AM-38細(xi)胞(bao)

公(gong)司產(chan)品僅供(gong)科(ke)研(yan)研(yan)究使(shi)用(yong)、不(bu)得(de)用(yong)於臨(lin)床診(zhen)斷！

1、細(xi)胞(bao)傳代：

1）細(xi)胞(bao)生(sheng)長至(zhi)覆(fu)蓋(gai)培養瓶的 80%面(mian)積時(shi)，棄(qi) 25cm2培(pei)養瓶中的(de)培(pei)養液，用(yong) PBS 清洗細(xi)胞(bao)壹(yi)次；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消化(hua)液(ye)約 1ml 至(zhi)培(pei)養瓶中，倒(dao)置(zhi)顯微鏡(jing)下(xia)觀察(cha)，待細(xi)胞(bao)回(hui)縮變(bian)圓後(hou)加(jia)入 5ml 培(pei)養

液終(zhong)止(zhi)消(xiao)化(hua)，再(zai)輕(qing)輕(qing)吹打(da)細(xi)胞(bao)使(shi)之(zhi)脫落，然(ran)後(hou)將懸液轉移(yi)至(zhi) 15ml 離(li)心(xin)管(guan)中(zhong)，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）棄(qi)上(shang)清，沈(chen)澱(dian)細(xi)胞(bao)用(yong) 1-2ml 培養基重(zhong)懸，然後按(an) 1:2 比(bi)例進(jin)行(xing)分瓶傳代，最(zui)後(hou)放入 37℃，5%CO2細(xi)胞(bao)

培(pei)養箱中培(pei)養；

壹(yi)、商(shang)品介紹：

2、細(xi)胞(bao)凍存(cun)：

1）細(xi)胞(bao)生(sheng)長至(zhi)覆(fu)蓋(gai)培養瓶的 80%面(mian)積時(shi)，棄(qi) 25cm2培(pei)養瓶中的(de)培(pei)養液，用(yong) PBS 清洗細(xi)胞(bao)壹(yi)次；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消化(hua)液(ye)約 1ml 至(zhi)培(pei)養瓶中，倒(dao)置(zhi)顯微鏡(jing)下(xia)觀察(cha)，待細(xi)胞(bao)回(hui)縮變(bian)圓後(hou)加(jia)入培(pei)養液終(zhong)

止(zhi)消(xiao)化(hua)，輕(qing)輕(qing)吹打(da)細(xi)胞(bao)使(shi)之(zhi)脫落，然(ran)後(hou)將懸液轉移(yi)至(zhi) 15ml 離(li)心(xin)管(guan)中(zhong)，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）用(yong)適(shi)量(liang)的凍存(cun)液（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸細(xi)胞(bao)，並(bing)放置(zhi)於凍存(cun)管中；

4）先將(jiang)細(xi)胞(bao)凍存(cun)管放置(zhi)於-20℃ 1.5h，然(ran)後將(jiang)其移(yi)入-80℃過(guo)夜(ye)，24h 後轉入液(ye)氮中(zhong)進(jin)行(xing)長(chang)期(qi)保(bao)存。使用(yong)程序(xu)

降(jiang)溫(wen)盒(he)可(ke)直(zhi)接(jie)放入-80℃。

二(er)、細(xi)胞(bao)培(pei)養操(cao)作(zuo)

1) 復(fu)蘇(su)細(xi)胞(bao)：以(yi)下(xia)細(xi)胞(bao)培(pei)養凍存(cun)處(chu)理僅(jin)供參(can)考(kao)，具(ju)體操(cao)作(zuo)步(bu)驟(zhou)以(yi)隨貨(huo)產(chan)品說明書為(wei)主。將(jiang)含有(you)1 mL細(xi)胞(bao)懸液的凍存(cun)管在 37℃水(shui)浴(yu)中(zhong)迅(xun)速(su)搖晃解凍，加(jia)4 mL培養基混合(he)均(jun)勻。在1000 rpm條(tiao)件下(xia)離(li)心3 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清(qing)液，加(jia)1-2 mL培養基後吹(chui)勻。然後(hou)將所(suo)有(you)細(xi)胞(bao)懸液加(jia)入含適(shi)量(liang)培養基的培(pei)養瓶中培(pei)養過(guo)夜(ye)（或將(jiang)細(xi)胞(bao)懸液加(jia)入10 cm皿(min)中，加(jia)入約8 mL培(pei)養基，培養過(guo)夜(ye)）。第二(er)天(tian)換液(ye)並(bing)檢查(zha)細(xi)胞(bao)密(mi)度(du)。

2) 細(xi)胞(bao)傳代：如果(guo)細(xi)胞(bao)密(mi)度(du)達(da) 80%-90%，即可(ke)進(jin)行(xing)傳代培養。

a、棄(qi)去(qu)培(pei)養上清，用(yong)不(bu)含鈣(gai)、鎂(mei)離(li)子的PBS潤洗(xi)細(xi)胞(bao)1-2次(ci)。

b、加(jia)1 mL消化(hua)液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培(pei)養瓶中，使(shi)消(xiao)化(hua)液(ye)浸潤所(suo)有(you)細(xi)胞(bao)，將(jiang)培養瓶置於37℃培(pei)養箱中消(xiao)化(hua)1-2 min（視(shi)細(xi)胞(bao)情(qing)況而(er)定(ding)），然(ran)後(hou)在(zai)顯微鏡(jing)下(xia)觀察(cha)細(xi)胞(bao)消(xiao)化(hua)情(qing)況，若細(xi)胞(bao)大(da)部(bu)分變(bian)圓並(bing)脫落，迅(xun)速(su)拿(na)回操(cao)作(zuo)臺(tai)，輕(qing)敲幾(ji)下(xia)培(pei)養瓶後加(jia)2-3ml培養基終(zhong)止(zhi)消(xiao)化(hua)。輕(qing)輕(qing)打(da)勻後裝(zhuang)入無(wu)菌(jun)離(li)心(xin)管中，1000 rpm離(li)心(xin)5 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清(qing)液，補加(jia)1-2 mL培養液後吹(chui)勻。

c、將細(xi)胞(bao)懸液按(an)1:2比(bi)例分到新的(de)含8 mL培養基的新皿(min)中(zhong)或者瓶(ping)中，置於培(pei)養箱中培(pei)養。 3) 細(xi)胞(bao)凍存(cun)：待細(xi)胞(bao)生(sheng)長狀態良好時(shi)，可(ke)進(jin)行(xing)細(xi)胞(bao)凍存(cun)。下(xia)面(mian) T25 瓶為(wei)例；a、收(shou)集細(xi)胞(bao)及細(xi)胞(bao)培(pei)養液，裝(zhuang)入無(wu)菌(jun)離(li)心(xin)管中，1000 rpm條(tiao)件(jian)下(xia)離(li)心4 min，棄(qi)去(qu)上(shang)清(qing)液，用(yong)PBS清洗壹(yi)遍，棄(qi)盡(jin)PBS，進(jin)行(xing)細(xi)胞(bao)計(ji)數(shu)。

b、根(gen)據細(xi)胞(bao)數(shu)量(liang)加(jia)入無(wu)血(xue)清(qing)細(xi)胞(bao)凍存(cun)液，使細(xi)胞(bao)密(mi)度(du)5×106~1×107/mL，輕(qing)輕(qing)混勻，每(mei)支(zhi)凍存(cun)管凍存(cun)1mL細(xi)胞(bao)懸液，註意凍存(cun)管做(zuo)好標識。將凍存(cun)管放入-80℃冰箱，24 h後(hou)轉入液(ye)氮灌(guan)儲存(cun)。記(ji)錄凍存(cun)管位(wei)置(zhi)以便下(xia)次(ci)拿(na)取。

公(gong)司正(zheng)在(zai)出(chu)售的(de)產品：

細(xi)胞(bao)壹(yi)氧(yang)化(hua)氮合(he)成酶總活性(xing)比(bi)色(se)法(fa)定量(liang)檢(jian)測(ce)試劑盒(he)

PH檢(jian)測(ce)試劑專(zhuan)題

細(xi)胞(bao)HSV2（HERPES SIMPLX2）病(bing)毒定(ding)量PCR擴(kuo)增檢(jian)測試劑盒(he)

細(xi)胞(bao)CASPASE-4蛋(dan)白(bai)表達(da)比色(se)法(fa)定量檢(jian)測試劑盒(he)

組(zu)織(zhi)A高(gao)效液相色(se)譜(pu)法(fa)定(ding)量(liang)檢(jian)測(ce)試劑盒(he)

冰凍切(qie)片免疫(yi)組(zu)織(zhi)化(hua)學(xue)HRP酶聯DAB間(jian)接(jie)檢測(ce)試劑盒(he)

組(zu)織(zhi)BLK激(ji)酶活(huo)性(xing)定(ding)量(liang)檢(jian)測試劑盒(he)（A/B/C）

（ZIEHL-NEELSEN）原(yuan)位(wei)間(jian)接(jie)染色(se)試劑盒(he)

高(gao)幹擾血(xue)清(qing)/血(xue)漿丙二醛（MDA）比(bi)色(se)法定(ding)量檢測試劑盒(he)

組(zu)織(zhi)磷脂(zhi)酶C（Phospholipase C）活(huo)性(xing)熒(ying)光定量檢(jian)測試劑盒(he)

蛋(dan)白(bai)表達(da)西方(fang)雜(za)交分析(xi)試劑盒(he)

體外(wai)非(fei)細(xi)胞(bao)系(xi)統細(xi)胞(bao)色(se)素P450亞(ya)酶CYP2B1（PROD）活(huo)性(xing)

細(xi)胞(bao)線(xian)粒體復(fu)合(he)物III蛋(dan)白(bai)表達(da)比色(se)法(fa)定量檢(jian)測試劑盒(he)

細(xi)胞(bao)血(xue)管(guan)緊張(zhang)素Ⅰ轉化(hua)酶（ACE）總活性(xing)比(bi)色(se)法(fa)定量(liang)檢(jian)測(ce)試劑盒(he)

胰(yi)中(zhong)和液(ye)

原(yuan)鈣(gai)粘(zhan)附蛋(dan)白(bai)α5抗(kang)體

鈣(gai)激活氯(lv)離子(zi)通(tong)道4蛋(dan)白(bai)抗(kang)體

橋粒(li)芯(xin)糖(tang)蛋(dan)白(bai)2抗(kang)體

IMPG1蛋(dan)白(bai)抗(kang)體

細(xi)胞(bao)表(biao)面趨(qu)化(hua)因(yin)子(zi)受體7抗(kang)體

VRTN蛋(dan)白(bai)抗(kang)體

可(ke)溶(rong)性(xing)載(zai)質轉運蛋(dan)白(bai)2B1抗(kang)體

AM-38細(xi)胞(bao)APC標記(ji)人CD103 (ITGAE)單克(ke)隆(long)抗(kang)體

鋅指(zhi)蛋(dan)白(bai)675抗(kang)體

三(san)、培(pei)養註意事(shi)項 

1. 收(shou)到細(xi)胞(bao)後(hou)首先(xian)觀察(cha)細(xi)胞(bao)瓶(ping)是否(fou)完(wan)好，培養液是否(fou)有(you)漏液(ye)、渾(hun)濁等(deng)現(xian)象(xiang)，若有(you)上述現象(xiang) 發(fa)生請及時(shi)和(he)我們聯系。

2. 仔(zai)細(xi)閱讀細(xi)胞(bao)說明書，了解細(xi)胞(bao)相(xiang)關(guan)信(xin)息，如(ru)細(xi)胞(bao)形(xing)態、所(suo)用(yong)培養基、血(xue)清(qing)比(bi)例、所(suo)需(xu) 細(xi)胞(bao)因(yin)子(zi)等(deng)，確保細(xi)胞(bao)培(pei)養條件壹(yi)致(zhi)，若由於培(pei)養條件不(bu)壹(yi)致(zhi)而(er)導(dao)致(zhi)細(xi)胞(bao)出(chu)現問(wen)題，責(ze)任(ren)由 客戶自(zi)行(xing)承(cheng)擔(dan)。

3. 用(yong) 75%酒精擦拭細(xi)胞(bao)瓶(ping)表面(mian)，顯微鏡(jing)下(xia)觀察(cha)細(xi)胞(bao)狀態。因(yin)運輸問(wen)題，部(bu)分細(xi)胞(bao)由於溫(wen)度(du) 變(bian)化(hua)及劇烈(lie)碰(peng)亡(wang)破碎(sui)形(xing)成碎片，是正常(chang)現象(xiang)。觀察(cha)好細(xi)胞(bao)狀態後，75%酒(jiu)精消毒(du)瓶(ping)壁(bi)將 T25 瓶(ping)置(zhi)於 37℃培(pei)養箱放置(zhi) 2-4h。

4. 貼(tie)壁(bi)細(xi)胞(bao)可(ke)以消(xiao)化(hua)，懸浮細(xi)胞(bao)直(zhi)接(jie)混勻收(shou)集細(xi)胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離(li)心 3 min，棄(qi)上(shang) 清。加(jia) 5 mL PBS 重(zhong)懸細(xi)胞(bao)，再(zai) 900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，用(yong)新鮮(xian)的(de)培養基重(zhong)懸 細(xi)胞(bao)，並(bing)接(jie)種到(dao)新的(de)培(pei)養瓶或培(pei)養皿中，置(zhi)於培(pei)養箱中進(jin)行(xing)培(pei)養。

5. 請客戶用(yong)相同條(tiao)件(jian)的培(pei)養基用(yong)於細(xi)胞(bao)培(pei)養。

6. 建議(yi)客(ke)戶收(shou)到細(xi)胞(bao)後(hou)前(qian) 3 天各(ge)拍幾(ji)張(zhang)細(xi)胞(bao)照(zhao)片(pian)，記錄細(xi)胞(bao)狀態，便於和(he)我司技(ji)術(shu)部(bu)溝通 交流(liu)。由於運輸的原因(yin)，個(ge)別(bie)敏(min)感細(xi)胞(bao)會(hui)出(chu)現(xian)不(bu)穩定(ding)的情(qing)況(kuang)，請及時(shi)和(he)我們聯系，告知細(xi)胞(bao) 的(de)具(ju)體情(qing)況(kuang)，以便(bian)我們的技術(shu)人員跟(gen)蹤(zong)回訪(fang)直(zhi)至問(wen)題解決(jue)。

7. 該細(xi)胞(bao)僅(jin)供科(ke)研(yan)使(shi)用(yong)。

8. 備註：運輸用(yong)的培養基 (灌液(ye)培(pei)養基) 不(bu)能(neng)再(zai)用(yong)來培養細(xi)胞(bao)，請換用(yong)按(an)照(zhao)說明書細(xi)胞(bao)培(pei) 養條件新配(pei)制的(de)培(pei)養基來培養細(xi)胞(bao)。     收(shou)到細(xi)胞(bao)後(hou)第壹(yi)次傳代建議(yi) 1：2 傳代 。

9. 註意(yi)：  1:2 傳代就是 1 個 T25 瓶傳 2 個 T25 瓶或(huo)者 2 個(ge) 6cm 皿。不(bu)是 1 個 T25 瓶傳 2 個10cm 皿。