禽(qin)腦脊髓(sui)炎(yan)病(bing)毒（AEV）核酸檢(jian)測(ce)試劑盒(he)

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 產(chan)品(pin)名(ming)稱(cheng)：禽(qin)腦脊髓(sui)炎(yan)病(bing)毒（AEV）核(he)酸(suan)檢(jian)測(ce)試劑盒(he)
規格：50T
編號(hao)：BH-P96749
分類：熒(ying)光(guang)PCR法(fa)
儲(chu)存條(tiao)件：-20℃避(bi)光(guang)保(bao)存(cun)，避(bi)免(mian)反(fan)復凍(dong)融(rong)。
運(yun)輸(shu)：低溫(wen)、避光(guang)，快(kuai)遞免(mian)費送(song)貨上(shang)門(men)。
產(chan)品(pin)特(te)點(dian)：
◇高(gao)特(te)異(yi)性(xing)：與(yu)其(qi)他(ta)病(bing)毒(du)無交叉(cha)反(fan)應，無非特(te)異(yi)性擴(kuo)增；
◇高(gao)靈敏度：檢測(ce)靈敏度可達(da)10~100拷(kao)貝；
◇操(cao)作(zuo)簡(jian)便(bian)：該系(xi)列所有(you)試劑(ji)均(jun)采用(yong)相(xiang)同(tong)的(de)體系(xi)和(he)條(tiao)件，可同(tong)時(shi)進行(xing)多個(ge)檢(jian)測(ce)；
◇高(gao)通量(liang)：多種(zhong)雙重PCR檢(jian)測(ce)以(yi)及(ji)三重PCR檢(jian)測(ce)試劑盒(he)。

準(zhun)備(bei)物(wu)品(pin)：
清(qing)理液(ye)（A）                                   毫(hao)升(sheng)
染色液(ye)（t B）                                   微(wei)升(sheng)
稀(xi)釋(shi)液（C）                                   毫(hao)升(sheng)
溶(rong)解(jie)液(ye)（tD）                                   毫(hao)升(sheng)
產(chan)品(pin)說(shuo)明(ming)書                                   1份(fen)
使(shi)用及(ji)效(xiao)果：
PCR反(fan)應特點(dian)
(1) 特(te)異(yi)性(xing)強
PCR反(fan)應的(de)特異性(xing)決定因(yin)素為(wei)：
①引(yin)物(wu)與(yu)模板(ban)DNA特(te)異(yi)正(zheng)確的(de)結(jie)合(he)；
②堿(jian)基(ji)配(pei)對原(yuan)則；
③Taq DNA聚合(he)酶合(he)成反(fan)應的(de)忠實性(xing)；
④靶(ba)基(ji)因(yin)的(de)特異性(xing)與(yu)保(bao)守(shou)性(xing)。
其(qi)中引(yin)物(wu)與(yu)模板(ban)的(de)正確結(jie)合(he)是關(guan)鍵(jian)。引物(wu)與(yu)模板(ban)的(de)結(jie)合(he)及(ji)引物(wu)鏈的(de)延伸(shen)是遵(zun)循堿基(ji)配(pei)對原(yuan)則的(de)。聚合(he)酶合(he)成反(fan)應的(de)忠實性(xing)及(ji)Taq DNA聚合(he)酶耐(nai)高(gao)溫(wen)性，使(shi)反(fan)應中模板(ban)與(yu)引(yin)物(wu)的(de)結(jie)合(he)(復性(xing))可以(yi)在(zai)較(jiao)高(gao)的(de)溫(wen)度下(xia)進行(xing)，結(jie)合(he)的(de)特異性(xing)大(da)大增加，被(bei)擴增(zeng)的(de)靶(ba)基(ji)因(yin)片(pian)段(duan)也(ye)就(jiu)能(neng)保(bao)持(chi)很(hen)高(gao)的(de)正確度。再通過(guo)選(xuan)擇(ze)特異性和(he)保(bao)守(shou)性高(gao)的(de)靶(ba)基(ji)因(yin)區(qu)，其(qi)特(te)異(yi)性(xing)程(cheng)度就(jiu)更高(gao)。
(2) 靈敏度高(gao)
PCR產(chan)物(wu)的(de)生(sheng)成量(liang)是以(yi)指數(shu)方式(shi)增(zeng)加的(de)，能(neng)將(jiang)皮(pi)克(ke)(pg=10-12g)量(liang)級的(de)起始待(dai)測(ce)模板(ban)擴(kuo)增到(dao)微(wei)克(ke)(ug=10-6g)水(shui)平(ping)。能(neng)從(cong)100萬個(ge)細胞(bao)中檢(jian)出壹(yi)個(ge)靶(ba)細胞(bao)；在病(bing)毒的(de)檢測(ce)中，PCR的(de)靈敏度可達(da)3個(ge)RFU(空斑(ban)形成單(dan)位(wei))；在(zai)細菌(jun)學中zui小(xiao)檢(jian)出率(lv)為(wei)3個(ge)細菌(jun)。
(3) 簡(jian)便(bian)、快(kuai)速(su)
PCR反(fan)應用耐(nai)高(gao)溫(wen)的(de)Taq DNA聚合(he)酶，壹次性(xing)地(di)將(jiang)反(fan)應液加好(hao)後(hou)，即在DNA擴(kuo)增(zeng)液(ye)和(he)水(shui)浴鍋(guo)上進(jin)行變性(xing)-退(tui)火(huo)-延伸(shen)反(fan)應，壹般在(zai)2～4 小(xiao)時(shi)完成擴(kuo)增(zeng)反(fan)應。擴增產(chan)物壹般(ban)用電(dian)泳(yong)分析，不壹定要(yao)用同(tong)位素，無放(fang)射(she)性汙染、易(yi)推廣(guang)。
(4) 對標(biao)本(ben)的(de)純度要(yao)求(qiu)低
不(bu)需(xu)要(yao)分離(li)病(bing)毒或細菌(jun)及(ji)培養(yang)細胞(bao)，DNA 粗制(zhi)品(pin)及(ji)總RNA均(jun)可作(zuo)為(wei)擴增(zeng)模板(ban)。可直接用臨(lin)床標(biao)本(ben)如(ru)血液(ye)、體腔液、洗(xi)嗽液、毛發、細胞(bao)、活(huo)PCR技(ji)術(shu)概(gai)論(lun)。
Promocell C-28052 DC Generation Medium DXF,樹(shu)突(tu)狀(zhuang)細胞(bao)生(sheng)成培養(yang)基(ji)DXF(即用型) 250ml芒果苷(gan)Mangiferin≥90%,BR

牙(ya)周膜成纖維細胞(bao)總RNAHPLF NA毛(mao)蕊(rui)異(yi)黃(huang)酮()CalycosinHPLC≥98%,

ITGAX & ITGB2 Others Human  ITGAX & ITGB2 Heterodimer 細胞(bao)裂解(jie)液 (陽(yang)性(xing)對照(zhao)) 毛(mao)蕊(rui)異(yi)黃(huang)酮苷(gan)（）Calycosin-7-O-β-D-glucosideHPLC≥98%，

KYSE410 食管(guan)癌(ai)細胞(bao)沒食子(zi)兒(er)茶(cha)素（）GC;  (-)-gallocatechinHPLC≥98%，

CL-0337FO(小(xiao)鼠(shu)骨(gu)髓(sui)瘤(liu)細胞(bao))5×106cells/瓶(ping)×2沒食子(zi)兒(er)茶(cha)素沒食子(zi)酸(suan)酯（）GCG;(−)-Gallocatechin gallateHPLC≥98%，
IGFBP5 Others Cynomolgus 食蟹(xie)猴(hou) IGFBP5 / IGFBP-5 細胞(bao)裂解(jie)液 (陽(yang)性(xing)對照(zhao)) 間(jian)甲(jia)基(ji)紅(hong)指示(shi)劑(ji)m-Methyl red

脂肪(fang)間(jian)充(chong)質幹細胞(bao)HMSC-ad紫脲酸銨(IND)INDMurexide

SK-MES-1細胞(bao)，肺癌(ai)細胞(bao) 膀(pang)胱鱗癌(ai)細胞(bao),ScaBER細胞(bao) 前脂肪(fang)細胞(bao)-皮(pi)下(xia)HPA-s卡(ka)立(li)普多>99%,USP,BRCarisoprodol

水(shui)貂(diao)肺(fei)上(shang)皮(pi)細胞(bao);Mv.1.Lu(NBL-7)卡(ka)立(li)普多（）HPLC>98%,Carisoprodol

MICB Others Human  MICB 細胞(bao)裂解(jie)液 (陽(yang)性(xing)對照(zhao)) > 99%,EPCarvedilol
禽(qin)腦脊髓(sui)炎(yan)病(bing)毒（AEV）核(he)酸(suan)檢(jian)測(ce)試劑盒(he)上(shang)皮(pi)細胞(bao)*培養(yang)基(ji) 100mL表(biao)告依春(chun)（）HPLC≥98%，Epigoitrin

TE671 subline No.2細胞(bao)，橫紋(wen)肌肉(rou)瘤(liu)細胞(bao) 化膿性(xing)鏈球菌 轉(zhuan)PYTL基(ji)因(yin)小(xiao)鼠支持細胞(bao);15P-1表(biao)沒食子(zi)兒(er)茶(cha)素（）HPLC≥98%，(−)-Epigallocatechin/EGC

CCL4 Protein Human 重(zhong)組 CCL4 / MIP1B 蛋(dan)白 (His 標(biao)簽)表(biao)小(xiao)檗堿（）HPLC≥98%，Epiberberine

LS-174T(結(jie)腸(chang)腺癌細胞(bao)) 5×106cells/瓶(ping)×2  PRNP / Prion 細胞(bao)裂解(jie)液 (陽(yang)性(xing)對照(zhao)) 濱(bin)蒿(hao)內(內)酯（）HPLC≥98%，Scoparone

兔(tu)主動脈(mai)平滑肌細胞(bao);CCC-SMC-1變色(se)酸(suan)鈉(na),鉻變酸(suan)二(er)鈉(na)ARChromotropic acid di salt dihydrate
檢(jian)測(ce)步(bu)驟：
壹(yi)、 試(shi)劑(ji)的(de)準(zhun)備(bei)
從(cong)試(shi)劑(ji)盒中取(qu)出熒(ying)光(guang)PCR反(fan)應液(BC-qPCR MIX)、酶(mei)混(hun)合(he)物(Enzymes MIX)，冰(bing)上融(rong)化並振(zhen)蕩混(hun)勻後(hou)，10000rpm離(li)心(xin)10s。
設(she)所(suo)需(xu)要(yao)的(de)PCR反(fan)應管管數(shu)為(wei)N(N=樣(yang)本(ben)數(shu)+1管(guan)陰性對照(zhao)+1管(guan)陽(yang)性(xing)對照(zhao))，每(mei)個(ge)測(ce)試反(fan)應體系(xi)配(pei)制(zhi)如下(xia)表(biao)：
試(shi)劑(ji) 每(mei)個(ge)反(fan)應加入(ru)的(de)量(liang) N個(ge)反(fan)應加入(ru)的(de)量(liang)
熒(ying)光(guang)PCR反(fan)應液 14µL N×14µL
酶(mei)混(hun)合(he)物 1 µL N×1 µL
總(zong)量(liang) 15 µL N×15µL
（1） 計(ji)算(suan)好各(ge)試(shi)劑的(de)使(shi)用量(liang)，加入(ru)壹適(shi)當體積(ji)潔(jie)凈(jing)離心(xin)管中，充(chong)分混(hun)勻(yun)，10000rpm離(li)心(xin)10s，向(xiang)設(she)定(ding)的(de)N個(ge)PCR反(fan)應管中分別(bie)加入(ru)15μL熒(ying)光(guang)PCR反(fan)應液，向每(mei)管中加入(ru)處(chu)理後(hou)樣品(pin)或(huo)陰性對照(zhao)(NTC)和(he)陽(yang)性(xing)對照(zhao)(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時(shi)離心(xin)10秒。
7.2 qPCR反(fan)應條(tiao)件
將(jiang)各(ge)反(fan)應管放(fang)入(ru)定量(liang)PCR儀(yi)器的(de)反(fan)應槽(cao)內。
循環條(tiao)件:
1循環 50℃ for 2 min
預變性(xing) 1循環 95℃ for 10 min
PCR擴(kuo)增(zeng) 40循環 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在(zai)60℃延伸(shen)時(shi)收集(ji)熒(ying)光(guang)信(xin)號(hao)。報(bao)告基(ji)團：設置(zhi)為(wei)FAM。淬(cui)滅(mie)基(ji)團：NONE，請勿選擇(ze)ROX參(can)比(bi)熒(ying)光(guang)。