4T1小(xiao)鼠(shu)乳腺(xian)癌細(xi)胞(bao)

公(gong)司(si)產品(pin)僅(jin)供科研(yan)研(yan)究使(shi)用(yong)、不(bu)得(de)用(yong)於臨(lin)床(chuang)診(zhen)斷！

1、細(xi)胞(bao)傳(chuan)代(dai)：

1）細胞(bao)生長至(zhi)覆(fu)蓋培養(yang)瓶(ping)的 80%面(mian)積時，棄 25cm2培養(yang)瓶(ping)中的培(pei)養(yang)液(ye)，用(yong) PBS 清(qing)洗細(xi)胞(bao)壹(yi)次(ci)；

2）添加 0.25%消化(hua)液(ye)約(yue) 1ml 至培(pei)養(yang)瓶(ping)中，倒置(zhi)顯(xian)微鏡(jing)下(xia)觀察(cha)，待細(xi)胞(bao)回(hui)縮(suo)變圓(yuan)後加入 5ml 培養(yang)

液(ye)終止(zhi)消化(hua)，再(zai)輕輕吹打(da)細(xi)胞(bao)使(shi)之(zhi)脫(tuo)落，然後將懸(xuan)液(ye)轉(zhuan)移至 15ml 離(li)心(xin)管中，1000rpm 離心(xin) 5min；

3）棄上清(qing)，沈(chen)澱(dian)細(xi)胞(bao)用(yong) 1-2ml 培養(yang)基重懸(xuan)，然後(hou)按(an) 1:2 比(bi)例(li)進(jin)行(xing)分(fen)瓶(ping)傳(chuan)代(dai)，最後(hou)放入 37℃，5%CO2細胞(bao)

培(pei)養(yang)箱中(zhong)培(pei)養(yang)；

2、細(xi)胞(bao)凍(dong)存(cun)：

1）細胞(bao)生長至(zhi)覆(fu)蓋培養(yang)瓶(ping)的 80%面(mian)積時，棄 25cm2培養(yang)瓶(ping)中的培(pei)養(yang)液(ye)，用(yong) PBS 清(qing)洗細(xi)胞(bao)壹(yi)次(ci)；

2）添加 0.25%消化(hua)液(ye)約(yue) 1ml 至培(pei)養(yang)瓶(ping)中，倒置(zhi)顯(xian)微鏡(jing)下(xia)觀察(cha)，待細(xi)胞(bao)回(hui)縮(suo)變圓(yuan)後加入培養(yang)液(ye)終

止(zhi)消化(hua)，輕輕吹打(da)細(xi)胞(bao)使(shi)之(zhi)脫(tuo)落，然後將懸(xuan)液(ye)轉(zhuan)移至 15ml 離(li)心(xin)管中，1000rpm 離心(xin) 5min；

3）用(yong)適量(liang)的凍(dong)存(cun)液（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸細(xi)胞(bao)，並(bing)放置於凍存(cun)管中；

4）先(xian)將細(xi)胞(bao)凍(dong)存(cun)管放置於-20℃ 1.5h，然後將其(qi)移入-80℃過夜(ye)，24h 後(hou)轉(zhuan)入液氮中進(jin)行(xing)長期(qi)保存(cun)。使(shi)用(yong)程序(xu)

降溫(wen)盒可(ke)直接放入-80℃。

壹、商品(pin)介紹：

二、細胞(bao)培(pei)養(yang)操作(zuo)

1) 復(fu)蘇(su)細(xi)胞(bao)：以(yi)下(xia)細胞(bao)培(pei)養(yang)凍(dong)存(cun)處理(li)僅供(gong)參(can)考(kao)，具體操作(zuo)步驟(zhou)以(yi)隨貨產品(pin)說(shuo)明書為(wei)主。將(jiang)含(han)有1 mL細胞(bao)懸(xuan)液(ye)的凍(dong)存(cun)管在 37℃水浴(yu)中迅(xun)速(su)搖(yao)晃(huang)解(jie)凍，加4 mL培養(yang)基混合均勻。在1000 rpm條件下(xia)離心(xin)3 min，棄去上清(qing)液，加1-2 mL培養(yang)基後吹(chui)勻。然後將(jiang)所有(you)細胞(bao)懸(xuan)液(ye)加入含(han)適量(liang)培養(yang)基的培(pei)養(yang)瓶(ping)中培養(yang)過夜(ye)（或(huo)將(jiang)細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)加入10 cm皿(min)中，加入約(yue)8 mL培養(yang)基，培養(yang)過夜(ye)）。第二天換(huan)液並(bing)檢查(zha)細胞(bao)密(mi)度(du)。

2) 細(xi)胞(bao)傳(chuan)代(dai)：如(ru)果細(xi)胞(bao)密(mi)度(du)達(da) 80%-90%，即(ji)可進行(xing)傳(chuan)代(dai)培養(yang)。

a、棄去培養(yang)上清(qing)，用(yong)不(bu)含(han)鈣、鎂(mei)離子(zi)的PBS潤洗細(xi)胞(bao)1-2次(ci)。

b、加1 mL消化(hua)液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培(pei)養(yang)瓶(ping)中，使(shi)消化(hua)液(ye)浸(jin)潤所有(you)細胞(bao)，將(jiang)培(pei)養(yang)瓶(ping)置於37℃培養(yang)箱中(zhong)消化(hua)1-2 min（視(shi)細(xi)胞(bao)情(qing)況而定(ding)），然(ran)後在顯(xian)微鏡(jing)下(xia)觀察(cha)細胞(bao)消化(hua)情(qing)況，若細(xi)胞(bao)大部(bu)分(fen)變圓並(bing)脫(tuo)落，迅速拿回(hui)操作(zuo)臺，輕敲(qiao)幾下(xia)培養(yang)瓶(ping)後加2-3ml培養(yang)基終止(zhi)消化(hua)。輕輕打勻後裝入無(wu)菌(jun)離心(xin)管中，1000 rpm離心(xin)5 min，棄去上清(qing)液，補加1-2 mL培養(yang)液(ye)後吹勻。

c、將細胞(bao)懸(xuan)液(ye)按(an)1:2比(bi)例(li)分(fen)到(dao)新的含(han)8 mL培養(yang)基的新皿(min)中或(huo)者瓶(ping)中，置於培(pei)養(yang)箱中(zhong)培(pei)養(yang)。 3) 細(xi)胞(bao)凍(dong)存(cun)：待細(xi)胞(bao)生長狀(zhuang)態(tai)良好時，可進(jin)行(xing)細(xi)胞(bao)凍(dong)存(cun)。下(xia)面 T25 瓶(ping)為(wei)例(li)；a、收(shou)集(ji)細胞(bao)及(ji)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)液(ye)，裝入無(wu)菌(jun)離心(xin)管中，1000 rpm條件下(xia)離心(xin)4 min，棄去上清(qing)液，用(yong)PBS清(qing)洗壹(yi)遍，棄盡PBS，進行(xing)細(xi)胞(bao)計(ji)數(shu)。

b、根據(ju)細胞(bao)數(shu)量(liang)加入無(wu)血清(qing)細胞(bao)凍(dong)存(cun)液，使(shi)細(xi)胞(bao)密(mi)度(du)5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每(mei)支(zhi)凍(dong)存(cun)管凍存(cun)1mL細胞(bao)懸(xuan)液(ye)，註(zhu)意凍存(cun)管做好標(biao)識(shi)。將凍存(cun)管放入-80℃冰箱，24 h後(hou)轉(zhuan)入液氮灌儲存(cun)。記錄(lu)凍存(cun)管位置以(yi)便(bian)下(xia)次拿(na)取。

公(gong)司(si)正(zheng)在出(chu)售的產品(pin)：

人(ren)腎(shen)小(xiao)球內(nei)皮(pi)細胞(bao)HRGEC 大鼠(shu)腫瘤特異生長因子(zi)/腫瘤相(xiang)關(guan)因子(zi)(TSGF)ELISA 試劑(ji)盒 Mouse IgM/Cy3 熒(ying)光素(su)Cy3標記小(xiao)鼠(shu)IgM 0.1ml

LPCAT2： 0脂(zhi)酰基轉移酶(mei)2抗(kang)體(ti) 小(xiao)鼠(shu)垂體(ti)瘤細(xi)胞(bao);GT1-1

AML-193(人(ren)急(ji)性(xing)單(dan)核(he)細(xi)胞(bao)白(bai)血病(bing)單(dan)核(he)細(xi)胞(bao)) 5×106cells/瓶(ping)×2 人(ren)神(shen)經細(xi)胞(bao)HN 大鼠(shu)腫瘤特異生長因子(zi)/腫瘤相(xiang)關(guan)因子(zi)(TGSF)ELISA試劑(ji)盒 IgG/Cy3 熒(ying)光素(su)Cy3標記豬(zhu)IgG 0.1ml

LRRFIP2： LRRFIP2蛋白抗(kang)體(ti) CL-0081F81(貓腎(shen)細(xi)胞(bao))5×106cells/瓶(ping)×2

FGF1 Protein Cynomolgus 重組食(shi)蟹猴(hou) aFGF / FGF1 蛋白 大鼠(shu)腫瘤特異生長因子(zi)(TSGF)ELISA試劑(ji)盒 Mink IgG/Cy3 熒(ying)光素(su)Cy3標記水貂IgG 0.1ml

大鼠(shu)腎(shen)上腺(xian)嗜鉻(ge)細(xi)胞(bao)瘤細(xi)胞(bao);PC-12 [PC12] 人(ren)空(kong)泡(pao)毒(du)素(su)相(xiang)關(guan)蛋白A(VacA)ELISA 試(shi)劑盒 Caspase-9 白(bai)介素(su)1-β轉化(hua)酶(mei)樣雕亡蛋白酶(mei)6(抗(kang)原(yuan)) 0.5mg

GRM2+GRM4： 促代謝型(xing)谷(gu)酸(suan)受(shou)體2+4抗(kang)體(ti) 人(ren)正(zheng)常(chang)上皮(pi)細胞(bao);MCF 10A

COLO 320(人(ren)結(jie)腸癌細(xi)胞(bao)) 5×106cells/瓶(ping)×2 CL-0166NCI-H1650(人(ren)非(fei)小(xiao)細胞(bao)肺(fei)癌細(xi)胞(bao))5×106cells/瓶(ping)×2 大鼠(shu)肺泡(pao)巨噬(shi)細胞(bao);NR8383[AgC11x3A; NR8383.1] 人(ren)空(kong)腸彎(wan)曲(qu)菌(jun)黏附蛋白(PEB1)ELISA 試(shi)劑盒 Caspase-9 白(bai)介素(su)1-β轉化(hua)酶(mei)樣雕亡蛋白酶(mei)6(抗(kang)原(yuan)) 0.5mg

GPNMB： GPNMB抗(kang)體(ti) EB病(bing)毒(du)轉化(hua)的人(ren)B淋(lin)巴(ba)細(xi)胞(bao);KMY0926

P3/NSI/1-Ag4-1 [NS-1] (小(xiao)鼠(shu)骨髓(sui)瘤細(xi)胞(bao)) 5×106cells/瓶(ping)×2 人(ren)克拉拉細(xi)胞(bao)蛋白(CC16) ELISA 試(shi)劑盒 Caspase-10 半(ban)胱胺(an)酸蛋白酶(mei)-10(抗(kang)原(yuan)) 0.5mg

4T1小(xiao)鼠(shu)乳腺(xian)癌細(xi)胞(bao)DU 145 人(ren)前(qian)列(lie)腺(xian)癌細(xi)胞(bao) 大鼠(shu)緊密(mi)連接蛋白1(ZO1)ELISA試(shi)劑盒 ACAST-D IV (Human autoantibodies against the C-terminal domain IV )  人(ren)抗(kang)鈣(gai)蛋白酶(mei)抑素(su)抗(kang)體(ti) Jecket細胞(bao)，淋(lin)巴(ba)瘤細(xi)胞(bao) 人(ren)肺(fei)腺(xian)癌細(xi)胞(bao),SPC-A1細(xi)胞(bao) EC109，人(ren)食(shi)管癌細(xi)胞(bao)

PGA4 Others Human 人(ren) PGA4 / Pepsinogen A 人(ren)細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液 (陽(yang)性(xing)對(dui)照) 大鼠(shu)緊密(mi)連接蛋白(Ocln)ELISA試(shi)劑盒 BMP-7  (Rabbit) 兔(tu)骨成型蛋白7 96T

Pumilio 2： PUM2蛋白抗(kang)體(ti) CL-0403NCI-H524(人(ren)非(fei)小(xiao)細胞(bao)肺(fei)癌細(xi)胞(bao))5×106cells/瓶(ping)×2

SW480 [SW-480]人(ren)結(jie)腸腺(xian)癌細(xi)胞(bao) SW480 [SW-480] human colon adenocarcinoma cells 1640+10% FBS 大鼠(shu)金屬(shu)轉(zhuan)運蛋白1(MTP1)ELISA試(shi)劑盒 PI Ab-IgG/IgM(Mouse phosphatidylinositol antibody IgG/IgM)  小(xiao)鼠(shu)0脂(zhi)酰肌醇(chun)抗(kang)體(ti) ACP5 Others Human 人(ren) ACP5 / AP 人(ren)細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液 (陽(yang)性(xing)對(dui)照)

人(ren)癌細(xi)胞(bao);MDA-MB-157 大鼠(shu)金屬(shu)硫(liu)蛋白3(MT3)ELISA試(shi)劑盒 OVA sIgE(Human ovalbumin specific IgE)  人(ren)卵(luan)清(qing)蛋白特異性(xing)IgE 96T

三、培(pei)養(yang)註(zhu)意事項(xiang) 

1. 收到細(xi)胞(bao)後(hou)首(shou)先(xian)觀察(cha)細胞(bao)瓶(ping)是否完(wan)好，培(pei)養(yang)液(ye)是否有(you)漏液(ye)、渾(hun)濁(zhuo)等現(xian)象(xiang)，若(ruo)有上述(shu)現(xian)象(xiang) 發(fa)生請及時和(he)我(wo)們聯系(xi)。

2. 仔細閱讀(du)細(xi)胞(bao)說(shuo)明(ming)書，了解(jie)細胞(bao)相(xiang)關(guan)信(xin)息(xi)，如(ru)細(xi)胞(bao)形(xing)態(tai)、所(suo)用(yong)培養(yang)基、血清(qing)比例(li)、所(suo)需(xu) 細胞(bao)因子(zi)等，確(que)保(bao)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)條件壹(yi)致，若由(you)於(yu)培(pei)養(yang)條件不(bu)壹(yi)致而導致細胞(bao)出(chu)現(xian)問題，責任(ren)由(you) 客(ke)戶自行(xing)承(cheng)擔(dan)。

3. 用(yong) 75%酒精擦(ca)拭(shi)細胞(bao)瓶(ping)表(biao)面(mian)，顯(xian)微鏡(jing)下(xia)觀察(cha)細胞(bao)狀(zhuang)態(tai)。因運輸(shu)問(wen)題，部(bu)分(fen)細胞(bao)由(you)於(yu)溫(wen)度 變化(hua)及(ji)劇烈碰(peng)亡破(po)碎形(xing)成碎片，是正(zheng)常(chang)現(xian)象(xiang)。觀察(cha)好細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態(tai)後(hou)，75%酒(jiu)精消毒(du)瓶(ping)壁(bi)將(jiang) T25 瓶置(zhi)於(yu) 37℃培養(yang)箱放置 2-4h。

4. 貼(tie)壁(bi)細(xi)胞(bao)可(ke)以(yi)消化(hua)，懸(xuan)浮細(xi)胞(bao)直接混(hun)勻收集細(xi)胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，棄上 清(qing)。加 5 mL PBS 重懸細胞(bao)，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，用(yong)新鮮的培(pei)養(yang)基重懸(xuan) 細胞(bao)，並(bing)接種(zhong)到新的培(pei)養(yang)瓶(ping)或培養(yang)皿(min)中，置(zhi)於培(pei)養(yang)箱中(zhong)進(jin)行(xing)培(pei)養(yang)。

5. 請客(ke)戶用(yong)相(xiang)同條件的培(pei)養(yang)基用(yong)於細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)。

6. 建議(yi)客(ke)戶收(shou)到(dao)細(xi)胞(bao)後(hou)前(qian) 3 天(tian)各(ge)拍幾張(zhang)細胞(bao)照片，記錄(lu)細胞(bao)狀(zhuang)態(tai)，便(bian)於(yu)和(he)我(wo)司(si)技(ji)術部(bu)溝通(tong) 交流。由(you)於(yu)運輸(shu)的原(yuan)因，個別(bie)敏(min)感細胞(bao)會(hui)出(chu)現(xian)不(bu)穩(wen)定(ding)的情(qing)況，請及時和(he)我(wo)們聯系(xi)，告知(zhi)細(xi)胞(bao) 的具體情(qing)況，以便(bian)我(wo)們的技(ji)術人(ren)員(yuan)跟(gen)蹤回(hui)訪(fang)直至問題解(jie)決。

7. 該(gai)細(xi)胞(bao)僅(jin)供(gong)科(ke)研(yan)使(shi)用(yong)。

8. 備(bei)註：運輸(shu)用(yong)的培(pei)養(yang)基 (灌液培(pei)養(yang)基) 不(bu)能(neng)再用(yong)來(lai)培養(yang)細(xi)胞(bao)，請換(huan)用(yong)按照說(shuo)明書細胞(bao)培(pei) 養(yang)條件新配(pei)制(zhi)的培(pei)養(yang)基來(lai)培養(yang)細(xi)胞(bao)。     收(shou)到(dao)細(xi)胞(bao)後(hou)第壹次(ci)傳(chuan)代(dai)建議(yi) 1：2 傳(chuan)代(dai) 。

9. 註意：  1:2 傳(chuan)代(dai)就是 1 個 T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個(ge) T25 瓶或(huo)者(zhe) 2 個(ge) 6cm 皿(min)。不(bu)是 1 個 T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個(ge)10cm 皿(min)。