斑點(dian)熱(re)立克次(ci)體(ti)核(he)酸(suan)檢(jian)測試劑盒(he)

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 產(chan)品名(ming)稱：斑點(dian)熱(re)立克次(ci)體(ti)核(he)酸(suan)檢(jian)測試劑盒(he)
規格：50T
編(bian)號：BH-P96618
分(fen)類(lei)：熒(ying)光(guang)PCR法
儲(chu)存(cun)條件(jian)：-20℃避光(guang)保(bao)存(cun)，避免反(fan)復凍(dong)融(rong)。
運輸(shu)：低(di)溫(wen)、避(bi)光(guang)，快(kuai)遞免費(fei)送貨上(shang)門(men)。
產(chan)品特(te)點(dian)：
◇高特(te)異性：與其他病毒無(wu)交叉反(fan)應，無(wu)非(fei)特(te)異性擴增；
◇高靈(ling)敏度(du)：檢測靈敏度(du)可(ke)達(da)10~100拷(kao)貝；
◇操作(zuo)簡便：該系列(lie)所有試劑均采用(yong)相同的(de)體(ti)系和(he)條(tiao)件(jian)，可(ke)同時(shi)進(jin)行多(duo)個(ge)檢(jian)測；
◇高通(tong)量(liang)：多(duo)種(zhong)雙重PCR檢測以及(ji)三重PCR檢測試劑盒(he)。

準備(bei)物(wu)品：
清理液（A）                                   毫(hao)升
染(ran)色液（t B）                                   微升
稀釋液（C）                                   毫(hao)升
溶(rong)解液（tD）                                   毫(hao)升
產(chan)品說明書                                   1份
使(shi)用(yong)及(ji)效(xiao)果(guo)：
PCR反(fan)應特(te)點(dian)
(1) 特(te)異性強
PCR反(fan)應的(de)特(te)異性決(jue)定(ding)因素為(wei)：
①引(yin)物與模(mo)板(ban)DNA特(te)異正確(que)的(de)結(jie)合(he)；
②堿(jian)基(ji)配對原則(ze)；
③Taq DNA聚(ju)合(he)酶(mei)合(he)成反(fan)應的(de)忠(zhong)實(shi)性(xing)；
④靶(ba)基(ji)因(yin)的(de)特(te)異性與保守(shou)性(xing)。
其中(zhong)引(yin)物與模(mo)板(ban)的(de)正(zheng)確(que)結(jie)合(he)是(shi)關鍵(jian)。引(yin)物與模(mo)板(ban)的(de)結(jie)合(he)及(ji)引(yin)物鏈(lian)的(de)延(yan)伸(shen)是(shi)遵循堿(jian)基(ji)配對原則(ze)的(de)。聚(ju)合(he)酶(mei)合(he)成反(fan)應的(de)忠(zhong)實(shi)性(xing)及(ji)Taq DNA聚(ju)合(he)酶(mei)耐高溫(wen)性，使(shi)反(fan)應中模(mo)板(ban)與引(yin)物的(de)結(jie)合(he)(復性)可(ke)以在較高的(de)溫(wen)度下(xia)進(jin)行，結(jie)合(he)的(de)特(te)異性大大增加，被(bei)擴(kuo)增的(de)靶(ba)基(ji)因(yin)片(pian)段也(ye)就(jiu)能保持很高的(de)正(zheng)確(que)度。再通(tong)過(guo)選擇特(te)異性和(he)保(bao)守(shou)性(xing)高的(de)靶(ba)基(ji)因(yin)區(qu)，其特(te)異性程度就(jiu)更高。
(2) 靈敏度(du)高
PCR產(chan)物(wu)的(de)生成量(liang)是(shi)以指數(shu)方(fang)式(shi)增加的(de)，能將皮(pi)克(ke)(pg=10-12g)量(liang)級的(de)起(qi)始(shi)待測模(mo)板(ban)擴增到微克(ke)(ug=10-6g)水平(ping)。能從(cong)100萬(wan)個(ge)細(xi)胞(bao)中檢(jian)出(chu)壹個(ge)靶(ba)細(xi)胞(bao)；在病毒的(de)檢(jian)測中，PCR的(de)靈(ling)敏度(du)可(ke)達(da)3個(ge)RFU(空斑形(xing)成單位)；在細菌(jun)學(xue)中(zhong)zui小檢出(chu)率(lv)為(wei)3個(ge)細(xi)菌。
(3) 簡便、快(kuai)速
PCR反(fan)應用(yong)耐高溫(wen)的(de)Taq DNA聚(ju)合(he)酶(mei)，壹次(ci)性(xing)地(di)將(jiang)反(fan)應液加(jia)好後(hou)，即(ji)在DNA擴增液和(he)水(shui)浴鍋(guo)上(shang)進(jin)行變(bian)性(xing)-退(tui)火-延(yan)伸(shen)反(fan)應，壹般(ban)在2～4 小時完(wan)成擴(kuo)增反(fan)應。擴增產(chan)物(wu)壹般(ban)用(yong)電泳(yong)分(fen)析，不(bu)壹定(ding)要用(yong)同位(wei)素(su)，無(wu)放射性汙(wu)染、易推(tui)廣(guang)。
(4) 對標本(ben)的(de)純(chun)度要(yao)求低(di)
不(bu)需(xu)要分(fen)離病(bing)毒或(huo)細(xi)菌(jun)及(ji)培(pei)養細胞(bao)，DNA 粗(cu)制品及(ji)總RNA均(jun)可(ke)作(zuo)為(wei)擴增模(mo)板(ban)。可(ke)直(zhi)接(jie)用(yong)臨床(chuang)標本(ben)如血液(ye)、體腔(qiang)液、洗(xi)嗽(sou)液(ye)、毛(mao)發(fa)、細胞(bao)、活PCR技(ji)術概(gai)論(lun)。
SW038-C2-tk細(xi)胞(bao)，轉(zhuan)染了(le)tk基(ji)因的(de)SW038-C2細胞(bao) 副(fu)溶(rong)血性(xing)弧菌 臍(qi)靜(jing)脈(mai)平(ping)滑(hua)肌(ji)細(xi)胞(bao)RNAHUVSMC miRNA5 μg潑(po)尼(ni)Prednisone>98%,USP30,BR

SK-N-MC(神經(jing)上(shang)皮(pi)瘤(liu)細胞(bao)) 5×106cells/瓶×2潑尼(ni)()PrednisoneHPLC>98%,

Hep 3B(肝癌細胞(bao)) 5×106cells/瓶×2 CL-0434SC-1(小鼠(shu)胚(pei)胎(tai)細(xi)胞(bao))5×106cells/瓶×2 腎(shen)小管上(shang)皮(pi)細(xi)胞(bao);HKC堿(jian)/壹水(shui)合(he)物Doxycycline monohydrate/Doxycycline base>900μg/mg,USP,BR,可(ke)用(yong)於細(xi)胞(bao)培養

組織細胞(bao)瘤細(xi)胞(bao);U937 [U-937]唑(zuo)來(lai)1酸(suan)Zoledronic acid hydrate>99%,壹水(shui)化合(he)物,BR

LRIG1 Others Mouse 小鼠(shu) LRIG1 / LIG-1 細胞(bao)裂解(jie)液(ye) (陽性對照) 唑(zuo)來(lai)1酸(suan)（）Zoledronic acid hydrateHPLC>98%,
MDA-MB-435細胞(bao)，癌高轉(zhuan)移細胞(bao) 鼠(shu)癌細胞(bao)系,MA-782細胞(bao) 原代(dai)滑(hua)膜皮(pi)細(xi)胞(bao)特(te)制(zhi)基(ji)礎無(wu)血清(qing)培養基Many types of cells　500/100mlL-蛋氨(an)酸(suan)乙酯(zhi)鹽(yan)酸(suan)鹽(yan);L-乙酯(zhi)鹽(yan)酸(suan)鹽(yan)>98%(T),BRL-Mine ethyl ester

PATU8988(胰(yi)腺(xian)癌細胞(bao)) 5×106cells/瓶×2L-乙酯(zhi)鹽(yan)酸(suan)鹽(yan)0.98L-Tyrosine ethyl ester 

HDLEC adult Pellet 類皮(pi)膚管內(nei)皮(pi)細(xi)胞(bao)團塊(kuai)(成年捐(juan)獻者(zhe)) > 1 mio.cells 角(jiao)質細胞(bao)生長(chang)添(tian)加(jia)物(wu)(不含BPE)KGS-2L-天冬氨酸(suan)-β-芐(bian)酯(zhi)/L-天冬氨酸(suan)-4-芐酯(zhi)>98%,BRL-Aspartic acid β-benzyl ester

CL-0324BT-20(癌細胞(bao))5×106cells/瓶×2L-半甲(jia)酯(zhi)鹽(yan)酸(suan)鹽(yan)>98%,BRL-Cysteine methyl ester

ROR1 Others Human  ROR1 細胞(bao)裂解(jie)液(ye) (陽性對照) 甲(jia)酯(zhi)鹽(yan)酸(suan)鹽(yan)>98%,BRGlycine methyl ester
斑點(dian)熱(re)立克次(ci)體(ti)核(he)酸(suan)檢(jian)測試劑盒(he)EFNB2A Protein Danio rerio (zebrafish) 重組斑馬魚 EFNB2A / Ephrin B2a 蛋白(bai) (His 標簽)4-(N,N-二苯(ben)氨(an)基(ji))苯(ben)(>98.0%(GC)(N))>98.0%(GC)(N)4-(N,N-Diphenylamino)benzaldehyde

Vero(非(fei)洲綠猴(hou)腎(shen)細(xi)胞(bao)) 5×106cells/瓶×2 小鼠(shu)胚(pei)胎(tai)成纖維(wei)細(xi)胞(bao);3T3-L1三(4-苯(ben))胺(an)(>96.0%(GC))>96.0%(GC)Tris(4-iodophenyl)amine

小膠質(zhi)細(xi)胞(bao)裂解(jie)物(wu)HML賓雪德拉(la)氏(shi)綠隱色堿(jian)(>98.0%(HPLC)(T))>98.0%(HPLC)(T)Bindschedler's Green Leuco Base

CLEC7A Others Human  CLEC7A / Dectin-1 / CLECSF12 細胞(bao)裂解(jie)液(ye) (陽性對照) 雙(4-苯(ben)基(ji))胺(an)(>98.0%(GC))>98.0%(GC)Bis(4-iodophenyl)amine

胃(wei)癌細胞(bao);MKN-451-溴(xiu)芘(>94.0%(GC))>94.0%(GC)1-Bromopyrene
檢測步驟：
壹、 試劑的(de)準(zhun)備
從(cong)試劑盒(he)中取出(chu)熒光(guang)PCR反(fan)應液(BC-qPCR MIX)、酶(mei)混(hun)合(he)物(Enzymes MIX)，冰(bing)上(shang)融(rong)化並(bing)振(zhen)蕩混(hun)勻(yun)後，10000rpm離(li)心(xin)10s。
設所需要(yao)的(de)PCR反(fan)應管管(guan)數(shu)為(wei)N(N=樣本(ben)數(shu)+1管(guan)陰(yin)性對照+1管陽性對照)，每(mei)個(ge)測試反(fan)應體系配(pei)制如下(xia)表：
試劑 每(mei)個(ge)反(fan)應加入的(de)量(liang) N個(ge)反(fan)應加入的(de)量(liang)
熒(ying)光(guang)PCR反(fan)應液 14µL N×14µL
酶(mei)混(hun)合(he)物 1 µL N×1 µL
總量(liang) 15 µL N×15µL
（1） 計(ji)算好(hao)各(ge)試劑的(de)使(shi)用(yong)量(liang)，加入壹適(shi)當體積潔凈離心(xin)管中(zhong)，充分(fen)混(hun)勻(yun)，10000rpm離(li)心(xin)10s，向設(she)定(ding)的(de)N個(ge)PCR反(fan)應管中(zhong)分別(bie)加(jia)入15μL熒(ying)光(guang)PCR反(fan)應液，向(xiang)每(mei)管中加(jia)入處(chu)理後(hou)樣品或陰(yin)性對照(NTC)和(he)陽性對照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬(shun)時(shi)離心(xin)10秒。
7.2 qPCR反(fan)應條件(jian)
將各反(fan)應管放(fang)入定(ding)量(liang)PCR儀器的(de)反(fan)應槽內(nei)。
循(xun)環條(tiao)件(jian):
1循環 50℃ for 2 min
預(yu)變性(xing) 1循環 95℃ for 10 min
PCR擴(kuo)增 40循(xun)環 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延(yan)伸(shen)時(shi)收集(ji)熒光(guang)信(xin)號。報告基(ji)團(tuan)：設置為(wei)FAM。淬滅(mie)基(ji)團(tuan)：NONE，請(qing)勿(wu)選(xuan)擇ROX參比(bi)熒(ying)光(guang)。