MKN-74人(ren)胃(wei)癌(ai)細胞

公司產(chan)品(pin)僅供科研(yan)研(yan)究使用(yong)、不得用(yong)於臨床診斷！

1、細胞傳(chuan)代(dai)：

1）細胞生(sheng)長至(zhi)覆(fu)蓋培(pei)養瓶(ping)的(de) 80%面(mian)積(ji)時(shi)，棄(qi) 25cm2培(pei)養瓶(ping)中的(de)培(pei)養(yang)液(ye)，用(yong) PBS 清洗細胞壹(yi)次(ci)；

2）添(tian)加 0.25%消(xiao)化液(ye)約(yue) 1ml 至(zhi)培(pei)養瓶(ping)中，倒置(zhi)顯(xian)微(wei)鏡下觀察，待(dai)細胞回(hui)縮(suo)變圓(yuan)後(hou)加(jia)入(ru) 5ml 培(pei)養(yang)

液(ye)終(zhong)止(zhi)消(xiao)化，再(zai)輕輕吹(chui)打(da)細胞使(shi)之脫(tuo)落(luo)，然(ran)後(hou)將懸(xuan)液(ye)轉(zhuan)移至(zhi) 15ml 離(li)心管中，1000rpm 離(li)心 5min；

3）棄(qi)上清，沈澱(dian)細胞用(yong) 1-2ml 培(pei)養基(ji)重(zhong)懸(xuan)，然(ran)後(hou)按 1:2 比例(li)進(jin)行(xing)分(fen)瓶(ping)傳(chuan)代(dai)，最後放(fang)入(ru) 37℃，5%CO2細胞

培(pei)養(yang)箱(xiang)中培養(yang)；

2、細胞凍存：

1）細胞生(sheng)長至(zhi)覆(fu)蓋培(pei)養瓶(ping)的(de) 80%面(mian)積(ji)時(shi)，棄(qi) 25cm2培(pei)養瓶(ping)中的(de)培(pei)養(yang)液(ye)，用(yong) PBS 清洗細胞壹(yi)次(ci)；

2）添(tian)加 0.25%消(xiao)化液(ye)約(yue) 1ml 至(zhi)培(pei)養瓶(ping)中，倒置(zhi)顯(xian)微(wei)鏡下觀察，待(dai)細胞回(hui)縮(suo)變圓(yuan)後(hou)加(jia)入(ru)培(pei)養(yang)液(ye)終(zhong)

止(zhi)消(xiao)化，輕輕吹(chui)打(da)細胞使(shi)之脫(tuo)落(luo)，然(ran)後(hou)將懸(xuan)液(ye)轉(zhuan)移至(zhi) 15ml 離(li)心管中，1000rpm 離(li)心 5min；

3）用(yong)適量的(de)凍存液(ye)（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸(xuan)細胞，並(bing)放(fang)置(zhi)於凍存管中；

4）先(xian)將細胞凍存管放(fang)置(zhi)於-20℃ 1.5h，然(ran)後(hou)將其移入(ru)-80℃過(guo)夜(ye)，24h 後轉入(ru)液(ye)氮中進行(xing)長期保存。使用(yong)程(cheng)序

降(jiang)溫盒可直(zhi)接(jie)放(fang)入(ru)-80℃。

二(er)、細胞培(pei)養(yang)操作

1) 復(fu)蘇細胞：以下細胞培(pei)養(yang)凍存處理僅供參考(kao)，具(ju)體(ti)操作步(bu)驟以隨貨(huo)產(chan)品說明(ming)書為(wei)主。將(jiang)含(han)有(you)1 mL細胞懸(xuan)液(ye)的(de)凍存管在 37℃水(shui)浴中迅速(su)搖(yao)晃(huang)解(jie)凍，加4 mL培(pei)養基(ji)混合(he)均(jun)勻。在1000 rpm條件下離(li)心3 min，棄(qi)去(qu)上清液(ye)，加(jia)1-2 mL培養(yang)基(ji)後吹(chui)勻(yun)。然(ran)後(hou)將所有(you)細胞懸(xuan)液(ye)加(jia)入(ru)含(han)適量培養(yang)基(ji)的(de)培(pei)養(yang)瓶(ping)中培養(yang)過(guo)夜(ye)（或將細胞懸(xuan)液(ye)加(jia)入(ru)10 cm皿中，加入(ru)約(yue)8 mL培養基(ji)，培養(yang)過(guo)夜(ye)）。第二天(tian)換(huan)液(ye)並(bing)檢查細胞密(mi)度(du)。

2) 細胞傳(chuan)代(dai)：如果細胞密(mi)度(du)達(da) 80%-90%，即(ji)可進(jin)行(xing)傳(chuan)代(dai)培養(yang)。

a、棄(qi)去(qu)培養(yang)上清，用(yong)不含鈣、鎂離(li)子(zi)的(de)PBS潤洗細胞1-2次(ci)。

b、加(jia)1 mL消(xiao)化液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培(pei)養瓶(ping)中，使消(xiao)化液(ye)浸(jin)潤所有(you)細胞，將(jiang)培(pei)養瓶(ping)置於37℃培(pei)養箱(xiang)中消(xiao)化1-2 min（視(shi)細胞情(qing)況(kuang)而定），然(ran)後(hou)在顯(xian)微(wei)鏡下觀察細胞消(xiao)化情(qing)況(kuang)，若(ruo)細胞大(da)部(bu)分(fen)變圓(yuan)並(bing)脫(tuo)落(luo)，迅速(su)拿回操作臺(tai)，輕敲(qiao)幾下培(pei)養(yang)瓶(ping)後加(jia)2-3ml培(pei)養(yang)基(ji)終(zhong)止(zhi)消(xiao)化。輕輕打(da)勻(yun)後(hou)裝(zhuang)入(ru)無菌(jun)離(li)心管中，1000 rpm離(li)心5 min，棄(qi)去(qu)上清液(ye)，補(bu)加1-2 mL培(pei)養(yang)液(ye)後(hou)吹(chui)勻(yun)。

c、將(jiang)細胞懸(xuan)液(ye)按1:2比例(li)分(fen)到新的(de)含(han)8 mL培(pei)養(yang)基(ji)的(de)新皿中或者(zhe)瓶(ping)中，置於培(pei)養箱(xiang)中培養(yang)。 3) 細胞凍存：待細胞生(sheng)長狀(zhuang)態良(liang)好時，可進(jin)行(xing)細胞凍存。下面(mian) T25 瓶(ping)為(wei)例(li)；a、收集細胞及(ji)細胞培(pei)養(yang)液(ye)，裝(zhuang)入(ru)無菌(jun)離(li)心管中，1000 rpm條件下離(li)心4 min，棄(qi)去(qu)上清液(ye)，用(yong)PBS清洗壹(yi)遍，棄(qi)盡(jin)PBS，進行(xing)細胞計(ji)數(shu)。

b、根據(ju)細胞數(shu)量(liang)加入(ru)無血(xue)清細胞凍存液(ye)，使(shi)細胞密(mi)度(du)5×106~1×107/mL，輕輕混勻(yun)，每(mei)支凍存管凍存1mL細胞懸(xuan)液(ye)，註意(yi)凍存管做好標識。將(jiang)凍存管放(fang)入(ru)-80℃冰(bing)箱(xiang)，24 h後轉(zhuan)入(ru)液(ye)氮灌儲(chu)存。記錄(lu)凍存管位(wei)置以便(bian)下次(ci)拿(na)取。

公(gong)司正(zheng)在出(chu)售(shou)的(de)產(chan)品(pin)：

IL1RN Protein Rat 重(zhong)組大鼠 IL-1RA / IL1RN 蛋(dan)白(bai) (Fc 標(biao)簽(qian)) 大鼠相(xiang)關血(xue)漿蛋(dan)白(bai)A(PAPP-A)ELISA 試(shi)劑(ji)盒(he) CACT  大鼠肉(rou)毒(du)堿(jian)脂酰(xian)轉移(yi)酶(mei) 96T

MAdCAM-1： 粘(zhan)膜血(xue)管定居(ju)因子抗體(ti) PAK3 Others Human 人(ren) PAK3 桿(gan)狀(zhuang)病(bing)毒(du)-昆(kun)蟲細胞裂(lie)解(jie)液(ye) (陽(yang)性(xing)對(dui)照)

大(da)鼠視(shi)網膜(mo)神經節細胞培(pei)養(yang)基(ji) 100mL 大鼠腺苷(gan)酸(suan)環(huan)化酶(mei)1(AC-1)ELISA試劑盒 C3a (Rabbit Complement fragment 3a)  兔子補(bu)體(ti)片(pian)斷(duan)3a 96T

Maspin： 抑(yi)癌基(ji)因抗體(ti) SMC-1細胞，胸(xiong)膜(mo)細胞瘤(liu) 早(zao)幼粒急性(xing)白(bai)血(xue)病細胞系(xi),HL-60細胞 小(xiao)鼠子(zi)細胞;U14

HA Others H12N1 甲(jia)型流感(gan) H12N1 (A/mallard duck/Alberta/342/1983) 血(xue)凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂(lie)解(jie)液(ye) (陽(yang)性(xing)對(dui)照) 大鼠腺苷(gan)受體A2a(ADORA2A)ELISA試劑盒(he) LZM(Mouse Lysozyme)  小(xiao)鼠 96T

HCMV UL49： 人(ren)巨細胞病(bing)毒(du)UL49蛋(dan)白(bai)抗體(ti) 動(dong)物上皮細胞生(sheng)長添(tian)加物-aEpiCGS-2-a

PPBP Protein Human 重(zhong)組人 NAP-2 / PPBP / CXCL7 蛋(dan)白(bai) (His 標(biao)簽(qian)) 人二(er)0酸(suan)腺苷(gan)(ADP)ELISA 試劑盒 FSH-R(Follicle-stimulating hormone receptor precursor) 促(cu)卵泡刺激素受體(ti)抗原(yuan) 0.5mg

HLA E： 人(ren)類白細胞抗原(yuan)E抗體(ti) NGF Others Mouse 小(xiao)鼠 β-NGF / Beta-NGF CHO細胞裂(lie)解(jie)液(ye) (陽(yang)性(xing)對(dui)照)

人(ren)甲狀腺濾(lv)泡(pao)上皮細胞培(pei)養(yang)基(ji) 100mL 人二(er)級淋(lin)巴組織趨化因(yin)子(SLC/CCL21)ELISA 試(shi)劑盒(he) FSH(Follicle-stimulating hormone precursor) 促(cu)卵泡刺激素抗原(yuan) 0.5mg

HECTD3： E3連(lian)接(jie)酶(mei)抑制素受體(ti)3抗體(ti) 荷(he)蘭黑白(bai)花奶(nai)牛(niu)牛(niu)肺細胞;DCL1 肺腺癌(ai)細胞，SPA-A1細胞 SCaBER(膀胱鱗癌(ai)細胞)

MKN-74人(ren)胃(wei)癌(ai)細胞SERPINF1 Protein Human 重(zhong)組人 SerpinF1 / PEDF 蛋(dan)白(bai) (His 標(biao)簽(qian)) 大鼠二(er)肽(tai)基(ji)肽(tai)酶(mei)Ⅳ(DPPⅣ)ELISA試劑盒 NADPH  大(da)鼠酰(xian)胺腺二(er)核苷酸(suan)0酸(suan) 96T

P英(ying)文名(ming)稱： 親(qin)環蛋(dan)白(bai)(親(qin)環(huan)素)PPIG抗體(ti) STATH Others Human 人(ren) Statherin / STATH 人細胞裂(lie)解(jie)液(ye) (陽(yang)性(xing)對(dui)照)

MuM-2B 人(ren)眼脈(mai)絡(luo)黑色素瘤(liu)細胞 大(da)鼠二(er)肽(tai)基(ji)肽(tai)酶(mei)Ⅳ(DPPⅣ)ELISA 試劑盒 MN(Human metanephrine)  人(ren)變(bian) 96T

Phospho-P(Ser376)： 0酸(suan)化親(qin)環蛋(dan)白(bai)(親(qin)環(huan)素)PPIG抗體(ti) 293sars181A細胞，Sars蛋(dan)白(bai)表(biao)達株(zhu) 人細胞,HBL-100細胞 腎(shen)系(xi)膜(mo)細胞培(pei)養(yang)基(ji)MCM-prf

FST Others Human 人(ren) FST / Follistatin ( FS288 ) 人細胞裂(lie)解(jie)液(ye) (陽(yang)性(xing)對(dui)照) 大鼠二(er)肽(tai)基(ji)肽(tai)酶(mei)Ⅳ(DPP4)ELISA試劑盒 D1R(Human Dopamine D1 receptor)  人(ren)多巴胺D1受體(ti) 96T

三(san)、培養註意(yi)事項 

1. 收到細胞後(hou)首(shou)先(xian)觀察細胞瓶(ping)是(shi)否完(wan)好，培養液(ye)是(shi)否有(you)漏(lou)液(ye)、渾(hun)濁(zhuo)等現(xian)象，若(ruo)有(you)上述現象 發生(sheng)請及時和(he)我(wo)們聯系。

2. 仔細閱讀細胞說明(ming)書，了解細胞相(xiang)關信(xin)息，如細胞形(xing)態、所用(yong)培(pei)養基(ji)、血(xue)清比例(li)、所需 細胞因(yin)子(zi)等，確保(bao)細胞培(pei)養(yang)條件壹(yi)致(zhi)，若由(you)於培(pei)養條件不壹(yi)致(zhi)而導致(zhi)細胞出(chu)現(xian)問題(ti)，責任由(you) 客(ke)戶自(zi)行承擔(dan)。

3. 用(yong) 75%酒精(jing)擦(ca)拭(shi)細胞瓶(ping)表(biao)面，顯(xian)微(wei)鏡下觀察細胞狀(zhuang)態。因(yin)運輸問題(ti)，部(bu)分(fen)細胞由(you)於溫度(du) 變(bian)化及(ji)劇(ju)烈碰亡(wang)破碎(sui)形成(cheng)碎(sui)片(pian)，是(shi)正(zheng)常(chang)現(xian)象。觀察好細胞狀(zhuang)態後(hou)，75%酒精(jing)消(xiao)毒瓶(ping)壁將 T25 瓶(ping)置於 37℃培(pei)養箱(xiang)放(fang)置(zhi) 2-4h。

4. 貼(tie)壁細胞可以消(xiao)化，懸(xuan)浮細胞直(zhi)接(jie)混(hun)勻收集細胞，900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，棄(qi)上 清。加 5 mL PBS 重(zhong)懸(xuan)細胞，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，用(yong)新鮮的(de)培(pei)養(yang)基(ji)重(zhong)懸(xuan) 細胞，並(bing)接(jie)種到(dao)新的(de)培(pei)養(yang)瓶(ping)或培(pei)養(yang)皿中，置於培(pei)養箱(xiang)中進行(xing)培養(yang)。

5. 請客(ke)戶用(yong)相(xiang)同條件的(de)培(pei)養(yang)基(ji)用(yong)於細胞培(pei)養(yang)。

6. 建(jian)議客(ke)戶收到細胞後(hou)前(qian) 3 天各(ge)拍(pai)幾張(zhang)細胞照片(pian)，記錄(lu)細胞狀(zhuang)態，便(bian)於和(he)我(wo)司技術部(bu)溝(gou)通 交(jiao)流。由(you)於運(yun)輸的(de)原(yuan)因(yin)，個(ge)別(bie)敏感(gan)細胞會(hui)出(chu)現不穩定的(de)情(qing)況(kuang)，請及時和(he)我(wo)們聯系，告(gao)知細胞 的(de)具(ju)體(ti)情(qing)況(kuang)，以便(bian)我(wo)們的(de)技(ji)術(shu)人(ren)員(yuan)跟(gen)蹤回訪直(zhi)至(zhi)問題(ti)解(jie)決。

7. 該細胞僅(jin)供(gong)科研(yan)使用(yong)。

8. 備(bei)註：運輸用(yong)的(de)培(pei)養(yang)基(ji) (灌液(ye)培(pei)養基(ji)) 不能再用(yong)來培養(yang)細胞，請換(huan)用(yong)按照說明(ming)書細胞培(pei) 養(yang)條件新配(pei)制的(de)培(pei)養(yang)基(ji)來培養(yang)細胞。     收到細胞後(hou)第壹(yi)次(ci)傳(chuan)代(dai)建(jian)議 1：2 傳(chuan)代(dai) 。

9. 註意(yi)：  1:2 傳(chuan)代(dai)就是(shi) 1 個 T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個 T25 瓶(ping)或者(zhe) 2 個(ge) 6cm 皿。不是(shi) 1 個 T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個10cm 皿。