3T3-Swiss(3T3-Swissalbino)細胞

公司產品僅供科(ke)研(yan)研(yan)究使用、不得用於(yu)臨床診斷(duan)！

1、細(xi)胞傳代(dai)：

1）細(xi)胞生長(chang)至(zhi)覆(fu)蓋(gai)培(pei)養(yang)瓶的(de) 80%面積時，棄(qi) 25cm2培養(yang)瓶中(zhong)的培養液，用 PBS 清洗(xi)細(xi)胞壹(yi)次；

2）添加(jia) 0.25%消化(hua)液約(yue) 1ml 至培(pei)養瓶中，倒(dao)置(zhi)顯微鏡(jing)下觀(guan)察，待細胞回縮(suo)變(bian)圓後加(jia)入(ru) 5ml 培(pei)養(yang)

液終(zhong)止消化(hua)，再輕(qing)輕(qing)吹(chui)打(da)細胞使之(zhi)脫(tuo)落(luo)，然後將(jiang)懸液轉移(yi)至 15ml 離心(xin)管中，1000rpm 離心(xin) 5min；

3）棄(qi)上(shang)清，沈(chen)澱細(xi)胞用 1-2ml 培養基重(zhong)懸，然後按(an) 1:2 比(bi)例進(jin)行(xing)分(fen)瓶傳(chuan)代(dai)，最後放(fang)入(ru) 37℃，5%CO2細(xi)胞

培養(yang)箱(xiang)中(zhong)培(pei)養(yang)；

壹(yi)、商品介紹：

2、細(xi)胞凍存：

1）細(xi)胞生長(chang)至(zhi)覆(fu)蓋(gai)培(pei)養(yang)瓶的(de) 80%面積時，棄(qi) 25cm2培養(yang)瓶中(zhong)的培養液，用 PBS 清洗(xi)細(xi)胞壹(yi)次；

2）添加(jia) 0.25%消化(hua)液約(yue) 1ml 至培(pei)養瓶中，倒(dao)置(zhi)顯微鏡(jing)下觀(guan)察，待細胞回縮(suo)變(bian)圓後加(jia)入(ru)培(pei)養(yang)液終(zhong)

止消化(hua)，輕(qing)輕(qing)吹(chui)打(da)細胞使之(zhi)脫(tuo)落(luo)，然後將(jiang)懸液轉移(yi)至 15ml 離心(xin)管中，1000rpm 離心(xin) 5min；

3）用適(shi)量的凍(dong)存液（FBS：DMSO=9 ：1）重懸細(xi)胞，並放(fang)置(zhi)於(yu)凍存管中；

4）先(xian)將(jiang)細胞凍存管放(fang)置(zhi)於(yu)-20℃ 1.5h，然後將(jiang)其(qi)移(yi)入(ru)-80℃過(guo)夜(ye)，24h 後轉入(ru)液氮(dan)中(zhong)進(jin)行長(chang)期(qi)保(bao)存。使用程序

降溫盒(he)可(ke)直(zhi)接(jie)放(fang)入(ru)-80℃。

二(er)、細(xi)胞培養(yang)操作(zuo)

1) 復(fu)蘇(su)細(xi)胞：以(yi)下細(xi)胞培養(yang)凍存處理(li)僅(jin)供參考，具(ju)體操(cao)作(zuo)步驟(zhou)以(yi)隨貨產品說明書為(wei)主。將(jiang)含有(you)1 mL細胞懸液的凍存管在 37℃水浴(yu)中(zhong)迅(xun)速(su)搖晃解凍(dong)，加(jia)4 mL培(pei)養基(ji)混合(he)均(jun)勻。在1000 rpm條件(jian)下離心(xin)3 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清液，加(jia)1-2 mL培(pei)養基(ji)後吹(chui)勻。然後將(jiang)所(suo)有(you)細胞懸液加(jia)入(ru)含適(shi)量培養(yang)基(ji)的培養(yang)瓶中(zhong)培(pei)養(yang)過(guo)夜(ye)（或將細(xi)胞懸液加(jia)入(ru)10 cm皿中(zhong)，加(jia)入(ru)約(yue)8 mL培養(yang)基，培養過(guo)夜(ye)）。第(di)二(er)天換(huan)液並檢查(zha)細胞密(mi)度。

2) 細胞傳代(dai)：如(ru)果細胞密(mi)度達 80%-90%，即(ji)可(ke)進行傳代(dai)培(pei)養(yang)。

a、棄(qi)去(qu)培(pei)養上(shang)清，用不含鈣(gai)、鎂(mei)離子的PBS潤洗(xi)細(xi)胞1-2次。

b、加(jia)1 mL消化(hua)液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培養瓶(ping)中(zhong)，使消化(hua)液浸潤所(suo)有(you)細胞，將培(pei)養瓶(ping)置(zhi)於(yu)37℃培養箱(xiang)中(zhong)消化(hua)1-2 min（視(shi)細(xi)胞情況(kuang)而定），然後在顯微鏡(jing)下觀(guan)察細胞消化(hua)情(qing)況(kuang)，若細胞大(da)部(bu)分(fen)變圓並脫落(luo)，迅(xun)速(su)拿回操作(zuo)臺，輕(qing)敲幾(ji)下培(pei)養(yang)瓶後加(jia)2-3ml培(pei)養基(ji)終(zhong)止消化(hua)。輕(qing)輕(qing)打(da)勻後裝(zhuang)入(ru)無(wu)菌離心(xin)管中，1000 rpm離心(xin)5 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清液，補(bu)加(jia)1-2 mL培(pei)養液後吹(chui)勻。

c、將細胞懸液按1:2比(bi)例分(fen)到(dao)新的含8 mL培(pei)養基的(de)新皿中(zhong)或(huo)者瓶中(zhong)，置於(yu)培養箱(xiang)中(zhong)培(pei)養(yang)。 3) 細(xi)胞凍存：待(dai)細胞生長(chang)狀(zhuang)態良(liang)好(hao)時，可(ke)進行細胞凍存。下(xia)面 T25 瓶(ping)為(wei)例；a、收(shou)集(ji)細胞及細(xi)胞培養(yang)液，裝入(ru)無(wu)菌離心(xin)管中，1000 rpm條件(jian)下離心(xin)4 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清液，用PBS清洗(xi)壹(yi)遍(bian)，棄(qi)盡PBS，進行細(xi)胞計數(shu)。

b、根(gen)據(ju)細(xi)胞數(shu)量加(jia)入(ru)無(wu)血(xue)清(qing)細(xi)胞凍存液，使細胞密(mi)度5×106~1×107/mL，輕(qing)輕(qing)混勻，每(mei)支(zhi)凍(dong)存管凍存1mL細(xi)胞懸液，註意(yi)凍(dong)存管做好(hao)標(biao)識。將凍存管放(fang)入(ru)-80℃冰箱(xiang)，24 h後轉入(ru)液氮(dan)灌(guan)儲存。記(ji)錄凍存管位置以(yi)便下(xia)次拿取。

公司(si)正(zheng)在出售(shou)的(de)產(chan)品：

體液脊髓(sui)過(guo)氧化(hua)酶（MPO）活(huo)性比(bi)色法(fa)定(ding)量檢測(ce)試劑(ji)盒(he)

神經(jing)內分(fen)泌代(dai)謝產物(wu)高效(xiao)液相色(se)譜(pu)電化(hua)學(xue)檢測(ce)試劑(ji)專(zhuan)題(ti)

細(xi)胞HSV（HERPES SIMPLX）病毒(du)定量PCR擴增(zeng)檢測(ce)試劑(ji)盒(he)

載(zai)玻片細胞CASPASE-3蛋(dan)白表達熒(ying)光顯(xian)微鏡(jing)檢測(ce)試劑(ji)盒(he)

水樣品氟元素(su)比(bi)色法(fa)定(ding)量檢測(ce)試劑(ji)盒(he)

免(mian)疫細(xi)胞化(hua)學(xue)HRP酶聯DAB直(zhi)接(jie)檢測(ce)試劑(ji)盒(he)（含HRP壹(yi)抗）

組(zu)織RSK3激酶活(huo)性定量檢測(ce)試劑(ji)盒(he)（A/B/C）

石(shi)蠟(la)切片組織(zhi)衰老特異(yi)性脂褐(he)素(su)靛酚(fen)原(yuan)位間(jian)接(jie)染(ran)色(se)試劑盒

甘(gan)肽過(guo)氧化(hua)物(wu)酶（GSH-PX）活(huo)性終(zhong)點比(bi)色法(fa)定(ding)量檢測(ce)試劑(ji)盒(he)

細(xi)胞長(chang)鏈(lian)脂酰(xian)脫氫酶（ACYL COA DEHYDROGENASE）活(huo)性比(bi)色法(fa)定(ding)量檢測(ce)試劑(ji)盒(he)

冰凍切片組織(zhi)氧(yang)化(hua)酶表(biao)達免(mian)疫熒(ying)光檢(jian)測(ce)試劑(ji)盒(he)

非吸(xi)者人體肺(fei)組(zu)織(zhi)微粒(li)體組(zu)分(fen)（5毫克/毫升）

載(zai)玻片細胞線(xian)粒體復(fu)合(he)物II蛋(dan)白表達熒(ying)光顯(xian)微鏡(jing)檢測(ce)試劑(ji)盒(he)

細(xi)胞組織(zhi)K（CATHEPSIN K）活(huo)性比(bi)色法(fa)定(ding)量檢測(ce)試劑(ji)盒(he)

胰（0.05%）乙(yi)二(er)胺四混合(he)液

原(yuan)鈣(gai)粘(zhan)蛋(dan)白γC3抗體

鈣(gai)抑(yi)制(zhi)蛋(dan)白抗體

羥(qiang)類固醇(chun)脫氫酶17β-HSD重(zhong)組兔(tu)單克(ke)隆抗體

Hydrolethalus綜(zong)合征(zheng)蛋(dan)白1抗體

細(xi)胞表面樣(yang)轉錄因(yin)子4抗體

UHRF1BP1蛋(dan)白抗體

顆(ke)粒蛋(dan)白前體抗體

3T3-Swiss(3T3-Swissalbino)細(xi)胞APC-Cy7標(biao)記人CD64單(dan)克隆抗體

鋅指(zhi)蛋(dan)白649抗體

三(san)、培養(yang)註(zhu)意(yi)事項 

1. 收到(dao)細胞後首(shou)先(xian)觀察細胞瓶是(shi)否完好(hao)，培(pei)養(yang)液是否有漏液、渾濁(zhuo)等(deng)現(xian)象，若(ruo)有(you)上(shang)述現(xian)象 發(fa)生請及時和(he)我(wo)們聯系。

2. 仔細(xi)閱(yue)讀(du)細(xi)胞說明書，了解細胞相關(guan)信(xin)息，如(ru)細胞形態(tai)、所(suo)用培養基、血(xue)清比(bi)例、所(suo)需(xu) 細胞因子等(deng)，確保細胞培養(yang)條件(jian)壹(yi)致，若(ruo)由(you)於(yu)培養條件(jian)不壹(yi)致而(er)導(dao)致細(xi)胞出現(xian)問題，責任(ren)由(you) 客(ke)戶自行承(cheng)擔。

3. 用 75%酒(jiu)精(jing)擦拭(shi)細胞瓶表(biao)面，顯(xian)微鏡(jing)下觀(guan)察細胞狀(zhuang)態。因(yin)運輸(shu)問題，部(bu)分(fen)細胞由於(yu)溫度 變化(hua)及劇(ju)烈碰(peng)亡破(po)碎(sui)形(xing)成碎片，是正(zheng)常現象。觀(guan)察好(hao)細(xi)胞狀(zhuang)態後，75%酒(jiu)精(jing)消毒(du)瓶壁(bi)將 T25 瓶(ping)置(zhi)於(yu) 37℃培養箱(xiang)放(fang)置(zhi) 2-4h。

4. 貼(tie)壁(bi)細胞可(ke)以(yi)消化(hua)，懸浮(fu)細(xi)胞直(zhi)接(jie)混勻收集(ji)細胞，900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，棄(qi)上(shang) 清。加(jia) 5 mL PBS 重(zhong)懸細(xi)胞，再 900 rpm-1000 rpm 離心(xin) 3 min，用新鮮的培(pei)養基(ji)重懸 細(xi)胞，並接(jie)種到(dao)新的培養(yang)瓶或(huo)培養皿中(zhong)，置(zhi)於(yu)培養箱(xiang)中(zhong)進(jin)行(xing)培(pei)養。

5. 請客(ke)戶用相同條件(jian)的培養(yang)基(ji)用於(yu)細胞培養(yang)。

6. 建議(yi)客(ke)戶收到(dao)細胞後前 3 天各拍(pai)幾(ji)張(zhang)細(xi)胞照片，記錄(lu)細(xi)胞狀(zhuang)態，便(bian)於(yu)和(he)我(wo)司技術(shu)部(bu)溝(gou)通(tong) 交流。由於(yu)運輸(shu)的(de)原(yuan)因(yin)，個(ge)別(bie)敏(min)感細(xi)胞會出(chu)現不穩定的(de)情(qing)況(kuang)，請及時和(he)我(wo)們聯系，告(gao)知(zhi)細(xi)胞 的具(ju)體情(qing)況(kuang)，以(yi)便我(wo)們的技術(shu)人員跟(gen)蹤回(hui)訪直(zhi)至(zhi)問題解決(jue)。

7. 該細胞僅供(gong)科(ke)研(yan)使用。

8. 備註：運輸(shu)用的培養基(ji) (灌(guan)液培養基(ji)) 不能(neng)再用來培養細(xi)胞，請換(huan)用按照說明書細胞培 養(yang)條件(jian)新配制(zhi)的培(pei)養基(ji)來(lai)培(pei)養細(xi)胞。     收到(dao)細胞後第(di)壹(yi)次傳代(dai)建(jian)議(yi) 1：2 傳(chuan)代(dai) 。

9. 註(zhu)意(yi)：  1:2 傳(chuan)代(dai)就是 1 個(ge) T25 瓶傳(chuan) 2 個(ge) T25 瓶或(huo)者 2 個(ge) 6cm 皿。不是(shi) 1 個(ge) T25 瓶傳(chuan) 2 個(ge)10cm 皿。