HCC-LM3人高轉移肝癌(ai)細胞(bao)

公(gong)司產(chan)品僅供(gong)科(ke)研研究使用、不(bu)得用(yong)於(yu)臨(lin)床(chuang)診斷(duan)！

1、細胞(bao)傳(chuan)代(dai)：

1）細胞(bao)生長(chang)至覆(fu)蓋(gai)培(pei)養(yang)瓶(ping)的 80%面積(ji)時，棄(qi) 25cm2培(pei)養(yang)瓶(ping)中的培(pei)養(yang)液(ye)，用(yong) PBS 清洗細胞(bao)壹次；

2）添加 0.25%消化(hua)液(ye)約(yue) 1ml 至培(pei)養(yang)瓶(ping)中，倒(dao)置顯微(wei)鏡下(xia)觀察，待(dai)細胞(bao)回縮變圓後加入(ru) 5ml 培(pei)養(yang)

液(ye)終止(zhi)消化(hua)，再(zai)輕輕(qing)吹(chui)打(da)細胞(bao)使之脫(tuo)落，然(ran)後將(jiang)懸液(ye)轉移至 15ml 離(li)心管中，1000rpm 離(li)心 5min；

3）棄上(shang)清，沈澱(dian)細胞(bao)用 1-2ml 培(pei)養(yang)基重懸，然(ran)後按(an) 1:2 比例(li)進行(xing)分(fen)瓶(ping)傳(chuan)代(dai)，最(zui)後放(fang)入(ru) 37℃，5%CO2細胞(bao)

培(pei)養(yang)箱(xiang)中培(pei)養(yang)；

壹、商(shang)品介紹：

2、細胞(bao)凍(dong)存(cun)：

1）細胞(bao)生長(chang)至覆(fu)蓋(gai)培(pei)養(yang)瓶(ping)的 80%面積(ji)時，棄(qi) 25cm2培(pei)養(yang)瓶(ping)中的培(pei)養(yang)液(ye)，用(yong) PBS 清洗細胞(bao)壹次；

2）添加 0.25%消化(hua)液(ye)約(yue) 1ml 至培(pei)養(yang)瓶(ping)中，倒(dao)置顯微(wei)鏡下(xia)觀察，待(dai)細胞(bao)回縮變圓後加入(ru)培(pei)養(yang)液(ye)終

止(zhi)消化(hua)，輕(qing)輕吹(chui)打(da)細胞(bao)使之脫(tuo)落，然(ran)後將(jiang)懸液(ye)轉移至 15ml 離(li)心管中，1000rpm 離(li)心 5min；

3）用適量(liang)的凍(dong)存(cun)液(ye)（FBS：DMSO=9 ：1）重懸細胞(bao)，並放(fang)置於凍(dong)存(cun)管(guan)中；

4）先(xian)將(jiang)細胞(bao)凍(dong)存(cun)管(guan)放(fang)置於-20℃ 1.5h，然(ran)後將(jiang)其(qi)移入(ru)-80℃過夜(ye)，24h 後轉入(ru)液(ye)氮(dan)中進行(xing)長(chang)期保(bao)存。使用程序

降溫(wen)盒可(ke)直(zhi)接放(fang)入(ru)-80℃。

二(er)、細胞(bao)培(pei)養(yang)操(cao)作(zuo)

1) 復蘇細胞(bao)：以(yi)下(xia)細胞(bao)培(pei)養(yang)凍(dong)存(cun)處理僅(jin)供參考(kao)，具(ju)體操(cao)作(zuo)步驟(zhou)以(yi)隨(sui)貨(huo)產品說(shuo)明(ming)書為主。將(jiang)含(han)有(you)1 mL細胞(bao)懸液(ye)的凍(dong)存(cun)管(guan)在 37℃水浴中迅(xun)速搖晃解凍(dong)，加(jia)4 mL培(pei)養(yang)基混(hun)合均勻。在1000 rpm條件下離(li)心3 min，棄去(qu)上清液，加1-2 mL培(pei)養(yang)基後吹(chui)勻。然(ran)後將(jiang)所有(you)細胞(bao)懸液(ye)加入(ru)含(han)適量(liang)培(pei)養(yang)基的培(pei)養(yang)瓶(ping)中培(pei)養(yang)過夜(ye)（或(huo)將(jiang)細胞(bao)懸液(ye)加入(ru)10 cm皿中，加(jia)入(ru)約(yue)8 mL培(pei)養(yang)基，培(pei)養(yang)過夜(ye)）。第二(er)天換(huan)液並(bing)檢(jian)查細胞(bao)密(mi)度(du)。

2) 細胞(bao)傳(chuan)代(dai)：如(ru)果細胞(bao)密(mi)度(du)達(da) 80%-90%，即(ji)可(ke)進行(xing)傳(chuan)代(dai)培(pei)養(yang)。

a、棄(qi)去(qu)培(pei)養(yang)上(shang)清(qing)，用不(bu)含(han)鈣、鎂離(li)子(zi)的PBS潤(run)洗細胞(bao)1-2次。

b、加1 mL消化(hua)液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培(pei)養(yang)瓶(ping)中，使消化(hua)液(ye)浸(jin)潤(run)所有(you)細胞(bao)，將(jiang)培(pei)養(yang)瓶(ping)置於37℃培(pei)養(yang)箱(xiang)中消化(hua)1-2 min（視細胞(bao)情(qing)況(kuang)而定），然(ran)後在顯(xian)微(wei)鏡下(xia)觀察細胞(bao)消化(hua)情(qing)況(kuang)，若(ruo)細胞(bao)大部(bu)分變圓並脫(tuo)落，迅(xun)速拿(na)回(hui)操作(zuo)臺，輕(qing)敲幾(ji)下培(pei)養(yang)瓶(ping)後加2-3ml培(pei)養(yang)基終止(zhi)消化(hua)。輕(qing)輕打(da)勻後裝(zhuang)入(ru)無(wu)菌(jun)離(li)心管中，1000 rpm離(li)心5 min，棄去(qu)上清液，補加1-2 mL培(pei)養(yang)液(ye)後吹(chui)勻。

c、將(jiang)細胞(bao)懸液(ye)按(an)1:2比例(li)分到(dao)新的含(han)8 mL培(pei)養(yang)基的新皿中或(huo)者瓶(ping)中，置於培(pei)養(yang)箱(xiang)中培(pei)養(yang)。 3) 細胞(bao)凍(dong)存(cun)：待(dai)細胞(bao)生長(chang)狀態(tai)良好(hao)時，可(ke)進行(xing)細胞(bao)凍(dong)存(cun)。下(xia)面 T25 瓶(ping)為例(li)；a、收集(ji)細胞(bao)及細胞(bao)培(pei)養(yang)液(ye)，裝(zhuang)入(ru)無(wu)菌(jun)離(li)心管中，1000 rpm條件下離(li)心4 min，棄去(qu)上清液，用PBS清(qing)洗壹遍，棄盡PBS，進行(xing)細胞(bao)計數(shu)。

b、根據(ju)細胞(bao)數量(liang)加(jia)入(ru)無(wu)血清(qing)細胞(bao)凍(dong)存(cun)液(ye)，使細胞(bao)密(mi)度(du)5×106~1×107/mL，輕(qing)輕混(hun)勻，每支(zhi)凍(dong)存(cun)管(guan)凍(dong)存(cun)1mL細胞(bao)懸液(ye)，註(zhu)意凍(dong)存(cun)管(guan)做好(hao)標(biao)識(shi)。將(jiang)凍(dong)存(cun)管(guan)放(fang)入(ru)-80℃冰(bing)箱，24 h後轉入(ru)液(ye)氮(dan)灌(guan)儲(chu)存(cun)。記(ji)錄(lu)凍(dong)存(cun)管(guan)位置以(yi)便(bian)下(xia)次拿(na)取(qu)。

公司正在出(chu)售(shou)的產品：

MAP4： 微(wei)管相(xiang)關(guan)蛋白4抗體 艾氏(shi)腹水瘤(liu)瘤(liu)株;Ehrlich

NCI-H157(人非小細胞(bao)肺腺(xian)癌(ai)細胞(bao)) 5×106cells/瓶(ping)×2 SRSV/3T3(SRSV轉化(hua)的3T3細胞(bao)) 大鼠(shu)血管(guan)內皮細胞(bao)生長(chang)因子(zi)B(VEGF-B)ELISA 試劑(ji)盒 Lep IgG (Rabbit Leptospira IgG)  兔(tu)鉤(gou)端(duan)螺(luo)旋(xuan)體IgG 96T

MSS1： 26S蛋白酶調(tiao)節(jie)亞型(xing)7抗(kang)體 大(da)額(e)牛(niu)與(yu)婆羅門牛(niu)雜(za)交(jiao)F1代(dai)皮膚(fu)成(cheng)纖維(wei)樣細胞(bao);BOS-5

IFNG Protein Mouse 重組(zu)小鼠(shu) IFNG / Ierferon Gamma 蛋白 (Fc 標簽) 大鼠(shu)血管(guan)內皮細胞(bao)生長(chang)因子(zi)(VEGF)ELISA試劑(ji)盒 Sam(Human soluble adhesion molecules)  人(ren)可(ke)溶性粘附分(fen)子(zi) 96T

MEG1： 蛋白酪酸(suan)0酸酶非受體型(xing)4抗(kang)體 IL2RG Others Human 人(ren) IL2RG / CD132 桿(gan)狀病(bing)毒(du)-昆(kun)蟲細胞(bao)裂解液 (陽性對(dui)照(zhao))

HRH3： 組(zu)織胺(an)H3受體抗(kang)體 CL-0130K-562(人(ren)慢性骨髓(sui)性白血病(bing)細胞(bao))5×106cells/瓶(ping)×2

M14細胞(bao)，人黑(hei)色素(su)瘤(liu)細胞(bao) 枯草(cao)芽(ya)孢(bao)桿(gan)菌黑(hei)色變(bian)種(zhong) 人(ren)肺癌(ai)細胞(bao);A-427 [A427] 人巰(qiu)基轉移酶(GST)ELISA試(shi)劑(ji)盒 Cx32(Connexin-32) 間(jian)隙(xi)連接蛋白32抗原 0.5mg

phospho-Histone H1.4 (Thr146)： 0酸化(hua)組(zu)蛋白H1抗體 IFNAR1 Others Mouse 小鼠(shu) IFNAR1 / IFNAR 人(ren)細胞(bao)裂解液 (陽性對(dui)照(zhao))

非洲(zhou)綠(lv)猴(hou)腎(shen)細胞(bao);GL-37 人硫(liu)轉移酶pi基因(yin)(GSTpi)ELISA 試劑(ji)盒 CX36 (Connexin-36) 間(jian)隙(xi)連接蛋白36抗原 0.5mg

HEATR4： HEATR4蛋白抗體 人(ren)肝永(yong)生化(hua)細胞(bao);THLE-3

HCC-LM3人高轉移肝癌(ai)細胞(bao)人胚(pei)腎二(er)倍體細胞(bao);CCC-HEK-1 人氣管(guan)上(shang)皮細胞(bao)培(pei)養(yang)基 100mL 大(da)鼠(shu)肝素輔因(yin)子(zi)Ⅱ(HCⅡ)ELISA試劑(ji)盒 LP Ab-IgA(Human Legionella antibody IgA)  人(ren)軍(jun)團(tuan)菌抗(kang)體 人(ren)肝細胞(bao)HH

HGF Protein Human 重組(zu)人 HGF / Hepatocyte Growth Factor 蛋白 大鼠(shu)肝素蛋白聚(ju)糖(HSPG)ELISA試(shi)劑(ji)盒 PGE1  大(da)鼠(shu)前列腺(xian)素E1 96T

phospho-PRL (Ser163)： 0酸化(hua)泌乳素抗(kang)體 ANGPTL7 Others Canine 狗(gou) ANGPTL7 / Angiopoietin-like 7 人細胞(bao)裂解液 (陽性對(dui)照(zhao))

MDA-MB-435 人癌(ai)高轉移細胞(bao) 大鼠(shu)肝素(HS)ELISA試劑(ji)盒 LP Ab-IgM (Human Legionella antibody IgM)  人(ren)軍(jun)團(tuan)菌抗(kang)體 THLE-3細胞(bao)，人肝上皮細胞(bao) 人癌(ai)細胞(bao),MCF-7(OLD)細胞(bao) 大鼠(shu)心(xin)肌(ji)細胞(bao)RCM

RSV-G Others Respiratory syncytial virus/RSV 人類(lei)呼吸(xi)道(dao)合胞(bao)病(bing)毒(du) hRSV (A, rsb1734) glycoprotein G / RSV-G 人(ren)細胞(bao)裂解液 (陽性對(dui)照(zhao)) 大鼠(shu)肝受體同源物(wu)1(LRH1)ELISA試劑(ji)盒 LP Ab-IgG(Human Legionella antibody IgG)  人(ren)軍(jun)團(tuan)菌抗(kang)體 CM-H133人(ren)視網(wang)膜(mo)muller細胞(bao)培(pei)養(yang)基100mL

三、培(pei)養(yang)註(zhu)意事項 

1. 收到(dao)細胞(bao)後首先(xian)觀(guan)察細胞(bao)瓶(ping)是(shi)否完好(hao)，培(pei)養(yang)液(ye)是(shi)否有(you)漏液、渾濁等現象(xiang)，若(ruo)有(you)上(shang)述現象(xiang) 發(fa)生請(qing)及(ji)時和我們(men)聯系。

2. 仔(zai)細閱讀細胞(bao)說(shuo)明(ming)書，了解細胞(bao)相關(guan)信(xin)息(xi)，如(ru)細胞(bao)形態(tai)、所用(yong)培(pei)養(yang)基、血清(qing)比(bi)例(li)、所需(xu) 細胞(bao)因子(zi)等，確(que)保(bao)細胞(bao)培(pei)養(yang)條件壹致，若由於培(pei)養(yang)條件不(bu)壹致而導(dao)致細胞(bao)出現問(wen)題(ti)，責任(ren)由 客(ke)戶自(zi)行(xing)承(cheng)擔。

3. 用(yong) 75%酒精(jing)擦拭細胞(bao)瓶(ping)表(biao)面，顯(xian)微(wei)鏡下(xia)觀察細胞(bao)狀態(tai)。因運(yun)輸(shu)問題，部(bu)分細胞(bao)由於溫度 變化(hua)及(ji)劇烈碰亡(wang)破(po)碎形(xing)成(cheng)碎片，是(shi)正常(chang)現象(xiang)。觀(guan)察好(hao)細胞(bao)狀態(tai)後，75%酒精(jing)消毒(du)瓶(ping)壁(bi)將(jiang) T25 瓶(ping)置於 37℃培(pei)養(yang)箱(xiang)放(fang)置 2-4h。

4. 貼壁(bi)細胞(bao)可以(yi)消化(hua)，懸(xuan)浮細胞(bao)直(zhi)接混(hun)勻收集(ji)細胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，棄上(shang) 清。加 5 mL PBS 重懸細胞(bao)，再 900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，用新鮮(xian)的培(pei)養(yang)基重懸 細胞(bao)，並接種(zhong)到(dao)新的培(pei)養(yang)瓶(ping)或(huo)培(pei)養(yang)皿中，置於培(pei)養(yang)箱(xiang)中進行(xing)培(pei)養(yang)。

5. 請(qing)客(ke)戶用(yong)相(xiang)同條件的培(pei)養(yang)基用(yong)於細胞(bao)培(pei)養(yang)。

6. 建議客(ke)戶收(shou)到(dao)細胞(bao)後前 3 天各拍幾(ji)張(zhang)細胞(bao)照(zhao)片，記(ji)錄(lu)細胞(bao)狀態(tai)，便於(yu)和我司技(ji)術(shu)部(bu)溝通 交(jiao)流(liu)。由於運(yun)輸(shu)的原因(yin)，個(ge)別敏(min)感細胞(bao)會(hui)出現不(bu)穩定(ding)的情(qing)況(kuang)，請(qing)及(ji)時和我們(men)聯系，告(gao)知細胞(bao) 的具體情(qing)況(kuang)，以(yi)便(bian)我(wo)們(men)的技(ji)術(shu)人員(yuan)跟(gen)蹤(zong)回(hui)訪直(zhi)至問(wen)題(ti)解決。

7. 該細胞(bao)僅供(gong)科研使用。

8. 備(bei)註(zhu)：運(yun)輸(shu)用的培(pei)養(yang)基 (灌(guan)液(ye)培(pei)養(yang)基) 不(bu)能再(zai)用(yong)來培(pei)養(yang)細胞(bao)，請換(huan)用按(an)照(zhao)說(shuo)明(ming)書細胞(bao)培(pei) 養(yang)條件新配制的培(pei)養(yang)基來(lai)培(pei)養(yang)細胞(bao)。     收到(dao)細胞(bao)後第壹次傳(chuan)代(dai)建議 1：2 傳(chuan)代(dai) 。

9. 註(zhu)意：  1:2 傳(chuan)代(dai)就(jiu)是(shi) 1 個 T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個(ge) T25 瓶(ping)或(huo)者 2 個 6cm 皿。不(bu)是(shi) 1 個 T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個(ge)10cm 皿。