MB49小(xiao)鼠膀(pang)胱癌(ai)細胞

公司(si)產(chan)品(pin)僅(jin)供(gong)科研(yan)研(yan)究使(shi)用、不得(de)用(yong)於(yu)臨(lin)床診斷！

1、細胞傳(chuan)代：

1）細胞生長(chang)至(zhi)覆蓋培(pei)養(yang)瓶(ping)的(de) 80%面積(ji)時(shi)，棄 25cm2培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)的培(pei)養(yang)液，用 PBS 清(qing)洗(xi)細胞壹次；

2）添加(jia) 0.25%消化(hua)液約(yue) 1ml 至培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)，倒置顯微(wei)鏡下觀察，待細胞回縮變圓後(hou)加(jia)入 5ml 培(pei)養(yang)

液終止消化(hua)，再輕(qing)輕吹(chui)打細胞使之脫(tuo)落，然後將懸液轉(zhuan)移(yi)至(zhi) 15ml 離心(xin)管(guan)中(zhong)，1000rpm 離心(xin) 5min；

3）棄(qi)上清(qing)，沈澱(dian)細胞用 1-2ml 培(pei)養(yang)基(ji)重(zhong)懸，然後按(an) 1:2 比(bi)例進行分(fen)瓶(ping)傳(chuan)代，最(zui)後(hou)放入 37℃，5%CO2細胞

培(pei)養(yang)箱中(zhong)培(pei)養(yang)；

2、細胞凍存(cun)：

1）細胞生長(chang)至(zhi)覆蓋培(pei)養(yang)瓶(ping)的(de) 80%面積(ji)時(shi)，棄 25cm2培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)的培(pei)養(yang)液，用 PBS 清(qing)洗(xi)細胞壹次；

2）添加(jia) 0.25%消化(hua)液約(yue) 1ml 至培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)，倒置顯微(wei)鏡下觀察，待細胞回縮變圓後(hou)加(jia)入培(pei)養(yang)液終

止消化(hua)，輕輕(qing)吹打細胞使之脫(tuo)落，然後將懸液轉(zhuan)移(yi)至(zhi) 15ml 離心(xin)管(guan)中(zhong)，1000rpm 離心(xin) 5min；

3）用(yong)適(shi)量的凍存(cun)液（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸細胞，並(bing)放置於凍存(cun)管(guan)中(zhong)；

4）先(xian)將細胞凍存(cun)管(guan)放置於-20℃ 1.5h，然後將其(qi)移(yi)入-80℃過(guo)夜(ye)，24h 後(hou)轉(zhuan)入液氮(dan)中(zhong)進行長(chang)期(qi)保存(cun)。使用(yong)程(cheng)序

降溫盒可直(zhi)接放入-80℃。

二、細胞培(pei)養(yang)操作(zuo)

1) 復蘇(su)細胞：以下細胞培(pei)養(yang)凍存(cun)處理(li)僅(jin)供(gong)參(can)考(kao)，具體(ti)操作(zuo)步驟(zhou)以(yi)隨(sui)貨(huo)產品(pin)說(shuo)明書為(wei)主(zhu)。將含(han)有(you)1 mL細胞懸液的(de)凍存(cun)管(guan)在 37℃水(shui)浴(yu)中(zhong)迅速(su)搖(yao)晃(huang)解凍，加4 mL培(pei)養(yang)基(ji)混(hun)合均勻(yun)。在1000 rpm條件(jian)下離心(xin)3 min，棄(qi)去上(shang)清液，加1-2 mL培(pei)養(yang)基(ji)後(hou)吹(chui)勻(yun)。然後將所有細胞懸液加(jia)入含適(shi)量培(pei)養(yang)基(ji)的(de)培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)培(pei)養(yang)過(guo)夜(ye)（或(huo)將細胞懸液加(jia)入10 cm皿(min)中(zhong)，加入約8 mL培(pei)養(yang)基(ji)，培(pei)養(yang)過(guo)夜(ye)）。第二天(tian)換(huan)液並(bing)檢查(zha)細胞密度(du)。

2) 細胞傳(chuan)代：如果(guo)細胞密度(du)達(da) 80%-90%，即(ji)可(ke)進行傳(chuan)代培(pei)養(yang)。

a、棄去培(pei)養(yang)上清，用(yong)不(bu)含(han)鈣(gai)、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

b、加1 mL消化(hua)液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培(pei)養(yang)瓶(ping)中(zhong)，使消化(hua)液浸(jin)潤所有細胞，將培(pei)養(yang)瓶(ping)置於37℃培(pei)養(yang)箱中(zhong)消化(hua)1-2 min（視(shi)細胞情況而定），然後在顯微(wei)鏡下觀察細胞消化(hua)情況(kuang)，若(ruo)細胞大部分(fen)變圓並(bing)脫(tuo)落，迅速(su)拿(na)回操(cao)作(zuo)臺，輕(qing)敲(qiao)幾(ji)下培(pei)養(yang)瓶(ping)後(hou)加2-3ml培(pei)養(yang)基(ji)終止消化(hua)。輕輕(qing)打勻(yun)後裝入無(wu)菌(jun)離心(xin)管(guan)中(zhong)，1000 rpm離心(xin)5 min，棄(qi)去上(shang)清液，補加1-2 mL培(pei)養(yang)液後吹(chui)勻(yun)。

c、將細胞懸液按(an)1:2比(bi)例分(fen)到(dao)新(xin)的含8 mL培(pei)養(yang)基(ji)的(de)新(xin)皿(min)中(zhong)或者(zhe)瓶(ping)中(zhong)，置於培(pei)養(yang)箱中(zhong)培(pei)養(yang)。 3) 細胞凍存(cun)：待細胞生長(chang)狀(zhuang)態(tai)良(liang)好時(shi)，可進行細胞凍存(cun)。下面 T25 瓶(ping)為(wei)例；a、收(shou)集(ji)細胞及細胞培(pei)養(yang)液，裝入無(wu)菌(jun)離心(xin)管(guan)中(zhong)，1000 rpm條件(jian)下離心(xin)4 min，棄(qi)去上(shang)清液，用PBS清洗(xi)壹遍(bian)，棄盡PBS，進行細胞計數。

b、根據(ju)細胞數量加入無(wu)血(xue)清(qing)細胞凍存(cun)液，使(shi)細胞密度(du)5×106~1×107/mL，輕輕混(hun)勻(yun)，每(mei)支凍存(cun)管(guan)凍存(cun)1mL細胞懸液，註(zhu)意(yi)凍存(cun)管(guan)做好(hao)標識。將凍(dong)存(cun)管(guan)放入-80℃冰(bing)箱，24 h後(hou)轉(zhuan)入液氮(dan)灌儲存(cun)。記(ji)錄(lu)凍(dong)存(cun)管(guan)位置以便(bian)下次拿(na)取。

公司(si)正(zheng)在出(chu)售(shou)的產品：

IL35 Protein Human 重(zhong)組人 IL-35 (IL12A & IL27B) 蛋白 (Fc 標(biao)簽) 大鼠乳(ru)過(guo)氧(yang)化(hua)物酶(LPO)ELISA試(shi)劑盒 Lp- Alpha(Mouse lipoprotein Alpha)  小(xiao)鼠脂(zhi)蛋白α 96T

NEK3： 絲酸(suan)/蘇(su)酸(suan)蛋白激(ji)酶Nek3抗體(ti) VP0 Others Human Eerovirus 71 人腸道(dao)病(bing)毒71型(xing) VP0 桿(gan)狀病(bing)毒-昆(kun)蟲細胞裂解液 (陽性對(dui)照(zhao))

小(xiao)鼠前脂(zhi)肪(fang)細胞培(pei)養(yang)基(ji) 100mL 大鼠肉堿棕(zong)櫚酰(xian)轉(zhuan)移(yi)酶(mei)Ⅰ(CPT1)ELISA試(shi)劑盒 Beta-EP(human Beta-Endorphin)  人β內(nei)啡(fei)肽(tai) 96T

NEK2： 中(zhong)心體(ti)相關蛋白激(ji)酶Nek2抗體(ti) V79-4細胞，中(zhong)國倉鼠肺(fei)細胞 人直(zhi)腸腺癌(ai)細胞系,HRC-99細胞 CM-R077大鼠血(xue)管(guan)外膜(mo)成纖維(wei)細胞培(pei)養(yang)基(ji)100mL

IFNAR1 Others Human 人 IFNAR1 / IFNAR 人細胞裂解液 (陽性對(dui)照(zhao)) 大鼠肉毒堿(jian)棕(zong)櫚酰(xian)基(ji)轉(zhuan)移(yi)酶(mei)2(CPT2)ELISA試(shi)劑盒 FFA  大鼠遊(you)離脂(zhi)肪(fang)酸(suan) 96T

CFHR2 Others Human 人 CFHR2 / FHR2 / HFL3 人細胞裂解液 (陽性對(dui)照(zhao)) 人Ⅲ型(xing)膠原(yuan)(Col Ⅲ)ELISA 試(shi)劑盒 BTG2/TIS21(B-cell translocation gene 2) BTG2(抗原(yuan)) 0.5mg

IL-31： 白細胞介素(su)31抗體(ti) 中(zhong)國倉鼠卵巢(chao)細胞(亞(ya)系(xi)克隆(long));CHO-DUKXB11-prepro-TGFβ2 cDNA-TGF-β Dinding Protein cDNA

BRL大鼠Buffalo細胞，大鼠肝(gan)細胞 SH-SY5Y(神經(jing)母(mu)細胞瘤細胞) 人肺(fei)粘(zhan)液上(shang)皮樣(yang)癌細胞;NCI-H292 人Ⅲ型(xing)膠原(yuan)(Col Ⅲ)ELISA 試(shi)劑盒 C-jun/AP-1 (Oncoprotein C-jun：active protein 1) 原(yuan)癌(ai)基(ji)因(yin)蛋白(活(huo)化(hua)蛋白1)(抗(kang)原(yuan)) 0.5mg

IFI78： 幹(gan)擾素(su)誘(you)導蛋(dan)白P78抗(kang)體(ti) IL18R1 Others Mouse 小(xiao)鼠 IL18R1 / CD218a 人細胞裂解液 (陽性對(dui)照(zhao))

人外根殼(ke)細胞RNAHHORSC miRNA5 μg 人Ⅱ型(xing)膠原(yuan)螺(luo)旋肽(tai)(HELIX-Ⅱ)ELISA 試(shi)劑盒 cyclin D1 周期1(抗原(yuan)) 0.5mg

MB49小(xiao)鼠膀(pang)胱癌(ai)細胞ROS1： 活(huo)性氧(yang)簇(cu)ROS抗(kang)體(ti) CL-0401NCI-H446(人小(xiao)細胞肺(fei)癌(ai)細胞)5×106cells/瓶(ping)×2

大鼠骨(gu)髓間(jian)充質幹(gan)細胞(BMSCs) 大鼠白介(jie)素(su)17B(IL17B)ELISA試(shi)劑盒 ADAM8(Human A Disintegrin And Metalloprotease 8)  人解整合素(su)樣(yang)金屬(shu)蛋(dan)白酶(mei)8 96T

phospho-RAC1(Ser71)： 0酸(suan)化(hua)細胞遷(qian)移(yi)誘(you)導因(yin)子5抗體(ti) EDEM2 Others Human 人 EDEM2 / C20orf31 人細胞裂解液 (陽性對(dui)照(zhao))

CHL 中(zhong)國倉鼠肺(fei)細胞 大鼠白介(jie)素(su)17(IL-17)ELISA試(shi)劑盒 Gzms-B(Human granzymes B)  人顆粒(li)酶B 96T

Phospho-RelB(Ser573)： 0酸(suan)化(hua)核(he)轉(zhuan)錄(lu)因(yin)子NFKB-RelB蛋白抗(kang)體(ti) MDBK細胞，牛腎細胞 人慢(man)性髓原(yuan)白血(xue)病(bing)細胞,K562細胞 人胚(pei)胎，皮膚，肌肉;M-22

三、培(pei)養(yang)註意(yi)事(shi)項(xiang) 

1. 收(shou)到(dao)細胞後首(shou)先(xian)觀(guan)察細胞瓶(ping)是否完(wan)好，培(pei)養(yang)液是否有漏液、渾(hun)濁(zhuo)等現象(xiang)，若(ruo)有(you)上述(shu)現象(xiang) 發(fa)生請及(ji)時(shi)和我(wo)們(men)聯系。

2. 仔(zai)細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信(xin)息(xi)，如細胞形態(tai)、所用培(pei)養(yang)基(ji)、血(xue)清(qing)比(bi)例、所需 細胞因(yin)子等，確保細胞培(pei)養(yang)條件(jian)壹致，若(ruo)由(you)於(yu)培(pei)養(yang)條件(jian)不壹(yi)致而導(dao)致細胞出現問(wen)題(ti)，責(ze)任(ren)由(you) 客(ke)戶自(zi)行承(cheng)擔。

3. 用 75%酒精擦(ca)拭細胞瓶(ping)表面，顯微(wei)鏡下觀察細胞狀態(tai)。因(yin)運輸問(wen)題(ti)，部(bu)分(fen)細胞由(you)於(yu)溫度(du) 變化(hua)及劇(ju)烈碰亡破(po)碎形成碎片(pian)，是正(zheng)常(chang)現象(xiang)。觀(guan)察好細胞狀態(tai)後(hou)，75%酒精消毒瓶(ping)壁(bi)將 T25 瓶(ping)置於 37℃培(pei)養(yang)箱放置 2-4h。

4. 貼壁細胞可以消化(hua)，懸浮細胞直(zhi)接混(hun)勻(yun)收(shou)集(ji)細胞，900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，棄(qi)上 清(qing)。加 5 mL PBS 重懸細胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，用(yong)新(xin)鮮(xian)的培(pei)養(yang)基(ji)重(zhong)懸 細胞，並(bing)接種到(dao)新(xin)的培(pei)養(yang)瓶(ping)或(huo)培(pei)養(yang)皿(min)中(zhong)，置於培(pei)養(yang)箱中(zhong)進行培(pei)養(yang)。

5. 請客(ke)戶用(yong)相(xiang)同(tong)條件(jian)的培(pei)養(yang)基(ji)用(yong)於(yu)細胞培(pei)養(yang)。

6. 建議客(ke)戶收(shou)到(dao)細胞後前 3 天(tian)各(ge)拍(pai)幾(ji)張細胞照(zhao)片(pian)，記(ji)錄(lu)細胞狀態(tai)，便(bian)於和我(wo)司(si)技術(shu)部溝通 交流。由(you)於(yu)運輸的原(yuan)因(yin)，個別敏(min)感(gan)細胞會出(chu)現不穩(wen)定的情(qing)況，請(qing)及(ji)時(shi)和我(wo)們(men)聯系，告(gao)知細胞 的具體(ti)情況(kuang)，以便(bian)我們(men)的技(ji)術人員(yuan)跟蹤回訪(fang)直(zhi)至問(wen)題(ti)解決。

7. 該(gai)細胞僅(jin)供(gong)科研(yan)使用(yong)。

8. 備註：運(yun)輸用的培(pei)養(yang)基(ji) (灌液培(pei)養(yang)基(ji)) 不(bu)能再用(yong)來培(pei)養(yang)細胞，請換(huan)用按(an)照(zhao)說(shuo)明書細胞培(pei) 養(yang)條件(jian)新(xin)配制的(de)培(pei)養(yang)基(ji)來(lai)培(pei)養(yang)細胞。     收(shou)到(dao)細胞後第壹(yi)次傳(chuan)代建議 1：2 傳(chuan)代 。

9. 註意(yi)：  1:2 傳(chuan)代就(jiu)是 1 個 T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個(ge) T25 瓶(ping)或(huo)者(zhe) 2 個 6cm 皿(min)。不是 1 個 T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個(ge)10cm 皿(min)。