BE(2)-C細(xi)胞(bao)

公司產(chan)品(pin)僅供科研研究(jiu)使用、不得用於(yu)臨床診斷(duan)！

1、細(xi)胞(bao)傳(chuan)代：

1）細胞(bao)生(sheng)長至(zhi)覆蓋培養瓶(ping)的 80%面積(ji)時(shi)，棄(qi) 25cm2培(pei)養瓶(ping)中(zhong)的培養(yang)液(ye)，用 PBS 清(qing)洗細胞(bao)壹(yi)次(ci)；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消化液(ye)約 1ml 至(zhi)培養瓶(ping)中(zhong)，倒(dao)置顯(xian)微鏡下(xia)觀(guan)察，待細胞(bao)回(hui)縮(suo)變圓後加(jia)入(ru) 5ml 培(pei)養

液(ye)終(zhong)止(zhi)消化，再輕(qing)輕(qing)吹(chui)打細(xi)胞(bao)使(shi)之脫落，然後(hou)將(jiang)懸液(ye)轉(zhuan)移(yi)至(zhi) 15ml 離(li)心(xin)管(guan)中(zhong)，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）棄(qi)上清(qing)，沈澱細(xi)胞(bao)用 1-2ml 培養基重(zhong)懸，然(ran)後按 1:2 比例(li)進(jin)行(xing)分(fen)瓶(ping)傳(chuan)代，最後(hou)放入(ru) 37℃，5%CO2細(xi)胞(bao)

培(pei)養箱(xiang)中(zhong)培養(yang)；

壹(yi)、商(shang)品(pin)介(jie)紹：

2、細胞(bao)凍(dong)存：

1）細胞(bao)生(sheng)長至(zhi)覆蓋培養瓶(ping)的 80%面積(ji)時(shi)，棄(qi) 25cm2培(pei)養瓶(ping)中(zhong)的培養(yang)液(ye)，用 PBS 清(qing)洗細胞(bao)壹(yi)次(ci)；

2）添(tian)加(jia) 0.25%消化液(ye)約 1ml 至(zhi)培養瓶(ping)中(zhong)，倒(dao)置顯(xian)微鏡下(xia)觀(guan)察，待細胞(bao)回(hui)縮(suo)變圓後加(jia)入(ru)培(pei)養液(ye)終(zhong)

止(zhi)消化，輕(qing)輕(qing)吹(chui)打細(xi)胞(bao)使(shi)之脫落，然後(hou)將(jiang)懸液(ye)轉(zhuan)移(yi)至(zhi) 15ml 離(li)心(xin)管(guan)中(zhong)，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）用適量的凍存(cun)液(ye)（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸細(xi)胞(bao)，並(bing)放置於(yu)凍存(cun)管(guan)中；

4）先(xian)將(jiang)細胞(bao)凍(dong)存管放置於(yu)-20℃ 1.5h，然後(hou)將(jiang)其移入(ru)-80℃過(guo)夜(ye)，24h 後轉(zhuan)入(ru)液(ye)氮中進(jin)行(xing)長期保存(cun)。使用程序(xu)

降(jiang)溫盒(he)可(ke)直接(jie)放入(ru)-80℃。

二、細(xi)胞(bao)培(pei)養操作(zuo)

1) 復(fu)蘇細胞(bao)：以(yi)下(xia)細(xi)胞(bao)培(pei)養凍存處(chu)理僅供參考(kao)，具(ju)體(ti)操作(zuo)步(bu)驟(zhou)以(yi)隨(sui)貨產品(pin)說(shuo)明(ming)書(shu)為主(zhu)。將(jiang)含有(you)1 mL細胞(bao)懸(xuan)液(ye)的凍存(cun)管(guan)在 37℃水(shui)浴中(zhong)迅速(su)搖(yao)晃(huang)解凍，加(jia)4 mL培養(yang)基(ji)混合(he)均勻。在(zai)1000 rpm條(tiao)件(jian)下(xia)離(li)心(xin)3 min，棄(qi)去(qu)上清(qing)液(ye)，加(jia)1-2 mL培(pei)養(yang)基後吹勻。然(ran)後(hou)將(jiang)所有(you)細胞(bao)懸(xuan)液(ye)加(jia)入(ru)含適量培養基的培養(yang)瓶(ping)中(zhong)培養過(guo)夜(ye)（或(huo)將(jiang)細胞(bao)懸(xuan)液(ye)加(jia)入(ru)10 cm皿(min)中，加入(ru)約8 mL培養(yang)基，培(pei)養過(guo)夜(ye)）。第二天(tian)換(huan)液(ye)並(bing)檢(jian)查細胞(bao)密(mi)度(du)。

2) 細胞(bao)傳(chuan)代：如果(guo)細胞(bao)密(mi)度(du)達 80%-90%，即(ji)可(ke)進(jin)行(xing)傳(chuan)代培養。

a、棄去(qu)培(pei)養(yang)上清(qing)，用不含鈣、鎂離(li)子(zi)的PBS潤洗細胞(bao)1-2次(ci)。

b、加(jia)1 mL消化液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於(yu)培養(yang)瓶(ping)中(zhong)，使消化液(ye)浸(jin)潤所有(you)細胞(bao)，將(jiang)培養(yang)瓶(ping)置於(yu)37℃培養(yang)箱(xiang)中(zhong)消化1-2 min（視細(xi)胞(bao)情(qing)況(kuang)而(er)定），然後在顯(xian)微鏡下(xia)觀(guan)察細胞(bao)消化情(qing)況(kuang)，若(ruo)細(xi)胞(bao)大(da)部(bu)分(fen)變圓並脫(tuo)落，迅速(su)拿回(hui)操作(zuo)臺，輕(qing)敲幾下(xia)培(pei)養(yang)瓶(ping)後(hou)加2-3ml培養基(ji)終(zhong)止(zhi)消化。輕(qing)輕(qing)打勻後(hou)裝(zhuang)入(ru)無(wu)菌離(li)心(xin)管(guan)中(zhong)，1000 rpm離(li)心(xin)5 min，棄(qi)去(qu)上清(qing)液(ye)，補(bu)加(jia)1-2 mL培(pei)養液(ye)後(hou)吹(chui)勻。

c、將(jiang)細胞(bao)懸(xuan)液(ye)按1:2比例(li)分(fen)到新(xin)的含8 mL培養基的新(xin)皿(min)中或(huo)者(zhe)瓶(ping)中(zhong)，置於(yu)培養(yang)箱(xiang)中(zhong)培養(yang)。 3) 細(xi)胞(bao)凍(dong)存：待細胞(bao)生(sheng)長狀態良(liang)好(hao)時(shi)，可進(jin)行(xing)細(xi)胞(bao)凍(dong)存。下(xia)面 T25 瓶(ping)為例(li)；a、收(shou)集細(xi)胞(bao)及(ji)細(xi)胞(bao)培(pei)養液(ye)，裝(zhuang)入(ru)無(wu)菌離(li)心(xin)管(guan)中(zhong)，1000 rpm條(tiao)件(jian)下(xia)離(li)心(xin)4 min，棄(qi)去(qu)上清(qing)液(ye)，用PBS清(qing)洗壹(yi)遍(bian)，棄(qi)盡(jin)PBS，進(jin)行(xing)細(xi)胞(bao)計(ji)數(shu)。

b、根(gen)據(ju)細(xi)胞(bao)數(shu)量加入(ru)無(wu)血清(qing)細(xi)胞(bao)凍(dong)存液(ye)，使(shi)細(xi)胞(bao)密(mi)度(du)5×106~1×107/mL，輕(qing)輕(qing)混勻，每(mei)支凍存(cun)管凍(dong)存(cun)1mL細(xi)胞(bao)懸(xuan)液(ye)，註意凍(dong)存(cun)管(guan)做好(hao)標(biao)識。將(jiang)凍存(cun)管放入(ru)-80℃冰(bing)箱(xiang)，24 h後(hou)轉入(ru)液(ye)氮灌(guan)儲(chu)存。記(ji)錄(lu)凍存(cun)管位置以(yi)便下(xia)次(ci)拿取(qu)。

公司正在(zai)出售的產品(pin)：

組織(zhi)誘導(dao)型(xing)巨(ju)噬細(xi)胞(bao)壹(yi)氧(yang)化氮合成(cheng)酶（（iNOS /NOS2/mNOS））活(huo)性(xing)比色法定量檢(jian)測試(shi)劑(ji)盒(he)

植物(wu)組織可溶性(xing)疏水(shui)總蛋(dan)白(bai)制(zhi)備試(shi)劑(ji)盒(he)

通用型(xing)CMV（CYTOMEGALOVIRUS）病毒(du)定性(xing)檢(jian)測試(shi)劑(ji)盒(he)

石蠟(la)切片(pian)組織(zhi)CASPASE-8蛋(dan)白(bai)表(biao)達NBT顯色(se)光(guang)學(xue)顯(xian)微鏡檢(jian)測試(shi)劑(ji)盒(he)

B2比色法定量檢(jian)測試(shi)劑(ji)盒(he)

TEM電(dian)鏡冰(bing)凍切片(pian)免疫(yi)組織(zhi)化學(xue)HRP酶聯(lian)DAB間(jian)接(jie)檢(jian)測試(shi)劑(ji)盒(he)

細胞(bao)CLK1激酶活(huo)性(xing)定量檢(jian)測試(shi)劑(ji)盒(he)（A/B/C）

（SCHMORL）直接(jie)染(ran)色試(shi)劑(ji)盒(he)

細胞(bao)肪(fang)酸(suan)酶連(lian)續(xu)循(xun)環(huan)比色法定量檢(jian)測試(shi)劑(ji)盒(he)

脂(zhi)肪(fang)酸(suan)酰(xian)胺(an)水(shui)解酶（FAAH）活(huo)性(xing)熒光(guang)定量檢(jian)測試(shi)劑(ji)盒(he)

細胞(bao)總核(he)蛋(dan)白(bai)萃(cui)取(qu)試(shi)劑(ji)盒(he)

細胞(bao)色(se)素(su)P450亞酶CYP2A（COD）活(huo)性(xing)熒光(guang)定量檢(jian)測試(shi)劑(ji)盒(he)

細胞(bao)線(xian)粒(li)體(ti)復(fu)合物(wu)IV蛋(dan)白(bai)表(biao)達熒(ying)光(guang)定量檢(jian)測試(shi)劑(ji)盒(he)

組織(zhi)血管(guan)緊張素(su)Ⅰ轉(zhuan)化酶1（ACE1）活(huo)性(xing)熒光(guang)定量檢(jian)測試(shi)劑(ji)盒(he)

細胞(bao)培(pei)養抗支原(yuan)體(ti)汙染試(shi)劑(ji)盒(he)

原(yuan)肌(ji)球(qiu)蛋(dan)白(bai)調(tiao)節(jie)蛋(dan)白(bai)4抗體(ti)

鈣結合蛋(dan)白(bai)樣(yang)39抗體(ti)

鞘(qiao)脂(zhi)激(ji)活(huo)蛋(dan)白(bai)原(yuan)抗體(ti)

INTS4L1蛋(dan)白(bai)抗體(ti)

細胞(bao)雕(diao)亡(wang)增(zeng)強酶抗體(ti)

WDR23蛋(dan)白(bai)抗體(ti)

口蹄疫(yi)病毒(du)O型(xing)VP1抗體(ti)

BE(2)-C細胞(bao)APC標(biao)記(ji)人CD154單(dan)克(ke)隆抗體(ti)

鋅(xin)指蛋(dan)白(bai)692抗體(ti)

三、培(pei)養(yang)註意事項(xiang) 

1. 收到(dao)細胞(bao)後(hou)首(shou)先(xian)觀(guan)察細胞(bao)瓶(ping)是(shi)否完(wan)好(hao)，培(pei)養液(ye)是(shi)否(fou)有(you)漏(lou)液(ye)、渾(hun)濁(zhuo)等(deng)現象，若(ruo)有(you)上述現象 發生請(qing)及(ji)時(shi)和(he)我(wo)們(men)聯(lian)系。

2. 仔(zai)細(xi)閱讀(du)細(xi)胞(bao)說(shuo)明(ming)書(shu)，了(le)解細胞(bao)相(xiang)關(guan)信(xin)息(xi)，如細(xi)胞(bao)形(xing)態(tai)、所用培養基、血清(qing)比例(li)、所需 細(xi)胞(bao)因(yin)子(zi)等(deng)，確保細胞(bao)培(pei)養條(tiao)件(jian)壹(yi)致(zhi)，若(ruo)由(you)於(yu)培養(yang)條(tiao)件(jian)不壹(yi)致(zhi)而導致(zhi)細胞(bao)出(chu)現問(wen)題(ti)，責(ze)任由(you) 客戶自行(xing)承(cheng)擔。

3. 用 75%酒精擦拭細(xi)胞(bao)瓶(ping)表(biao)面，顯(xian)微鏡下(xia)觀(guan)察細胞(bao)狀(zhuang)態。因運輸問(wen)題(ti)，部(bu)分(fen)細胞(bao)由(you)於(yu)溫度(du) 變化及(ji)劇烈碰(peng)亡(wang)破碎形(xing)成(cheng)碎(sui)片(pian)，是正常(chang)現象。觀(guan)察好(hao)細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態後，75%酒精消毒(du)瓶(ping)壁(bi)將(jiang) T25 瓶(ping)置於(yu) 37℃培養(yang)箱(xiang)放置 2-4h。

4. 貼(tie)壁(bi)細(xi)胞(bao)可(ke)以(yi)消化，懸浮細胞(bao)直接(jie)混勻收(shou)集細(xi)胞(bao)，900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，棄(qi)上 清(qing)。加(jia) 5 mL PBS 重(zhong)懸細(xi)胞(bao)，再 900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，用新(xin)鮮(xian)的培養(yang)基(ji)重(zhong)懸 細(xi)胞(bao)，並(bing)接(jie)種(zhong)到新(xin)的培養(yang)瓶(ping)或(huo)培養皿中，置於(yu)培養(yang)箱(xiang)中(zhong)進(jin)行(xing)培(pei)養。

5. 請(qing)客戶用相同條(tiao)件(jian)的培養(yang)基(ji)用於(yu)細胞(bao)培(pei)養。

6. 建議(yi)客戶收(shou)到細胞(bao)後(hou)前 3 天(tian)各(ge)拍幾(ji)張細胞(bao)照(zhao)片(pian)，記(ji)錄(lu)細胞(bao)狀(zhuang)態，便於(yu)和我(wo)司技術(shu)部(bu)溝通(tong) 交流(liu)。由(you)於(yu)運輸(shu)的原(yuan)因(yin)，個(ge)別敏感細(xi)胞(bao)會(hui)出現不(bu)穩(wen)定的情(qing)況(kuang)，請(qing)及(ji)時(shi)和(he)我(wo)們(men)聯(lian)系，告(gao)知(zhi)細胞(bao) 的具(ju)體(ti)情(qing)況(kuang)，以(yi)便我(wo)們(men)的技術(shu)人員(yuan)跟(gen)蹤回訪(fang)直至(zhi)問題解決(jue)。

7. 該(gai)細(xi)胞(bao)僅供科研使用。

8. 備註：運(yun)輸用的培養(yang)基(ji) (灌(guan)液(ye)培(pei)養(yang)基(ji)) 不能(neng)再用來培養細(xi)胞(bao)，請(qing)換(huan)用按照(zhao)說(shuo)明(ming)書(shu)細(xi)胞(bao)培(pei) 養條(tiao)件(jian)新(xin)配制(zhi)的培養(yang)基(ji)來培養(yang)細(xi)胞(bao)。     收(shou)到細胞(bao)後(hou)第壹(yi)次(ci)傳(chuan)代(dai)建議(yi) 1：2 傳代(dai) 。

9. 註意：  1:2 傳(chuan)代(dai)就(jiu)是(shi) 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個(ge) T25 瓶(ping)或(huo)者(zhe) 2 個(ge) 6cm 皿。不(bu)是(shi) 1 個(ge) T25 瓶(ping)傳(chuan) 2 個(ge)10cm 皿。