粗(cu)球(qiu)孢子菌(jun)核酸檢(jian)測試(shi)劑(ji)盒(he)（熒光PCR法）

訂(ding)購信息(xi)：
 產品名(ming)稱：粗(cu)球(qiu)孢子菌(jun)核酸檢(jian)測試(shi)劑(ji)盒(he)（熒光PCR法）
規格(ge)：50T
編(bian)號：BH-P97233
分(fen)類(lei)：熒光PCR法
儲(chu)存(cun)條件(jian)：-20℃避(bi)光保(bao)存(cun)，避(bi)免反復凍(dong)融(rong)。
運(yun)輸：低溫、避(bi)光，快(kuai)遞免(mian)費(fei)送(song)貨(huo)上門。
產品特點(dian)：
◇高(gao)特異(yi)性(xing)：與(yu)其(qi)他(ta)病毒(du)無交(jiao)叉反應(ying)，無非(fei)特異(yi)性(xing)擴(kuo)增(zeng)；
◇高(gao)靈敏(min)度(du)：檢(jian)測靈(ling)敏(min)度(du)可達10~100拷(kao)貝；
◇操作簡便：該(gai)系(xi)列所有試(shi)劑(ji)均(jun)采用相同的體(ti)系(xi)和(he)條件(jian)，可(ke)同時(shi)進行(xing)多(duo)個(ge)檢(jian)測；
◇高(gao)通量：多種(zhong)雙重PCR檢(jian)測以(yi)及三重PCR檢(jian)測試(shi)劑(ji)盒(he)。

準(zhun)備物(wu)品：
清(qing)理液（A）                                   毫升
染(ran)色液（t B）                                   微升
稀釋液（C）                                   毫升
溶(rong)解(jie)液（tD）                                   毫升
產品說明書                                   1份
使(shi)用及效果：
PCR反應(ying)特點(dian)
(1) 特異(yi)性(xing)強
PCR反應(ying)的特異(yi)性(xing)決定(ding)因(yin)素(su)為(wei)：
①引(yin)物與(yu)模板DNA特異(yi)正(zheng)確(que)的結(jie)合(he)；
②堿(jian)基(ji)配對(dui)原(yuan)則；
③Taq DNA聚(ju)合酶(mei)合成(cheng)反應(ying)的忠實(shi)性(xing)；
④靶基(ji)因的特異(yi)性(xing)與(yu)保(bao)守(shou)性(xing)。
其(qi)中(zhong)引(yin)物與(yu)模板的正確結(jie)合(he)是關鍵(jian)。引(yin)物與(yu)模板的結(jie)合(he)及引(yin)物鏈(lian)的延(yan)伸是(shi)遵循(xun)堿(jian)基(ji)配對(dui)原(yuan)則的。聚合酶(mei)合成(cheng)反應(ying)的忠實(shi)性(xing)及Taq DNA聚(ju)合酶(mei)耐高(gao)溫(wen)性(xing)，使反應(ying)中(zhong)模板(ban)與引(yin)物的結(jie)合(he)(復性(xing))可(ke)以在較(jiao)高的溫度(du)下進行(xing)，結(jie)合(he)的特異(yi)性(xing)大大增(zeng)加(jia)，被擴(kuo)增(zeng)的靶基(ji)因片段也(ye)就(jiu)能保(bao)持很高的正確度(du)。再通過選(xuan)擇(ze)特異(yi)性(xing)和(he)保守(shou)性(xing)高的靶基(ji)因區(qu)，其(qi)特異(yi)性(xing)程度(du)就更(geng)高(gao)。
(2) 靈(ling)敏(min)度(du)高
PCR產物的生成(cheng)量是以指數方式增(zeng)加的，能將(jiang)皮克(pg=10-12g)量級的起(qi)始(shi)待(dai)測模(mo)板(ban)擴(kuo)增(zeng)到(dao)微克(ug=10-6g)水平。能從100萬(wan)個(ge)細胞(bao)中(zhong)檢(jian)出(chu)壹(yi)個(ge)靶細(xi)胞(bao)；在病(bing)毒的檢(jian)測中(zhong)，PCR的靈敏(min)度(du)可達3個(ge)RFU(空斑形(xing)成(cheng)單位)；在細(xi)菌(jun)學(xue)中(zhong)zui小(xiao)檢(jian)出(chu)率為(wei)3個(ge)細菌(jun)。
(3) 簡便、快速
PCR反應(ying)用(yong)耐高(gao)溫(wen)的Taq DNA聚(ju)合酶(mei)，壹(yi)次(ci)性地將(jiang)反應(ying)液加好後，即(ji)在DNA擴(kuo)增(zeng)液和(he)水浴鍋上進行(xing)變(bian)性(xing)-退(tui)火(huo)-延(yan)伸反應(ying)，壹(yi)般(ban)在2～4 小(xiao)時(shi)完成(cheng)擴(kuo)增(zeng)反應(ying)。擴(kuo)增(zeng)產物壹(yi)般(ban)用(yong)電(dian)泳(yong)分析，不壹(yi)定(ding)要用同位素(su)，無放(fang)射性汙(wu)染、易(yi)推廣(guang)。
(4) 對(dui)標本的純度(du)要求低
不需要分離病毒或細菌(jun)及培(pei)養(yang)細(xi)胞(bao)，DNA 粗(cu)制品(pin)及總(zong)RNA均(jun)可(ke)作為(wei)擴(kuo)增(zeng)模板(ban)。可直接用臨(lin)床(chuang)標本如(ru)血(xue)液、體(ti)腔液、洗嗽(sou)液、毛(mao)發、細(xi)胞(bao)、活(huo)PCR技術(shu)概論(lun)。
臍靜脈(mai)平滑肌細(xi)胞(bao)RNAHUVSMC miRNA5 μg己(ji)二酸二(er)乙(yi)酯(zhi)(>99.0%(GC))Diethyl Adipate>99.0%(GC)

大鼠(shu)海(hai)馬(ma)趾(zhi)星(xing)形(xing)膠(jiao)質細胞(bao)(RAh)(5×105)己(ji)二酸二(er)異(yi)癸(gui)酯(zhi)Diisodecyl Adipate

恒(heng)河猴(hou)腎細胞(bao);LLC-MK2壬(ren)二酸雙(2-乙(yi)基(ji)己(ji)基(ji))酯(zhi)(>75.0%(GC))Bis(2-ethylhexyl) Azelate>75.0%(GC)

KM小(xiao)鼠網(wang)織(zhi)細(xi)胞(bao)肉(rou)瘤(liu)瘤株;LⅡ 小(xiao)鼠腎上皮細胞(bao)*培(pei)養(yang)基(ji) 100mL己(ji)二酸二(er)異(yi)丙(bing)酯(zhi)(>99.0%(GC))Diisopropyl Adipate>99.0%(GC)

MN-c, 小(xiao)鼠皮質神經(jing)元(yuan) Mouse己(ji)二酸二(er)丁酯(zhi)(>99.0%(GC))Dibutyl Adipate>99.0%(GC)
CM-M037小(xiao)鼠小(xiao)腸隱窩(wo)上皮細胞(bao)*培(pei)養(yang)基(ji)100mL碳(tan)酸二(er)苯酯(zhi)(>99.0%(GC))>99.0%(GC)Diphenyl Carbonate

TE-10細(xi)胞(bao)，食管癌細(xi)胞(bao) 腦膠(jiao)質母細(xi)胞(bao)瘤(liu)細胞(bao),TG-905細(xi)胞(bao) 家(jia)貓(mao)皮膚(fu)細(xi)胞(bao);FCA-S1二(er)芐基(ji)亞碸(>98.0%(GC))>98.0%(GC)Dibenzyl Sulfoxide

Calu-1(肺(fei)癌細(xi)胞(bao)) 5×106cells/瓶(ping)×2乙(yi)二(er)醇(chun)二(er)苯(>99.0%(GC))>99.0%(GC)Ethylene Glycol Diphenyl Ether

PTPRC Others Human  CD45 細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液 (陽(yang)性(xing)對(dui)照) 十(shi)六(liu)碳(tan)酰(xian)胺(>95.0%(GC))>95.0%(GC)Hexadec*

小(xiao)鼠前(qian)胃癌細(xi)胞(bao);MFC（）含(han)量測定(ding)Pentoxifylline
粗(cu)球(qiu)孢子菌(jun)核酸檢(jian)測試(shi)劑(ji)盒(he)（熒光PCR法）絨(rong)毛(mao)膜內皮細胞(bao)，英(ying)文名(ming)或英文縮(suo)寫：Rapamycin，級別(bie)：BR，85%，規格(ge)：2KU

胚腎細胞(bao);293 Cells, low passage 心(xin)室肌細(xi)胞(bao)*培(pei)養(yang)基(ji) 100mL聯(lian)本酰(xian) Bqnzil 134-81-6

肺(fei)成(cheng)纖維細胞(bao)RNAHPF miRNA5 μg尿(niao)苷-5′-單(dan)嶙酸，英(ying)文名(ming)或英文縮(suo)寫：U 5′-P，級別(bie)：BR，98%，規格(ge)：50毫克

IGSF8 Others Human  PGRL / IGSF8 細(xi)胞(bao)裂(lie)解(jie)液 (陽(yang)性(xing)對(dui)照) 正(zheng)十(shi)三烷(wan)，英文名(ming)或英文縮(suo)寫：Tridecane，級別(bie)：SP，98.5%，規格(ge)：5克

小(xiao)香豬(zhu)皮膚(fu)細(xi)胞(bao);SSC-S2MTT 250mg/500mg/1g Amresco分(fen)裝(zhuang)
檢(jian)測步(bu)驟：
壹(yi)、 試(shi)劑(ji)的準備
從試(shi)劑(ji)盒(he)中(zhong)取出(chu)熒光PCR反應(ying)液(BC-qPCR MIX)、酶(mei)混(hun)合(he)物(Enzymes MIX)，冰(bing)上融(rong)化並振蕩混(hun)勻後，10000rpm離心10s。
設(she)所需(xu)要的PCR反應(ying)管(guan)管(guan)數為(wei)N(N=樣本數+1管(guan)陰性(xing)對(dui)照+1管(guan)陽(yang)性(xing)對(dui)照)，每(mei)個測試(shi)反應(ying)體(ti)系(xi)配制如(ru)下(xia)表：
試(shi)劑(ji) 每(mei)個反應(ying)加(jia)入(ru)的量 N個(ge)反應(ying)加(jia)入(ru)的量
熒光PCR反應(ying)液 14µL N×14µL
酶(mei)混(hun)合(he)物 1 µL N×1 µL
總(zong)量 15 µL N×15µL
（1） 計(ji)算好各(ge)試(shi)劑(ji)的使用量，加入壹(yi)適(shi)當體(ti)積(ji)潔(jie)凈離心管中(zhong)，充分(fen)混(hun)勻，10000rpm離心10s，向設(she)定的N個(ge)PCR反應(ying)管(guan)中(zhong)分別(bie)加入(ru)15μL熒光PCR反應(ying)液，向每(mei)管中(zhong)加入(ru)處理(li)後樣品(pin)或陰性(xing)對(dui)照(NTC)和(he)陽(yang)性(xing)對(dui)照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬(shun)時(shi)離心10秒(miao)。
7.2 qPCR反應(ying)條件(jian)
將(jiang)各反應(ying)管(guan)放(fang)入(ru)定(ding)量PCR儀(yi)器(qi)的反應(ying)槽內。
循(xun)環(huan)條件(jian):
1循(xun)環(huan) 50℃ for 2 min
預(yu)變性(xing) 1循(xun)環(huan) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuo)增(zeng) 40循(xun)環(huan) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延(yan)伸時(shi)收(shou)集(ji)熒光信(xin)號。報(bao)告(gao)基(ji)團(tuan)：設(she)置為(wei)FAM。淬(cui)滅(mie)基(ji)團(tuan)：NONE，請(qing)勿(wu)選(xuan)擇(ze)ROX參(can)比(bi)熒光。