C3H/10T1/2,Clone8細胞

公司產(chan)品僅供(gong)科(ke)研(yan)研(yan)究(jiu)使(shi)用、不得(de)用於臨(lin)床(chuang)診斷！

1、細(xi)胞傳代：

1）細胞生長(chang)至(zhi)覆蓋培(pei)養瓶的(de) 80%面(mian)積時，棄 25cm2培(pei)養瓶中(zhong)的(de)培(pei)養液，用 PBS 清洗細胞壹次；

2）添(tian)加 0.25%消(xiao)化(hua)液(ye)約 1ml 至培(pei)養瓶中(zhong)，倒置顯微(wei)鏡下觀察，待(dai)細(xi)胞回(hui)縮(suo)變(bian)圓(yuan)後加入(ru) 5ml 培(pei)養

液終(zhong)止(zhi)消化(hua)，再(zai)輕輕吹打細(xi)胞使之脫落(luo)，然後將(jiang)懸(xuan)液(ye)轉移(yi)至(zhi) 15ml 離(li)心(xin)管(guan)中(zhong)，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）棄(qi)上清，沈(chen)澱細(xi)胞用 1-2ml 培(pei)養基重(zhong)懸，然(ran)後按(an) 1:2 比(bi)例(li)進(jin)行(xing)分瓶傳(chuan)代(dai)，最(zui)後放(fang)入(ru) 37℃，5%CO2細胞

培(pei)養箱(xiang)中培(pei)養；

壹、商品(pin)介(jie)紹(shao)：

2、細胞凍(dong)存：

1）細(xi)胞生長(chang)至(zhi)覆蓋培(pei)養瓶的(de) 80%面(mian)積時，棄 25cm2培(pei)養瓶中(zhong)的(de)培(pei)養液，用 PBS 清洗細胞壹次；

2）添(tian)加 0.25%消(xiao)化(hua)液(ye)約 1ml 至培(pei)養瓶中(zhong)，倒置顯微(wei)鏡下觀察，待(dai)細(xi)胞回(hui)縮(suo)變(bian)圓(yuan)後加入(ru)培(pei)養液終(zhong)

止(zhi)消化(hua)，輕輕吹打細(xi)胞使之脫落(luo)，然後將(jiang)懸(xuan)液(ye)轉移(yi)至(zhi) 15ml 離(li)心(xin)管(guan)中(zhong)，1000rpm 離(li)心(xin) 5min；

3）用適(shi)量(liang)的凍(dong)存液(ye)（FBS：DMSO=9 ：1）重(zhong)懸細胞，並放置於凍(dong)存管(guan)中(zhong)；

4）先(xian)將(jiang)細胞凍(dong)存管(guan)放(fang)置於-20℃ 1.5h，然(ran)後將(jiang)其(qi)移(yi)入(ru)-80℃過夜(ye)，24h 後轉入(ru)液氮(dan)中進(jin)行(xing)長(chang)期(qi)保存。使(shi)用程序

降溫盒可(ke)直(zhi)接放(fang)入(ru)-80℃。

二、細(xi)胞培(pei)養操(cao)作(zuo)

1) 復蘇(su)細(xi)胞：以下細胞培(pei)養凍(dong)存處(chu)理(li)僅供(gong)參(can)考，具體(ti)操(cao)作(zuo)步(bu)驟以(yi)隨(sui)貨(huo)產(chan)品說明書(shu)為主。將(jiang)含有1 mL細(xi)胞懸液的凍(dong)存管(guan)在 37℃水(shui)浴(yu)中迅(xun)速(su)搖晃解凍(dong)，加4 mL培(pei)養基混合均勻(yun)。在1000 rpm條(tiao)件下離(li)心(xin)3 min，棄(qi)去(qu)上清液，加1-2 mL培(pei)養基後吹勻(yun)。然後將(jiang)所(suo)有(you)細胞懸液加入(ru)含適(shi)量(liang)培(pei)養基的(de)培(pei)養瓶中(zhong)培(pei)養過夜(ye)（或將(jiang)細(xi)胞懸液加入(ru)10 cm皿中(zhong)，加入(ru)約8 mL培(pei)養基，培(pei)養過夜(ye)）。第二天(tian)換液並檢查(zha)細(xi)胞密度(du)。

2) 細胞傳代：如(ru)果細胞密度(du)達 80%-90%，即(ji)可(ke)進(jin)行(xing)傳代(dai)培(pei)養。

a、棄去(qu)培(pei)養上清，用不含鈣(gai)、鎂(mei)離(li)子的(de)PBS潤(run)洗(xi)細(xi)胞1-2次。

b、加1 mL消(xiao)化(hua)液(ye)（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培(pei)養瓶中(zhong)，使(shi)消化(hua)液(ye)浸潤所(suo)有(you)細胞，將培(pei)養瓶置於37℃培(pei)養箱(xiang)中消(xiao)化(hua)1-2 min（視(shi)細胞情(qing)況(kuang)而(er)定(ding)），然後在顯(xian)微鏡下觀察細胞消化(hua)情(qing)況(kuang)，若細(xi)胞大部(bu)分(fen)變圓(yuan)並(bing)脫落(luo)，迅(xun)速(su)拿(na)回(hui)操(cao)作(zuo)臺(tai)，輕敲幾下培(pei)養瓶後加2-3ml培(pei)養基終(zhong)止(zhi)消化(hua)。輕輕打勻(yun)後裝(zhuang)入(ru)無菌(jun)離(li)心(xin)管(guan)中(zhong)，1000 rpm離(li)心(xin)5 min，棄(qi)去(qu)上清液，補加1-2 mL培(pei)養液後吹勻(yun)。

c、將細(xi)胞懸液按1:2比(bi)例(li)分到(dao)新(xin)的含8 mL培(pei)養基的(de)新(xin)皿中或(huo)者瓶中(zhong)，置於培(pei)養箱(xiang)中培(pei)養。 3) 細胞凍(dong)存：待(dai)細(xi)胞生長(chang)狀(zhuang)態良好(hao)時，可進(jin)行(xing)細胞凍(dong)存。下面 T25 瓶為(wei)例(li)；a、收(shou)集(ji)細胞及細(xi)胞培(pei)養液，裝(zhuang)入(ru)無菌(jun)離(li)心(xin)管(guan)中(zhong)，1000 rpm條(tiao)件下離(li)心(xin)4 min，棄(qi)去(qu)上清液，用PBS清洗壹遍，棄盡(jin)PBS，進(jin)行(xing)細胞計數(shu)。

b、根(gen)據細胞數(shu)量(liang)加入(ru)無血(xue)清細(xi)胞凍(dong)存液(ye)，使(shi)細胞密度(du)5×106~1×107/mL，輕輕混勻(yun)，每支(zhi)凍(dong)存管(guan)凍(dong)存1mL細(xi)胞懸液，註(zhu)意(yi)凍(dong)存管(guan)做好(hao)標(biao)識(shi)。將凍(dong)存管(guan)放(fang)入(ru)-80℃冰(bing)箱(xiang)，24 h後轉入(ru)液氮(dan)灌儲(chu)存。記錄(lu)凍(dong)存管(guan)位(wei)置以便(bian)下次拿(na)取。

公司正在出售(shou)的(de)產(chan)品：

組織單胺(an)氧化(hua)酶（MAO）總活(huo)性比(bi)色(se)法(fa)定(ding)量(liang)檢測(ce)試劑盒

可溶(rong)性包(bao)涵(han)體(ti)蛋白復(fu)性（物(wu)理(li)透(tou)析(xi)）試劑盒（10毫升(sheng)純化(hua)蛋白）

組織HPV7（HUMAN PAPILLOMAVIRUS-7）病毒(du)定(ding)量(liang)PCR

細胞CASPASE-10蛋白表(biao)達熒光(guang)定(ding)量(liang)檢測(ce)試劑盒

細胞總氨(an)基(ji)酸含量(liang)熒光定(ding)量(liang)檢測(ce)試劑盒

TEM電(dian)鏡(jing)石(shi)蠟(la)切(qie)片(pian)免疫組織化(hua)學(xue)AP酶聯NBT/BCIP間接檢測(ce)試劑盒（含AP二抗(kang)）

細胞FLT3激(ji)酶活性定(ding)量(liang)檢測(ce)試劑盒（A/B/C）

動物(wu)細胞周期S早期同(tong)步(bu)（SYNCHRONY）處理(li)試劑盒

人載(zai)脂蛋白B標準溶(rong)液

組織脂蛋白脂酶活性比(bi)色(se)法(fa)定(ding)量(liang)檢測(ce)試劑盒

頂(ding)體形(xing)態豌(wan)豆凝(ning)集(ji)素熒(ying)光標(biao)記（PSA-FITC）染色(se)試劑盒

體外(wai)非(fei)細胞系(xi)統(tong)細(xi)胞色(se)素P450亞酶2A6（COUMARIN）活性

鈣(gai)ATP酶PMCA蛋白免(mian)疫共(gong)沈(chen)澱分(fen)析(xi)試劑盒

細胞艾滋病毒(du)1（HIV-1 PROTEASE）活性熒(ying)光(guang)淬滅法(fa)

人體(ti)胚(pei)胎(tai)幹細胞條件培(pei)養基

載脂蛋白B-mRNA編輯(ji)酶復合物1抗(kang)體(ti)

鈣(gai)調磷酸酶A/鈣(gai)依(yi)賴磷(lin)酸酶A抗(kang)體(ti)

清道夫受體A亞型5抗(kang)體(ti)

Irx3蛋白抗(kang)體(ti)

細胞分裂周期(qi)蛋白23抗(kang)體(ti)

XRN1蛋白抗(kang)體(ti)

跨(kua)膜(mo)蛋白16A/鈣(gai)激(ji)活(huo)氯(lv)離(li)子通(tong)道單克(ke)隆抗(kang)體(ti)

C3H/10T1/2,Clone8細胞APC標記人(ren)CD41單克(ke)隆抗(kang)體(ti)

鋅(xin)指(zhi)蛋白743抗(kang)體(ti)

三(san)、培(pei)養註(zhu)意(yi)事項(xiang) 

1. 收(shou)到(dao)細(xi)胞後首(shou)先(xian)觀察細胞瓶是(shi)否(fou)完(wan)好(hao)，培(pei)養液是(shi)否(fou)有(you)漏液、渾(hun)濁等現(xian)象(xiang)，若有(you)上述現象(xiang) 發生請(qing)及時和我們(men)聯(lian)系(xi)。

2. 仔(zai)細(xi)閱讀細胞說明書(shu)，了解細胞相關信息，如(ru)細胞形態、所(suo)用培(pei)養基、血(xue)清比(bi)例(li)、所需(xu) 細(xi)胞因子等，確(que)保細胞培(pei)養條件壹致，若由於培(pei)養條件不壹致而導致(zhi)細胞出現(xian)問(wen)題，責任(ren)由 客(ke)戶自行(xing)承擔(dan)。

3. 用 75%酒精(jing)擦拭(shi)細(xi)胞瓶表(biao)面(mian)，顯(xian)微(wei)鏡(jing)下觀察細胞狀(zhuang)態。因(yin)運(yun)輸問(wen)題，部分(fen)細胞由於溫度(du) 變(bian)化(hua)及劇(ju)烈碰亡(wang)破(po)碎形成(cheng)碎片(pian)，是(shi)正常現(xian)象(xiang)。觀察好(hao)細(xi)胞狀(zhuang)態後，75%酒(jiu)精(jing)消毒(du)瓶壁(bi)將(jiang) T25 瓶置於 37℃培(pei)養箱(xiang)放置 2-4h。

4. 貼壁細(xi)胞可以消化(hua)，懸(xuan)浮細(xi)胞直(zhi)接混勻(yun)收(shou)集(ji)細胞，900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，棄(qi)上 清。加 5 mL PBS 重(zhong)懸細(xi)胞，再 900 rpm-1000 rpm 離(li)心(xin) 3 min，用新(xin)鮮的(de)培(pei)養基重(zhong)懸 細(xi)胞，並接種(zhong)到(dao)新(xin)的培(pei)養瓶或(huo)培(pei)養皿中(zhong)，置於培(pei)養箱(xiang)中進(jin)行(xing)培(pei)養。

5. 請客(ke)戶用相同條件的培(pei)養基用於細胞培(pei)養。

6. 建議客(ke)戶收(shou)到(dao)細(xi)胞後前(qian) 3 天(tian)各拍(pai)幾張細(xi)胞照片(pian)，記錄(lu)細胞狀(zhuang)態，便(bian)於和(he)我司技(ji)術(shu)部溝(gou)通 交流。由於運(yun)輸的(de)原(yuan)因(yin)，個(ge)別敏感(gan)細(xi)胞會出現(xian)不穩定(ding)的情(qing)況(kuang)，請(qing)及時和我們(men)聯(lian)系(xi)，告(gao)知(zhi)細(xi)胞 的具體情(qing)況(kuang)，以(yi)便(bian)我們(men)的(de)技(ji)術(shu)人員跟蹤(zong)回(hui)訪直(zhi)至問題解決(jue)。

7. 該細胞僅供(gong)科(ke)研(yan)使(shi)用。

8. 備註(zhu)：運(yun)輸用的培(pei)養基 (灌(guan)液培(pei)養基) 不能再(zai)用來培(pei)養細胞，請換用按照說明書(shu)細胞培(pei) 養條件新(xin)配制的(de)培(pei)養基來培(pei)養細胞。     收(shou)到(dao)細(xi)胞後第壹次傳代建議 1：2 傳代(dai) 。

9. 註(zhu)意(yi)：  1:2 傳代(dai)就是(shi) 1 個 T25 瓶傳(chuan) 2 個(ge) T25 瓶或(huo)者 2 個 6cm 皿(min)。不是(shi) 1 個 T25 瓶傳(chuan) 2 個(ge)10cm 皿。