(pi)質腺癌(ai)細胞(bao))

EPHB6 Others Cynomolgus 食蟹猴 EphB6 / EphB6 人(ren)細胞(bao)裂解(jie)液(ye) (陽性(xing)對照) 人(ren)雕亡信號(hao)調(tiao)節(jie)激酶(mei)I(ASK-1)ELISA 試劑(ji)盒 GPC3(glypican 3; Intestinal protein OCI-5; GTR2-2; MXR7) 0脂酰(xian)基醇(chun)蛋白聚糖-3(多(duo)肽) 0.5mg

HSPB7： 熱休(xiu)克(ke)蛋白β7抗體(ti) CM-M120小(xiao)鼠(shu)角(jiao)膜上(shang)皮(pi)細胞(bao)培養基100mL

MT-4人(ren)急性(xing)淋(lin)巴(ba)母(mu)細胞(bao)白血病(bing)細胞(bao)NAMALWA 人(ren)Butt`s淋巴(ba)瘤細胞(bao) 大鼠(shu)多(duo)巴胺(an)受(shou)體(ti)D3(DRD3)ELISA試(shi)劑(ji)盒 ADM(Human adrenomedullin)  人(ren)腎上腺(xian)髓(sui)質(zhi)素 96T

Phospho-Paxillin (Tyr118)： 0酸化(hua)樁(zhuang)蛋白Paxillin抗體(ti) HT-1080細胞(bao)，人(ren)纖維(wei)肉瘤 人(ren)管(guan)癌(ai)細胞(bao),T47D細胞(bao) 小膠(jiao)質(zhi)細胞(bao)生長(chang)添加物MGS

MYOC Others Human 人(ren) MYOC / Myocilin 人(ren)細胞(bao)裂解(jie)液(ye) (陽性(xing)對照) 大(da)鼠(shu)多(duo)巴胺(an)受(shou)體(ti)D2(DRD2)ELISA試(shi)劑(ji)盒 IL-10 mouse  小鼠(shu)白介素10 96T

PIM1： 絲酸/蘇酸(suan)激酶(mei)蛋白Pim1抗體(ti) 斑(ban)馬魚(yu)尾(wei)鰭細胞(bao);AB.9

MG-63, 人(ren)骨肉瘤細胞(bao) 大鼠(shu)多(duo)巴胺(an)受(shou)體(ti)D1(DRD1)ELISA試(shi)劑(ji)盒 irGH(Human Immunoreactive growth hormone)  人(ren)免疫反(fan)應性(xing)生(sheng)長(chang)激素 96T